氣相色譜培訓(xùn)ppt課件VIP

.,為什么用氣相色譜,IfyoucandoitbyGC,YoushoulddoitbyGC.-H.M.McNair如果你能用氣相色譜完成，你就應(yīng)該用氣相色譜完成。,.,氣相色譜可分析的有機(jī)物占目前發(fā)現(xiàn)總有機(jī)物的1520。應(yīng)用范圍：揮發(fā)溫度500熱穩(wěn)定性好相對(duì)分子量400,.,氣相色譜系統(tǒng),.,一、氣相色譜基礎(chǔ),色譜原理氣相色譜系統(tǒng)色譜基本理論載氣進(jìn)樣口色譜柱檢測(cè)器定量分析方法,.,1.色譜原理,根據(jù)樣品各組分在流動(dòng)相和固定相中的分配情況不同來(lái)進(jìn)行分離。一些組分與固定相作用較強(qiáng)，故較慢流出色譜柱，從而得以分離。,.,樣品組分分離示意圖,.,2.氣相色譜系統(tǒng),.,色譜圖,檢測(cè)信號(hào)和時(shí)間的關(guān)系圖不同的色譜峰對(duì)應(yīng)相應(yīng)的組分可以得到相應(yīng)組分的保留時(shí)間和峰面積信息。保留時(shí)間定性分析峰面積定量分析,3.氣相色譜理論,CH4,.,基本術(shù)語(yǔ)保留時(shí)間（Retentiontime)：組份從進(jìn)樣到出現(xiàn)最大值所需要的時(shí)間，tR死時(shí)間(deadtime):不被固定相滯留的組份，從進(jìn)樣到出峰最大值所需要的時(shí)間，t0峰高（PeakHeigh)從峰最大值到峰底的距離,峰面積（PeakArea)峰與峰底之間的面積,.,分離度（Resolution)兩個(gè)相鄰峰的分離程度。以兩個(gè)組份保留值之差與其平均半峰寬值的比來(lái)表示：,當(dāng)R=1時(shí)，有5的重疊；當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度為99.7%，可視為基線分離毛細(xì)管色譜柱比填充柱有更高的分辨率.,.,例如，圖示中塔板數(shù)為3.,塔板理論,柱效能（ColumnEfficiency),峰展寬的度量.以塔板數(shù)來(lái)表示類似蒸餾中的氣液平衡柱效的大小直接反應(yīng)色譜柱的分離能力,.,峰的形狀,理想的峰型是高斯曲線.分子的理論統(tǒng)計(jì)學(xué)分布,.,A.渦流擴(kuò)散(不同路徑的影響).,取決于色譜柱大小、形狀和填充的好壞毛細(xì)管柱可忽略該項(xiàng),影響色譜柱效率的因素,.,B.縱向擴(kuò)散.,氣相中分子的擴(kuò)散主要決定于氣體流速,.,C.傳質(zhì)阻力.,樣品組分從氣相到液相容易.主要取決于氣體的流速和固定相量的多少。,.,綜合上述三個(gè)峰展寬的因數(shù)HEPT:理論塔板高度(HeightequicalenttoatheoreticalPlate)：,HETP=A+B/+C,這里：A=渦流擴(kuò)散B=縱向擴(kuò)散C=傳質(zhì)阻力=載氣的線流量低的HETP=高的色譜柱效率如果已知有效塔板數(shù)，則可計(jì)算：,Neff=Lcol/HETP,著名的范德母特（VanDeemter）方程,.,由該圖可以得到最佳的線速度對(duì)于毛細(xì)管柱可忽略A項(xiàng)（渦流擴(kuò)散），一般對(duì)于毛細(xì)管線速度為30-60cm/sec。,VanDeemter圖,.,N2,變化最大,可得到最低的HETP.H2和He曲線較平坦，即使較高的流速下也能得到較低的HETP所以即使在較高的分析速度時(shí)，也可以得到較好的分離度.,4.載氣對(duì)VanDeemter圖的影響,常用毛細(xì)管柱的最佳載氣流量,.,氣體,作用：1）載氣：作為色譜的流動(dòng)相2）檢測(cè)器的工作氣體。載氣：惰性：He,Ar,N2,H2.根據(jù)檢測(cè)器,價(jià)格及方便程度來(lái)決定采用壓力調(diào)節(jié)器以獲得恒定的儀器輸入壓力控制流量來(lái)得到恒定的流速,.,氣體的類型由檢測(cè)器決定.氣體要求色譜級(jí)的高純氣體，99.999%,過(guò)濾系統(tǒng):除氧.活性炭除碳?xì)浠衔?。分子篩除水,氣體的供應(yīng)和控制,載氣推薦采用H2、He:分離度好對(duì)TCD靈敏度最高，而且可保護(hù)W絲注意安全問(wèn)題,.,兩級(jí)的氣體壓力調(diào)節(jié)器.低壓端可從0到100psig.注意：不要用不干凈的管路,氣體進(jìn)口及連接,如果管線太長(zhǎng)，應(yīng)適當(dāng)增加輸出壓力,.,Allgasesconnectto1/8”Swagelokfittingsonrearofinstrument,氣體進(jìn)口及連接（續(xù)）,.,5、進(jìn)樣口,作用：樣品進(jìn)樣和汽化.要求：精度和重現(xiàn)性根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇進(jìn)樣技術(shù),.,填充柱進(jìn)樣口柱上進(jìn)樣(OnColumn)快速氣化（Flash-vaporization）毛細(xì)管柱進(jìn)樣口分流/不分流進(jìn)樣分流分流進(jìn)樣規(guī)則不分流進(jìn)樣的規(guī)則,.,填充柱進(jìn)樣口,柱上進(jìn)樣(OnColumn)快速氣化（Flash-vaporization）柱上進(jìn)樣(Oncolumn)液體樣品直接注射進(jìn)柱頭上消除了氣化時(shí)樣品損失。消除了傳輸過(guò)程中從進(jìn)樣口到色譜柱之間的樣品損失?？捎糜跓岵环€(wěn)定物質(zhì)的分析。定量分析精度好。最好用于干凈稀釋的樣品。,.,Model1041,可用于填充柱和0.53毛細(xì)管柱標(biāo)準(zhǔn)配制如右圖，用于0.53mm的毛細(xì)管柱如用于填充柱，則將右圖中的“530microninsert”拆下，將填充柱裝到頂,標(biāo)準(zhǔn)工具包里帶兩個(gè)柱螺母，一個(gè)悶頭1041的進(jìn)樣墊為10.5mm，與1079（11.4mm）、1177(9mm)不一樣。,.,快速氣化（Flash-vaporization）,對(duì)于濃度較高或較臟的樣品。色譜柱連接在進(jìn)樣口底部。色譜柱完全填充。樣品在玻璃內(nèi)襯中氣化進(jìn)樣口至少高于柱溫箱50C。能夠用于大口徑的毛細(xì)管。,.,毛細(xì)管進(jìn)樣,只需要少的進(jìn)樣量需要特別的進(jìn)樣技術(shù)分流/不分流/柱上進(jìn)樣載氣流量小但檢測(cè)器需要尾吹需要特別的硬件隔墊吹掃分流裝置壓力、流量調(diào)節(jié),.,毛細(xì)管柱進(jìn)樣口,要求不同的硬件和技術(shù)。