大鼠實(shí)驗(yàn)性腦梗死后早期CT表現(xiàn)的法醫(yī)學(xué)研究

大鼠實(shí)驗(yàn)性腦梗死后早期 CT表現(xiàn)的法醫(yī)學(xué)研究 大鼠實(shí)驗(yàn)性腦梗死后早期 CT 表現(xiàn)的法醫(yī)學(xué)研究 【摘要】目的探討 24 h 內(nèi)腦梗死 ct值的變化與梗死時(shí)間的關(guān)系以及ct表現(xiàn)。方法采用線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈梗死模型，于梗死后 2、3、 4、 6、 8、 12、 24 h 進(jìn)行頭顱 ct冠狀位掃描。觀察 ct圖像，測(cè)量?jī)蓚?cè)大腦半球?qū)ΨQ部位的 ct值，并求出兩者的差值。結(jié)果線栓法大鼠腦梗死后最早于 3h肉眼即可辨別梗死灶，其患側(cè) ct值與健側(cè)有顯著性差異，且腦梗死健、患側(cè) ct 值的差值與時(shí)間呈直線正相關(guān)。結(jié)論血管栓塞引起的腦梗死最早于梗死發(fā)生后 3 h 即可診斷，并可通過(guò)腦梗死兩側(cè) ct 值的差值的計(jì)算來(lái)推斷腦梗死發(fā)生的時(shí)間?！娟P(guān)鍵詞】腦梗死；斷層攝影術(shù)；動(dòng)物【中圖分類號(hào)】 d919 1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 a【文章編號(hào)】 1007 9297(2005)04 0301 04early ct signs forensic medical study in experimental cerebml infarction in rats wa ng a i-reng,zha ng ling li de partment of forensic medical， tonti medical college， huazhong unweniof science and technology wuhan 430030,p r chin【 abstract】 objective to investigate the relationship between ct value and time and，the ct signs in early cerebral infare tion methods the intraluminal thread occlusion model in the middle cerebral anew of rats was established serial scans in coronalplanes were performed at 2， 3， 4， 6， 8， 12 and 24 hours after occlusion the ct signs of cerebral infarction， mean while measuredct values of both infracted and healthy brain tissues were analyzed，then the differences calculated results the hypodense lesioncould be observed by naked eyes at least 3 hours after cerebral infraction the ct value differences of both sides bear a statisticallysignificant linear relationship with time conclusion cerebral infarction due to blood vessel embolism could be diagnosed at least 3hours after middle cerebral artery occlusion it suggests that the occlusion time could be evaluated by the differenees of ct values【 key words】cerebral infarction； tomography； animals 在法醫(yī)臨床檢案工作中腦梗死的案例時(shí)常遇到，對(duì)于這類案件，鑒定重點(diǎn)是鑒別腦梗死是由疾病引起還是外傷導(dǎo)致。在多個(gè)鑒別因素中，腦梗死發(fā)生時(shí)間是鑒別傷與病的關(guān)鍵。 ct 作為一種普遍、快捷的檢查方法， 目前在臨床上已經(jīng)成為腦梗死首選的檢查手段，也是法醫(yī)臨床鑒定中診斷腦梗死的重要依據(jù)。但對(duì)于腦梗死在 ct 平掃中最初何時(shí)可以明確診斷，至今仍無(wú)統(tǒng)一看法。一般認(rèn)為，腦梗死發(fā)病 l2 24 h 內(nèi) ct平掃多不能顯示。 1l 但有實(shí)驗(yàn)表明，梗死灶最初于 6 h 內(nèi)即可顯示： 陳彥芳等 31 的研究結(jié)果表明，腦梗死后 3 h， ct即可看到病變；甚至 有腦梗死后 2 h 即有陽(yáng)性表現(xiàn)的報(bào)道。 本文就實(shí)驗(yàn)性大鼠腦梗死早期不同時(shí)相的 ct平掃圖像進(jìn)行觀察，同時(shí)進(jìn)行了兩側(cè)大腦半球的 ct值的測(cè)定，并求出它們的差值，探討大鼠腦梗死后 ct可以明確診斷的最早時(shí)間及 ct值變化與梗死時(shí)間的關(guān)系。