藥物雜質研究基本思路.ppt

藥物雜質研究基本思路 及控制方法,王洪權 2011.1.16,1. 國內外對藥物雜質研究的相關技術要求 2. 雜質來源和控制 有機雜質 無機雜質 殘留溶劑,主要內容,ICH（International Conferenceon Harmonizationof Technical Requirements for RegistrationofPharmaceuticalsfor Human Use） 美國藥典（USP） 英國藥典 (BP) 歐洲藥典 (EP) 中國藥典 (ChP),化學藥物雜質研究的技術指導原則,相關內容的基礎上，結合我國藥物研發(fā)的特點，通過分 析、研究與藥物的安全性、有效性及質量可控性之間的 內在關系而制定的,一、概述,（一）定義 任何影響藥物純度的物質統(tǒng)稱為雜質。雜質的研究是藥品研發(fā)的一項重要內容。它包括選擇合適的分析方法，準確地分辨與測定雜質的含量并綜合藥學、毒理及臨床研究的結果確定雜質的合理限度。這一研究貫穿于藥品研發(fā)的整個過程。,藥學,藥物的整個合成工藝 藥物制劑工藝 藥物結構及其性質 分析方法,（二）雜質的分類,按理化性質 按照其來源 按照其毒性 按化學結構,有機雜質、無機雜質、殘留溶劑,工藝雜質（包括合成中未反應完全的反應物、 試劑、中間體、 副產(chǎn)物等） 降解產(chǎn)物 從反應物及試劑中混入的雜質等。,毒性雜質、普通雜質,如甾體、生物堿、幾何異構體、光學異構體 聚合物等。,有機雜質： 包括工藝中引入的雜質和降解產(chǎn)物等，由于這類雜質的化學結構一般與活性成分類似或具淵源關系，故通常又可稱之為有關物質。 無機雜質： 是指在原料藥及制劑生產(chǎn)或傳遞過程中產(chǎn)生的雜質，這些雜質通常是已知的，主要包括：反應試劑、配位體、催化劑、重金屬、其它殘留的金屬、無機鹽、助濾劑、活性炭等。 殘留溶劑： 在合成、純化、制劑過程中殘留所使用的溶劑，這些溶劑通常是已知的。,二、國內外對藥物雜質研究的 相關技術要求,附件1：原料藥的雜質限度,(一)雜質限度要求,附件2：制劑的雜質限度,報告限度（Reporting Threshold）： 超出此限度的雜質均應在檢測報告中報告，并應報告具體的檢測數(shù)據(jù)。 鑒定限度（Identification Threshold）： 超出此限度的雜質均應進行定性分析，確定其化學結構。 質控限度（Qualification Threshold）： 質量標準中一般允許的雜質限度，如制訂的限度高于此限度，則應有充分的依據(jù)。,1、有機雜質的限度確定,質量標準中對有機雜質的限度規(guī)定應包括： 每一個已知雜質、未知雜質及總雜質。 共存的異構體和抗生素的多組分一般不作為雜質進行控制，必要時作為共存物質在質量標準中規(guī)定其比例。 單一的對映體藥物，其對映異構體應作為雜質控制.由于創(chuàng)新藥物與仿制藥情況不同，在確定雜質限度時，可有所區(qū)別。,(1)創(chuàng)新藥物,由于在創(chuàng)新藥物的研究過程中進行 藥理毒理 臨床研究 超出了附件1或2的質控限度，仍可認為該雜質的含量已經(jīng)通過了安全性的驗證。 在此前提之下，如果該雜質的含量同時也在正常的制備工藝所允許的限度范圍內，那么根據(jù)試驗樣品中雜質的含量所確定的限度可認為是合理的。,故新產(chǎn)品應在上市后繼續(xù)監(jiān)測不良反應: 如與雜質有關，則應分析原因，設法降低雜質含量，這樣制訂出來的雜質限度才能保證產(chǎn)品的安全性。 如某雜質同時也是該藥物在動物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對該雜質可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。與藥物性質和臨床應用相關聯(lián)。,鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯,福莫司汀,（2）仿制已有國家標準的藥品,可以根據(jù)已有的標準制訂相應的雜質限度。 