直接進(jìn)樣.分流/不分流進(jìn)樣.柱上進(jìn)樣直接進(jìn)樣-(柱上進(jìn)樣或快速氣化)只用于大口徑(0.53mm內(nèi)徑).將注射器中的樣品全部送入到色譜柱.允許緩慢注入較大體積的稀釋樣品(2L)。相對(duì)低的進(jìn)樣口溫度。,.,分流/不分流進(jìn)樣,用于毛細(xì)管柱0.1mmto0.53mmID.可選用分流/不分流進(jìn)樣(split/splitless.)分流(split)允許樣品中的代表部分進(jìn)入到色譜柱中。當(dāng)被測(cè)物濃度較高時(shí)。不分流(splitless)類似于直接進(jìn)樣.樣品中絕大部分進(jìn)入到色譜柱中。,.,分流,均勻氣化的樣品通過(guò)分流點(diǎn)(柱尖端Colomntip).樣品在玻璃襯管氣化要求：將樣品中具有代表性的樣品注入到色譜柱中。可重現(xiàn)的分流比缺點(diǎn)可能會(huì)有進(jìn)樣歧視現(xiàn)象。對(duì)寬沸程的樣品易產(chǎn)生非線性分流，使樣品失真不適于高純度物質(zhì)和痕量組分(60米),內(nèi)徑較細(xì).所有材料均要求化學(xué)及熱性質(zhì)穩(wěn)定.熱穩(wěn)定性-分析時(shí)所使用的溫度不應(yīng)致使色譜柱材質(zhì)受到破壞化學(xué)穩(wěn)定性-在一定溫度下，色譜柱材質(zhì)不受分析物的影響注意：用色譜級(jí)、干凈的材料。,.,填充柱,玻璃、特氟瓏及不銹鋼材質(zhì)(惰性).,填充柱中填有固態(tài)載體，上面涂有液態(tài)固定相，用于氣液色譜（GLC）或直接填充多孔固體，用于氣固色譜（GSC）.,填充柱尺寸,.,固態(tài)載體,是液態(tài)固定相附著的載體增加與樣品接觸的表面積。細(xì)小、均勻、多孔。大部分采用硅土.標(biāo)準(zhǔn)大小顆粒.,直徑大小與目號(hào)的關(guān)系,例如:80/100目表明所有的顆粒將通過(guò)80目篩但不通過(guò)100目篩.80目篩是指篩網(wǎng)每英寸有80根標(biāo)準(zhǔn)直徑的網(wǎng)線。,.,毛細(xì)管柱,不銹鋼玻璃熔融硅.柔韌性及機(jī)械強(qiáng)度均較好惰性內(nèi)徑：0.05-0.80mm.長(zhǎng)度：可大于100m,普通一般為30m。外層為聚酰亞胺，可修補(bǔ)柱子缺陷并且增加強(qiáng)度。柱子內(nèi)表面進(jìn)行硅烷化處理。內(nèi)壁涂有固定相.,.,毛細(xì)管柱截面圖,毛細(xì)管柱,WCOT-內(nèi)表面涂有很薄的固定相.PLOT內(nèi)表面涂有多孔的固體層或吸附劑SCOT內(nèi)表面先涂固態(tài)載體，然后再涂上固定相。,.,色譜柱參數(shù),柱長(zhǎng)、內(nèi)徑、涂膜厚度色譜柱長(zhǎng)度柱長(zhǎng)度只有大的變化才會(huì)影響分辨率。填充柱一般為2-3米.毛細(xì)管柱可以根據(jù)需要進(jìn)行裁剪。色譜柱內(nèi)徑填充柱固定為2mm。毛細(xì)管柱的內(nèi)徑可從0.10-0.8mm.內(nèi)徑的大小將影響到色譜柱的效率、保留時(shí)間和柱容量.較小的內(nèi)徑有較小的流失和較小的柱容量,.,毛細(xì)管柱內(nèi)徑,0.25mm：用于分流/不分流進(jìn)樣，或柱上進(jìn)樣，前提是被測(cè)物不會(huì)過(guò)載。0.32mm：用于分流/不分流進(jìn)樣，或柱上進(jìn)樣，允許較高濃度的分析物。0.53mm：如果想取代填充柱，并且被測(cè)物少于30種。,典型的毛細(xì)管柱特點(diǎn),.,涂膜厚度,固定相的總量.影響保留時(shí)間和容量。較厚的涂層會(huì)延長(zhǎng)保留時(shí)間和增加柱容量。薄的涂層用于高沸點(diǎn)的分析物。標(biāo)準(zhǔn)的毛細(xì)管柱一般為0.25m.0.53mm內(nèi)徑的毛細(xì)管柱一般為1.0-1.5m.填充柱一般10m.,.,柱容量,柱容量是指色譜峰沒(méi)有明顯變形，樣品能夠進(jìn)入到色譜柱中的最大允許量。以下因素可增加柱容量:膜厚(df).溫度.內(nèi)徑(ID).固定相的選擇性.如果過(guò)載，可導(dǎo)致:峰變寬.不對(duì)稱.拖尾或前伸峰.,.,色譜柱中固定相流失,柱流失可以從檢測(cè)器的背景信號(hào)中觀察到：柱流失是由于固定相遭到破壞而導(dǎo)致的。柱流失隨著膜厚、柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度和溫度的增加而增加。極性柱有較高的柱流失。柱子損壞或退化，柱流失可能會(huì)增加。避免使用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿按照制造商推薦的溫度限制使用,.,確保載氣流過(guò)毛細(xì)管柱15-30分鐘.緩慢程序升溫(5/min)到老化溫度。最初老化溫度4hours.如果柱子受到污染,可在推薦的最高色譜柱溫度低20C的條件下，老化柱子。一般推薦的老化溫度為：Tcond=Tmax/2-Tapp/2+Tapp這里:Tcond=老化溫度Tmax=色譜柱推薦采用的最高溫度Tapp=應(yīng)用中使用的最高溫度在老化柱子時(shí)，一定不要將毛細(xì)管接在檢測(cè)器上。應(yīng)將那一端放空，同時(shí)將檢測(cè)器用悶頭堵上。如果是FID,容許接在上面，但應(yīng)該將檢測(cè)器溫度升上去。,色譜柱老化,.,溫度限制,恒溫最高允許溫度:恒溫操作的最高允許溫度程序升溫最高允許溫度：短期允許的最高溫度，一般比恒溫允許的最高溫度高20C。當(dāng)柱子遭受熱破壞，可以看到嚴(yán)重的峰拖尾和柱流失。,.,固態(tài)固定相,氣固色譜（GSC）最常用于氣體樣品的分析。采用的固定相可以是分子篩和氧化鋁固態(tài)吸附點(diǎn)少，不會(huì)導(dǎo)致拖尾。無(wú)液態(tài)固定相導(dǎo)致的柱拖尾。,.,液體固定相,固定相決定了色譜柱的選擇性。有數(shù)百種固定相，尤其是填充柱.許多固定相有多種商品名。毛細(xì)管柱的固定相選擇較簡(jiǎn)單?！跋嗨葡嗳茉怼?用極性固定相分析極性物質(zhì)。-用非極性固定相分析非極性物質(zhì).極性表明了分子中電荷的分配情況。,.,硅氧烷結(jié)構(gòu),固定相取代,.,液態(tài)固定相的選擇,根據(jù)極性選擇固定相。非極性柱分離弱極性物質(zhì)能得到較好的分離。對(duì)于普通的GC使用,常用到如VA-5這樣的弱極性柱。避免固定相中帶有檢測(cè)器能夠檢測(cè)的成分。用聚乙二烯乙二醇固定相來(lái)分析帶氫鍵的樣品氣體分析可能要求固態(tài)的固定相。