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Q/HLS 00022001沈陽(yáng)海吉諾生物科技有限公司 發(fā)布2012-03-02實(shí)施2012-01-05發(fā)布圣宣牌彼德膠囊Q/HJN 0002S-2012代替Q/HJN0022009Q/HJN 沈陽(yáng)海吉諾生物科技有限公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 1Q/HJN 0002S-2012目 次前言 II1 范圍 12 規(guī)范性引用文件 13 要求 14 試驗(yàn)方法 35 檢驗(yàn)規(guī)則 46 標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存、保質(zhì)期 5附錄A 6Q/HJN 0002S-2012前 言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則修訂。本標(biāo)準(zhǔn)代替Q/HJN0022009圣宣牌彼德膠囊。本標(biāo)準(zhǔn)與Q/HJN0022009圣宣牌彼德膠囊的主要差異:核查補(bǔ)充了規(guī)范性引用文件;調(diào)整了標(biāo)準(zhǔn)結(jié)構(gòu)。本標(biāo)準(zhǔn)由沈陽(yáng)海吉諾生物科技有限公司提出并起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:童星。本標(biāo)準(zhǔn)所代替歷次版本的發(fā)布情況為:Q/HJN0022009。Q/HJN 0002S-2012圣宣牌彼德膠囊1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了圣宣牌彼德膠囊的要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、食用說(shuō)明書(shū)、包裝、運(yùn)輸與貯存。本標(biāo)準(zhǔn)用于以刺五加、淫羊藿、枸杞子、黃精、麥門(mén)冬為主要原料,經(jīng)提取、過(guò)濾、濃縮、干燥、粉碎、裝囊、包裝,再經(jīng)60Co殺菌等工藝制成的保健食品圣宣牌彼德膠囊。2 規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 191 包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB 2760 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.2 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)的測(cè)定GB/T 4789.3 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群的測(cè)定GB 4789.4 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)GB/T 4789.5 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)GB 4789.10 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)GB/T 4789.11 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 溶血性鏈球菌檢驗(yàn)GB 4789.15 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)GB 5009.3 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定GB 5009.4 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測(cè)定GB/T 5009.11 食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定GB 5009.12 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測(cè)定GB/T 5009.17 食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定 GB/T 6543 運(yùn)輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱GB 7718 預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則GB 13432 預(yù)包裝特殊膳食用食品標(biāo)簽通則GB 14881 食品企業(yè)通用衛(wèi)生規(guī)范GB 14882 食品中放射物質(zhì)限制濃度標(biāo)準(zhǔn)GB 16740 保健(功能)食品通用標(biāo)準(zhǔn)GB 17405 保健食品良好生產(chǎn)規(guī)范YBB 0021 PVC硬片JJF 1070 定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)范國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局令(2005)第75號(hào) 定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法中華人民共和國(guó)藥典2010年版一部保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003版)13 要求Q/HJN 0002S-20123.1 原輔料要求3.1.1 刺五加、淫羊藿、枸杞子、黃精、麥門(mén)冬:應(yīng)符合中華人民共和國(guó)藥典2010年版的要求。