兩種工藝制備黃芪口服液的實驗研究.doc

兩種工藝制備黃芪口服液的實驗研究內(nèi)蒙古中醫(yī)藥兩種工藝制備黃芪口服液的實驗研究周玲君摘要:采用水醇法與動態(tài)提取法制備黃芪口服液,從制劑的澄明度,黃芪甲苷的含量等方面比較,工業(yè)生產(chǎn)中可采用動態(tài)提取法生產(chǎn)工藝.關(guān)鍵詞:黃芪口服液,提取工藝中圖分類號R284.2文獻標識碼:B文章編號:10060979(2010)060040-02黃芪是豆科植物黃芪的根,主要含黃芪甙I,乙酰黃芪甙I,異黃芪甙I等,黃芪臨床上可增強機體特異和非特異的免疫功能,使細胞的生理代謝作用增強,對血清性腎炎可是尿蛋白量明顯下降,腎臟病變減輕,有明顯利尿作用,對中樞神經(jīng)有鎮(zhèn)靜,安定作用.臨床上單獨使用或與其他藥配伍用于預防感冒,防止小兒哮喘以及治療慢性氣管炎均有較好的療效,臨床上黃芪常用劑型為口服液,是黃芪的提取液加蜂蜜精制而成,口味更為適宜,黃芪精口服液是多種慢性消耗性疾病的調(diào)補劑,又是中老年人養(yǎng)生保健的強壯劑,主要用于氣血虧,四肢乏力,精神不足,久病衰弱,脾胃不壯等癥狀.傳統(tǒng)的中藥純化方法乃至一些現(xiàn)代的純化技術(shù)由于其只作用于某一有效成分或某一類有限成分,因而往往會造成另一種有效成分或另一類有效成分的損失,比如說采用酸沉法從黃連中提取有效成分時,只能得到鹽酸小劈堿,而同時有效成分的藥根堿,黃連堿等大部分損失掉了,這既不符合中醫(yī)的整體觀念,而且療效也會受到影響,采用這種方法來提取的話,黃連和黃柏這兩味藥酒沒有什么區(qū)別了,而實質(zhì)上黃連和黃柏作用有很大的不同,傳統(tǒng)的中藥純化方法還存在使用大量有機溶媒,提取方法復雜,提取速率低,除雜不徹底,有效成分損失或破壞嚴重,并常造成環(huán)境污染等一系列問題,應用已受到很大的限制.黃芪精口服液生產(chǎn)中常采用水醇法制備,通過對水醇法與動態(tài)提取法進行比較,優(yōu)化生產(chǎn)工藝,尋找更好的方法來更好的除雜,保留有效成分,提高臨床療效.1儀器和材料G清型高速管式離心機(遼陽天興制藥機械有限公司),SSC300三足離心機(張家港威龍機械制造設(shè)備有限公司),UF一1板框超濾器(上海離心機研究所),725紫外光柵分光光度計(上海第二分析儀器廠);黃芪甲苷標準品由中國生物制品檢定所提供,所用試劑均為分析純.2實驗制法2.1黃芪中有效成分的提取:用天平稱取黃芪飲片100克,倒入鍋內(nèi),放500毫升純化水浸泡20分鐘,再加200毫升純化水,注意總共加水不可多于800毫升,置于電爐上煮沸,調(diào)節(jié)電壓,用文火保持微沸煮40分鐘,攪拌防止溫度過高藥液飛濺,過濾得450毫升藥液,將藥液分為體積相等的兩份,一份用醇沉法制備一份用離心法精制.2.2醇沉法制法:水醇法是根據(jù)重要成分既溶于水,用溶于醇的原理,利用其中所含成分在水中或乙醇中溶解度不同而進行的純化方法,藥物與水煮時,大多數(shù)有效成分如藥材中所含生物堿鹽,苷類,氨基酸等可被提取,但同時也煎出許多雜質(zhì)如淀粉,蛋白質(zhì),色素等水溶性雜質(zhì),他們在醇中溶解度小,加入乙醇可部分或大部分沉淀除去,但水溶性色素,樹脂等含量提高,雖然可降低溶解度,但不易完全除去,用乙醇沉淀雜質(zhì)醇化水提液,可以一次也可以反復處理2至3次,每次藥液含醇量逐漸提高防止一次加入過量乙醇致使有效成分同時沉出的量過多損失,如分兩次醇沉時,第一次使醇量達50%60%,第二次達65%一75%,若需第三次醇沉,含醇量達75%85%,本實驗僅需兩次醇沉.