,.,表3常用固定相與相應(yīng)色譜柱,.,7.檢測(cè)器,通用型檢測(cè)器（UniversalDetector)熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）氫火焰檢測(cè)器（FID）選擇性檢測(cè)器電子捕獲（ECD）脈沖火焰光度檢測(cè)器（PFPD）氮磷檢測(cè)器（TSD),.,.,通用型檢測(cè)器(UniversalDetector),熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）氣相色譜最早的檢測(cè)器,1946.測(cè)量樣品氣流導(dǎo)熱性能的變化。熱導(dǎo)-熱量從高溫物體到低溫物體的傳導(dǎo)。,.,TCD熱導(dǎo)池,兩個(gè)平行的氣流，樣品和參考?；菟雇姌蛴脕?lái)比較兩個(gè)氣流的阻抗。氣流的速度、壓力及電的變化影響被最小化。,.,氣體的熱導(dǎo),分子越小，運(yùn)動(dòng)速度越快，導(dǎo)熱性能越好。H2和He是最小的分子，它們的熱導(dǎo)性能比絕大部分有機(jī)物和無(wú)機(jī)氣體高6到10倍。H2和He是最普通的載氣；N2和Ar也可采用。,TCD溫度的設(shè)定：Tfil-Tdet的值越大，靈敏度越高，但太高會(huì)使樣品分解，且減少燈絲壽命檢測(cè)器的溫度Tdet：比最高的柱溫高3050C燈絲溫度Tfil:：一般，比Tdet高的柱溫高50C,.,TCD操作注意事項(xiàng)1.打開氣體鋼瓶(He,Ar或N2),並須確認(rèn)鋼瓶無(wú)誤,輸出壓為80PSI（5.5kg/cm2)2.確定流速CarrierGas（柱流量Makeup流量）=ReferenceGas3.等待COL/INJ/DET溫度到達(dá)設(shè)定值4.設(shè)定ElectronicsOn(|TFIL-TDET|=T,T,靈敏度)5.等待TCD穩(wěn)定至少約30min左右6.開始分析樣品7.結(jié)束分析時(shí)設(shè)定ElectronicsOff8.降溫COL/INJ/DET=50(含F(xiàn)ilament)9.關(guān)閉氣體鋼瓶,.,氫火焰檢測(cè)器（FID）,最常用的GC檢測(cè)器.-是有機(jī)物的通用型檢測(cè)器。-檢出限10pg.-線性范圍可達(dá)7個(gè)數(shù)量級(jí).-容易操作破壞型檢測(cè)器樣品燃燒信號(hào)值大小取決于碳原子數(shù)目及替代物的數(shù)量。,.,FID結(jié)構(gòu)圖,H,2,a,n,d,m,a,k,e,-,u,p,a,i,r,f,p,a,y,s,i,g,n,a,l,p,r,o,b,e,i,g,n,i,t,o,r,p,r,o,b,e,collector,.,FID工作原理,理論:在火焰頭和收集極（電極）上加一電壓。有機(jī)物都在火焰中燃燒(2000F)。在電極之間產(chǎn)生離子化介質(zhì)和電子。帶電粒子被收集極吸引和捕獲。離子流被放大和記錄。,.,響應(yīng),離子數(shù)目正比于碳原子數(shù)目(C-H鍵).一些官能團(tuán)如羰基(CO=)、羥基(OH）、鹵素（X）、胺（NH4+）則很少或根本不會(huì)離子化。對(duì)無(wú)機(jī)氣體如H2O,CO2,SO2,和Nox不靈敏。火焰以氫氣和空氣作為燃?xì)?。在控制的流速下進(jìn)行電子點(diǎn)火?；鹧鏌o(wú)色除非受到污染。,.,燃燒氣,H2與載氣（或載氣尾吹氣）的流速一般為1:1?？諝庖话銥闅錃獾?0倍。大的空氣流速和熱檢測(cè)器可以趕走大量的水蒸氣。,FID燃燒氣流速對(duì)信號(hào)的影響,.,FID注意事項(xiàng),正確設(shè)置H2、空氣和尾吹氣的流量檢測(cè)器溫度應(yīng)比柱溫箱設(shè)定的最高溫度高30C，且大于150C以防止水凝結(jié)在檢測(cè)器上FID在電路打開后，會(huì)自動(dòng)點(diǎn)火。在3800報(bào)告熄火以前，最多會(huì)連續(xù)點(diǎn)火三次如果報(bào)告了熄火，要查找熄火的原因。然后再按GC3800上的“Ignite”功能鍵，或在工作站上關(guān)閉FID的電路，再打開當(dāng)色譜柱拆下或不使用檢測(cè)器時(shí)，一點(diǎn)要關(guān)閉氫氣。以防止氫氣積累。,.,選擇性檢測(cè)器,電子捕獲檢測(cè)器（ECD）非破壞性。對(duì)鹵素、過(guò)氧化物、醌類金屬有機(jī)物及硝基化合物非常靈敏。而對(duì)胺類、醇類及碳?xì)浠衔锊混`敏。線性窄，103.,.,電子捕獲檢測(cè)器ECD,主要用于食品、制藥、環(huán)保等領(lǐng)域，檢測(cè)痕量含鹵素等的樣品一定不要試圖去拆卸該檢測(cè)器,.,電子捕獲檢測(cè)器ECD操作原理,射線粒子使載氣離子化:N2+N2+e-在電場(chǎng)中生成的正離子和電子向兩極移動(dòng)形成基流。當(dāng)電負(fù)性樣品進(jìn)入后即捕獲慢速低能量電子使基流下降形成信號(hào)。e-+samplecurrentloss,.,ECD的調(diào)節(jié),可在GC-3800上進(jìn)行，按Adjustment鍵進(jìn)行池電流：Ar/CH4；CAP；N2STD；N2HIGH以及Zero零電流是為了進(jìn)行接觸電位的設(shè)置一般，當(dāng)Range設(shè)為1時(shí)，基線信號(hào)不應(yīng)超過(guò)25mV。否則，說(shuō)明可能是載氣不純、柱流失嚴(yán)重或檢測(cè)器受污染等25mV之上的基線信號(hào)會(huì)減少ECD檢測(cè)器的可用線性范圍,.,設(shè)置接觸電位,儀器準(zhǔn)備完成：打開載氣，設(shè)置到正確的輸出壓力；色譜柱已經(jīng)老化完成,在3800面板上，選擇DetectorECD;設(shè)置Tempture：300CElectron:on;Range:1.0;Autozero:NO等達(dá)到設(shè)定溫度后，平衡若干小時(shí)，最好過(guò)夜,.,設(shè)置接觸電位（續(xù)）,在ECD屏幕上，按Adjustment:將CellCurrent設(shè)為零；將Contactpotential設(shè)為-760mv注意屏幕顯示的信號(hào)強(qiáng)度應(yīng)在-12.7-13.0mv,如-12.8mv再將接觸電位設(shè)定為+760mv，信號(hào)應(yīng)該增加幾mv逐漸降低接觸電位的設(shè)定值，直到信號(hào)強(qiáng)度為開始的顯示值加0.5mv,如-12.8+0.5=-12.3mv;這時(shí)的接觸電位就是我們需要的接觸電壓，接觸電位也就設(shè)好了。