3.2 感官要求2感官要求符合表1規(guī)定。表1 感官要求項(xiàng) 目要 求色 澤呈棕色,色澤均勻滋、氣味具有本品特有的滋味氣味、微苦、無(wú)異味性 狀膠囊劑,完整光潔,內(nèi)容物為粉末雜 質(zhì)無(wú)肉眼可見(jiàn)的外來(lái)雜質(zhì)3.2 保健功能緩解體力疲勞,增強(qiáng)免疫功能。3.3 功效成分指標(biāo)功效成份應(yīng)符合表2的要求。表2 功效成分功 效 成 份指 標(biāo)總皂甙(以人參皂甙Re計(jì))/(g/100g)1.86總黃酮(以蘆丁計(jì))/(g/100g)0.14粗多糖(以葡聚糖計(jì))/(g/100g)0.103.4理化指標(biāo)理化指標(biāo)應(yīng)符合表3的要求。表3 理化指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)水份(%)8.0灰份(%)8.0鉛(以Pb計(jì))/(mg/kg)1.5砷(以As計(jì))/(mg/kg)1.0汞(以Hg計(jì))/(mg/kg)0.3崩解時(shí)限/(min)303.5 微生物指標(biāo)微生物指標(biāo)應(yīng)符合表4的要求。2Q/HJN 0002S-2012表4 微生物指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)菌落總數(shù) (cfu/g)1000大腸菌群 (MPN/100g)40霉菌(cfu/g)25酵母計(jì)數(shù)(cfu/g)25致病菌(志賀氏菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌)不得檢出3.6 凈含量及允許負(fù)偏差應(yīng)符合國(guó)家定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法的規(guī)定,見(jiàn)表5的規(guī)定。表5 凈含量及允許負(fù)偏差凈含量, g/盒負(fù)偏差,%1293.7 輻照劑量輻照劑量為60Co6KGy。3.8 食品添加劑3.8.1 食品添加劑質(zhì)量應(yīng)符合國(guó)家相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)規(guī)定。3.8.2 食品添加劑的品種和使用量應(yīng)符合GB 2760的規(guī)定。4 試驗(yàn)方法4.1感官要求4.1.1 色澤、組織狀態(tài)、雜質(zhì)在自然光線下用目測(cè)進(jìn)行。4.1.2 滋、氣味取適量樣品以品嘗、鼻嗅進(jìn)行。4.2 功效成份4.2.1 總皂甙、總黃酮、粗多糖 按附錄A方法測(cè)定。4.3 理化指標(biāo)4.3.1 水份按GB 5009.3規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.3.2 灰份按GB 5009.4規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.3.3 砷按GB/T 5009.11規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.3.4 鉛3按GB 5009.12規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。Q/HJN 0002S-20124.3.5 汞按GB/T 5009.17規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.3.6 崩解時(shí)限按中華人民共和國(guó)藥典2010年版一部規(guī)定執(zhí)行。4.4 微生物指標(biāo)4.4.1 菌落總數(shù)按GB 4789.2規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.4.2 大腸菌群按GB/T 4789.3規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.4.3 霉菌、酵母計(jì)數(shù)按GB 4789.15規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.4.4 致病菌按GB 4789.4、GB/T 4789.5、GB 4789.10、GB/T 4789.11規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。4.5 凈含量偏差按JJF 1070規(guī)定方法進(jìn)行。5 檢驗(yàn)規(guī)則5.1 原、輔料入庫(kù)檢驗(yàn)原、輔料入庫(kù)前應(yīng)由生產(chǎn)廠的質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)部門(mén)按原、輔料要求進(jìn)行檢驗(yàn),合格后方可入庫(kù)使用。5.2 組批以一次投料生產(chǎn)包裝好的產(chǎn)品為一批,每批產(chǎn)品隨機(jī)抽樣,取樣量不得低于1千克,供檢驗(yàn)用。5.3 抽樣試樣品按批隨機(jī)抽取,設(shè)批量件數(shù)為X,當(dāng)X3時(shí),每件取樣;當(dāng)3X300時(shí),按隨機(jī)取樣;當(dāng)X300時(shí),按/2+1隨機(jī)取樣。每批試樣取樣3份,每份樣品應(yīng)為全檢所需樣品的3倍量,一份做微生物學(xué)檢驗(yàn),一份做其他項(xiàng)目檢驗(yàn),另一份貯存?zhèn)錁印?.4 出廠檢驗(yàn)5.4.1 出廠的質(zhì)量檢驗(yàn)部門(mén)須對(duì)出廠前的產(chǎn)品按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定逐批進(jìn)行檢驗(yàn),經(jīng)檢驗(yàn)合格,并簽發(fā)合格證的產(chǎn)品可出廠。