清潔級實驗動物房的使用.ppt

清潔級實驗動物房的使用 唐甩恩 進入動物房要更衣 戴口罩 帽子 經(jīng)過風淋 為什么 對實驗動物為什么要實行環(huán)境控制 如何維護實驗動物房正常運行 進入動物房要更衣 戴口罩 帽子 經(jīng)過風淋 為什么 實驗動物實驗用動物 實驗動物 是指經(jīng)人工培育 對其攜帶微生物實行控制 遺傳背景明確 來源清楚 可用于科學實驗 藥品 生物制品的生產(chǎn)和檢定及其它科學實驗的動物 有三大特點 1遺傳角度有要求 必須經(jīng)人工培育 遺傳背景明確 來源清楚 根據(jù)基因的純合程度 實驗動物分為 近交系 突變系 雜交群 封閉群 2對其攜帶的微生物 寄生蟲實行人工控制 3用于科學實驗 它是人類的替身 最精密的儀器都無法替代 實驗用動物 是指一切能用于科學實驗的動物 除實驗動物外 還包括野生動物 經(jīng)濟動物和觀賞動物 實驗 野生 經(jīng)濟 觀賞動物的區(qū)別 按微生物學控制原理分類 實驗動物可分為普通級清潔級SPF級 SpecificPathogenFree 無特定病原體的動物無菌動物 無菌動物 是指動物體內(nèi)外無任何微生物和寄生蟲的動物 是經(jīng)人工剖腹產(chǎn)凈化培育出來的 飼養(yǎng)在隔離環(huán)境設施中 SPF級 無特定病原體的動物 是指實驗動物體內(nèi)不存在特定病原微生物和寄生蟲的特殊動物 不允許存在干擾實驗的潛在感染 如綠膿桿菌 飼養(yǎng)在屏障環(huán)境設施系統(tǒng)中 來源 無菌動物 悉生動物 SPF動物悉生動物 指體內(nèi)攜帶的微生物是經(jīng)人工有計劃投給的已知菌或動物生存必需菌 如大腸桿菌或雙歧桿菌 清潔級動物 動物體內(nèi)外不攜帶人畜共患的病原體或動物傳染病病原體的動物 對動物危害大的 科學研究干擾大的微生物不允許存在 如肝炎病毒 仙臺病毒 普通級動物 未經(jīng)嚴格控制微生物的動物 飼養(yǎng)在開放環(huán)境設施中 用于教育示教 不允許存在人畜共患病和嚴重的動物傳染病 如沙門氏菌 出血熱 弓形蟲 螨 虱 猴皰疹病毒 B病毒 鼠痘病毒 普通環(huán)境 該環(huán)境設施符合動物居住的基本要求 不能完全控制傳染因子 適用于飼育教學等用途的普通級實驗動物 屏障環(huán)境 該環(huán)境設施適用于飼育清潔實驗動物及無特定病原體實驗動物 該環(huán)境嚴格控制人員和物品的進出 隔離環(huán)境 該環(huán)境設施采用無菌隔離裝置以保存無菌或無外來污染動物 隔離裝置內(nèi)的空氣 飼料 水 墊料和設備均為無菌 動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng) 該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離 又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持內(nèi)環(huán)境一致 該環(huán)境設施適用于飼育無特定病原體 SPF 悉生 Gnotobiotic 及無菌 GermFree 實驗動物 動物實驗設施 設備 環(huán)境指標 對實驗動物為什么要實行環(huán)境控制 影響實驗結(jié)果的遺傳和環(huán)境因素 基因型 表現(xiàn)型 演出型 發(fā)育環(huán)境 周圍環(huán)境 動物實驗的目的是對演出型進行各種有控制的處理而獲得實驗結(jié)果 為求得動物實驗結(jié)果重復性好 就必須要求演出型穩(wěn)定 這就需要對決定演出型的遺傳和環(huán)境條件加以控制 反應的重復性 指不同的實驗工作者 在不同的實驗地點 不同的時間 用同一品系動物所做的實驗 幾乎沒有差異地均能獲得相同的結(jié)果 動物對實驗處理的反應 R A B C D ER 實驗動物的總反應 A 實驗動物種的共同反應 B 動物品種和品系的特有反應 C 動物個體反應 個體差異 D 環(huán)境的影響 包括實驗處理 E 實驗誤差 實驗動物環(huán)境因素包括兩個方面 自然因素 物理 化學 生物 人為因素 