結核感染T細胞(TB-IGRA)檢測及意義ppt課件

.干擾素釋放試驗(IGRAS )的臨床應用，南京醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院呼吸科沉紅，1 .結核病診斷現(xiàn)狀，2.TB-IGRA產(chǎn)品介紹，3.TB-IGRA的臨床應用，4.TB-IGRA的測定方法和結果，3 .結核病現(xiàn)狀，結核病(tuberculosis )為結核分枝桿菌(tuberculosis ) 肺結核最常見，死亡人數(shù)僅次于艾滋病。 在全身各器官都能看到。 肺外結核占總發(fā)病率的10%-20%，死亡率占總結核死亡率的14.1%-17.6%。 全世界約有三分之一的人感染，2014年全球結核病報告在2013年有900萬新發(fā)病例，顯示有150萬人死亡。 我國是結核病多發(fā)地區(qū)，發(fā)病人數(shù)居世界第二位，目前有600萬活動性肺結核，且患者人數(shù)逐年增加，居全國甲乙類傳染病之首。 電子顯微鏡下的結核菌worldhealthorganization.globaltuberculosisconstrail : epidemiology，strategy financing : who report 2011 (who/htm/TB/2011 ) . geneal:who，2011，2010年新發(fā)現(xiàn)880萬例結核病患者，59%發(fā)生在亞洲，26%發(fā)生在非洲，發(fā)病前5個國家India (2.0million2.5 million ) (26 % ) China (0.9million1.2 million ) south Africa (0.40 million0.59 million ) Indonesia (0.37 million0.54 million ) Pakistan (0.33 million0.48 millon )， 38%、結核的現(xiàn)狀和危害傳播范圍廣的worldhealthorganization.multidrugandinextvelydrug-resistant Bt (m/XDR-TB ) :2010 globalreportonsurveillanceandand TB/2010.3 .是世界上27個國家MDR-TB流行嚴重的國家之一，中國特別嚴重，HIV感染和艾滋病破壞機體免疫系統(tǒng)，加劇結核病的發(fā)病，HIV患者中有1/3患有結核菌耐藥的結核菌感染率增加貧困，移民等細菌學涂膜率低，2/3TB患者菌陰性，原因、 結核發(fā)病機制，結核分枝桿菌(MTB )，暴露，感染，9%，復發(fā)，注：感染后有無發(fā)病與機體敏感性有關，5-10%，HIV10%，活動性結核：發(fā)病狀態(tài)潛伏性結核感染(LTBI ) :宿主感染結核菌后，處于尚未發(fā)病的特殊狀態(tài)，未根治， 結核病免疫主要是細胞免疫，et al.theimmunologyoftuberculoisis : frombenchobeside.resi rgy，2010，1535365433-450，11， 時間長48周的檢出率低50%、涂陰檢出率低22%-38%的肺外結核較難，結核檢測方法比較結核診斷、x線、分子診斷涂膜鏡檢查、細菌培養(yǎng)、特異性差誤診肺炎、肺癌肺外結核較難，操作復雜的技術在高涂陰檢查中難以達到34%的肺外結核， NTM檢查率為20%的肺外結核困難，假陽/假陰多則無法區(qū)分(涂陰45%/35%)WHO無效，抗體檢查，提出TST (結核菌素皮試)，bcg接種者無法區(qū)分NTM48-72小時復診，接觸臨床癥狀的病原/病理，12、 TB-IGRA Tuberculosis (結核TB)Interferon (干擾素) Gamma()Release (釋放) Assay (測定)原理：感染者體內結核菌(TB )抗原致敏的效果t細胞在體外受到相同抗原的刺激(APC輔助下)時，IFN-(犀牛通過IFN-的檢測判斷結核感染情況。1 .結核病診斷現(xiàn)狀、2.TB-IGRA介紹、3.TB-IGRA臨床應用、4.TB-IGRA測定方法和結果說明、TB-IGRA介紹、ELISA、紅細胞pot、流式細胞術、IGRAsIFN-greleaseassay、體外刺激： RD1抗原、 原理：在生物體內被結核菌抗原致敏的效果t細胞，在體外受到同樣抗原的刺激(APC輔助下)，會分泌大量的IFN-(細胞因子)。 