5.4.2 出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為標(biāo)準(zhǔn)中感官要求、水分、崩解時(shí)限、功效成分和微生物指標(biāo)和凈含量及允許負(fù)偏差。5.5 型式檢驗(yàn)5.5.1 型式檢驗(yàn)項(xiàng)目為要求中的全部項(xiàng)目。5.5.2 型式檢驗(yàn)每半年進(jìn)行一次,有下列情況應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn):a) 產(chǎn)品定型投產(chǎn)時(shí);b) 停產(chǎn)6個(gè)月以上恢復(fù)生產(chǎn)時(shí);c) 原輔料產(chǎn)地、供應(yīng)商發(fā)生改變或更新主要生產(chǎn)設(shè)備時(shí);d) 檢驗(yàn)結(jié)果與型式檢驗(yàn)差異較大時(shí)和質(zhì)檢部門(mén)認(rèn)為有必要時(shí);e) 供需雙方對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有爭(zhēng)議,請(qǐng)第三方進(jìn)行仲裁時(shí);f) 國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督管理部門(mén)提出要求時(shí)。4Q/HJN 0002S-20125.5.3 判定規(guī)則產(chǎn)品經(jīng)檢驗(yàn)全部指標(biāo)符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí),判定為合格品。若有不合格項(xiàng)時(shí),可在同批產(chǎn)品中加倍取樣對(duì)不合格項(xiàng)進(jìn)行復(fù)檢,以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。微生物指標(biāo)不得復(fù)檢。6 標(biāo)志、食用說(shuō)明書(shū)、包裝、運(yùn)輸與貯存6.1 標(biāo)志產(chǎn)品的標(biāo)志按GB 16740保健(功能)食品通用標(biāo)準(zhǔn)和保健食品標(biāo)識(shí)規(guī)定執(zhí)行。6.2 食用說(shuō)明書(shū)說(shuō)明書(shū)應(yīng)包括如下內(nèi)容:a) 產(chǎn)品概述;b) 主要原料c) 標(biāo)志性成分及含量d) 保健功能;e) 適用人群;f) 不適宜人群;g) 食用方法及食用量;h) 產(chǎn)品規(guī)格;i) 保質(zhì)期;j) 貯存方法;k) 注意事項(xiàng);l) 批準(zhǔn)文號(hào);m) 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)編號(hào);n) 委托企業(yè)名稱、地址、郵政編碼、生產(chǎn)許可證號(hào)(或衛(wèi)生許可證號(hào));o) 受委托生產(chǎn)企業(yè)名稱、地址、郵政編碼、生產(chǎn)許可證號(hào)(或衛(wèi)生許可證號(hào))。r)聯(lián)系電話或網(wǎng)址。6.3 包裝6.3.1 產(chǎn)品包裝規(guī)格及包裝材料產(chǎn)品內(nèi)包裝采用鋁塑袋或PVC硬片,0.35g/粒,12粒/板,3板/盒。鋁箔應(yīng)符合GB12255的規(guī)定,PVC硬片應(yīng)符合YBB0021要求。中包裝用紙板盒,大包裝采用符合GB/T 6543標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的瓦楞紙箱包裝,外包裝上應(yīng)印有產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)名稱及地址、天藍(lán)色保健食品標(biāo)識(shí)、保健食品批準(zhǔn)文號(hào)、商標(biāo)、保健功能、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期等,箱內(nèi)必須有產(chǎn)品合格證或產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)證。6.3.2 產(chǎn)品包裝材料應(yīng)當(dāng)清潔衛(wèi)生、干燥并符合食品安全法要求。6.3.3 包裝箱表面圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 191規(guī)定。6.4 運(yùn)輸運(yùn)輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生,禁止與有毒、有害、有異味物品混運(yùn)。6.5 貯存6.5.1 產(chǎn)品應(yīng)存放在清潔、干凈通風(fēng)的倉(cāng)庫(kù)中,不得與有害、有腐蝕性、有毒物品堆放在一起。6.5.2 入庫(kù)產(chǎn)品應(yīng)分批堆放,堆疊高度不得超過(guò)六層,并掌握先進(jìn)先出的原則。6.6 保質(zhì)期5在上述條件下,產(chǎn)品保質(zhì)期為24個(gè)月。Q/HJN 0002S-2012附錄A(規(guī)范性附錄)保健食品中總皂甙、總黃酮、粗多糖的測(cè)定方法A.1總皂甙的測(cè)定A.1.1 試劑A.1.1.1 mberlite-XAD-2大孔樹(shù)脂,Sigma化學(xué)公司,U.A.S。A.1.1.2正丁醇 分析純。A.1.1.3 乙醇 分析純。