品質(zhì)控制 實驗動物的環(huán)境因素 遺傳因素 人為因素 設施 飼養(yǎng) 管理 調(diào)教和實驗處理等 生物因素 各種病原體 細菌 病毒 寄生蟲 物理因素 溫度濕度氣流光照噪聲籠具墊料飼養(yǎng)密度 化學因素 飼料飲水空氣臭氣殺蟲劑消毒劑有毒物質(zhì) 如何維護實驗動物房正常運行 清潔級動物引入動物實驗室的規(guī)定 1 外購的大 小鼠品系 需查明該生產(chǎn)單位是否具備該動物生產(chǎn)合格證 如不具備合法證明 則立即退回 2 動物運輸盒箱包裝是否符合該級別要求 如發(fā)現(xiàn)有破漏等不符合該級別要求的情況 則立即退回 3 如懷疑該品系動物不合要求或不健康 則應立即向法定檢測機構(gòu)要求鑒定 如確屬不合格或以次充好 則將該批動物如數(shù)退回 并通報上級動物管理委員會嚴肅處理 4 在以上三點均符合要求的前提下 將動物連同包裝盒一起送入緩沖間 不得在送入之前將動物包裝盒打開 5 動物連同合格的包裝盒放入緩沖間后 即噴灑過氧乙酸等空氣消毒劑 開啟紫外線消毒20分鐘 然后打開實驗室內(nèi)緩沖間的門 連盒進入實驗室 取出動物入籠架 動物實驗人員操作規(guī)定 實驗中必需的器件 物品均需嚴格消毒后由傳遞倉 大物品由緩沖間 進入 并按照傳遞倉或緩沖間的進入程序操作 非實驗所需的一切物品嚴禁帶入實驗室 傳遞倉 緩沖間 使用規(guī)定 物品傳遞倉 緩沖間 是傳送實驗用品 各種滅菌物品及更替下的物品的專用通道 嚴禁隨意開啟 開而不關或改作其他用途 傳遞倉 緩沖間 使用方法如下 滅菌物品傳入 開啟外門 消毒液噴灑倉內(nèi) 去除外包裝 二層包布 放入倉內(nèi) 噴液 關閉外門 開紫外線燈30分鐘 關紫外線燈 開啟內(nèi)門 傳入實驗室物品傳出 開紫外線燈30分鐘 關紫外線燈 開啟內(nèi)門 放入送出物品 關閉內(nèi)門 開啟外門 搬出物品 噴液 關閉外門 開紫外線燈 實驗人員進入動物房程序 洗手 更衣室 戴口罩 帽子 穿鞋套 風淋 內(nèi)走廊 動物室 緩沖間 外走廊 在進出時不能同時打開兩扇門 加水喂料 飲水采用過濾水 飲水瓶應及時更換 防止漏水 斷水 定時消毒 飼料要保持新鮮 滅菌飼料貯藏不超過一周 更換籠具 每天更換 清洗接糞盤 定期用消毒液擦拭籠架 動物的排泄物和廢物由實驗者清除匯總 實驗結(jié)束后 通過緩沖室?guī)С?交動物實驗管理人員處理 非實驗人員不得擅自進入動物實驗室 實驗后 不必要的儀器 物品 樣本或死亡的動物 應在離開實驗室時帶出 通過緩沖室隨身帶出 死亡的動物應交實驗室管理人員統(tǒng)一處理 高壓飼料的準備 1 飼料需用可高壓滅菌的耐高壓飼料 2 檢查飼料質(zhì)量 如發(fā)現(xiàn)飼料有霉變 結(jié)塊及蟲蛀的情況 不得使用 3 將飼料裝入牛皮紙袋內(nèi) 外套布袋 扎緊袋口 放高壓消毒鍋中消毒 120 20分鐘 4 將消毒過的飼料用脫皮法進入傳遞倉和實驗室 實驗室環(huán)境主要參數(shù)的例行觀察記錄 1 每天由值班人員觀察并記錄動物實驗室的溫度和相對濕度 2 大 小鼠要求室內(nèi)溫度保持在20 24 之間 3 發(fā)現(xiàn)溫度過高或過低時及時調(diào)整 動物健康狀況的間接觀察和發(fā)現(xiàn)異常情況的處置規(guī)定 1 動物在實驗中如發(fā)現(xiàn)有異常情況應及時報告實驗室負責人 2 對動物不明原因的死亡 須作必要的尸體解剖 查明原因 3 如發(fā)現(xiàn)尚未進行實驗的動物表現(xiàn)異常 應及時隔離觀察 并追查動物來源 4 如動物經(jīng)檢驗后 發(fā)現(xiàn)有烈性傳染病的感染 應立即隔離處死 動物實驗室需嚴格消毒 動物廢物處理 1 動物的廢物應統(tǒng)一置于規(guī)定地方傾倒 并有專人負責處理 2 廢物應與動物尸體分開處理 3 動物尸體一定要焚燒 其他廢物可作焚燒 發(fā)酵 無害化處理后丟棄或其他相應辦法處理 以不污染環(huán)境為原則 4 對于有特殊試驗的實驗動物排泄物 要有專人負責按規(guī)定處理 實驗室的例行清潔衛(wèi)生和例行消毒規(guī)定 1 實驗室內(nèi)