中藥光譜指紋圖譜鑒別技術(shù)

中藥光譜指紋圖譜鑒別技術(shù),田進(jìn)國山東大學(xué)藥學(xué)院山東省重大新藥創(chuàng)制中心國家糖工程技術(shù)研究中心山東省中藥標(biāo)準(zhǔn)工程技術(shù)研究中心,向?yàn)橹兴幀F(xiàn)代化 而辛勤工作的同仁們致敬！,中藥這個(gè)最具發(fā)展?jié)摿Φ膬?yōu)勢傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)要想實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化，必須不斷提高現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。色譜指紋圖譜法已被廣泛應(yīng)用，但光譜指紋圖譜法至今還沒有得到業(yè)界足夠的重視。,色譜法和光譜法各有優(yōu)勢和特長，應(yīng)博采眾長功能互補(bǔ)。光譜法擅長定性，能解決許多色譜法無法快速解決的鑒別問題。下面以紅外指紋圖譜法為例予以展示。,紅外指紋圖譜法應(yīng)用范圍非常廣?？梢杂糜谥参锼帲òㄋ幉暮透鞣N劑型的中成藥）；礦物藥和動(dòng)物藥的鑒別。,對(duì)于植物藥（包括藥材和各種劑型的中成藥）和動(dòng)物藥，測試其提取物的光譜；對(duì)于礦物藥直接采用KBr壓片法測試其光譜。,為什么對(duì)植物藥和動(dòng)物藥要用溶劑進(jìn)行提取呢？這是因?yàn)槲覀兿Ｍ鶞y試的樣品中，應(yīng)盡可能地減少共有性成分（如:淀粉、纖維素等）而相對(duì)較多地保留特征性成分。樣品中的成分越多，疊加光譜的鑒別力就會(huì)越低。,如果不加分離直接用KBr壓片法測試中藥全成分的紅外光譜,一般最多能進(jìn)行真?zhèn)舞b別而很難鑒別到種的水平。,如果不加分離在紅外制樣時(shí)還會(huì)遇到很大的問題（有局限性）。例如：含纖維素多的樣品很難研磨細(xì)；含油多的樣品與KBr研磨時(shí)會(huì)打滑，根本無法壓成均勻透明的片子。,為了提高方法的鑒別力，對(duì)植物藥和動(dòng)物藥用多種溶劑（最多3種）進(jìn)行提取。我們希望在同一樣品的不同提取物中，能找到更多的鑒別信息。,紅外指紋圖譜法具備良好的專屬性、穩(wěn)定性和可重復(fù)性。能達(dá)到鑒別植物種的水平。,同科同屬不同種藥材的鑒別,以甘草為例：測試和比較烏拉爾、脹果、光果和刺果甘草正己烷、乙醚和丁酮提取物的光譜。,四種甘草（正己烷）,四種甘草（乙醚）,四種甘草（丁酮）,三種甘草KBr壓片的紅外光譜,四種甘草乙醚提取物的紅外光譜,很多復(fù)雜情況藥材的鑒別，其鑒別難度要比種間鑒別更大。例如： 1、不同產(chǎn)地；2、不同采集時(shí)間；3、不同炮制方法；4、不同藥用部位；5、不同栽培品種；6、野生和栽培品種；7、不同放置時(shí)間等,同種藥材不同產(chǎn)地的鑒別,同屬不同種間的光譜差異程度要大于不同產(chǎn)地樣品間的差異程度。也就是說產(chǎn)地鑒別要更難一些。,同種藥材不同采集時(shí)間的鑒別,小薊（山東濟(jì)南）,小薊開花時(shí)間,1380cm-1,小薊一個(gè)花期的紅外指紋圖譜,葛根（山東濰坊）,不同炮制方法的鑒別,白芍（山東菏澤） 赤芍（山東菏澤）,不同藥用部位的鑒別,何首烏（藥材對(duì)照品） 首烏藤（藥材對(duì)照品）,種下不同品種藥材的鑒別,紫花丹參 白花丹參,同種藥材野生和栽培品種的鑒別,北五味子（野生） 北五味子（栽培）,同種藥材不同放置時(shí)間的鑒別,黃連（藥材對(duì)照品 913-8902）,紅花 （藥材對(duì)照品 907-8903）,礦物和動(dòng)物藥材的鑒別,煅,藥材蛇膽汁（對(duì)照品）,煅石膏,自然銅,煅自然銅（過度煅）,石膏,牛黃,中成藥的紅外指紋 圖譜鑒別,對(duì)于大處方的中成藥，除了藥典規(guī)定檢查的幾種藥材和成分外，如果不法廠家為減少成本，少加一些其他藥材，通常是難以發(fā)現(xiàn)的。