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第八章 微生物檢測(cè)技術(shù)和相關(guān)儀器習(xí)題參考答案一、名詞解釋1自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng):主要由培養(yǎng)系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)組成。培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)基、恒溫裝置和震蕩培養(yǎng)裝置。檢測(cè)系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)控制,對(duì)血培養(yǎng)實(shí)施連續(xù)、無損傷瓶外監(jiān)測(cè)。通過自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化,定性地檢測(cè)微生物的存在。2檢測(cè)導(dǎo)電性和電壓的血培養(yǎng)系統(tǒng):血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一定導(dǎo)電性。微生物在生長(zhǎng)代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán)(例如在液體培養(yǎng)基內(nèi)CO2轉(zhuǎn)變成CO3),通過電極檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無微生物生長(zhǎng)。3應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng):許多細(xì)菌生長(zhǎng)過程中,常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象,如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長(zhǎng)時(shí),由于消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣而首先表現(xiàn)為吸收氣體。而厭氧菌生長(zhǎng)時(shí)最初均無吸收氣體現(xiàn)象,僅表現(xiàn)為產(chǎn)生氣體(主要為CO2),因此可利用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的改變檢測(cè)微生物的生長(zhǎng)情況。4采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng):微生物在代謝過程中必然會(huì)產(chǎn)生終代謝產(chǎn)物CO2,引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改變。利用光電比色檢測(cè)血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變,可判斷有無微生物生長(zhǎng)。5BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng):該系統(tǒng)在每個(gè)培養(yǎng)瓶底部裝置一帶含水指示劑的CO2感受器,當(dāng)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)有微生物生長(zhǎng)時(shí),其釋放出的CO2可滲透至感受器,并與感受器指示劑上飽和水發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生游離氫離子使pH值降低,感受器上的指示劑由綠變黃。感受器上方的光發(fā)射二極管每10min發(fā)一次光投射到感受器上,再由一光電探測(cè)器測(cè)量其產(chǎn)生的反射光。反射光強(qiáng)度傳送至微機(jī)后,會(huì)自動(dòng)連續(xù)記憶并繪成生長(zhǎng)曲線圖,由微機(jī)分析判斷陰性或陽性,以此確定是否有微生物生長(zhǎng)。6Bactec9000自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng):系統(tǒng)利用熒光法作為檢測(cè)手段,其CO2感受器上含有熒光物質(zhì)。當(dāng)培養(yǎng)瓶中有微生物存在時(shí),產(chǎn)生的CO2可與感受器中的水發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生H+,使pH值降低,酸性環(huán)境促使感受器釋放出熒光物質(zhì)。從光發(fā)射二極管發(fā)射的光激發(fā)熒光感受器而產(chǎn)生熒光。光電比色檢測(cè)儀每10min直接對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè),此熒光強(qiáng)度隨CO2的產(chǎn)生量增多而增強(qiáng)。數(shù)據(jù)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)后,生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)根據(jù)熒光的線性增加或熒光產(chǎn)量的增加等特有標(biāo)準(zhǔn),分析細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,最終判斷陽性或陰性。7Vital血培養(yǎng)系統(tǒng):系統(tǒng)采用同源熒光技術(shù)來監(jiān)測(cè)微生物的生長(zhǎng)。與培養(yǎng)基結(jié)合的熒光分子在最初具有一定熒光值,當(dāng)有微生物存在時(shí),其生長(zhǎng)代謝過程中或產(chǎn)生CO2、或發(fā)生pH值改變、或氧化還原使電位改變等,均可導(dǎo)致液體培養(yǎng)基內(nèi)的熒光分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而成為無熒光的化合物,即發(fā)生熒光衰減。通過光電比色計(jì)檢測(cè)熒光衰減水平,可判斷有無微生物生長(zhǎng)。8微生物自動(dòng)鑒定分析系統(tǒng):將物理和化學(xué)分析方法相結(jié)合,根據(jù)細(xì)菌不同的生物學(xué)性狀和代謝產(chǎn)物的差異,在微量快速培養(yǎng)基和微量生化反應(yīng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,將細(xì)菌對(duì)底物的生化類型與已建立數(shù)據(jù)庫(kù)類型相比較,即可得出鑒定結(jié)果。