A.1.1.4 中性氧化鋁 層析用,100200目。A.1.1.5 人參皂甙Re 購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。A.1.1.6 香草醛溶液 稱取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100mL。A.1.1.7 高氯酸 分析純。A.1.1.8 冰乙酸 分析純。A.1.1.9 人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)溶液精確稱取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0mL,即每毫升含人參皂甙Re2.0mg。A.1.2 儀器A.1.2.1 比色計(jì)A.1.2.2 層析柱A.1.3 實(shí)驗(yàn)步驟A.1.3.1 樣品處理A.1.3.1.1 固體樣品稱取1.000g左右的試樣(根據(jù)樣品含人參量多少而定)置于100mL容量瓶中,加少量水,超聲30min,再用水定容至100mL,搖勻,放置,吸取上清液1.0mL進(jìn)行柱層析。A.1.3.1.2 液體試樣 含乙醇的補(bǔ)酒類保健食品,吸取1.0mL樣品放水浴揮干,用水浴溶解殘?jiān)么艘哼M(jìn)行柱層析。非乙醇類的液體樣品:吸取1.0ml樣品(假如濃度高、或顏色深,需稀釋一定體積后再取1.0mL)進(jìn)行柱層析。A.1.3.2 柱層析 用10ml注射器作層析管,內(nèi)裝3cm高的Amberlite-XAD-2大孔樹(shù)脂,上加1cm高的中性氧化鋁。先用25ml70%乙醇洗柱,充去洗脫液,再用25mL水洗柱,棄去洗脫液,精確加入1.0mL已處理好的樣品溶液(見(jiàn)3.1),用25mL的水洗柱,以洗去糖份等水溶性雜質(zhì),棄去洗脫液,用25mL70%乙醇洗脫人參皂甙,收集洗脫液于蒸發(fā)皿中,放水浴揮干。以此作顯色用。A.1.3.3 顯色 6在上述已揮干的蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液,轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)皿,使殘?jiān)既芙猓偌?.8mL高氯酸,混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中,放在60以下的水浴上加溫10min,取出,冰浴冷卻后,準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL,搖勻后,以1cm比色池于560nm波長(zhǎng)處與標(biāo)準(zhǔn)管一起進(jìn)行比色測(cè)定。Q/HJN 0002S-2012A.1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)管 吸取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0mg/mL)100l放蒸發(fā)皿中,放在水浴揮干(低于60),或熱風(fēng)吹干(勿使過(guò)熱),以下操作從“3.2柱層析”起,與樣品相同。測(cè)定吸光度值。A.1.4 計(jì)算X=A1/A2CV100/m/1000/1000式中:X:樣品中人參總皂甙量(以人參皂甙Re計(jì)),g/100g;A1:被測(cè)液的吸光度值;A2:標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度值;C:樣品管人參皂甙Re的量,g;V:樣品稀釋體積,mL;m:樣品質(zhì)量,g。 計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7A.2總黃酮A.2.1 試劑A.2.1.1 聚酰胺粉A.2.1.2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取5.0mg蘆丁,加甲醇溶解并定容至100mL,即得50g/mL。A.2.1.3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源:中國(guó)藥品生物制品檢定所A.2.1.4 乙醇:分析純。A.2.1.5 甲醇:分析純。A.2.2 分析步驟A.2.2.1 試樣處理稱取一定量的試樣,加乙醇定容至25mL,搖勻后,超聲提取20min,放置,吸取上清液1.0mL,于蒸發(fā)皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于水浴上揮去乙醇,然后轉(zhuǎn)入層析柱。先用20mL苯洗,苯液棄去,然后用甲醇洗脫黃酮,定容至25mL。此液于波長(zhǎng)360nm測(cè)定吸收值。同時(shí)以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,求回歸方程,計(jì)算試樣中總黃酮含量。A.2.2.2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中,加甲醇至刻度,搖勻,于波長(zhǎng)360nm比色。求回歸方程,計(jì)算試樣中總黃酮含量。A.2.2.3 計(jì)算和結(jié)果表示X=AV2100V1M10008式中:X試樣中總黃酮的含量,mg/100g;A由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得被測(cè)液中黃酮量,g;M試樣質(zhì)量,g;V1測(cè)定用試樣體積,mL;V2試樣定容總體積,mL。計(jì)算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。7Q/HJN 0002S-2012A.3 粗多糖的測(cè)定A.3.1 范圍本方法規(guī)定了保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測(cè)定方法。