然而，根據(jù)其紅外光譜輪廓特征的變化，就可以準(zhǔn)確地予以鑒別。,冰硼散的紅外指紋圖譜,散劑的鑒別,云南白藥（9303-014 , 9303-022）,片劑的鑒別,西瓜霜潤喉片(桂林三金) 健胃消食片(江中藥業(yè)),脂必妥片(成都地奧) 榮昌肛泰臍融片(煙臺(tái)榮昌),連云港中藥廠 廣西半宙,牛黃解毒片,冰片的紅外光譜,合劑的鑒別,復(fù)方大青葉合劑（山東北方） 橘紅痰咳液(廣東化州),膠囊劑的鑒別,排毒養(yǎng)顏膠囊(云南盤龍?jiān)坪?,洗液的鑒別,潔爾陰（成都恩威）,錠劑的鑒別,片仔癀 （漳州制藥廠）,流浸膏劑與浸膏劑的鑒別,蜜煉川貝枇杷膏(香港念慈菴）,露劑的鑒別,神奇止咳露(貴州神奇),中藥材配方顆粒已經(jīng)全無形態(tài)鑒別的特征，然而，紅外指紋圖譜鑒別技術(shù)卻可以大有作為。,牡丹皮（11批產(chǎn)品直接壓片的疊加圖譜）,牡丹皮11批產(chǎn)品提取物的疊加圖譜,牡丹皮的紅外指紋圖譜（江陰天江）,茯苓（12批產(chǎn)品直接壓片的疊加圖譜）,茯苓12批產(chǎn)品提取物的疊加圖譜,茯苓的紅外指紋圖譜（江陰天江）,茯苓皮（江陰天江） 炒六曲（江陰天江）,葛根（江陰天江） 葛根（山大標(biāo)本）,丹參（藥材對(duì)照品） 丹參（江陰天江）,薄荷（江陰天江） 白芷（江陰天江）,生黃芪（江陰天江） 墨旱蓮（江陰天江）,防風(fēng)（江陰天江） 延胡索（江陰天江）,狗脊（江陰天江） 貫眾（江陰天江）,重樓（江陰天江） 燈心草（江陰天江）,地鱉蟲（江陰天江） 九香蟲（江陰天江）,大腹皮（江陰天江） 大腹皮（三九）,注射劑的鑒別,復(fù)方丹參注射液（上海中西） 刺五加注射液（烏蘇里）,復(fù)方丹參注射液（上海中西） 配方顆粒丹參（江陰天江）,脈絡(luò)寧注射液（南京金陵） 經(jīng)絡(luò)通注射液（山西康寶）,生脈注射液（江蘇蘇中） 參麥注射液（正大青春寶）,黃芪注射液 （成都地奧） 魚腥草注射液（雅安三九),滴丸劑的鑒別,復(fù)方丹參滴丸（天士力）,柴胡滴丸（天士力）,復(fù)方丹參滴丸（天士力）,配方顆粒丹參（江陰天江）,丸劑的鑒別,六味地黃丸(河南宛西) 速效救心丸(天津六中藥),同仁大活絡(luò)丹（25批平均）同仁牛黃清心丸（27批平均）,同仁牛黃清心丸（27批平均） 消栓再造丸（31批平均）,同仁大活絡(luò)丹（25批平均） 偽大活絡(luò)丹(8010067),同仁大活絡(luò)丹（25批平均） 偽大活絡(luò)丹(9805-203),效果獨(dú)特的計(jì)算機(jī)鑒別檢索系統(tǒng),同仁牛黃清心丸（27批平均） 牛黃清心丸（同仁二廠）,同仁牛黃清心丸（27批平均）牛黃清心丸（缺麝香）,同仁烏雞白鳳丸（25批平均） 烏雞白鳳丸(缺動(dòng)物藥),本方法的特點(diǎn) 本方法簡便、快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、重復(fù)性好、數(shù)據(jù)信息量大、光譜特征性高、應(yīng)用性廣，一旦建立指紋圖譜庫，不再需要對(duì)照品，結(jié)果判斷可使用計(jì)算機(jī)鑒別和檢索。 對(duì)于各類混合物，本方法可以準(zhǔn)確地測定出其整體化學(xué)成分差異程度的大小，而一般不能鑒別其中的某一化學(xué)成分。 對(duì)于處方簡單的中成藥，通過陰性對(duì)照樣品測定，能達(dá)到準(zhǔn)確鑒別其中單味藥材的鑒別水平。 混合物中各種成分紅外指紋圖譜的相對(duì)強(qiáng)弱具有半定量的意義。 由本方法獲得的紅外指紋圖譜可以很容易地在任何型號(hào)的紅外光譜儀上精確重現(xiàn)。,本方法的主要貢獻(xiàn)1.用一個(gè)非常簡單的思路和方法(傻 瓜)解決了相當(dāng)大量相當(dāng)復(fù)雜的中 藥鑒別問題。 2.將10批以上樣品的圖譜進(jìn)行平均 就可以得到標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。