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文檔簡介

搖瓶和發(fā)酵罐培養(yǎng)的差異,第七組,CompanyLogo,在發(fā)酵工業(yè)研究中,廣泛采用搖瓶試驗(yàn)進(jìn)行發(fā)酵條件的初步探索,為罐發(fā)酵提供參考數(shù)據(jù)。但搖瓶或小發(fā)酵罐的試驗(yàn)條件轉(zhuǎn)移到大發(fā)酵罐時(shí),它們所得產(chǎn)物的產(chǎn)量往往不完全一致。所以,如何盡量縮小它們之間結(jié)果的差異,保證搖瓶培養(yǎng)為罐發(fā)酵提供可靠的試驗(yàn)數(shù)據(jù),就顯得十分重要。,CompanyLogo,一、搖瓶實(shí)驗(yàn)二、搖瓶與發(fā)酵罐培養(yǎng)的差異三、搖瓶放大培養(yǎng)的結(jié)果四、消除差異的方法,主要內(nèi)容,CompanyLogo,一、搖瓶實(shí)驗(yàn),1、搖瓶培養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)是在菌種的篩選培養(yǎng)階段(中試),中試生產(chǎn)的目的是確定菌種培養(yǎng)的最佳操作條件,以便于轉(zhuǎn)移到大發(fā)酵罐進(jìn)行生產(chǎn)。,CompanyLogo,在錐形瓶中裝入一定量的培養(yǎng)基配上瓶塞,經(jīng)滅菌后接種,在搖瓶上進(jìn)行恒溫振蕩培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中分析測定培養(yǎng)液中的有關(guān)參數(shù)和產(chǎn)物得量。,CompanyLogo,2、搖瓶培養(yǎng)的應(yīng)用搖瓶試驗(yàn)可以在有限的空間、時(shí)間和一定量的人力的條件下,短期內(nèi)獲得大量的數(shù)據(jù),所以在實(shí)驗(yàn)室研究中被廣泛采用。,CompanyLogo,搖瓶試驗(yàn)結(jié)果提供了生產(chǎn)菌株的基本信息和發(fā)酵工藝數(shù)據(jù),經(jīng)過中試放大后用于工廠發(fā)酵罐生產(chǎn)。搖瓶和發(fā)酵罐培養(yǎng)之間出現(xiàn)差異的原因本質(zhì)上是由這兩種試驗(yàn)規(guī)模變化所引起的。,CompanyLogo,體積氧傳遞系數(shù)(KLa)和溶解氧的差異,1,二、搖瓶和發(fā)酵罐培養(yǎng)的差異,CompanyLogo,1體積氧傳遞系數(shù)(KLa)和溶解氧的差異,通氣狀況:搖瓶培養(yǎng):瓶塞對氧傳遞的阻力、表面通氣狀況與周圍環(huán)境有關(guān)發(fā)酵罐培養(yǎng):鼓泡通氣Kd值:溶氧系數(shù)Kd在搖瓶發(fā)酵和發(fā)酵罐中的差異很大,CompanyLogo,-,搖瓶的Kd值,CompanyLogo,發(fā)酵罐的Kd值,發(fā)酵罐的溶解氧都大于搖瓶,CompanyLogo,2CO2濃度的差異,CO2是微生物的代謝產(chǎn)物,同時(shí)它往往也是合成所需的一種基質(zhì),溶解在發(fā)酵液中的CO2對微生物發(fā)酵有抑制或刺激作用。大多數(shù)微生物適應(yīng)低CO2濃度(0.020.04%體積分?jǐn)?shù))。當(dāng)排出的CO2濃度高于4%時(shí),碳水化合物的代謝及呼吸速度下降,影響菌體生長、形態(tài)及產(chǎn)物合成。,CompanyLogo,搖瓶常壓狀態(tài)發(fā)酵罐正壓狀態(tài)CO2在水中的溶解度隨外界壓力的增大而增加。所以罐中培養(yǎng)液的CO2濃度明顯大于搖瓶。,CompanyLogo,3菌絲受機(jī)械損傷的差異,搖瓶培養(yǎng):菌體只受液體的沖擊或沿著瓶壁滑動影響機(jī)械損傷很輕發(fā)酵罐培養(yǎng):受攪拌葉的剪切力、攪拌時(shí)間的長短等機(jī)械損傷程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于搖瓶培養(yǎng),CompanyLogo,urTxt,菌體內(nèi)核酸類物質(zhì)的漏出率與攪拌轉(zhuǎn)速、攪拌持續(xù)時(shí)間、攪拌葉的葉尖線速度、培養(yǎng)液單位體積吸收的功率以及體積氧傳遞系數(shù)(KLa)等成正比關(guān)系,也就是說,這些發(fā)酵參數(shù)的數(shù)量增加,其漏出率也增加,菌體受損傷的程度也增加。雖然搖瓶發(fā)酵也有低分子核酸類物質(zhì)漏出,其漏出量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于罐的。,攪拌增加菌體受損傷的程度,CompanyLogo,三、搖瓶放大培養(yǎng)的結(jié)果,溶氧敏感,罐中生產(chǎn)能力可能高于搖瓶機(jī)械損傷敏感,罐中的生產(chǎn)能力低于搖瓶溶氧和機(jī)械損傷都敏感,其結(jié)果隨發(fā)酵罐中的特性而定,CompanyLogo,四、消除差異的方法,消除搖瓶與發(fā)酵罐培養(yǎng)這兩種規(guī)模結(jié)果的差異,使搖瓶發(fā)酵結(jié)果能反映罐上的結(jié)果,是一個(gè)很重要的問題。,CompanyLogo,從下面四個(gè)方面模擬罐上發(fā)酵的條件,CompanyLogo,在搖瓶中附加擋板也可模擬罐發(fā)酵時(shí)菌絲體的損傷。為減少罐發(fā)酵對菌絲的損傷,可采用剪切力較小的螺旋漿式

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