,.,氮磷檢測(cè)器(TSD）,只對(duì)氮、磷有很高的選擇性氮的靈敏度：bluelightN:HNO*=NIR根據(jù)所測(cè)量的元素來(lái)選擇濾光片和/或光電倍增管,.,發(fā)光的事件差與元素的選擇性,不同的元素發(fā)射特征光的時(shí)間不一樣如下圖：碳?xì)浠衔锖土虻陌l(fā)光強(qiáng)度與時(shí)間的關(guān)系,S在點(diǎn)火后6ms時(shí)開始發(fā)光，持續(xù)20ms，而HC的發(fā)光則在4ms內(nèi)完成,.,下表列出的是常規(guī)分析條件下操作PFPD時(shí)用到的幾種載氣的流速。當(dāng)優(yōu)化PFPD的性能時(shí)使用這些流速作為起點(diǎn)。,.,建議下列調(diào)節(jié)設(shè)定值用于PFPD的設(shè)置和常規(guī)操作。這些調(diào)節(jié)可以通過(guò)在3800方法的PFPD檢測(cè)器部分按調(diào)節(jié)鍵進(jìn)入,.,PFPD操作,在分析磷或硫時(shí)，需要變化濾光片。推薦采用He或N2作為載氣。檢測(cè)器的溫度應(yīng)保持恒定為220C，以獲得最大靈敏度。必須控制好燃燒氣的流量，以保證火焰不會(huì)波動(dòng)。(H2:13,Air#1:20,Air#2:10mL/min)HPO*發(fā)射的綠光于火焰中磷的流速呈線性相關(guān)。S2*發(fā)出的藍(lán)光則與火焰中硫的流速的平方線性相關(guān)。,.,8.定量分析方法,校正因子校正因子是定量計(jì)算公式中的比例常數(shù)，其物理意義是單位面積所代表的被測(cè)組分的量?？捎孟率奖硎荆篗iI組分的量；fiI組分的校正因子；AiI組分的峰面積定量分析的依據(jù)是被測(cè)組分的量與響應(yīng)信號(hào)成正比，但相同含量的物質(zhì)由于物理、化學(xué)性質(zhì)的差別，即使在同一檢測(cè)器上產(chǎn)生的信號(hào)也不同，直接用響應(yīng)信號(hào)定量，必然導(dǎo)致較大誤差。故引入校正因子。,.,歸一化法(Normalized%),將樣品中所有組份的含量之和定為100%。計(jì)算其中某一組份百分含量的定量方法：其中：xi試樣中組份I的百分含量fi組份I的校正因子Ai組份I的峰面積或峰高,.,優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)便，進(jìn)樣量與載氣流速的影響不大缺點(diǎn)：樣品中所有組份必須都能出峰，并且必須知道各自組份的校正因子。當(dāng)樣品中各組份的校正因子近似相等，可不用校正因子，將面積直接歸一化，按下式計(jì)算：即%(NOCalibration),.,外標(biāo)法（ExternalStandard)又稱校正曲線法,在相同分析條件下，比較標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與樣品的色譜峰面積或峰高1.用已知的標(biāo)準(zhǔn)品配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣，測(cè)量各種濃度的峰高或峰面積，繪制響應(yīng)信號(hào)與百分含量的關(guān)系曲線；2.測(cè)量樣品的峰面積或峰高，在校正曲線上查出其對(duì)應(yīng)的百分含量。要求：進(jìn)樣量、色譜分析條件嚴(yán)格不變；,.,樣品中加入內(nèi)標(biāo)物，利用被測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物校正因子的比值不變來(lái)進(jìn)行定量的。首先用被測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)物配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，求得校正因子比值：然后，再由它和樣品的峰面積來(lái)計(jì)算：fisfi/fs內(nèi)標(biāo)物與被測(cè)組份校正因子的比值；mi被測(cè)組份i的含量；ms加入內(nèi)標(biāo)物的量As內(nèi)標(biāo)物的峰面積；Ai組份I的峰面積；,內(nèi)標(biāo)法(InternalStandard),.,內(nèi)標(biāo)物的要求：不能與樣品或固定相反應(yīng)；能與樣品完全互溶；與被測(cè)組份很好分離，又比較接近；加入內(nèi)標(biāo)的量要接近被測(cè)組份。內(nèi)標(biāo)法可以補(bǔ)償色譜條件和樣品組成或平衡溫度的細(xì)小變化而帶來(lái)的影響，定量較準(zhǔn)確。缺點(diǎn)：每次需要準(zhǔn)確稱量?jī)?nèi)標(biāo)物和樣品。也可采用內(nèi)標(biāo)校正曲線法。公式可改為：,.,食品與香料,分析實(shí)例食品中的天然香精香料人工香精香料飲料中的醇類,樣品:比薩,色譜分析領(lǐng)域(1),.,生命科學(xué),氣相色譜分析實(shí)例體液和組織中的藥品血醇水平藥品純度,色譜分析領(lǐng)域(2),.,石化,DB-1,15mx0.25mmI.D.0.25mfilmStegosaurus-o-gram,分析實(shí)例燃料油定級(jí)汽車排放的廢氣,色譜分析領(lǐng)域(3),.,環(huán)境,色譜分析領(lǐng)域(4),.,GC-氣相色譜柱及消耗品,.,GC-氣相色譜柱及消耗品,.,GC消耗品,.,每6-12個(gè)月或當(dāng)指示型捕集阱顏色改變時(shí)更換時(shí)間取決于捕集阱的容量與氣體純度,每1-2年校準(zhǔn)一次,樣品瓶及隔墊應(yīng)當(dāng)一次性使用重復(fù)使用通常導(dǎo)致定量誤差較大,活性待測(cè)組份易被吸附,導(dǎo)致峰形拖尾或峰高變小,每3個(gè)月當(dāng)發(fā)現(xiàn)注射器中有明顯的清洗不掉的污染物,或推桿難以抽動(dòng),或當(dāng)推桿粘連時(shí),或進(jìn)樣口隔墊穿刺出現(xiàn)異常,或當(dāng)針頭被堵塞時(shí),每60針樣品裂口,進(jìn)樣口襯管內(nèi)有碎屑,保留時(shí)間偏移,柱壓降低等等,每月與襯管一起更換,或視磨損情況更換,每周經(jīng)常檢查,當(dāng)襯管內(nèi)有可見(jiàn)的污染物或色譜性能下降時(shí)更換,每月經(jīng)常檢查,當(dāng)有劃痕,腐蝕或非揮發(fā)性組分造成堵塞,污染時(shí)更換,每次更換色譜柱,進(jìn)樣口/檢測(cè)器部件時(shí