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文檔簡介

第73練1.(2019青島檢測)利用基因工程技術生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如下圖所示,下列敘述正確的是()A.過程所需的逆轉錄酶可取自于抗農(nóng)藥馬拉硫磷小菜蛾的任一細胞B.過程利用PCR技術擴增目的基因需使用耐高溫的解旋酶和引物對C.過程常用Ca2處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細胞D.過程可利用抗原抗體雜交技術鑒定目的基因是否已導入受體細胞2.下列關于蛋白質工程的說法錯誤的是()A.蛋白質工程能定向改造蛋白質的結構,使之更加符合人類的需要B.蛋白質工程是在分子水平上對蛋白質分子直接進行操作,定向改變其結構C.蛋白質工程能產(chǎn)生自然界中不存在的新型蛋白質分子D.蛋白質工程與基因工程密不可分,又稱為第二代基因工程3.下列有關限制性核酸內(nèi)切酶的敘述正確的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個DNA分子中部,獲得一個目的基因時,被水解的磷酸二酯鍵有2個B.限制性核酸內(nèi)切酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C.CATG和GGATCC序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的黏性末端堿基數(shù)不同D.只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質粒,才能形成重組質粒4.(2018天津一中月考)限制酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamH、EcoR、Hind以及Bgl的識別序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合?其正確的末端互補序列為()A.BamH和EcoR;末端互補序列AATTB.BamH和Hind;末端互補序列GATCC.EcoR和Hind;末端互補序列AATTD.BamH和Bgl;末端互補序列GATC5.干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必須從血液中提取,每升人血中只能提取0.5g,所以價格昂貴。美國加利福尼亞的某生物制品公司用如下方法(如圖所示)生產(chǎn)干擾素。從上述方式中可以看出該公司生產(chǎn)干擾素運用的方法是()A.個體間的雜交B.基因工程C.蛋白質工程D.器官移植6.北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有1個由11個氨基酸組成的重復序列,該序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強。下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖,有關敘述正確的是()A.過程獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因,可能得不到抗凍性增強的抗凍蛋白C.過程構成的重組質粒缺乏標記基因,需要轉入農(nóng)桿菌才能進行篩選D.應用DNA探針技術,可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在與否及其是否表達7.(2018天津六校高三聯(lián)考)繼在上海和安徽首次發(fā)現(xiàn)H7N9禽流感病例,我國多地出現(xiàn)禽流感疫情,為此某研究小組為了研制預防H7N9禽流感病毒的疫苗,開展了前期研究工作,其簡要的操作流程如下圖。下列相關敘述錯誤的是()A.過程不需使用Taq酶B.步驟所依據(jù)的理論基礎之一是DNA分子結構的相似性C.步驟可將重組質粒導入所有的大腸桿菌D.檢驗Q蛋白的免疫反應特性,可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原抗體特異性反應實驗8.(2019北京質檢)DNA的粗提取與鑒定實驗的正確操作步驟是()A.制備雞血細胞液提取細胞核物質溶解核內(nèi)的DNA析出并濾取DNA黏稠物DNA的再溶解提取較純凈的DNA鑒定DNAB.制備雞血細胞液提取細胞核物質溶解并析出DNADNA的再溶解提取較純凈的DNA鑒定DNAC.制備雞血細胞液溶解DNA提取細胞核中的DNADNA的再溶解提取較純凈的DNADNA的鑒定D.制備雞血細胞的細胞核物質提取液溶解DNA并析出提取較純凈的DNADNA的鑒定9.(2018長春普通高中高三一模)肺細胞中的let7基因表達減弱,癌基因RAS表達增強,會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術將let7基因導入肺癌細胞實現(xiàn)表達,發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術基本流程如圖1所示。請回答下列問題:(1)進行過程時,需用相關酶切開載體以插入let7基因,該酶破壞的化學鍵是_。重組載體應有RNA聚合酶識別和結合的部位,該部位稱為_,同時,重組載體還應有_,以驅動自身復制以及_,以鑒別受體細胞是否含有目的基因。(2)進行過程時,當細胞生長到表面_時,需用_酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞并進行_后繼續(xù)培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn),let7基因影響癌基因RAS表達的機理如圖2所示。據(jù)圖分析,肺癌細胞增殖受到抑制,可能是由于細胞中_含量減少引起的,作出該假設的依據(jù)是_。10.(2018德州高三期末)真核生物基因中通常含有內(nèi)含子,而原核生物基因中沒有,原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應的RNA序列的機制。下圖表示從基因文庫提取胰島素基因的過程?;卮鹣铝袉栴}:(1)過程用到的酶為_,與基因組文庫中的基因相比,cDNA文庫中獲得的目的基因_(填“不含有”或“含有”)啟動子。(2)過程的目的是_。(3)過程需將纖維素膜上的細菌_,釋放出DNA,再用32P標記的_作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結果,應選取培養(yǎng)基上_(填字母)菌落繼續(xù)培養(yǎng),才能獲得含有胰島素基因的受體菌。(4)與從基因組文庫獲取目的基因相比,圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達,原因是_。11.(2019武漢一中模擬)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列?,F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識別的堿基序列和酶切位點分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請回答下列問題:(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由_連接。(2)若用限制酶Sma完全切割圖1中的DNA片段,產(chǎn)生的末端是_末端,其產(chǎn)物長度為_。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被TA堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對應的DNA片段,用限制酶Sma完全切割,產(chǎn)物中共有_種不同長度的DNA片段。