向制得的黃芪水煎液中加人乙醇418毫升,調(diào)節(jié)乙醇含量為65%,以去掉淀粉,在冰箱中靜置24小時,采用減壓抽濾回收乙醇,蒸至無乙醇味,得江蘇省江都市第三人民醫(yī)院(225200)2010年1月10日收稿200毫升藥液,然后加入乙醇600毫升,使乙醇含量調(diào)至體積分數(shù)為75%以去除色素等少數(shù)無效成分,再在冰箱中靜置24小時至48小時,后抽濾,再常壓回收乙醇,即得成品100毫升,再用電爐加熱濃縮至75毫升,濾過,直接配藥液,灌封,滅菌得成品,放入冰箱備用,每瓶相當于黃芪藥材75克.2.3離心機制備:離心法是以離心機為主要設(shè)備,通過離心機的高速運轉(zhuǎn),使離心機加速度超過重力加速度的成百上千倍,而使沉降速度增加,以加速藥液中的雜質(zhì)沉淀并除去的一種方法,其原理是利用混合液的密度差來分離藥液,比較適合于難于沉降的細微?；蛐鯛钗锏膽腋∫憾?靜置24小時的黃芪提取液余液用減壓抽濾得澄清液,將抽濾得到的上清液放人成對的心管,放在天平兩端調(diào)節(jié)至平衡,放人離心機的對稱位置,啟動離心機,轉(zhuǎn)速為30oo至5000轉(zhuǎn),分,反復離心,合并離心管中上清液,備用,得藥液120毫升加熱濃縮至75毫升藥液既得,直接配藥液灌封滅菌,得成品,每瓶相當于黃芪藥材75克.3質(zhì)量比較3.1雜質(zhì)的檢查:從兩種工藝所制的的產(chǎn)品中取2毫升各3份,分別加入1%明膠試劑,1%鞣酸溶液和O.1%碘試劑,檢查產(chǎn)品中的鞣質(zhì),蛋白質(zhì),淀粉三種雜質(zhì),結(jié)果如表1.表1兩種工藝成品雜質(zhì)檢查注:一澄清,+沉淀,+多沉淀3.2穩(wěn)定性觀察:將兩種工藝制成的121服液于室溫放置,每一個月檢查一次澄明度,連續(xù)觀察3個月,結(jié)果如表2.表2兩種工藝穩(wěn)定性觀察注:一澄清3.3兩種工藝口服液中黃芪甲苷的含量測定:取黃芪口服液29毫升,用水飽和的正丁醇提取2次,每次2O毫升,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次20毫升,合并正丁醇提取液,用氨試液提取2次,每次2O毫升,棄去氨液,正丁醇液置水浴蒸干,殘渣加甲醇1毫升溶解,作為供試品溶液.另精密稱取黃芪甲苷對照品,加甲醇溶制成每毫升含1毫克的溶液,作為對照品.照薄層色譜法試驗,洗去供試品溶液.具體結(jié)果見表3.2010年3月表3兩樣品黃芪甲苷含量測定結(jié)果(單位:mg/m1)3.4黃芪多糖的檢測反應:取樣品1和樣品II各2毫升傾入兩支試管中,各加入5%萘酚醇溶液3滴,搖勻沿試管壁緩緩加入1毫升濃硫酸,觀察口服液于硫酸交界面產(chǎn)生的反應,樣品I與樣品II均產(chǎn)生深紫色環(huán),說明兩種工藝中黃芪多糖含量高.4討論黃芪中有效成分主要為以黃芪甲苷為代表的皂苷類,黃芪多糖等.水醇法制備黃芪口服液工藝成本較高,有效成分損失較大,特別是醇沉多糖類成分損失更大;高速離心法是一種物理分離法,它除去的是固體雜質(zhì),本法減少了有效成分的損壞和破壞,節(jié)省了大量物料,降低了藥品成本,高速離心法簡便可行,適宜工業(yè)化生產(chǎn)采用,值得進一步推廣.超聲提取黃芩多糖工藝研究朱智勇摘要:目的:采用(3)正交實驗法,研究黃芩多糖的超聲波法提取最佳工藝條件.方法:以多糖得率為指標,以提取溫度,提取時間,料液比,粒度為因素進行正交實驗.結(jié)果:超聲波法提取黃芩多糖的最佳工藝條件為萃取溫度65C,萃取時/160min,料液比l:1O,黃苓粉碎過200目篩.結(jié)論:此實驗工藝簡單易行,通過驗證實驗,最佳提取工藝條件得率為3.40%.