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文檔簡介
附 錄 一 顯微鑒定及顯微化學(xué)反應(yīng)常用試液的配制方法1水合氯醛試液:取水合氯醛50 g,加蒸餾水l 5m1與甘油10m1使溶解,即得。此為常用的透化劑,能使細(xì)胞組織透明清晰,能溶解淀粉粒,蛋白質(zhì)。揮發(fā)油、樹脂、葉綠素等,但不溶解草酸鈣或碳酸鈣晶體等它亦有使皺縮的細(xì)胞膨脹而恢復(fù)原狀的作用。2稀甘油試液:取甘油33ml,加蒸餾水10ml,再加樟腦少許或液化苯酚1滴,即得。 本品為臨時(shí)切片的常用封藏液之一。經(jīng)水合氯醛透化的顯微標(biāo)本滴加稀甘油封藏,可防止水合氯醛結(jié)晶析出而避免干擾觀察。3甘油醋酸試液 (斯氏溶液):取甘油、50醋酸、蒸餾水各等分,混合,即得。此為常用的一種封藏劑,能在較長時(shí)間內(nèi)保持淀粉粒的形狀、大小,防止淀粉粒崩解,以便于顯微觀察和測量大小4間苯三酚試液: 取間苯三酚1g,加95乙解100ml使溶解,即得。置棕色瓶內(nèi),在暗處保存。樣品加本試液23分鐘后,再加濃鹽酸或濃硫酸1滴,木質(zhì)化細(xì)胞壁顯紅色,紅色的深度與木質(zhì)化的程度有關(guān)。5.蘇丹試液: 取蘇丹0.01g加90乙醇5m1,溶解后,加甘油5m1,搖勻,即得。 應(yīng)置棕色瓶中保存,在2個(gè)月內(nèi)應(yīng)用。 此液能使木栓化或角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪油樹脂等染成紅色或桔紅色。6氯化鋅碘試液: 取碘化鉀8g,加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.5g溶解后,加適量碘使達(dá)飽和狀態(tài),即得。 本試液置棕色玻璃瓶內(nèi)保存。用于鑒別纖維素細(xì)胞壁和木化細(xì)胞壁,前者顯藍(lán)色或藍(lán)紫色,后者呈黃色或棕色。 7銅氨試液:取硫酸銅0.5g,加蒸餾水適量,置乳缽中研磨,再加濃氨水10ml使溶解,即得。本試液在使用時(shí)配制,貯存時(shí)間一般不得超過2個(gè)月。能使纖維素細(xì)胞壁染成淺藍(lán)色,并逐漸膨脹而溶解:半纖維素細(xì)胞壁與纖維素細(xì)胞壁反應(yīng)同,但前者遇水強(qiáng)烈膨脹。8稀碘液:取碘化鉀0.5g溶少量蒸餾水中,加碘lg,溶解后加水至100ml,即得,使用時(shí),通常還要稀釋至談棕色或淡棕黃色。置棕色玻璃瓶內(nèi)保存。 用于淀粉粒及糊粉粒之檢查。直鏈淀粉遇此液呈藍(lán)色;支鏈淀粉則顯紫紅色。與糊粉粒作用顯暗黃色或黃棕色。 9氯化汞溴酚藍(lán)試液:取氯化汞10g,溴酚藍(lán)0.001g,加蒸餾水100ml溶解,即得。 此試液用于檢識(shí)糊酚粒將含糊粉粒之切片加此溶液中5分鐘后,依次用0.5醋酸沖洗除去多余的試劑,再用水洗3分鐘,用稀甘油裝片鏡撿,糊粉粒顯藍(lán)色。 10亞甲藍(lán)試液: (1)醇溶液: 取亞甲藍(lán)0.1g,溶于95乙醇25ml中; (2)甘油溶液: 取亞甲藍(lán)0.1g,溶于95乙醇5m1及甘油25m1。 鏡檢粘液時(shí),先前加(1)液12滴于材料,加蓋玻片,過12分鐘之后再從蓋玻片邊緣滴加(2)液,粘液顯天藍(lán)色;果膠質(zhì)里紫色。 11釕紅試液:取10%醋酸納溶液12ml,家釕紅適量使呈酒紅色,即,應(yīng)臨用時(shí)配制。12稀鹽酸:取鹽酸234ml,加蒸餾水釋至100ml,即得。本液含HCl應(yīng)為9.5%105%。與小檗堿反應(yīng)形成黃色針簇狀鹽酸小檗堿結(jié)晶。