大豆抗原蛋白與仔豬過敏性腹瀉 醫(yī)學(xué)PPT.ppt

大豆抗原蛋白與仔豬過敏性腹瀉 1 2020 3 10 內(nèi)容提要 2 2020 3 10 仔豬腹瀉發(fā)生的原因 傳染性病因1 1病毒性腹瀉傳染性胃腸炎 輪狀病毒感染1 2細菌性腹瀉仔豬黃痢 仔豬白痢 仔豬副傷寒 仔豬紅痢 3 2020 3 10 2 免疫系統(tǒng)因素 1 2 3 4 周齡 6 7 5 6 8 4 2 免疫力 主動免疫 被動免疫 母乳 4 2020 3 10 3 應(yīng)激因素3 1溫度驟變皮下脂肪薄 被毛稀少 保溫能力差 糖原水平低 產(chǎn)熱能力不足 因此仔豬對冷相當(dāng)敏感 5 2020 3 10 1 2 3 4 周齡 6 7 5 6 8 4 2 免疫力 主動免疫 被動免疫 母乳 斷奶 3 2斷奶應(yīng)激 6 2020 3 10 胃酸分泌不足 消化酶活性不高母乳 飼料 飼料 營養(yǎng) 因素4 1營養(yǎng)消化不良 7 2020 3 10 日糧抗原蛋白過敏 導(dǎo)致仔豬腹瀉的一個重要因素 飼料 營養(yǎng) 因素4 2日糧抗原過敏 8 2020 3 10 仔豬日糧抗原蛋白的來源 植物性飼料 大豆大豆制品 9 2020 3 10 大豆中含多種抗營養(yǎng)因子 10 2020 3 10 大豆抗原蛋白是由Duke等 1934 首次發(fā)現(xiàn) 嬰兒過敏 Castimapoolas和Ekenstam 1969 從大豆中分離出4種抗原蛋白 大豆球蛋白 glycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 大豆抗原蛋白 11 2020 3 10 Glycinin由6個酸性多肽和6個堿性多肽組成的大分子蛋白 360kDa Glycinin晶體結(jié)構(gòu) 占大豆總球蛋白的40 李德發(fā) 2003 12 2020 3 10 Conglycinin是大豆中的一種主要貯藏蛋白 13 2020 3 10 孫鵬等 2008 仔豬對glycinin的過敏反應(yīng) 14 2020 3 10 Glycinin對仔豬小腸內(nèi)肥大細胞數(shù)量及組胺含量的影響 日糧中添加2 或4 的glycinin可顯著增加仔豬空腸 回腸內(nèi)組胺的釋放量 孫鵬等 2008 15 2020 3 10 大豆抗原蛋白與仔豬斷奶腹瀉 飼喂含與不含大豆抗原蛋白的仔豬腹瀉情況 Miller 1994 16 2020 3 10 大豆抗原蛋白與仔豬生長性能 大豆抗原蛋白使仔豬在斷奶后第一周生長速度明顯下降 P 0 05 Li等 1990 1991 17 2020 3 10 Glycinin對仔豬 24 28日齡 生長性能影響 孫鵬等 2008 純樣品 18 2020 3 10 conglycinin對斷奶仔豬 38日齡 生長性能的影響 pigs 19 2020 3 10 大豆抗原蛋白通過誘發(fā)幼齡動物的過敏反應(yīng) 影響機體消化系統(tǒng)和免疫功能 導(dǎo)致腹瀉 最后抑制動物生長減少豆粕用量是減輕斷奶仔豬過敏反應(yīng)的有效措施正確的飼喂制度 免疫耐受的產(chǎn)生需要一定時間 斷奶后7 10d 教槽料應(yīng)持續(xù)用到斷奶后10天 20 2020 3 10 在使用前 對大豆抗原蛋白進行消除是提升大豆及其制品質(zhì)量 避免仔豬腹瀉的關(guān)鍵 21 2020 3 10 大豆抗原蛋白的消除 微生物發(fā)酵 外源酶水解 基因工程技術(shù) 有機溶劑萃取 多種措施結(jié)合 22 2020 3 10 微生物發(fā)酵 23 2020 3 10 大豆抗原蛋白 寡肽生物活性肽 抗原活性降低 微生物發(fā)酵 24 2020 3 10 微生物發(fā)酵工藝 生產(chǎn)工藝 穩(wěn)定的好 才是真正的好 25 2020 3 10 發(fā)酵過程控制 PH值 溫度 水分 酸性蛋白酶 半乳糖苷酶 大豆抗原 不良寡糖 降解 降解 枯草芽孢 酵母菌 乳酸菌 26 大豆蛋白在進入動物體內(nèi)之前降解為小分子蛋白 提高蛋白質(zhì)的利用率 降低大豆抗原蛋白的抗原活性 降解不良寡糖 棉籽糖 水蘇糖 產(chǎn)生有益代謝產(chǎn)物 乳酸 3 具有發(fā)酵香味 提高適口性和采食量 豆粕生物發(fā)酵的優(yōu)勢 27 2020 3 10 大豆基因工程改良 28 2020 3 10 據(jù)報道 三亞基的抗原活性 29 2020 3 10 conglycinin 亞基對大鼠腸道超微結(jié)構(gòu)的影響 正常組 上皮細胞微絨毛結(jié)構(gòu)清晰 試驗組 上皮細胞微絨毛結(jié)構(gòu)模糊 郭鵬飛 2007 30 2020 3 10 結(jié)果表明 conglycinin的 亞基同樣有較強的致過敏活性 31 2020 3 10 RNAGelBlotShowsConglycininCosuppression TransgenicSoybeanSeeds Kinney等 2001 基因敲除 沉默 32 2020 3 10 但研究表明 大豆 conglycinin含量的減少 將伴隨著glycinin含量的增加 而glycinin同樣是一種抗原蛋白 33 2020 3 10 不同加工工藝大豆蛋白比較 34 2020 3 10 因此生物發(fā)酵技術(shù)是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法 35 2020 3 10 發(fā)酵豆粕的質(zhì)量差異及大豆抗原蛋白的含量檢測 36 2020 3 10 SDS PAGE 定性 抗血清測定 特異性問題 高效液相色譜分析 設(shè)備 前處理問題 以抗大豆 conglycinin單克隆抗體為介質(zhì)的免疫學(xué)檢測方法 37 2020 3 10 Marker 豆粕對照 發(fā)酵豆粕1 發(fā)酵豆粕2 發(fā)酵豆粕3 發(fā)酵豆粕4 發(fā)酵豆粕5 發(fā)酵豆粕6 電泳圖譜 38 2020 3 10 以單抗為介質(zhì)的ELISA 定量 39 2020 3 10 熱處理是應(yīng)用較為廣泛的日糧抗原消除方法 但對于熱穩(wěn)定性高 熱加