GB 29708-2013 食品安全國家標準 動物性食品中五氯酚鈉殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法

G 中華人民共和國 國 家標準 9708 2013 食品安全國家標準 動物性食品中 五氯酚鈉 殘留 量的測定 氣相色譜 in （電子版本僅供參考，以標準正式出版物為準） 2013布 2014施 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會 發(fā)布 I 目 次 目 次 . I 前 言 . 物性食品中五氯酚鈉殘留量的測定 氣相色譜 . 1 范圍 . 2 規(guī)范性引用文件 . 3 原理 . 4 試劑和材料 . 5 儀器和設(shè)備 . 6 試料的制備與保存 . 料的制備 . 料的保存 . 7 測定步驟 . 準曲線的制備 . 取 . 衍生化 . 測定 . 空白試驗 . 8 結(jié)果計算與表述 . 9 檢測方法靈敏度、準確度、精密度 . 敏度 . 確度 . 密度 . 附錄 A . 言 本標準的附錄 A 為資料性附錄。 本標準系國內(nèi)首次發(fā)布的國家標準。 動物性食品中五氯酚鈉殘留量的測定 氣相色譜 1 范圍 本標準規(guī)定了動物性食品中五氯酚鈉殘留 量 檢測的制樣和氣相色譜質(zhì)譜法。 本標準適用于豬的肌肉、肝臟和腎臟及雞的肌肉和肝臟 組織 中五 氯酚鈉殘留量的檢測。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最 新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。 準化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法 3 原理 試料中殘留的五氯酚鈉，用三氯乙酸沉淀蛋白， 環(huán)己烷 乙酸酐 生 ，氣相色譜 標法定量。 4 試劑和材料 以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純試劑；水為符合 6682 規(guī)定的一級水。 五氯酚鈉 標準品 ： 含量 碳酸鉀 正己烷 環(huán)己烷 乙酸乙酯 乙酸酐 吡啶 三氯乙酸 濃鹽酸 5三氯乙酸溶液： 取氯乙酸溶液 5 g， 用 水 溶解并 稀釋至 100 2.4 鹽酸溶液： 取濃鹽酸 20 用 水 溶解并 稀釋至 100 環(huán)己烷 取乙酸乙酯 10 加環(huán)己烷 40 勻。 乙酸酐 取乙酸酐 10 加 吡啶 10 勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。 0.2 碳酸鉀溶液： 取碳酸鉀 27.6 g， 用水溶解 并稀釋 至 1 000 1 mg/氯酚鈉標準貯備液： 精密 稱取五氯酚鈉標準品 10 于 10 瓶中， 用水溶解并 稀釋至刻度 ，配制成 濃度為 1 mg/ 五氯酚鈉標準貯備液 。 以下保存，有效期為 3 個月。 2 g/氯酚鈉 標準 工作液： 精密 量取 1 mg/氯酚鈉標準貯備液 200 L， 于 100 瓶中， 用水稀釋 至刻度 ，配制 成濃度 為 2 g/ 五氯酚鈉 標準工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。 5 儀器和設(shè)備 氣相色譜質(zhì)譜儀 ：配 。 分析天平： 感量 1 g。 天平： 感量 g。 高速離心機 振蕩器 旋渦混合器 組織勻漿機 氮吹儀 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 離心管： 50 6 試料的制備與保存 料的制備 取適量新鮮或解凍的空白或供試組織，絞碎 ， 并使均質(zhì)。 取均質(zhì)的供試樣品，作為供試試料。 