9微生物數(shù)碼鑒定:指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式,給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼,建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過對(duì)未知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字(編碼),查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù),得到細(xì)菌名稱。10自動(dòng)化抗生素敏感性試驗(yàn):其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。將抗生素微量稀釋在條孔或條板中,加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育,儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度,或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解,觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。得出待檢菌在各藥物濃度的生長(zhǎng)斜率,經(jīng)回歸分析得到最低抑菌濃度MIC值,并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度。11VITEK自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng):鑒定原理是根據(jù)不同微生物的理化性質(zhì)不同,采用光電比色法,測(cè)定微生物分解底物導(dǎo)致pH值改變而產(chǎn)生的不同顏色,來判斷反應(yīng)的結(jié)果。VITEK系統(tǒng)可快速鑒定500多種臨床病原菌。具有20多種藥敏測(cè)試卡、90多種抗生素和測(cè)定超廣譜-內(nèi)酰胺酶測(cè)試卡。還有根據(jù)細(xì)菌耐藥規(guī)律而設(shè)定的專家系統(tǒng),可幫助校正和修改結(jié)果。12MicroScanWalk/Away自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng):系統(tǒng)除采用傳統(tǒng)呈色反應(yīng)法外,同時(shí)采用敏感度極高的快速熒光測(cè)定技術(shù)來檢測(cè)細(xì)菌胞外酶。鑒定板有普通板和快速板兩種,普通板獲得結(jié)果需要1618h,快速板測(cè)定只需23.5h,可鑒定近800種細(xì)菌。藥敏部分采用比濁法進(jìn)行測(cè)定。13Biolog微生物鑒定系統(tǒng):其原理是利用微生物對(duì)不同碳源代謝率的差異,通過檢測(cè)微生物細(xì)胞利用不同碳源進(jìn)行新陳代謝過程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致的吸光度以及由于微生物生長(zhǎng)造成的濁度差異,與標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),即可得出最終鑒定結(jié)果。二、選擇題【A型題】1B 2D 3 C 4E 5A 6C 7B 8D 9E 10C 11A 12B 13C 14D 15E 【X型題】1BD 2ABCDE 3ABC 4ABCD 5BDE6ABCD 7ACD 8ABCDE 9ABCDE 10ABCDE11BCDE 12BCDE 13ABCDE 14ABCDE 15ABCDE三、簡(jiǎn)答題1. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)儀培養(yǎng)系統(tǒng)的特點(diǎn)。答:培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)基、恒溫裝置和震蕩培養(yǎng)裝置。具有培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富,檢測(cè)靈敏度高,檢出的時(shí)間短,檢出病原菌的種類多,抗干擾能力強(qiáng)、污染明顯減少等特點(diǎn)。2. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)儀檢測(cè)系統(tǒng)的工作原理。答:檢測(cè)系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)控制,對(duì)血培養(yǎng)實(shí)施連續(xù)、無損傷瓶外監(jiān)測(cè)。其工作原理主要是通過自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基(液)中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化,定性地檢測(cè)微生物的存在。3. 自動(dòng)化血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)按檢測(cè)原理可分為哪幾類,各類型的工作原理是什么?答:以檢測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng):血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一定導(dǎo)電性。微生物在生長(zhǎng)代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán),通過電極檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無微生物生長(zhǎng);應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng):許多細(xì)菌生長(zhǎng)過程中,常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象,因此可利用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的改變檢測(cè)微生物的生長(zhǎng)情況;采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng):微生物在代謝過程中產(chǎn)生的CO2引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改變。利用光電比色檢測(cè)血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變,可判斷有無微生物生長(zhǎng)。4. 簡(jiǎn)述自動(dòng)血培養(yǎng)儀的基本結(jié)構(gòu)及其功能。答:主要培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)等三部分組成。