材 料和方法一、動(dòng)物選擇健康成年 wistar大鼠 55 只 f由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供 )，雌雄不拘，體重 200 250g。自由進(jìn)食和水， 12 h晝夜節(jié)律飼養(yǎng)。大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組 (a組 )、假手術(shù)組 (b組 )和實(shí)驗(yàn)組 (c 組 )。其中假手術(shù)組按手術(shù)后 3， 6， 12 h分為 3 組 ，實(shí)驗(yàn)組按腦梗死后 2， 3， 4， 6， 8， 12， 24 h分為 7 組，每組 5 只。二、線栓制備插入線栓采用進(jìn) el尼龍線，直徑 0 209 mm，線長(zhǎng) 40 mm。在顯微鏡下用進(jìn)口速干上光漆涂于一端 5 mm內(nèi)，制成直徑 0 25 0 28 mm 的光滑的頭端。將線栓晾干，紫外線消毒后置于 l肝素溶液中備用?！咀髡吆?jiǎn)介】王愛(ài)楓 (1977 一 )，女，遼寧遼陽(yáng)人，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系法醫(yī)臨床專業(yè)在讀碩士，主要從事法醫(yī)臨床學(xué)鑒定及研究工作。 tel+86-27-83692955； e-mail：wangaifeng1977sina con。 通信作者】張玲莉，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系法醫(yī)臨床專業(yè)副教授，碩士生導(dǎo)師。 302 三、模型的建立參照 longa 線栓法 51 制備大腦中動(dòng)脈梗死模型。略有改進(jìn)。將大鼠用 6水合氯醛溶液以 5 ml kg腹腔注射麻醉，固定、消毒、鋪巾后，沿鼠腹側(cè)頸部正中手術(shù)切 el 切開(kāi)頸部皮膚，分離頸總動(dòng)脈并結(jié)扎其近端。分離頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈。于頸總動(dòng)脈分叉遠(yuǎn)端 l 2mm處結(jié)扎頸外動(dòng)脈，用血管夾夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈。在頸總動(dòng)脈結(jié)扎處遠(yuǎn)端用眼科剪剪一小 el，將制備好的栓線插入，同時(shí)釋放頸內(nèi)動(dòng)脈的血管夾。進(jìn)線長(zhǎng)度距頸總 動(dòng)脈分叉處約 20mm，遇阻即止。之后將頸總動(dòng)脈連同栓線一起結(jié)扎，縫合皮膚。即制備好永久性大腦中動(dòng)脈梗死模型。全部大鼠均栓塞右側(cè)大腦中動(dòng)脈。線栓插入 10 mm后即拔出形成假手術(shù)組：正常對(duì)照組不手術(shù)。模型成功的標(biāo)志為：手術(shù)麻醉清醒后，大鼠左側(cè)偏癱，左下肢伸直，站立不穩(wěn)，向一側(cè)轉(zhuǎn)圈。操作時(shí)室溫控制在 25 左右。四、 ct掃描方法采用美國(guó) ge lightspeed型全身 ct 設(shè)備。矩陣 512x512， 140 kv， 120 ma，層厚 5 mm，層距5 mm，進(jìn)行大鼠大腦冠狀面掃描。實(shí)驗(yàn)組于術(shù)后 2， 3， 4， 6， 8， l2，24 h進(jìn)行掃描，假手術(shù)組在術(shù)后 3， 6， 12 h 進(jìn)行掃描，對(duì)照組掃描時(shí)間不限。仔細(xì)觀察各組大鼠 ct圖像。選擇同一平面對(duì)稱部位約 1 5 mmz 范圍內(nèi)測(cè)定各組大鼠兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)的 ct 值，求出兩者的差值。五、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以 +j 表示，采用 t 檢驗(yàn)和相關(guān)分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。 p<；0 05表示差異有顯著性意義。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠大腦中動(dòng)脈梗死自 3 h后出現(xiàn)不同程度的低密度，隨著時(shí)間的推移，密度逐漸降低 (圖 1)。 3 h組有 3只動(dòng)物 ct掃描出現(xiàn)肉眼可辨的梗死灶梗死范圍較小，梗死區(qū)與周圍組織界限不清。其兩側(cè) ct值的差值分別為 3 66 hu， 4 15 hu和 3 87 hu： 自 6 h 組開(kāi)始全部動(dòng)物均出現(xiàn)明確的梗死灶，到 12h 組，梗死灶已十分明顯。不同時(shí)相點(diǎn)兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū) ct 值及差值的變化見(jiàn)表 1、表 2。由表 1 可知 梗死后 3 h 兩側(cè) ct值即有顯著性差異 fp<；0 05)。由表 2可知，梗死后兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域 ct值的差值隨梗死時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加，梗死時(shí)間與腦梗死兩側(cè) ct值的差值呈顯著直線正相關(guān) f相關(guān)系數(shù) r=0 982 p<；0 05，回歸方程： y=i 76+0 49x)。