取均質(zhì)的空白樣品，作為空白試料。 取均質(zhì)的空白樣品，添加適宜濃度的 標準 工作液，作為空白添加試料。 料的保存 以下貯存?zhèn)?用。 7 測定步驟 質(zhì)匹配 標準曲線的制備 準確量取 2 g/氯酚鈉標準工作液 適量 ，用水配制成濃度為 2、 5、 10、 20、 50、 100 g/L 的系列標準溶液，各取 1.0 別溶解經(jīng)提取、 蒸 吹干后的 6 份 空白試料 殘余物， 混勻， 用 2.4 鹽酸 溶液調(diào) 小于 環(huán)己烷 渦混合， 8 000 r/心 10取有機層，再 加 環(huán)己烷 渦混合， 8 000 r/心 10 合并兩次有機層， 于45 旋轉(zhuǎn)蒸干 。 按衍生化步 驟操作， 供氣相色譜質(zhì)譜測定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標，對照溶液 濃度為橫坐 標，繪制標準曲線。 求回歸方程和相關(guān)系數(shù) 。 取 稱取 試料（ 5g， 于 50 心管中，加水 10 渦混勻， 8 000 r/心 10上清液，加 5%三氯乙酸 5 渦混勻， 8 000 r/心 10 上清液， 用 2.4 鹽酸 溶液調(diào) 小于 環(huán)己烷 渦混合， 8 000 r/心 10 取 有機層，再 加 環(huán)己烷 渦混合， 8 000 r/心 10 合并兩次 有機層 ， 于 45 旋轉(zhuǎn)蒸干 。 衍生化 殘余物 中加 環(huán)己烷 .0 無水硫酸鈉 少量 ，加 乙酸酐 00 L，密封， 于60 反應(yīng) 15 冷卻 ，加碳酸鉀溶液 0.5 分混勻， 靜置分層 ，取有機相 ， 供氣相色譜質(zhì)譜測定。 測定 色譜條件 色譜柱： %苯基甲基聚硅氧烷 （ 30 m膜厚 m），或相當者 ； 進樣口 溫度 ： 250 ； 進樣方式：不分流進樣 ； 進 樣體積： 2 L； 柱溫： 初溫 140 ，保留 2 10 /溫至 200 ，以 15 /溫至 280 ，保持 3.0 載氣：氦氣， 1.0 mL/流） 質(zhì)譜條件： ： 70 溶劑延遲： 3 S 傳輸線溫度： 280 ； 選擇離子檢測方式，檢測離子 )： 266， 308， 237， 165， 130； 定量離子： 266。 定法 通過 試樣 色譜圖的保留時間與標準溶液的保留時間、色譜峰的特征離子與相應(yīng)濃度標準品各色譜峰的特征離子 相對照定性。 試樣 溶液中的離子相對豐度與基質(zhì)匹配標準溶液中的離子相對豐度相比，符合表 1的要求?；|(zhì)匹配標準溶液和添加試液中特征離子的質(zhì)量色譜圖分別見附錄 A。 表 1 試料溶液中離子相對豐度的允許偏差范圍 相對豐度 % 允許偏差 % 50 20 20 50 25 10 20 30 10 50 空白試驗 取空白試料采用完全相同的測定步驟進行平行操作 。 8 結(jié)果計算與表述 單點校準： 或基質(zhì)匹配標準曲線校準：由 b， 求得 a和 b，則 試料中五氯酚鈉的殘留量 （ g/： 按下式計算 式中： X供試試料 中五氯酚鈉的殘留量 ， g/ 標準溶液中五氯酚鈉濃度 ， ng/ C供試試料 溶液中五氯酚鈉濃度 ， ng/ 標準溶液中五氯酚鈉的衍生物的峰面積； A供試試料溶液中五氯酚鈉的衍生物的峰 面積； V殘余物定容體積 ， m 供試試料質(zhì)量 ， g。 注：計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。 9 檢測方法靈敏度、準確度、精密度 敏度 本方法的檢測限 為 g/ 本方法的 定量限， 肌肉 組織 中為 g/臟 和 腎臟 組織 中為 1 g/ 確度 本方法在肌肉 組織 2 g/ 肝臟 和 腎臟 組織 1 4 g/加濃度水平上的 回收率范圍為6