培養(yǎng)瓶:通常為一次性無菌培養(yǎng)瓶,提供不同細(xì)菌繁殖所必需的增菌液體培養(yǎng)基和適宜的氣體成分,并且含有不同的指示系統(tǒng);培養(yǎng)儀:設(shè)有恒溫、振蕩培養(yǎng)裝置及監(jiān)測(cè)裝置,培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行培養(yǎng)及連續(xù)監(jiān)測(cè),并給予提示信息;數(shù)據(jù)管理系統(tǒng):收集并分析來自培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù),以及將患者和培養(yǎng)瓶的資料存入數(shù)據(jù)庫(kù)。5. 采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng),按檢測(cè)手段可分為哪幾類?答:采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng),按檢測(cè)手段可分成BioArgos系統(tǒng)、BacT/Alert系統(tǒng)、Bactec9000系列和Vital系統(tǒng)等四類。6. 簡(jiǎn)述BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答:該系統(tǒng)在每個(gè)培養(yǎng)瓶底部裝置一帶含水指示劑的CO2感受器,當(dāng)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)有微生物生長(zhǎng)時(shí),其釋放出的CO2可滲透至感受器,并與感受器指示劑上飽和水發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生游離氫離子使pH值降低,指示劑由綠變黃。感受器上方的光發(fā)射二極管每10min發(fā)一次光投射到感受器上,再由一光電探測(cè)器測(cè)量其產(chǎn)生的反射光。產(chǎn)生的CO2越多,則被反射的光就越多。反射光強(qiáng)度傳送至微機(jī)后,會(huì)自動(dòng)連續(xù)記憶并繪成生長(zhǎng)曲線圖,由微機(jī)分析判斷陰性或陽性,以此確定是否有微生物生長(zhǎng)。7. 簡(jiǎn)述Bactec自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答:BACTEC系統(tǒng)利用熒光法作為檢測(cè)手段,其CO2感受器上含有熒光物質(zhì)。當(dāng)培養(yǎng)瓶中有微生物存在時(shí),產(chǎn)生的CO2可與感受器中的水發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生H+,使pH值降低,酸性環(huán)境促使感受器釋放出熒光物質(zhì)。從光發(fā)射二極管發(fā)射的光激發(fā)熒光感受器而產(chǎn)生熒光。光電比色檢測(cè)儀每10min直接對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè),此熒光強(qiáng)度隨CO2的產(chǎn)生量增多而增強(qiáng)。數(shù)據(jù)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)后,生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)根據(jù)熒光的線性增加或熒光產(chǎn)量的增加等特有標(biāo)準(zhǔn),分析細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,最終判斷陽性或陰性。8. 簡(jiǎn)述Vital自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答:該系統(tǒng)采用同源熒光技術(shù)來監(jiān)測(cè)微生物的生長(zhǎng)。也就是說,與培養(yǎng)基結(jié)合的熒光分子在最初具有一定熒光值,當(dāng)有微生物存在時(shí),其生長(zhǎng)代謝過程中或產(chǎn)生CO2、或發(fā)生pH值改變、或氧化還原使電位改變等,均可導(dǎo)致液體培養(yǎng)基內(nèi)的熒光分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而成為無熒光的化合物,即發(fā)生熒光衰減。通過光電比色計(jì)檢測(cè)熒光衰減水平,可判斷有無微生物生長(zhǎng)。9. 簡(jiǎn)述BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分及相應(yīng)功能。答: BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。培養(yǎng)瓶為一次性無菌培養(yǎng)瓶,每個(gè)培養(yǎng)瓶底部都包含一個(gè)檢測(cè)CO2的傳感器,通過檢測(cè)CO2變化作為微生物生長(zhǎng)狀況的指示器;培養(yǎng)儀中設(shè)有恒溫裝置、振蕩培養(yǎng)裝置及監(jiān)測(cè)裝置。培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行培養(yǎng)并借助固相反射光光度計(jì)連續(xù)監(jiān)測(cè)每個(gè)培養(yǎng)瓶的狀態(tài)。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)由主機(jī)、監(jiān)視器、鍵盤、條形碼閱讀器及打印機(jī)等組成。主要功能是收集并分析來自BacT/Alert血培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù),并將患者和培養(yǎng)瓶的資料存入數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)可根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室的要求追蹤大量的信息,根據(jù)病區(qū)、微生物類型及時(shí)間追蹤分析結(jié)果。10. 簡(jiǎn)述BACTEC9000系列自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分及相應(yīng)功能。答:主要組成部分有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。培養(yǎng)瓶針對(duì)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)和氣體環(huán)境的要求懸殊較大,包括患者的年齡和體質(zhì)差異以及之前是否服用抗菌素等要素。