)更換,GC消耗品更換時(shí)間表,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,氣體純化系統(tǒng),氣源,氣源,氣源,壓力表,在線氣體凈化劑,氣體凈化系統(tǒng),組合捕集阱,放空,水分捕集阱烴類捕集阱氧氣指示捕集阱氣體凈化系統(tǒng)除水分,氧氣和烴類的組合捕集阱,.,部件號(hào)：5060-9096,部件號(hào)：5060-9096,部件號(hào)：OT3-2,部件號(hào)：RMSH-2,氣體純化系統(tǒng),部件號(hào)：OT3-2,部件號(hào)：IOT-2-HP,FID尾吹,空氣和氫氣需烴類捕集阱,載氣需氧/水分捕集阱ECD尾吹需氧/水分捕集阱ELCD反應(yīng)氣需烴類捕集阱MS載氣需水分,氧氣和烴類的組合捕集阱+可指示氧氣捕集阱,.,氣體捕集阱實(shí)例,基線不佳,取下色譜柱,用空色譜柱連接進(jìn)樣口與檢測(cè)口,使用在線氣體捕集阱-30分鐘后,基線不佳,基線大幅度改善,樣品峰,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,流量計(jì),安捷倫提供氣體和液體流量計(jì)產(chǎn)品流量計(jì)分為兩類:體積流量計(jì)質(zhì)量流量計(jì)體積流量計(jì)-測(cè)量一個(gè)時(shí)間段內(nèi)已知?dú)怏w通過(guò)的體積量質(zhì)量流量計(jì)-測(cè)量一個(gè)時(shí)間段內(nèi)已知?dú)怏w通過(guò)的質(zhì)量或分子數(shù)（通過(guò)密度換算成為體積）各有所長(zhǎng).,.,流量計(jì),體積流量計(jì):可測(cè)量混合氣體,例如GC中常用氣體標(biāo)準(zhǔn)溫度和壓力下測(cè)試數(shù)據(jù)接近質(zhì)量流量計(jì)的數(shù)值,但可能由于溫度與壓力造成偏差尤其適合于在標(biāo)準(zhǔn)溫度和壓力下的色譜應(yīng)用,ADM1000,220-1170,.,流量計(jì),質(zhì)量流量計(jì):測(cè)量特殊氣體格外準(zhǔn)確（校準(zhǔn)）不受溫度與壓力影響（有內(nèi)置式溫度和壓力傳感器）測(cè)量一個(gè)時(shí)間段內(nèi)已知?dú)怏w通過(guò)的質(zhì)量或分子數(shù)（通過(guò)密度換算成為體積）經(jīng)過(guò)校正的標(biāo)準(zhǔn)溫度和壓力下的體積流速等于質(zhì)量流速尤其適合于特定溫度壓力條件下測(cè)流量,Veri-Flow500,HVF-500,.,流量計(jì),安捷倫數(shù)字式皂膜流量計(jì):比帶刻度的量筒更準(zhǔn)確,準(zhǔn)確度達(dá)(3%)而帶刻度的量筒的偏差度5%數(shù)字式皂膜流量計(jì)更容易讀數(shù)通過(guò)皂液,電子傳感器和電腦芯片計(jì)算流量便攜式,電池供電玻璃流路適用于所有氣體低流速(0.1-50mL/min),中等流速(0.5-700mL/min)和高流速(5-5000mL/min),Optiflow420,HFM-420,.,流量計(jì),安捷倫數(shù)字式電子流量計(jì):完全的電子流量計(jì)(無(wú)皂液)可測(cè)量體積流量,質(zhì)量流量或兩者同時(shí)測(cè)量便攜式,電池供電,有的帶電源線AC/DC110/220V大部分有RS232接口可連接電腦數(shù)據(jù)口比數(shù)字式皂膜流量計(jì)更有優(yōu)勢(shì)用于非腐蝕性氣體連續(xù)實(shí)時(shí)流量讀數(shù),Reference,.,流量計(jì),ADM流量計(jì)ADM1000-綜合應(yīng)用,經(jīng)濟(jì)型,體積流量計(jì)0.5-1000mL/min,電池供電,3%準(zhǔn)確度ADM2000與ADM-1000相同,具有RS232接口,電池和AC/DC110/220V電源線,不但可測(cè)量體積流量還可測(cè)量質(zhì)量流量,.,流量計(jì),流程跟蹤流量計(jì)適用面最寬的GC氣體流量計(jì)多功能,體積和質(zhì)量流量顯示（同時(shí)顯示測(cè)試時(shí)的溫度和壓力,FT2000獨(dú)具檢漏功能)適用范圍0-500mL/min,2%準(zhǔn)確度(5mL/min)可校準(zhǔn)測(cè)量七種氣體(N2,H2,He,Air,CO2,CH4和95%Ar/5%CH4)配有RS232接頭,6AA電池和AC/DC110/220V電源線可進(jìn)行在線監(jiān)測(cè),FlowTracker1000,5183-4779,FlowTracker2000,5183-4780,測(cè)漏探頭,.,流量計(jì),.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,樣品瓶設(shè)計(jì)指標(biāo),為確保樣品瓶能與自動(dòng)進(jìn)樣器相匹配,安捷倫樣品瓶生產(chǎn)工藝中至少有18個(gè)重要尺寸指標(biāo)高度與寬度內(nèi)外直徑肩高與半徑頸長(zhǎng)平底(可使用內(nèi)襯管),.,樣品瓶選擇,玻璃通用型和耐酸型棕色瓶-用于光敏感樣品硅烷化/去活用于會(huì)與玻璃瓶壁粘合的樣品或痕量分析聚丙烯用于醇類樣品或水溶性溶劑微量?jī)?nèi)襯管用于極少進(jìn)樣量高收率用于有限的樣品量,.,廣口螺紋瓶瓶墊直徑9mm,廣口鉗口瓶瓶墊直徑11mm,廣口卡口瓶,廣口瓶?jī)?nèi)襯管用于2mL,12X32mm,小口螺紋瓶,小口螺紋瓶?jī)?nèi)襯管用于2mL,12X32mm,頂空鉗口瓶平底與圓底,安捷倫LC儀器專用鉗口瓶,.,樣品瓶墊類型與選擇,氟聚膜Teflon/紅色天然橡膠適用于常規(guī)分析重復(fù)使用的密閉性和化學(xué)惰性適中最經(jīng)濟(jì)實(shí)惠氟聚膜Teflon/硅樹脂或氟聚膜Teflon/紅色硅樹脂橡膠重復(fù)使用的密閉性卓越不易脫落碎屑特別適用于多次進(jìn)樣,氟聚膜Teflon/硅樹脂/氟聚膜Teflon適用于痕量分析重復(fù)使用的密閉性適中最不易脫落碎屑蒸發(fā)最小氟聚膜Teflon適用于單次進(jìn)樣,重復(fù)使用密閉性差耐化學(xué)腐蝕,無(wú)污染維通橡膠Viton適用于含氯試劑和有機(jī)酸,.,樣品瓶墊類型與選擇,.,電子蓋瓶器與電子啟蓋器,改良后的彈簧鎖環(huán)和金屬齒輪(非塑料材質(zhì)),操作噪音小,可靠性高,避免費(fèi)力的手工封蓋與啟蓋過(guò)程,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,手動(dòng)進(jìn)樣針自動(dòng)進(jìn)樣針劣質(zhì)進(jìn)樣針可能損傷自動(dòng)進(jìn)樣器,GC進(jìn)樣口,進(jìn)樣口隔墊,甚至導(dǎo)致程序出錯(cuò),數(shù)據(jù)丟失!,進(jìn)樣針,.,進(jìn)樣針,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,進(jìn)樣口示意圖,.,進(jìn)樣口隔墊的作用：保持色譜系統(tǒng)處于密封狀態(tài),防止空氣進(jìn)入系統(tǒng)優(yōu)化溫度和流失隔墊(BTO隔墊)：較高使用溫度4000C,流失最小,可用于GC/MS.