能溶解草酸鈣結(jié)晶而不產(chǎn)生氣泡,溶解碳酸鈣結(jié)晶(鐘乳體)而產(chǎn)生氣泡;不溶解硅質(zhì)塊。13稀醋酸:取冰醋酸6ml,加蒸餾水至100ml,即得。此為較常用試液。不溶解草酸鈣晶體,但能溶解碳酸鈣晶體(鐘乳體)而產(chǎn)生氣泡,故常以此作顯微化學(xué)反應(yīng)。14稀硫酸:取蒸餾水約50m1,加濃硫酸57ml,攪拌,再加蒸餾水稀釋至100ml,即得。本液含H2S04應(yīng)為9.5%105。能溶解草酸鈣晶體,并析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。15稀硝酸:取硝酸105m1,加蒸餾水稀釋至100ml,即得。本液合HNO3。應(yīng)為95。105;30硝酸與小檗堿反應(yīng)形成黃色硝酸小檗堿針晶簇結(jié)晶。16.氫氧化鈉(氫氧化鉀)試液:取氫氧化鈉5g,加蒸餾水溶解成100ml,即得。17擦鏡液 : 取乙醚70m1,加無水乙醇30ml,混合搖勻,即得。 用于擦拭顯微鏡的鏡頭等光學(xué)部分。附 錄 二 制作生藥顯微標(biāo)本片常用試液配制1.福爾馬林醋酸酒精混合液(FAA固定液): 取福爾馬林5ml,冰醋酸5mml,50或70酒精90ml,混合即得。此為較常用的固定液和保存液,能固定一般植物組織(單細(xì)胞體及絲狀藻類除外),也適合昆蟲、甲殼類的固定,但不適于作細(xì)胞學(xué)研究的固定。固定時(shí)間最短需十幾小時(shí),可作無限期保存,久置對制片并無影響。柔軟的材料用50%酒精為好,堅(jiān)硬的材料用70% 酒精為好。易于收縮的材料可稍增加冰醋酸。2脫水劑 :為50、70、 80、90%、95、100乙醇。 用法:生藥制片中的脫水劑用量為材料的23倍,各級(jí)224小時(shí),但材料在無水酒精中不能放置過長,否則組織過硬、過脆,造成切片困難。在95%酒精及無水酒精中時(shí),最好多換一次新液,更有利于脫水。3透明劑:分四級(jí)。二甲苯:純酒精(1:2;1:1;2:1;純二甲苯)。用于生藥制片中脫水后材料的透明,各級(jí)約30分鐘。純二甲苯中應(yīng)更換2次。4滲蠟劑:分四級(jí)。二甲苯;石蠟(3:1;1:1;1:3;純石蠟)。用于生藥石制片中的滲蠟,每級(jí)23小時(shí)。5.染色劑:(1)番紅染色劑取番紅1g,溶于100ml50%酒精中,即得??墒鼓举|(zhì)化細(xì)胞壁染成紅色。(2)固綠染色劑取固綠0.5g,溶于100ml95%酒精中,即得。與番紅染色液配合用作生藥切片的二重染色,可使纖維化細(xì)胞壁染成綠色。6封藏劑:(1)加拿大樹脂封藏劑取加拿大樹脂適量,溶于適量的二甲苯中,配成適當(dāng)濃度(以玻璃棒一端形成小滴滴下,而不成絲狀物為度),加入幾粒豆粒大小的大理石(中和樹膠因放置產(chǎn)生的酸性,以免使切片褪色),即得。使用時(shí)注意: (1)溶液宜現(xiàn)配現(xiàn)用。 (2)此液放置時(shí)因溶劑揮發(fā)會(huì)逐漸變稠,用時(shí)需用二甲苯稀釋,否則不僅浪費(fèi)樹脂,而且易混進(jìn)氣泡;稀釋時(shí)不可加熱,以免樹脂變質(zhì)發(fā)黑。 (3)用特制的樹脂瓶盛樹脂溶液。如無特制的樹脂瓶,可用普通玻璃瓶代替,但不可用軟木塞塞,而要另外罩上適當(dāng)大小的玻璃試管。以免塞子打不開。(2)品紅甘油明膠溶液取粉末狀明膠1g,加水6ml,浸16小時(shí),使溶解,加甘油7ml,輕輕攪勻,用紗布過濾,加入適量的堿性品紅溶液,即得。用于半永久制片的封藏。堿性品紅溶液的配制:堿性品紅0.01g,加入無水乙醇60ml、樟油8m,溶解即得。 7組織解離液: (1)硝鉻
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