1、該標準中未規(guī)定雜質的限度： 應與已上市同品種藥品進行全面的質量對比研究 雜質的種類與含量 穩(wěn)定性考察 2、難以獲得已上市同品種的標準，但有相同原料藥的其它劑型上市，則在制訂雜質限度時，可參考此上市產(chǎn)品質量標準，對雜質進行控制。,3、工藝或處方的不同雜質的限度： 新雜質的含量高于附件1或2規(guī)定的合理限度 在研產(chǎn)品的雜質含量明顯高于已上市的同品種產(chǎn)品的雜質實測值。 優(yōu)化產(chǎn)品的處方與制備工藝 安全性研究。,（3）其它新藥,改變給藥途徑的制劑，其雜質限度的確定參照創(chuàng)新藥物的要求進行。 對于其它類別的新藥，如果能夠獲得已上市的對照樣品，則可按照仿制已有標準的藥品的研究思路，在詳細的質量對比研究的基礎上，確定雜質的限度。如果不能獲得對照樣品，則應參照創(chuàng)新藥物的要求確定雜質限度，或通過詳細的安全性試驗來證明已有的雜質限度是安全的。,2、無機雜質的限度確定,原則：無機雜質的限度主要根據(jù)該雜質的毒性、對藥品本身質量（如穩(wěn)定性）的影響及各批次產(chǎn)品的實測結果而定。 各國藥典收載的質量標準及我國已批準上市產(chǎn)品的注冊標準中對于我們確定在研產(chǎn)品的無機雜質限度具有重要的參考價值。 給藥途徑、適應癥、劑量等選擇合適的參考標準，確定合理的限度。,3、殘留溶劑限度確定,藥物中常見殘留溶劑及其限度,4、臨床研究申請與上市生產(chǎn)申請 階段的雜質研究,申報臨床研究： 1、申報臨床研究前，應對已有批次產(chǎn)品的雜質進行比較，根據(jù)安全性研究用樣品的雜質含量情況來證明臨床研究用藥品是安全的。 2、可在臨床研究期間對雜質分析方法進行完善。 3、對于創(chuàng)新藥物，可對雜質的限度做初步的規(guī)定。,申報生產(chǎn)研究：,1、產(chǎn)生了新的雜質 2、已有雜質的含量超出限度 根據(jù)附件1或2來判斷該雜質的含量是否合理，如不合理，則應參照決策樹來考慮下一步的研究工作。,（二）雜質檢測技術要求,1、雜質分析方法 分析方法的選擇直接關系到雜質測定結果的專屬性與準確性，因此，在進行雜質研究時首要問題是選擇合適的雜質分析方法。,（1）有機雜質的分析方法,化學法、光譜法、色譜法等，隨著分離、檢測技術的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術與靈敏、穩(wěn)定、準確、適用的檢測手段相結合。 目前普遍采用的雜質檢測方法： 高效液相色譜法 薄層色譜法、 氣相色譜法 毛細管電泳法,應根據(jù)藥物及雜質的理化性質、化學結構、雜質的控制要求等確定適宜的檢測方法。由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進行雜質分析時，應注意不同原理的分析方法間的相互補充與驗證，如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補充，HPLC不同檢測器檢測結果的相互補充等。,（2）無機雜質的分析方法,無機雜質的產(chǎn)生主要與生產(chǎn)工藝過程有關。由于許多無機雜質直接影響藥品的穩(wěn)定性，并可反映生產(chǎn)工藝本身的情況，了解藥品中無機雜質的情況對評價藥品生產(chǎn)工藝的狀況有重要意義。,對于無機雜質，各國藥典都收載了經(jīng)典、簡便而又行之有效的檢測方法。對于成熟生產(chǎn)工藝的仿制，可根據(jù)實際情況，采用藥典收載的方法進行質量考察及控制。對于采用新生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的新藥，鼓勵采用離子色譜法及電感耦合等離子發(fā)射光譜質譜（ICP-MS）等分析技術，對產(chǎn)品中可能存在的各類無機雜質進行定性、定量分析，以便對其生產(chǎn)工藝進行合理評價，并為制定合理的質量標準提供依據(jù)。,不揮發(fā)性無機雜質采用熾灼殘渣法進行檢測。 某些金屬陽離子雜質（銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、砷、鋅、鈷與鎳等）籠統(tǒng)地用重金屬限度檢查法進行控制。