長(zhǎng)使用壽命隔墊：適用于進(jìn)樣隔墊使用壽命長(zhǎng)的要求,特別適合自動(dòng)進(jìn)樣.高級(jí)綠色隔墊：適用于進(jìn)樣隔墊使用壽命長(zhǎng)的要求,粘連最少.,進(jìn)樣口隔墊,.,隔墊碎屑脫落,BTO隔墊,無(wú)中央引導(dǎo)孔,有中央引導(dǎo)孔,1,100,700,1,100,700,#扎刺次數(shù),#扎刺次數(shù),有中央引導(dǎo)孔的隔墊幾乎沒(méi)有碎屑脫落!,放大30倍,.,隔墊碎屑脫落,脫落的隔墊材質(zhì)會(huì)進(jìn)樣口襯管,廠商A生產(chǎn)的紅色隔墊,100次進(jìn)樣已經(jīng)有大塊的隔墊碎屑脫落,廠商B生產(chǎn)的綠色隔墊,400次進(jìn)樣已經(jīng)有明顯的隔墊碎屑脫落,BTO隔墊,90%以上的GC樣品1支弱極性(例,DB-1或DB-5)1支中等極性(例,DB-17或DB-624)1支強(qiáng)極性(例DB-Wax或HP-Innowax)另加：1支PLOT色譜柱（分析永久氣體和輕烴）,四支色譜柱可分析幾乎所有GC樣品,.,氣相色譜柱保護(hù)柱,石英去活毛細(xì)管柱接頭(用于連接保護(hù)柱)(5/包裝)3396聚酰亞胺密封樹脂(用于連接保護(hù)柱)(5g/包裝)500-12000.53mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(5m/包裝)160-2535-50.32mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(5m/包裝)160-2325-50.25mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(5m/包裝)160-2255-50.53mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(10m/包裝)160-2535-100.32mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(10m/包裝)160-2325-100.25mm內(nèi)徑去活毛細(xì)管柱(10m/包裝)160-2255-10,用于保護(hù)柱,預(yù)柱,保留間隙柱或檢查系統(tǒng)是否污染,農(nóng)殘等痕量分析強(qiáng)烈推薦使用保護(hù)柱！,.,氣相色譜柱,近100種色譜柱,NPD檢測(cè)器應(yīng)避免使用含氮固定相例氰丙基色譜柱：DB-23,DB-225,DB-1701,DB-1301ECD檢測(cè)器應(yīng)避免使用含鹵素固定相例三氟乙基色譜柱：DB-210,DB-200,.,氣相色譜柱,30mx0.25mm,0.25m,色譜柱柱長(zhǎng)色譜柱內(nèi)徑鍵合相膜厚,色譜柱柱長(zhǎng)：柱長(zhǎng)越長(zhǎng),保留越長(zhǎng),分離度越好,柱效越高色譜柱內(nèi)徑：內(nèi)徑越小,保留越小,分離度越好,柱效越高鍵合相膜厚：,.,柱長(zhǎng)度與分離度和保留時(shí)間,分離度與柱長(zhǎng)平方根成正比恒溫分析：保留時(shí)間與柱長(zhǎng)成正比,15m,60m,30m,R=0.84,2.29min,R=1.68,8.73min,R=1.16,4.82min,210C恒溫,.,色譜柱長(zhǎng)度與費(fèi)用,15m,30m,60m,.,小結(jié)：如何選擇色譜柱尺寸？,“相似相溶原則”-即待測(cè)組份與固定相極性匹配原則通常用30m長(zhǎng)的色譜柱,盡量用合適長(zhǎng)度的色譜柱,色譜柱越長(zhǎng)意味著分析時(shí)間越長(zhǎng)和費(fèi)用越高首先考慮0.25mm或0.32mm內(nèi)徑的色譜柱,再根據(jù)樣品情況決定選用更粗或更細(xì)內(nèi)徑的色譜柱首先考慮0.25um膜厚,再根據(jù)樣品的揮發(fā)性選擇更厚或更薄的液膜,.,該如何老化新色譜柱？眾說(shuō)紛紜,有人說(shuō)不必老化,有人說(shuō)必須過(guò)夜老化,有人認(rèn)為老化色譜柱時(shí)升溫速率必須較慢?究竟該如何老化？解答:安裝色譜柱后,首先用至少3倍于平常工作流速的載氣吹色譜柱,然后將載氣流速調(diào)整到正常流速.開始從100度升溫迅速升溫到老化溫度,老化色譜柱。老化溫度-在高于樣品分析終溫20度但不超過(guò)色譜柱的恒溫溫度上限的狀態(tài)下,恒溫2小時(shí)的方法快速老化一支新的毛細(xì)管色譜柱,色譜柱老化時(shí)的升溫速率沒(méi)有限制,既可使用最高升溫速率老化色譜柱.如果樣品分析的終溫一旦超過(guò)色譜柱恒溫溫度上限,必須在比首次老化溫度更高的溫度下重新老化色譜柱,但不能超過(guò)色譜柱的程序升溫上限.如果恒溫10分鐘以后,檢測(cè)器信號(hào)仍然不往下降,立即將色譜柱柱溫降下來(lái),檢查是否漏氣.色譜柱老化所需時(shí)間可依據(jù)應(yīng)用分析的需要,并且取決于操作者可接受的流失程度.所需要的檢測(cè)限越低,色譜柱需要的老化時(shí)間就越長(zhǎng).(與色譜柱固定相的極性和膜厚直接相關(guān))極性和厚膜色譜柱流失較多和需要較徹底的老化.對(duì)于絕大多數(shù)應(yīng)用,30至60分鐘的老化時(shí)間已經(jīng)足夠.,色譜柱故障排除與維護(hù)-老化新色譜柱,.,FID檢測(cè)器最適合用于檢測(cè)色譜柱老化時(shí)的基線.在升溫程序的末端(例低于恒溫溫度上限30-40度時(shí)),基線將升高,然后基線下降逐漸平穩(wěn),此時(shí)可以認(rèn)為色譜柱老化完成.雖然有報(bào)道認(rèn)為當(dāng)使用一些類型的檢測(cè)器(例ECD,MS)時(shí),會(huì)污染檢測(cè)器,但總體來(lái)說(shuō),將色譜柱連接在檢測(cè)器上進(jìn)行色譜柱老化是安全的,并不會(huì)污染檢測(cè)器.