通過IFN-的檢測判斷結核感染情況。、兩種TB-IGRA比較、高孟秋、劉菲、紀濱英等.兩種-干擾素釋放分析結核臨床診斷的比較研究.中華結核與呼吸雜志，2012，35 (10 ):762-765，TB-IGRA產(chǎn)品特性， 高靈敏度檢出率85%以上特異性高的RD1區(qū)編碼的ESAT-6和CFP-10特異性抗原具有較強的Thl細胞免疫原性，在制備BCG苗的所有菌株和環(huán)境中幾乎不存在非結核分枝桿菌，不受BCG苗和非分枝桿菌的影響，國內外相關研究表明， TB-IGRA是一種快速、簡便、應用的檢測方法：張華黃圣文、羅振元.結核分枝桿菌r-干擾素體外釋放定量試驗診斷結核感染的臨床應用.中華醫(yī)學院感染學雜志2009年第19卷第14期，國內外相關研究，1 .結核病的診斷現(xiàn)狀，2.TB-IGRA介紹， 3.TB-IGRA的臨床應用，4.TB-IGRA的測定方法和結果說明，臨床應用事例肺結核的輔助診斷：某醫(yī)院呼吸科患者，男性臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽檢查結果： TB-IgG(-)，TB-IGRA()T-N值為21.5pg/ml的結果分析： TB-IgG靈敏度低，易漏檢。 臨床診斷：肺結核備注： 2011年，WHO建議不使用結核抗體檢測結核感染，臨床應用實例：肺外結核輔助診斷：某醫(yī)院感染科，女，75歲臨床癥狀：發(fā)熱數(shù)日，胸痛，干咳檢查結果： x線胸腔積液影像，積液(-)，積液培養(yǎng)(-)，TB-IGRAT-N350pg/ml、積液單核細胞增多血沉快速結果分析：肺外結核診斷涂膜和培養(yǎng)陽性率極低，TB-IGRA ()可結合其他非特異性輔助指標明確診斷肺外結核。 臨床診斷：結核性胸膜炎，臨床應用實例，肺炎與肺結核鑒別診斷：某醫(yī)院呼吸內科，男，59歲臨床癥狀：肺部有胸水，高熱發(fā)熱，初步鑒定肺炎，抗生素治療1周無效，強烈懷疑結核。 檢查結果：痰涂片(-)、結核抗體(-)、TB-IGRA(-)結果分析：傳統(tǒng)結核檢測率為20%-40%，靈敏度低。 IGRA檢測率在90%以上，陰性排除的意義高于涂膜和抗體。 患者連續(xù)用藥三周，病情好轉。 臨床診斷：肺炎，23，MTB及其他桿菌感染鑒別診斷：某醫(yī)院呼吸內科患者，男性臨床癥狀：發(fā)熱、咳嗽、咳痰、呼吸困難、乏力、多汗、關節(jié)痛檢查結果：痰涂片(-)菌(-)肺部x線可見肺結節(jié)，胸腔積液診斷過程：我院診斷為結核但治療不佳，患者入院行IGRAs(-)試管凝集實驗、布病結果痰涂片和菌培檢出率低，陰性不重視，僅x片和癥狀診斷結核治療。 治療失效后，患者轉院，檢測IGRAs陰性，考慮排除結核，患者是牧民，診斷布氏桿菌病。 訴訟敗訴后，我院首次開始重視IGRAs檢查。 最終確診：布氏桿菌病，臨床應用實例，MTB和NTM鑒別診斷：某醫(yī)院感染科患者，男性臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽，少量痰檢結果： 2次痰涂片(-)，2次TB-IGRA(-)，肺部x線無異常，后用菌培鑒定為菌培()，結果：痰涂片不能區(qū)分非結核分枝桿菌，假陽性臨床診斷：鳥型分枝桿菌感染、臨床應用實例、NTM (非結核分枝桿菌)比例增高，2000年全國流通分離的抗酸桿菌菌株中，NTM菌株占11.1%，其中90%為非結核分枝桿菌肺病。 NTM肺疾病的臨床表現(xiàn)與結核病相似，既有全身中毒癥狀，也有局部損害表現(xiàn)。 但癥狀和體征無特異性，20%-50%的患者無明顯癥狀，除非進行菌型鑒定，臨床表現(xiàn)很難與肺結核病區(qū)別開來。 PPD試驗：弱陽性較多，但不能鑒別MTB和NTM感染。 細菌學檢查：常規(guī)痰涂膜不能鑒別MTB和NTM。培養(yǎng)特性：在固體培養(yǎng)基中，NTM菌落始終光滑，部分菌落產(chǎn)生色素，生長快，可在含有pnb (對硝基苯甲酸)和TCH (噻吩羧酸肼)的選擇性培養(yǎng)基中生長，但結核分枝桿菌只能在TCH選擇性培養(yǎng)基中生長。 