BACTEC9000系統(tǒng)可提供多種專用封閉式培養(yǎng)瓶;各種儀器的培養(yǎng)儀結(jié)構(gòu)基本相同,主要由轉(zhuǎn)動(dòng)體、鍵盤、條形碼閱讀器、液晶顯示屏、計(jì)算機(jī)及外部接口等組成。培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng),恒溫培養(yǎng),并連續(xù)監(jiān)測(cè)每個(gè)培養(yǎng)瓶熒光信號(hào)的變化;數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)獲取、整理、處理并分析來自BACTEC9000系列培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù)信息,以及將患者相關(guān)信息和培養(yǎng)瓶資料存入數(shù)據(jù)庫(kù),并進(jìn)行管理。11. 第三代自動(dòng)血培養(yǎng)儀有哪些性能特點(diǎn)?答:(1)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富;(2)以連續(xù)、恒溫、振蕩方式培養(yǎng),細(xì)菌易于生長(zhǎng);(3)培養(yǎng)瓶多采用不易碎材料制成,提高了使用的安全性;(4)采用封閉式非侵入性的瓶外監(jiān)測(cè)方式,避免標(biāo)本交叉感染,且無放射性污染;(5)自動(dòng)連續(xù)監(jiān)測(cè),縮短了檢測(cè)時(shí)間,陽性標(biāo)本檢測(cè)可快速、準(zhǔn)確;(6)結(jié)果報(bào)告及時(shí),85%以上的陽性標(biāo)本能在48小時(shí)內(nèi)被檢出;(7)培養(yǎng)瓶多采用雙條形碼技術(shù),只需用電腦上的條碼閱讀器掃描報(bào)告單上的條碼,就可直接查詢到病人的結(jié)果及生長(zhǎng)曲線;(8)培養(yǎng)瓶可隨時(shí)放入培養(yǎng)系統(tǒng),并進(jìn)行追蹤檢測(cè);(9)數(shù)據(jù)處理功能較強(qiáng),數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)隨時(shí)監(jiān)測(cè)感應(yīng)器的讀數(shù),依據(jù)數(shù)據(jù)的變化來判定標(biāo)本的陽性或陰性,并可進(jìn)行流行病學(xué)的統(tǒng)計(jì)分析;(10)設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng),可保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn);(11)可進(jìn)行血液及所有無菌體液的細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)。12. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)常見故障及維護(hù)。答:溫度異常:多數(shù)情況下是由于儀器門打開的次數(shù)太多引起,應(yīng)盡量減少儀器門開關(guān)次數(shù),并確保培養(yǎng)過程中儀器門是緊閉的。應(yīng)經(jīng)常進(jìn)行溫度核實(shí)。瓶孔被污染:如果培養(yǎng)儀瓶孔內(nèi)的培養(yǎng)瓶破裂或泄漏,需按各儀器要求及時(shí)進(jìn)行清潔和消毒處理。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)與培養(yǎng)儀失去信息聯(lián)系或不工作:此類故障只可能在微機(jī)與培養(yǎng)儀儀器相對(duì)獨(dú)立的系統(tǒng)中出現(xiàn)。因此必須注意放置培養(yǎng)瓶時(shí),需先掃描條形碼,再將它放入啟用的瓶孔內(nèi),患者、檢驗(yàn)號(hào)、培養(yǎng)瓶的信息要等到微機(jī)系統(tǒng)工作之后才能輸入。儀器對(duì)測(cè)試中的培養(yǎng)瓶出現(xiàn)異常反應(yīng):卸出培養(yǎng)瓶,重新掃描后裝入到另一孔內(nèi),然后對(duì)異??鬃髻|(zhì)控。13. 簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定的工作原理。答:采用微生物數(shù)碼鑒定原理,這是自動(dòng)化鑒定系統(tǒng)的基礎(chǔ)。數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式,給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼,建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過對(duì)未知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字(編碼),查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù),得到細(xì)菌名稱。其基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對(duì)系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻率總和。14. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化抗生素敏感性試驗(yàn)的檢測(cè)原理。答:自動(dòng)化抗生素敏感性試驗(yàn)使用藥敏測(cè)試板(卡)進(jìn)行測(cè)試,其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。將抗生素微量稀釋在條孔或條板中,加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育,儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度,或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解,觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。得出待檢菌在各藥物濃度的生長(zhǎng)斜率,經(jīng)回歸分析得到最低抑菌濃度MIC值,并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度:敏感“S”、中度敏感“MS”和耐藥“R”。15. 簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)與相應(yīng)功能。答:(1)測(cè)試卡(板):是系統(tǒng)的工作基礎(chǔ),各種不同的測(cè)試卡(板)具有不同的功能。最基本的測(cè)試卡(板)包括革蘭氏陽、陰性菌鑒定卡(板),革蘭氏陽、陰性菌藥敏試驗(yàn)卡(板)。