本方法適用于保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測(cè)定。本方法最低檢出濃度:5.0mg/L。本方法最佳線性范圍:5.0ug/mL200ug/mL。A.3.2 原理食品中分子量10000的高分子物質(zhì)在80%乙醇溶液中沉淀,與水溶液中單和低聚糖分離,用堿性二價(jià)銅試劑選擇性的從其它高分子物質(zhì)中沉淀具有葡聚糖結(jié)構(gòu)的水溶性多糖,用苯酚-硫酸反應(yīng)以碳水化合物形式比色測(cè)定其含量,其顏色強(qiáng)度與水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)參照物并以此計(jì)算食品中水溶性粗多糖含量。A.3.3 試劑本方法所用試劑除特殊注明外,均為分析純;所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源:自中國(guó)藥品生物制品檢定所。平均分子量 5.0105A.3.3.1乙醇溶液(80%):20mL水中加入無(wú)水乙醇80mL,混勻。A.3.3.2氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取100g氫氧化鈉,加水溶解并稀釋至1L,加入固體無(wú)水硫酸鈉至飽和,備用。A.3.3.3銅試劑儲(chǔ)備液:稱取3.0gCuSO4.5H2O,30.0g檸檬酸鈉,加水溶解并稀釋至1L, 混勻備用。A.3.3.4銅試劑溶液:取銅儲(chǔ)備液50mL,加水50mL,混勻后加入固體無(wú)水硫酸鈉12.5g并使其溶解。臨用新配。A.3.3.5洗滌劑:取水50mL,加入10mL銅試劑溶液,10mL氫氧化鈉溶液,混勻,臨用新配。A.3.3.6硫酸溶液(10%):取100mL濃硫酸加入到800mL左右水中,混勻,冷卻后稀釋至1L。A.3.3.7苯酚溶液(50g/L):稱取精制苯酚5.0g,加水溶解并稀釋至100mL,混勻。溶液置冰箱中可保存一月。A.3.3.8葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:精密稱在硫酸干燥器中干燥至恒重的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)0.5000g,加溶解,并定容至50mL,混勻,置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡聚糖。A.3.3.9葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00mL,置于100mL容量瓶中,加水至刻度,混勻,置冰箱中保存。此溶液每毫升含葡聚糖0.10mg。A.3.4 儀器A.3.4.1分光光度計(jì)A.3.4.2離心機(jī)A.3.4.3旋轉(zhuǎn)混勻器A.3.5 分析步驟A.3.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:8精密吸取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00,0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mL(相當(dāng)于葡聚糖,0.010,0.020,0.040,0.060,0.080,0.10mg)分別置于25mL比色管中,準(zhǔn)確補(bǔ)充水至2.0mL,加入50g/L苯酚溶液1.0mL,在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻,小心加入濃硫酸10.0mL,于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻,置沸水浴中煮沸2min.,冷卻后用分光光度計(jì)在485nm波長(zhǎng)處以試劑空白溶液為參比,1cm比色皿測(cè)定吸光度值。以葡聚糖濃度為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。Q/HJN 0002S-2012A.3.5.2試樣處理A.3.5.2.1試樣提取:稱取混合均勻的固體試樣2.0g,置于100mL容量瓶中,加水80mL左右,于水浴上加熱2h,冷卻至室溫后補(bǔ)加水至刻度,混勻,過(guò)濾,棄去初濾液,收集余下濾液供沉淀多糖。A.3.5.2.2沉淀粗多糖:精密取5.2.1濾液5.0mL或液體試樣5.0mL,置于50mL離心管中,加入無(wú)水乙醇20mL,混勻5min.,以3000rpm離心5min.,棄去上清液。殘?jiān)?0%乙醇溶液數(shù)毫升洗滌,離心后棄上清液,反復(fù)34次操作。殘?jiān)盟芙獠⒍ㄈ葜?.0mL,混勻,供沉淀葡聚糖。A.3.5.2.3沉淀葡聚糖:精密取5.2.2溶液2mL置于20mL離心管中,加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0mL,銅試劑溶液2.0mL,沸水浴中煮沸2min.,冷卻后以3000rpm離心5min.,棄去上清液。殘?jiān)孟礈煲簲?shù)毫升洗滌,離心,棄去上清液,反復(fù)3次操作,殘?jiān)?00mL/L硫酸溶液2.0 mL溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量中,加水稀釋至刻度,混勻。此溶液為試樣測(cè)定液。A.3.5.3試樣測(cè)定:精密吸取試樣測(cè)定液2.0 mL置于25 mL比色管中,加入50g/L苯酚溶液1.0 mL,在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻后,小心加入
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