關(guān)鍵點(diǎn):切勿過(guò)夜老化色譜柱.當(dāng)色譜柱處于高溫時(shí),柱壽命急劇下降.如果色譜柱老化時(shí)超過(guò)2小時(shí)還有大量柱流失,則將色譜柱冷卻至室溫,辨認(rèn)柱流失來(lái)源(通常原因是：氧氣由連接不緊密的連接處進(jìn)入色譜柱或隔墊漏氣).來(lái)源于GC儀器本身的殘留物導(dǎo)致的基線信號(hào)變化也可能與色譜柱流失狀況相像.關(guān)鍵點(diǎn):如果色譜柱放置一段時(shí)間未用,則可進(jìn)行一次溫和的色譜柱老化過(guò)程以便趕走色譜柱保存過(guò)程中冷凝沉積下來(lái)的污染物.,色譜柱故障排除與維護(hù)-如何確定色譜柱老化是否足夠?,.,色譜柱使用時(shí)有溫度上限和下限.如果色譜柱低于使用溫度下限使用,色譜柱的性能表現(xiàn)會(huì)不理想,會(huì)得到饅頭峰與寬峰(例：柱效損失),但色譜柱并不會(huì)因此而受損.在高于色譜柱使用溫度下限的情況下使用,可獲得較好的色譜峰峰形.色譜柱使用溫度上限的表達(dá)方式例如：325/3500C前者較低的溫度是恒溫溫度上限.色譜柱可無(wú)限期的在恒溫溫度上限下使用,此時(shí)的色譜柱流失和壽命都不會(huì)受到嚴(yán)重?fù)p傷.后者較高的溫度是程序升溫溫度上限.色譜柱只在程序升溫溫度上限使用10至15分鐘是不會(huì)嚴(yán)重?fù)p傷色譜柱壽命或引起色譜柱過(guò)度流失,但如果長(zhǎng)時(shí)間使用或高于程序升溫溫度上限則會(huì)損傷固定相以及熔融硅膠柱管的惰性導(dǎo)致嚴(yán)重縮短色譜柱壽命或引起色譜柱過(guò)度流失.,色譜柱故障排除與維護(hù)-色譜柱使用溫度上限,.,真正的色譜柱流失的來(lái)源只應(yīng)該是色譜柱.用戶所觀察到的流失實(shí)際上是到達(dá)檢測(cè)器的所有信號(hào)的總和,包含了以下來(lái)源：進(jìn)樣口隔墊,進(jìn)樣口和檢測(cè)器,但有可能將以上所有來(lái)源全都錯(cuò)誤的歸結(jié)為色譜柱流失.判斷流失是否正常的最好方法是檢查檢測(cè)器.斷開,并取下色譜柱,用堵頭封住檢測(cè)器入口.打開檢測(cè)器,紀(jì)錄50度時(shí)的信號(hào)值.柱箱升溫到320度,記錄信號(hào)值.干凈的檢測(cè)器上FID信號(hào)將增加1至2個(gè)pA.如果信號(hào)增加值和超過(guò)2個(gè)pA,應(yīng)該立即考慮清洗檢測(cè)器,尾吹氣和氫氣管線.一旦檢測(cè)器信號(hào)在320度落回到可接受的水平,考慮進(jìn)樣口的問(wèn)題.如果目測(cè)進(jìn)樣口襯管,發(fā)現(xiàn)有明顯的污染,將進(jìn)樣口冷卻下來(lái),拆開進(jìn)樣口,用溶劑擦洗進(jìn)樣口內(nèi)腔.更換新的襯管后,重新安裝上進(jìn)樣口,用一段“跳接管”(1至3米的未涂敷的熔融硅膠或不銹鋼色譜柱管)將進(jìn)樣口與檢測(cè)器直接相連.進(jìn)樣口升溫,柱箱升溫到320度.此時(shí)只接了檢測(cè)器時(shí)任何“流失”信號(hào)增加值均來(lái)源于儀器的前端例如：進(jìn)樣口隔墊,載氣氣路,在線調(diào)節(jié)器,閥或流速控制器.用鋁箔將一個(gè)新的隔墊包起來(lái),光滑面向下.如果從跳接管的信號(hào)過(guò)來(lái)的信號(hào)降低了,表明需要使用質(zhì)量更好的隔墊.如果信號(hào)仍然很高,載氣中可能有物質(zhì)沉積在管線,閥或調(diào)節(jié)器中,這些部件需要拆開清洗或更換.,色譜柱故障排除與維護(hù)-如何判斷是否是色譜柱流失？,.,懷疑進(jìn)樣器或載氣發(fā)生被污染問(wèn)題時(shí)可用冷凝測(cè)試來(lái)進(jìn)行故障排除(例：鬼峰或基線不正常)將GC恒溫于40-50度至少8小時(shí).不進(jìn)樣運(yùn)行空白程序分析(啟動(dòng)GC,但不進(jìn)樣),使用正常的溫度條件和儀器設(shè)置.保存第一張譜圖.立即重復(fù)上述空白程序,間隔最多不超過(guò)5分鐘.將第二張譜圖與第一張譜圖做對(duì)比.如果第一張譜圖上有大量的色譜峰并且基線不穩(wěn),則表明污染部位位于毛細(xì)管色譜柱上游(例：進(jìn)樣口或載氣已被污染).如果兩張譜圖上色譜峰均較少并且或基線漂移也小,則表明載氣和/或進(jìn)樣口相對(duì)比較干凈.如果兩張譜圖上噪音較高并且/或發(fā)生基線漂移,則表明檢測(cè)器或檢測(cè)器氣路已被污染.,色譜柱故障排除與維護(hù)-如果懷疑進(jìn)樣器或載氣被污染該如何檢查?,.,系統(tǒng)污染導(dǎo)致大多數(shù)的鬼峰或Carryover交叉污染問(wèn)題.如果額外的鬼峰峰寬與樣品色譜峰相近(保留時(shí)間也相近),污染物最有可能是與樣品同時(shí)進(jìn)入色譜柱.額外組分的可能來(lái)源是進(jìn)樣器(例污染物)或樣品本身.溶劑,樣品瓶,瓶蓋和進(jìn)樣針中的雜質(zhì)也是可能的其他來(lái)源.分別進(jìn)樣分析樣品和空白溶劑可以找到污染物來(lái)源.如果鬼峰比樣品色譜峰寬許多,則早在樣品進(jìn)入色譜柱之前,污染物已經(jīng)存在于色譜柱中.上一次樣品運(yùn)行被中斷后,上述組份殘留在色譜柱中.在樣品運(yùn)行的后期流出色譜柱,且峰形較寬.有時(shí),多次進(jìn)樣疊加后形成多個(gè)鬼峰或以駝峰形式流出,并伴隨有基線漂移.升高終溫或延長(zhǎng)程序升溫時(shí)間可減少或消除鬼峰.另外,每次或幾次樣品分析后,進(jìn)行一次短時(shí)間的色譜柱烘烤可以消除色譜柱上的強(qiáng)保留化合物,避免導(dǎo)致不良后果.進(jìn)行冷凝測(cè)試可判定是否是由于進(jìn)樣口被污染而導(dǎo)Carryover交叉污染或鬼峰.,色譜柱故障排除與維護(hù)-鬼峰或Carryover交叉污染,.,通常一個(gè)隔墊在引起譜圖表現(xiàn)不佳之前至少能進(jìn)100次樣品.而襯管則可以發(fā)現(xiàn)譜圖表現(xiàn)不佳后再更換.影響隔墊壽命的因素有進(jìn)樣針尺寸,進(jìn)樣溫度和彈性,壓力.影響襯管壽命的因素有樣品潔凈程度.具體情況可依據(jù)儀器的使用狀況及樣品的情況而定.,色譜柱故障排除與維護(hù)-何時(shí)需要更換隔墊或襯管?,.,這與樣品制備或系統(tǒng)潔凈程度有關(guān).更換樣品制備,空白制備以及洗針瓶中的溶劑.更換新的進(jìn)樣針和隔墊.取下分流口管線進(jìn)行清洗.