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)涂片和革蘭氏染色結(jié)果進(jìn)行選擇。(2) 菌液接種器:可分為真空接種器和活塞接種器,以真空接種器較為常用??蓪⑴浜玫木航臃N至測(cè)試卡中。(3)培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)系統(tǒng):測(cè)試卡(板)接種菌液后即可放入孵箱/讀數(shù)器中進(jìn)行培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)。監(jiān)測(cè)系統(tǒng)每隔一定時(shí)間對(duì)每孔的透光度或熒光物質(zhì)的變化進(jìn)行檢測(cè),并將檢測(cè)數(shù)據(jù)傳送給數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。(4)數(shù)據(jù)管理系統(tǒng):數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)就象整個(gè)系統(tǒng)的神經(jīng)中樞,始終保持與孵箱/讀數(shù)器、打印機(jī)的聯(lián)絡(luò),控制孵箱溫度,自動(dòng)定時(shí)讀數(shù),負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)換及分析處理。16.簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的鑒定卡類型及工作原理。答:微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的鑒定卡通常包括常規(guī)革蘭氏陽(陰)性卡和快速熒光革蘭氏陽(陰)性卡兩種。常規(guī)革蘭氏陽(陰)性卡對(duì)各項(xiàng)生化反應(yīng)結(jié)果(陰性或陽性)的判定是根據(jù)比色法的原理,系統(tǒng)以各孔的反應(yīng)值作為判斷依據(jù),組成數(shù)碼并與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知分類單位相比較,獲得相似系統(tǒng)鑒定值;快速熒光革蘭氏陽(陰)性板則根據(jù)熒光法的鑒定原理,通過檢測(cè)熒光底物的水解、熒光底物被利用后的pH值變化、特殊代謝產(chǎn)物的生成和某些代謝產(chǎn)物的生成率來進(jìn)行菌種鑒定。17簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的藥敏卡類型及工作原理。答:藥敏測(cè)試板分為常規(guī)測(cè)試板和快速熒光測(cè)試板兩種。常規(guī)測(cè)試板的檢測(cè)原理為比濁法,在含有抗生素的培養(yǎng)基中,濁度的增加提示細(xì)菌生長(zhǎng),根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)解釋敏感或耐藥;快速熒光測(cè)試板的檢測(cè)原理為熒光法,在每一反應(yīng)孔內(nèi)參入熒光底物,若細(xì)菌生長(zhǎng),表面特異酶系統(tǒng)水解熒光底物,激發(fā)熒光,反之無熒光。以最低藥物濃度仍無熒光產(chǎn)生的濃度為最低抑菌濃度(MIC)。18簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的性能特點(diǎn)。答:(1)自動(dòng)化程度較高,可自動(dòng)加樣、聯(lián)機(jī)孵育、定時(shí)掃描、讀數(shù)、分析、打印報(bào)告等;(2)功能范圍大,包括需氧菌、厭氧菌、真菌鑒定及細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)、最低抑菌濃度(MIC)測(cè)定;(3)檢測(cè)速度快,快速熒光測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為24小時(shí),絕大多數(shù)細(xì)菌的鑒定可在46小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果;(4)系統(tǒng)具有較大的細(xì)菌資料庫(kù),鑒定細(xì)菌種類可達(dá)100700余種不等,可進(jìn)行數(shù)十甚至100多種不同抗生素的敏感性測(cè)試;(5)使用一次性測(cè)試卡或測(cè)試板,可避免由于洗刷不潔而造成人為誤差;(6)數(shù)據(jù)處理軟件功能強(qiáng)大,可自動(dòng)檢測(cè)結(jié)果作出統(tǒng)計(jì)和組成多種統(tǒng)計(jì)學(xué)報(bào)告;(7)軟件和測(cè)試卡(板)大多可不斷升級(jí)更新,使設(shè)備功能不易老化;(8)設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng),保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。19簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的維護(hù)。答:(1)嚴(yán)格按手冊(cè)規(guī)定進(jìn)行開、關(guān)機(jī)及各種操作;(2)定期清潔比濁儀、真空接種器、封口器、讀數(shù)器及各種傳感器,避免由于灰塵而影響判斷的正確性;(3)定期用標(biāo)準(zhǔn)比濁管對(duì)比濁儀進(jìn)行校正,用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)試各種試卡,并作好質(zhì)控記錄;(4)建立儀器使用以及故障和維修記錄,詳細(xì)記錄每次使用情況和故障的時(shí)間、內(nèi)容、性質(zhì)、原因和解決辦法;(5)定期由工程師作全面保養(yǎng),并排除故障隱患。20臨床常見的自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)分成哪幾類? 答:臨床常見的自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)分成VITEK系統(tǒng)、MicroScanWalk/Away系統(tǒng)、PHOENIX系統(tǒng)和SENSITITRE ARIS系統(tǒng)等四類。21. 簡(jiǎn)述VITEK系統(tǒng)的鑒定原理及特點(diǎn)。答:VITEK系統(tǒng)的鑒定原理是根據(jù)不同微生物的理化性質(zhì)不同,采用光電比色法,測(cè)定微生物分解底物導(dǎo)致pH值改變而產(chǎn)生的不同顏色,來判斷反應(yīng)的結(jié)果。VITEK系統(tǒng)可快速鑒定約500種臨床病原菌。具有20多種藥
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