3.把對(duì)中藥的極其復(fù)雜的特征成分 的表達(dá)和分析過程，變成了一件 非常容易和直觀的對(duì)簡單圖形進(jìn) 行識(shí)別和判斷的事情。,紅外指紋圖譜法與核磁指紋圖譜法（作為儲(chǔ)備技術(shù)）聯(lián)合應(yīng)用可大幅度提高我國現(xiàn)行中藥鑒別技術(shù)的權(quán)威性和鑒別力。,配方顆粒牡丹皮的紅外指紋圖譜,圖3.中藥配方顆粒牡丹皮的1HNMR核磁指紋圖譜,中藥配方顆粒牡丹皮的1HNMR核磁指紋圖譜圖,中藥配方顆粒牡丹皮的13CNMR核磁指紋圖譜圖,地鱉蟲 九香蟲,中藥地鱉蟲的1HNMR核磁指紋圖譜圖,中藥九香蟲的1HNMR核磁指紋圖譜圖,真假哈德門軟小盒的紅外反射光譜QC值3.36紅線：真哈德門 藍(lán)線：假哈德門,已發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 1、紅外光譜法鑒別中藥材的初步探討. 中草藥, 1989, 20(5) :2212、用紅外光譜法鑒別黃連和大黃. 中國醫(yī)藥學(xué)報(bào), 1992 ,7(6) :3443、不同采集時(shí)間葛根和小薊紅外光譜的鑒別研究. 中草藥, 1994, 25 (10) :5334、不同產(chǎn)地白芍和赤芍的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1995, 18(4) :1765、南、北五味子的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1995, 18(6) :2846、不同產(chǎn)地、品種當(dāng)歸的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1995, 18(9) :4517、三十種藥材對(duì)照品紅外光譜的研究. 中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 1996, 27(1) :248、人參和西洋參的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1996, 19(2) :709、傘形科和姜科十二種藥材對(duì)照品的紅外光譜. 山東醫(yī)科大學(xué)學(xué) 報(bào)，1996, 34(2) :155,10、五種貝母藥材的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1996, 19(6) :292 11、北五味子野生和栽培品種的紅外光譜鑒別. 中藥材, 1996, 9 (8) : 396 12、四種甘草的紅外光譜鑒別. 中藥材，1997, 20(4) :175 13、蒼耳子與東北蒼耳子的紅外光譜鑒別. 中藥材,1997, 20(8) :393 14、紅外光譜法鑒別道地藥材的研究. 中國道地藥材論叢. 北京: 中醫(yī)古籍出版社, 1997 :236 15、枸骨葉與十大功勞葉紅外光譜的研究. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 1998, 21(5) :36 16、功勞木及同屬種用植物的紅外光譜研究. 中國中藥雜志, 1998, 23(5) :263 17、不同產(chǎn)地牡丹皮與艾葉的紅外光譜研究. 中華中醫(yī)基礎(chǔ)與臨 床. 北京: 中醫(yī)古籍出版社， 1998: 275,18、延胡索與全葉延胡索的紅外光譜鑒別. 中國中藥雜志, 1999, 24(6) :327 19、同仁烏雞白鳳丸與消栓再造丸紅外指紋圖譜的研究. 中成藥, 2002,24(12):908 20、中藥配方顆粒紅外指紋圖譜的研究( I ). 中成藥, 2003,25(12): 949 21、同仁大活絡(luò)丹與同仁牛黃清心丸紅外指紋圖譜的研究. 中國 中藥雜志, 2004,29(4):326 22、茯苓、黨參、重樓等13種中藥配方顆粒紅外指紋圖譜的研究. 中成藥, 2004,26(7),