不進(jìn)樣運(yùn)行空白溫度程序,觀察是否色譜峰是由于加熱色譜柱而導(dǎo)致.,色譜柱故障排除與維護(hù)-為什么走空白時(shí)會(huì)出樣品峰?,.,如果保留時(shí)間沒(méi)有明顯變化但是色譜峰變寬,拖尾,這表明系統(tǒng)中存在活性點(diǎn)。如果變寬的色譜峰是對(duì)稱的,則表明正常的色譜柱柱效下降；如果色譜峰前伸,則表明色譜柱過(guò)載。,色譜柱故障排除與維護(hù)-標(biāo)樣和樣品峰隨保留時(shí)間增加而峰形變寬,是否正常?,.,水是常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室溶劑中蒸發(fā)體積最大的溶劑之一.對(duì)于進(jìn)水樣,進(jìn)樣口襯管不能提供足夠大的蒸發(fā)空間,會(huì)導(dǎo)致過(guò)量的蒸氣反沖到進(jìn)樣口外,再冷凝在較低溫度的表面上,最終結(jié)果是造成樣品損失.如果要進(jìn)水樣,將進(jìn)樣口溫度設(shè)置在150和220度之間（降低膨脹體積）或使用較小的進(jìn)樣體積可以減少樣品損失.,色譜柱故障排除與維護(hù)-分析水相基體樣品,重現(xiàn)性不佳,該如何改善?,.,進(jìn)樣口維護(hù)是避免活性點(diǎn)和樣品降解問(wèn)題的第一首選.使用干凈的,去活襯管,更換分流/不分流進(jìn)樣口(鍍金)處的密封圈尤其是發(fā)現(xiàn)降解跡象時(shí)必須這樣處理.并非所有的實(shí)驗(yàn)室都只分析比較干凈的樣品.如果樣品很臟既樣品基體復(fù)雜,則進(jìn)樣口維護(hù)非常關(guān)鍵。徹底的進(jìn)樣口清洗會(huì)有助于避免大多數(shù)的異狄氏劑和滴滴涕在進(jìn)樣口發(fā)生分解.電子氣動(dòng)控制可以提供脈沖不分流或流量程序進(jìn)樣技術(shù).這些技術(shù)可有效減少樣品在進(jìn)樣口的停留時(shí)間,而減少降解.,色譜柱故障排除與維護(hù)-如何避免異狄氏劑&滴滴涕發(fā)生分解?,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-基線噪音過(guò)高,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-基線不穩(wěn)或紊亂,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-色譜峰拖尾,.,進(jìn)樣口或色譜柱被污染,或色譜柱切口不平整.將進(jìn)樣口冷卻下來(lái),關(guān)掉氣路,更換或清潔進(jìn)樣口部件,包括進(jìn)樣襯管和鍍金密封墊。取出色譜柱.將色譜柱柱頭部分切除一段消除殘留的非揮發(fā)性組份,隔墊材料和石墨墊碎屑.切除的柱長(zhǎng)可按實(shí)際需要為1英尺到1米,甚至更長(zhǎng).使用正確的色譜柱切割工具是關(guān)鍵.切割不平整,樣品會(huì)發(fā)生吸附.在重新安裝任何部件之前必須確保徹底清洗進(jìn)樣口.推薦使用溶劑清洗分流口管線.使用不分流模式進(jìn)行分析時(shí),太長(zhǎng)的不分流時(shí)間會(huì)導(dǎo)致拖尾.常用設(shè)定的時(shí)間0.5至1分鐘.死體積也會(huì)導(dǎo)致拖尾的發(fā)生.確保色譜柱安裝正確地于檢測(cè)器和進(jìn)樣口中.如果必須保證使用相同的色譜柱柱長(zhǎng),則可考慮使用一段未涂敷的保留間隙柱(色譜柱前的預(yù)柱).保留間隙柱可以切除或更換,而不損失柱效,并且可有效延長(zhǎng)色譜柱壽命.使用保留間隙柱時(shí)必須確保保留間隙柱和分析色譜柱之間的連接部分不漏氣和不吸附樣品.,色譜柱故障排除與維護(hù)-色譜峰拖尾的原因?,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-裂分峰,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-色譜峰大小發(fā)生變化,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-保留時(shí)間變化,.,色譜柱故障排除與維護(hù)-分辨率損失,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法-固相萃取SPE,.,內(nèi)容,氣體純化系統(tǒng)流量計(jì)樣品瓶進(jìn)樣針進(jìn)樣口隔墊，O型圈石英襯管，密封墊石墨墊圈，柱螺母氣相色譜柱選擇,使用與維護(hù)GC方法移植軟件樣品前處理新方法,.,SPE固相萃取,固相萃取的主要作用待測(cè)組份純化痕量富集濃縮溶劑轉(zhuǎn)換樣品儲(chǔ)備和保存,.,SPE洗脫溶劑選擇,SPE小柱的容量與洗脫參數(shù),.,SPE吸附模式的基本步驟,預(yù)洗*,消除可能會(huì)被溶劑洗脫出來(lái)的污染物,活化,上樣,沖洗,淋洗,活化SPE小柱準(zhǔn)備接受樣品,上樣并沖洗小柱,用不會(huì)把待測(cè)組份淋洗出來(lái)的最強(qiáng)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行淋洗,盡量用最少的淋洗溶劑淋洗待測(cè)組份,如果洗脫溶劑溶解能力強(qiáng)于活化溶劑,1.MeOH或乙腈2.弱溶劑(水,緩沖液),保留較弱的基體組份被首先洗脫出來(lái)需控制流速,待測(cè)組份和其他基體組份被保留,將待測(cè)組份洗脫出來(lái)而剩余保留較強(qiáng)的基體組份仍然保留在填料中需控制溶劑用量,1,2,.,AccuBONDIISPE應(yīng)用報(bào)告,環(huán)境水中有機(jī)氯農(nóng)殘的固相萃取水中多環(huán)芳烴PAH的固相萃取水中多氯聯(lián)苯PCB的固相萃取固相萃取三嗪triazines苯酚系列物的SPE固相萃取及GC/MS分析醫(yī)藥尿樣和血清中的代謝類固醇血清中的苯酰牙子堿血清中的咖啡因及其代謝產(chǎn)物血清中的巴比妥,.,水中多環(huán)芳烴的萃取與分離,水Spikedat50ppb,固相萃取方法AccuBONDII,500mg,6mL(P/N188-1356,30/box)樣品制備:加入2mL異丙醇至20mL水樣中混勻活化:5mL二氯甲烷5mL甲醇5mL去離子水加入1mL去離子水于填料床頂部上樣:在小柱下放置24-mL樣品瓶上樣.用玻璃滴管控制流速.調(diào)節(jié)真空,控制流速10mL/min.流速越低,萃取效果越好.沖洗:3mL50:50乙腈/去離子水沖洗后繼續(xù)抽真空30sec把SPE小柱離心分離1000-1500rpm轉(zhuǎn)速5min.(除去多余的水)淋洗:3mL二氯甲烷,收集流動(dòng)相.揮干至50-200L.不要加熱,以防