梗死時(shí)間每增加 1 h健、患兩側(cè) ct 值 的差值平均增加 2 25 hu。梗死時(shí)間與腦梗死兩側(cè) ct值的差值呈顯著直線法律與醫(yī)學(xué)雜志 2005年第 l2卷 (第 4 期 )正相關(guān) (相關(guān)系數(shù) r=0 982， p<；0 05，回歸方程： y=i 76+0 49x)。圖 1 大鼠腦梗死早期不同時(shí)相點(diǎn) ct 圖像變化 pic 1 change of ct images in diferent periods in earlycerebral infarction in rats 自梗死后 6 h 大腦中動(dòng)脈供血區(qū)腦組織開(kāi)始出現(xiàn)不同程度的低密度，隨著時(shí)間的推移密度逐漸降低。 a梗死后 3 h，平均 ct 值：右側(cè)： 36 37，左側(cè)： 39 94，平均差值： 3 67： b 梗死后 6 h，平均 ct 值：右側(cè)： 33 34，左側(cè)： 38 00，平均差值： 4 46； c 梗死后 12 h，平均 ct值：右側(cè)： 32-31，左側(cè)：40 84，平均差值： 8 53； d 梗死后 24 h，平均 ct值：右側(cè)： 25 49，左側(cè)： 38 53，平均差值： 13 04。討論一、關(guān)于腦梗死模型大鼠局灶性腦梗死模型已廣泛應(yīng)用于對(duì)該疾病的研究。目前主要有光化學(xué)誘導(dǎo)法、自體血栓栓塞法和線栓法。光化學(xué)誘導(dǎo)法需開(kāi)顱進(jìn)行手術(shù)，具有對(duì)手術(shù)條件要求較高，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)傷較大的缺點(diǎn)。自體血栓栓塞法雖然很接近自然 狀態(tài)但因由全血凝固形成的血栓為紅色血栓。含纖維蛋白較少。易在血管內(nèi)自溶而致阻塞血管再通，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 zea longa等應(yīng)用線栓法制備腦梗死模型手術(shù)操作簡(jiǎn)單，避免了開(kāi)顱所造成的腦創(chuàng)傷。本實(shí)驗(yàn)采用線栓法制作大鼠急性大腦中動(dòng)脈梗死模型。具有操作簡(jiǎn)便、對(duì)動(dòng)物損傷小、可重復(fù)性 高、梗死范圍恒定等特點(diǎn)。二、關(guān)于腦水腫腦梗死 ct 平掃的主要表現(xiàn)為梗死血管供血區(qū)密度減低和或輕微的占位效應(yīng)，而以梗死血管供血區(qū)密度減低最為常見(jiàn)。對(duì)腦梗死的診斷價(jià)值最大是腦梗死的特征性表現(xiàn)。閻肖恩華等 l71 對(duì) 250例 24h內(nèi)腦梗死患者進(jìn)行回顧性研究，結(jié)果表明：低密度灶診斷法律與醫(yī)學(xué)雜志 2005 年第 12卷 (第 4 期 )表 1 大鼠腦梗死后不同時(shí)相兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū) ct值 table 1 ct value of both sides in diferent periods in cerebml infarction in rats 303 正常對(duì)照組假手術(shù)組 ab實(shí)驗(yàn)組 c38 04+1 8536 881 7736 482-3839 251 0839 272 1739 941 8742 211 9538 002 6638 561 9040 841 8838 531 7237 931 8836 712 5636 392 3 138 971 1937 871 8136 371 7238 221 9833 343 4532 781 7432 3 12 2625 4883 450 0490 1480 0610 5932 7369 96053237 96613 8907 7945 833注： 健、患側(cè) ct 值比較差異有顯著意義， 19<；0 05表 2 大鼠大腦中動(dòng)脈梗死后不同時(shí)相兩側(cè) ct值的差值變化 table 2 changing of ct value s diferences of both sides in diferent periods in middle cerebral artery occlusion in rats24 h 內(nèi)腦梗死的敏感性為 56 8 特異性為 100。故本實(shí)驗(yàn)選擇梗死腦組織密度降低作為觀察指標(biāo)。腦梗死缺血區(qū)水腫是引起梗死腦組織密度降低的主要原因可分為兩階段：細(xì)胞毒性水腫和血管源性水腫。在腦梗死的初始階段主要是細(xì)胞毒性水腫細(xì)胞外水分子大量進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)但缺血區(qū)腦組織水含量無(wú)明顯增加因此兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū) ct 值無(wú)顯著性差異。腦組織缺血 3 h左右血腦屏障被破壞，這是血管源性水腫開(kāi)始的標(biāo)志。此時(shí)缺血區(qū)腦組織含水量增加。 于腦組織含水量與 ct 值呈負(fù)相關(guān)，所以腦組織含水量的增加導(dǎo)致了梗死區(qū)腦組織 ct 值的下降。