關(guān)鍵詞:超聲波;黃芩;多糖;提取工藝中圖分類號:R284.2文獻標識碼:B文章編號:10060979(2010)06-004102黃芩始載于神農(nóng)本草經(jīng),為唇形科多年草本植物,黃芩(Scutellm-iabaicalensisGeorg1)的根別名黃金茶,山茶根,爛心草,為中醫(yī)常用的清熱燥濕藥.具有清熱燥濕,瀉火解毒,止血安胎等功效【l】.中草藥多糖及糖復合物參與和介導了細胞各種生命現(xiàn)象的調(diào)節(jié),在抗腫瘤,抗菌,抗病毒,抗?jié)?抗糖尿病,降血脂,抗凝血及免疫調(diào)節(jié)等方面有作用.近年來研究表明,黃芩多糖可以抑制豬生殖和呼吸系統(tǒng)綜合癥病毒,對病毒感染引起的非典型性肺炎等疾病具有一定的防治作用.本實驗采用超聲提取技術(shù)對黃芩多糖的提取工藝進行了研究.1材料與儀器1.1藥材:黃芩購自江西宜春老百姓大藥房.1.2試劑:葡萄糖標準品,上?；瘜W試劑公司;苯酚,上?；瘜W試劑公司;乙醚,95%乙醇,正丁醇,無水乙醇,濃硫酸均為分析純.1.3儀器:Branson2200型超聲清洗儀(上海正方電子電器有限公司);BS一223S型電子分析天平(江西華科精密儀器有限公司);RE一200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);UV一4501S型紫外可見分光光度計(天津市港東科技有限公司).2方法與結(jié)果一2.1黃芩多糖提取方法優(yōu)選:選定影響黃芩多糖提取效率的四個主要因素:提取溫度A,提取時間B,料液比C,和黃芩粉末粒度D作為考察因素,以黃芩多糖的得率為考察指標,選用(3)正交表進行實驗.因素水平安排見表1.表1因素水平表2.2黃芩多糖提取方法:稱取黃芩1000g,干燥,粉碎,過篩(120目,100目,80目)后,分別稱取黃芩粉末5Og,加入95%乙醇35rn1(脫單糖,低聚糖),藥粉揮干溶劑后,加入蒸餾水,超聲提取2次,每次30rain,合并提取液,過濾.濾液經(jīng)減壓濃縮至體積一半.濾液中加入2.5倍量的95%乙醇,放置過夜,濾出沉淀,加入l5rIll蒸餾水溶解沉淀,sevag法去除蛋白,即加入等體積的氯仿一正丁醇溶液(氯仿:正丁醇=5:1),離心,上清液用2mol/L的NaOH調(diào)pH=7,離心,加入2.5倍量的95%乙醇靜置48小時,濾出沉淀,依次用95%乙醇,無水乙醇,丙酮,乙醚反復洗滌,將沉淀物(即粗多糖)真空干燥至恒重,即得黃芩多糖.江西省宜春學院化學與生物工程學院(336000)2010年1月4日收稿2.3黃芩多糖含量測定:參照文獻5,61方法,進行多糖含量測定,分別準確吸取葡萄糖標準溶液和黃芩多糖提取液1.0ml于具塞試管中,以蒸餾水1.0ml作空白,每管加人5%苯酚溶液1.Oml,再垂直快速加入濃硫酸,搖勻,放置5min,沸水水浴加熱15rain,之后用流水速冷至室溫,以蒸餾水為空白對照,在20070Ohm范圍內(nèi)用紫外分光光度計進行掃描,實驗結(jié)果表明葡萄糖和黃芩多糖最大吸收峰值均在490nm處,經(jīng)重復性,穩(wěn)定性,回收率實驗確定硫酸一苯酚法作為黃芩多糖含量的測定方法,校準曲線回歸方程為:A=0.0243C一0.0853,R:=-0.9967.2.4實驗結(jié)果與分析:實驗按照IJ9(3)進行正交實驗設(shè)計,實驗結(jié)果見表2.從表中數(shù)據(jù)可分析,影響黃芩多糖提取因素的主次順序為D>A>B>C,即黃芩粉末粒度D,提取溫度A,提取時間B,料液比C對黃芩多糖提取率的影響依次減少.通過直觀分析可知最佳提取工藝為D,B2C:,即:黃芩粒度200目,料液比1:10,萃取溫度65,萃