因在藥品生產(chǎn)中遇到鉛的機會較多，且鉛易積蓄中毒，故作為重金屬的代表，以鉛的限量表示重金屬限度。,對某種（些）特定金屬離子或上述方法不能檢測到的金屬離子作限度要求，可采用專屬性較強的原子吸收分光光度法或具有一定專屬性的經(jīng)典比色法（如采用藥典已收載的鐵鹽、銨鹽、硒等的檢查法檢測藥品中微量鐵鹽、銨鹽和硒等雜質）。雖然重金屬檢查法可同時檢測砷，但因其毒性大，且易帶入產(chǎn)品中，故需采用靈敏度高、專屬性強的砷鹽檢查法進行專項考察和控制，各國藥典收載的方法已歷經(jīng)多年驗證，行之有效，應加以引用。,（3）殘留溶劑的檢測方法,在確定了需要進行殘留量研究的溶劑后，需要通過方法學研究建立合理可行的檢測方法。目前，常用的檢測方法為氣相色譜法（Gas Chromatography，GC），也有其他一些檢測方法。,三、雜質來源和控制,（一）有機雜質來源和控制 工藝雜質 反應物 試劑 中間體 副產(chǎn)物 降解產(chǎn)物 混入的雜質 反應物 試劑,工藝雜質,反應物、試劑、中間體 鹽酸氨溴索合成,副產(chǎn)物,異構體,不同工藝路線,桂哌齊特工藝研究,副產(chǎn)物,異構體,降解產(chǎn)物,不同工藝路線,環(huán)丙沙星,中間體,副產(chǎn)物,副產(chǎn)物,副產(chǎn)物,降解產(chǎn)物,降解產(chǎn)物,有機雜質的定量方法,有機雜質的檢測一般多采用HPLC法，有時也采用TLC、 GC等其它方法。 如采用HPLC法，須采用峰面積法， 外標法（雜質對照品法） 加校正因子的主成分自身對照法 不加校正因子的主成分自身對照法 峰面積歸一化法。,法定量比較準確 法應對校正因子進行嚴格測定，僅適用于已知雜質的控制 法的前提是假定雜質與主成分的響應因子基本相同。 法簡便快捷，但因各雜質與主成分響應因子不一定相同、雜質量與主成分量不一定在同一線性范圍內、儀器對微量雜質和常量主成分的積分精度及準確度不相同等因素，所以在質量標準中采用有一定的局限性。,有關物質中包括已知雜質和未知雜質。已知雜質對主成分的相對響應因子在0.9-1.1范圍內時，可以用主成分的自身對照法計算含量，超出0.9-1.1范圍時，宜用雜質對照品法計算含量，也可用加校正因子的主成分自身對照法。理想的定量方法為已知雜質對照品法與未知雜質不加校正因子的主成分自身對照法兩者的結合。研究人員可根據(jù)實際情況選用合適的定量方法。,有機雜質的定量要求,1、專屬性 為了考察在其他成分存在的條件下，采用的方法是否具有準確測定出待檢測的有機雜質的能力。 2、檢測限 通常有機雜質量較低，而每種有機雜質的檢測靈敏度又各不相同，為了考察所采用的方法能否將殘留的少量或微量的有機雜質檢出。 3、定量限 為保證測定方法的準確度和精密度，需要進行定量限的研究。,4、 線性 在配制對照品溶液時，對照品溶液濃度很難和規(guī)定的限度達到完全一致，當不一致時，需要通過標準曲線進行換算，這種換算的前提是有關物質的濃度與色譜峰面積直接成正比關系。 5 準確度 為了保證檢測結果能夠代表產(chǎn)品的實際情況，建議進行方法的準確度考察。 6 耐用性 為考察測定條件發(fā)生細小變動時，測定方法和結果是否仍準確可靠，建議進行耐用性考察。,（二）無機雜質來源和控制,工藝雜質 反應物：鹽 試劑：含鉛 催化劑：鎳、鈀炭 干燥劑：硫酸鹽、氯化物、磷酸鹽 pH調節(jié)劑（兩性藥物） 混入的雜質 反應物 試劑 助濾劑、活性炭,A 硝化反應：68%硝酸+丙酸于125反應30min。 B 胺化反應：B1氯化，SOCl2+DMF于CH2Cl2中加熱回流3.5h B2胺化，于-15滴加異丁胺與CH2Cl2溶液后，加熱 回流30min. C 氫化反應：室溫，RenyNi催化，50psi氫壓力下氫化3h. D 環(huán)合反應：甲酸中加熱回流4h. E 氧化反應：16%過氧乙酸+乙醇，于50反應24h. F 胺化反應：二氯甲烷+28-30%氨水 于020min內滴加對甲苯磺酰氯的二氯甲烷溶液。,詳細的精制方法,取咪喹莫特成品10g，加 5N鹽酸200ml，攪拌加熱至80使溶解，過濾除去不溶物，濾液冷卻，用二氯甲烷洗（50mlx2），加入活性炭少許，于80加熱15min，濾去活性炭