本實(shí)驗(yàn) 3 h 組梗死側(cè)與健側(cè)腦組織 ct值的均值 分別為： 39 941 87 hu和 36 371 72 hu差異有顯著性，說(shuō)明此時(shí)兩側(cè)腦組織含水量已存在顯著性差異。隨梗死時(shí)間的延長(zhǎng)梗死區(qū)域腦組織含水量逐漸增加，兩側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)ct值的差值也隨之逐漸增大。三、關(guān)于大鼠腦梗死早期的 ct表現(xiàn)不少學(xué)者對(duì) 24 h 內(nèi)腦梗死的 ct 征象進(jìn)行研究， kuroiwa等罔曾利用貓研究急性腦梗死的早期 ct 表現(xiàn)，掃描層厚為 10ram。結(jié)果表明，在缺血后 3 h ct 無(wú)異常棚改變， ct 值亦無(wú)降低。直至 24 h才形成明確的梗死灶。文獻(xiàn)報(bào)道，在 ct 掃描斷層層面為 10mm 的病例中常 出現(xiàn)假陰性，而當(dāng)層面改為 3 4mm時(shí)，這種假陰性可基本消除。 91本實(shí)驗(yàn)掃描層厚為 5 mm，顯著降低了假陰性率。 dzialowski等 10】認(rèn)為：兩側(cè)腦組織的 ct 值的差值 <；4hu，則肉眼難以辨別出梗死灶。而本實(shí)驗(yàn)中 3 h組 5只動(dòng)物兩側(cè)大腦半球的 ct值差值分別為： 3 66 hu、 3 49 hu、 4 15 hu、 3 18 hu 和 3 87hu。其中 3只動(dòng)物的 ct圖像肉眼可以分辨出梗死灶。考慮可能由于本實(shí)驗(yàn)所選擇測(cè)定 ct 值的范圍較大，所選范圍內(nèi)可能既包含梗死區(qū)域也包含非梗死區(qū)域，從而導(dǎo)致了 兩側(cè)大腦半球所測(cè)范圍 ct值的差值偏小。梗死灶的大小、部位、缺血程度決定著梗死灶在 ct 上的表現(xiàn)時(shí)間。肖恩華等同報(bào)告， 250 例腦梗死患者中有 8l例在 6 h 內(nèi) ct 出現(xiàn)陽(yáng)性表現(xiàn)， 占 32 4 。 kueinski 等 11】研究發(fā)現(xiàn)有 84的患者于起病后 2h 行 ct 平掃可出現(xiàn)腦實(shí)質(zhì)密度降低。這些結(jié)果間的差異，主要與作者選擇病例的標(biāo)準(zhǔn)不同有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)是利用線栓阻斷大腦中動(dòng)脈主干血流完全阻斷，不會(huì)發(fā)生梗死局部漏血或血管再通現(xiàn)象；梗死范圍較大同一時(shí)間缺血范圍基本一致：梗死過(guò)程迅速，于線栓插入后立即發(fā)生。因此，本實(shí)驗(yàn)中大 鼠腦梗死后 ct 征象出現(xiàn)相對(duì)較早，易于觀察。結(jié)果表明，缺血后 3 h， 5只動(dòng)物中有 3 只出現(xiàn)肉眼可分辨的梗死灶，占 60。其他腦梗死模型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)存在一定程度的差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明在血管栓塞性腦梗死中梗死后 3 h 進(jìn)行 ct平掃， 60的動(dòng)物出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的低密度灶，可以為此類腦梗死的早期診斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和臨法律與醫(yī)學(xué)雜志 2005 年第 l2卷 (第4 期 )床參考。但由于外傷性腦梗死有多種致傷因素不同機(jī)理所引起的腦梗死出現(xiàn) ct征象的時(shí)間不盡相同要依據(jù) ct 征象準(zhǔn)確的判斷梗死時(shí)間尚需進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)研究和進(jìn)一步探討。但 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定梗死健、患側(cè) ct值的差值并結(jié)合臨床表現(xiàn)可以作為推斷腦梗死發(fā)生時(shí)間的一種參考方法。參考文獻(xiàn) 1】劉運(yùn)生，歐陽(yáng)姍神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷治療學(xué) m】北京：人民軍醫(yī)出版社， 2003， 3822】 肖芝豹，郭小藍(lán)，賴文雄，等大腦中動(dòng)脈供血區(qū)早期腦梗塞 ct 診斷 jj中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志， 2003， 13(14)： 95963】 陳彥芳，吳恩惠，劉國(guó)棟，等實(shí)驗(yàn)性急性腦梗塞早期 ct 表現(xiàn)與病理基礎(chǔ)研究 j】中華放射學(xué)雜志， 1994， 28(12)： 8438454】徐茂竹 ct 掃描在大面積腦梗死中的應(yīng)用 jj臨床薈萃， 2001， 16(17)： 803 8035】 zea longa ez， weinstein pr， carlson s， et a1 reversible middlecerebral artery occlusion without craniectomy in ratsj st