(4)若將圖2中質粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質粒,那么應選用的限制酶是_。在導入重組質粒后,為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌,一般需要用添加_的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測,部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達,其最可能的原因是_。12.絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒(TMV)基因,可以合成一種抗TMV蛋白,葉片對TMV具有抗感染性。煙草是重要的經(jīng)濟作物,由于TMV的感染會導致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉基因技術培育出了抗TMV的煙草,主要流程如圖所示:(1)科學家首先從絞股藍細胞中提取抗TMV基因轉錄的RNA,然后合成目的基因。圖中過程表示_,獲得的DNA必須在兩側添加_和_。(2)過程構建重組Ti質粒時,必須使用_和_兩種工具酶。(3)由圖分析,在過程構建的重組Ti質粒上應該含有卡那霉素抗性基因作為_,重組Ti質粒導入煙草體細胞的方法是_。(4)在過程培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外,還必須添加_,以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株。(5)過程可采取_的方法,檢測植株是否合成了抗TMV蛋白。在個體水平的鑒定過程中,可通過_的方法來確定植株是否具有抗性。答案精析1.C2.B由于基因決定蛋白質,因此,要對蛋白質的結構進行設計改造,最終還必須通過改造基因來完成,而不是直接對蛋白質分子進行操作,B項錯誤。3.B用限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子中部獲得一個目的基因時,需剪切2次,被水解的磷酸二酯鍵有4個,A項錯誤;限制性核酸內(nèi)切酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大,B項正確;CATG和GGATCC序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的黏性末端均有4個堿基,C項錯誤;切割目的基因和載體并非只能用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,如果用不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子所產(chǎn)生的末端也存在互補關系,則兩末端也可連接形成重組質粒,D項錯誤。4.D5.B從圖中可以看出整個過程為將人的淋巴細胞中控制干擾素合成的基因與質粒結合后導入酵母菌,并從酵母菌產(chǎn)物中提取干擾素,這項技術為基因工程。6.B7.C步驟是人工以RNA為模板形成DNA的過程,為反轉錄,不需使用Taq酶,A項正確;步驟是基因表達載體的構建,所依據(jù)的理論基礎之一是DNA分子結構的相似性,B項正確;步驟需用Ca2處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài)之后,才能將重組質粒導入大腸桿菌,C項錯誤;患禽流感康復的雞的血清中含有相應的抗體,可以與Q蛋白進行抗原抗體雜交,以此可以檢測Q蛋白的免疫反應特性,D項正確。8.AB項漏掉了DNA溶解前要過濾;C項提取細胞核中DNA敘述欠妥,應是提取核物質,并且應放在溶解DNA之前;D項敘述明顯有誤。9.(1)磷酸二酯鍵啟動子復制原點標記基因(2)相互接觸胰蛋白(或膠原蛋白)分瓶(3)RAS蛋白據(jù)圖分析可知,RASmRNA和沒有翻譯功能的miRNA結合后能抑制RAS基因的翻譯,所以細胞中RAS蛋白質的含量減少解析(1)過程表示基因表達載體的構建,在該過程中需要用限制酶對載體進行切割,以便于目的基因的插入,該酶切割的是DNA分子中的磷酸二酯鍵。重組載體上的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位,復制原點可以啟動載體的自我復制,標記基因可以鑒別受體細胞是否含有目的基因。(2)過程表示用胰蛋白酶處理組織細胞獲得單個細胞的過程,當細胞生長到表面相互接觸時,需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞并進行分瓶后繼續(xù)培養(yǎng)。(3)據(jù)圖2可知,let7基因影響RAS基因表達的機理是let7基因轉錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉錄產(chǎn)物RAS mRNA結合,使RAS基因翻譯受到抑制,引起細胞中的RAS蛋白含量減少,進而導致癌細胞增殖受到抑制。10.(1)反轉錄酶不含有(2)使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并遺傳給后代,同時使目的基因能夠表達并發(fā)揮作用(3)裂解目的基因(或胰島素基因)a(4)cDNA中不含有內(nèi)含子,轉錄出的RNA不需要經(jīng)過加工,可直接作為合成蛋白質的模板解析(1)據(jù)題圖分析可知,過程表示反轉錄過程,需要反轉錄酶的催化;該過程獲得cDNA為部分基因文庫,由于其中目的基因是mRNA反轉錄形成的,不含有啟動子。(2)過程表示基因表達載體的構建,目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并遺傳給后代,同時使目的基因能夠表達并發(fā)揮作用。(3)過程需將纖維素膜上的細菌裂解,釋放出DNA,再用32P標記的目的基因作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結果中雜交帶出現(xiàn)的位置可知,應選取培養(yǎng)基上a菌落繼續(xù)培養(yǎng),才能獲得含有胰島素基因的受體菌。(4)圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達,是因為cDNA中不含有內(nèi)含子,轉錄出的RNA不需要經(jīng)過加工,可直接作為合成蛋白質的模板。11.(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamH抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D與質粒反向連接解析(1)一條脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩個堿基之間是通過“脫氧核糖磷酸脫氧核糖”相連的。(2)由Sma的識別序列和酶切位點可見,其切割后產(chǎn)生的是平末端,圖1中DNA片段有兩個Sma的識別序列,故切割后產(chǎn)生的產(chǎn)物長度為537(5343)bp、790(79633)bp和661(6583)bp三種。(3)圖示方框內(nèi)發(fā)生堿基的替換后,形成的d基因失去了1個Sma的識別序列,故D基因、d基因用Sma完全切割后產(chǎn)物中除原有的3種長度的DNA片段外,還增加一種(537790)bp的DNA片段。(4)目的基因的兩端都有BamH的識別序列,質粒的抗生素A抗性基因上也有BamH的識別序列,故應選用的限制酶是BamH,此時抗生素B抗性基因作為標記基因,故篩選時培養(yǎng)基中要添加抗生素B。若重組質粒已導入了受體細胞卻不能表達,很可能是

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