06.16.2011，26，抗TNF藥物前結核的意義，發(fā)病率/100.000患者/年，DixonWGetal.AnnRheumDis2010； 69:522-528 .tubeachetal.arthritis 605365884-1894，發(fā)病率/100.000患者/年，潛伏性感染監(jiān)測，某中學高三小學結核爆發(fā)，初期病例，1例(7班)，6月初，第一次疫情，5例(7班)，8-9月，第二次疫情九月，、和的所有的所有的元素定量測定干擾素的釋放強度可用于持續(xù)監(jiān)測： 抗結核療效評價，Kobashi等人利用IGRA追蹤50例結核病人治療：治療開始后，結核病人中IGRA的敏感性和反應強度有明顯降低的趨勢.以上，TB-IGRA :特異性高，靈敏度高，體外、 全血定量檢查的應用方向：輔助肺結核診斷輔助肺外結核診斷潛在感染監(jiān)測，追蹤抗結核治療，臨床應用TB-IGRA，應用TB-IGRA總結，輔助肺結核診斷，特別是細菌學檢查陰性肺結核診斷： TB-IGRA可從細胞水平檢測結核感染，檢出率高，早期感染肺外結核輔助診斷： TB-IGRA抽靜脈血檢查，克服了肺外結核患者痰樣未發(fā)現(xiàn)結核菌、病灶部取樣困難的問題。 呼吸道疾病與結核鑒別診斷：發(fā)熱、咳嗽、咳痰2周咯血胸痛等癥狀疑似結核，胸片/CT不能明確診斷者抗炎治療療效差者的結核篩查，陰性結果可排除較多結核。2周以上不明原因發(fā)熱患者結核感染的調查：其中20%是結核所致，大部分是肺外結核。 高危人群結核感染篩查：如生物制劑/免疫抑制劑、大劑量激素患者、HIV患者、糖尿病患者、血液病和癌癥化療前患者進行結核篩查，防止陳舊性結核、潛伏性結核爆發(fā)和近期結核感染。 隨訪抗結核療效并定期監(jiān)測潛在結核： TB-IGRA結果為定量值，活動結核患者經(jīng)治療陽性強度降低，進而變?yōu)殛幮缘臐摲腥净颊哧栃詮姸蕊@著上升，有發(fā)展為活動結核的風險。 流程調查顯示，85%90%的新診斷活動性肺結核是由潛在性結核演變而來的。已有25個國家發(fā)布了IGRAs應用指南：美國、加拿大、英國、巴西、法國、西班牙、意大利、德國、澳大利亞、葡萄牙、愛爾蘭、瑞士、丹麥、挪威、芬蘭、捷克、斯洛伐克、波蘭、保加利亞奧地利、韓國、日本、中國、潛伏感染和活動性結核診斷輔助(美國CDC、英國NICE中國)診斷疑似結核，陰性結果排除感染(中國)所有人中PDP試驗(美國CDC、日本厚生省) 取而代之的是在接受抗TNF-a治療前必須在IGRA進行結核桿菌感染的篩查，PDP篩查不再使用(瑞士衛(wèi)生局和肺科協(xié)會)的兩個國際組織WHO、ECDC也發(fā)表了應用指南。 萬泰TB-IGRA試劑是中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準-結核分枝桿菌-干擾素體外檢驗方法中唯一提及的結核病檢驗試劑。.1.結核病診斷現(xiàn)狀，2.TB-IGRA產(chǎn)品介紹，3.TB-IGRA臨床應用，4.TB-IGRA檢測方法和結果說明，萬泰TB-IGRA，北京萬泰生物藥業(yè)株式會社，國家傳染病診斷試劑和疫苗工程技術研究中心，廈門大學，研發(fā)6年， 2012年4月取得SFDA認證的國食藥監(jiān)測器(準)字2012第3400557號，TB-IGRA檢查方法，陰性對照管n，陽性對照管p，檢查管t，培養(yǎng)液無刺激原，培養(yǎng)液刺激抗原，培養(yǎng)液PHA，TB特異性刺激抗原(RD1區(qū)： ESAT-6，CFP-10 )，刺激非特異性刺激抗原(PHA )，評價-IFN上升水平，評價-IFN背景水平，評價t淋巴細胞活性，定量分析，、ELISA，t :培養(yǎng)管(t )含量n :背景對照培養(yǎng)管(n )含量p :陽性對照培養(yǎng)管評價TB-IGRA的含量，建議采用BD或GreinerBio-One肝素采集血管，從內毒素最少、對結果影響最小的采血到分注4小時以下避免混血激烈/溶血等患者狀況的免疫系統(tǒng)異?；颊叩臋z測效果受到限制， 活動和潛在無癥狀陽性的處理依據(jù)以下治療和患者意愿防治不確定結果的原因免疫系統(tǒng)異?；颊哂捎诿庖吡ο陆岛透蓴_素的根本高度無法判斷，TBB-igra的臨床參考，萬泰TBB-igra檢測試劑盒的優(yōu)勢，高靈敏度：肺內