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文檔簡介
1、專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(時(shí)間90分鐘滿分100分)一、選擇題(本題包括20小題,每小題2.5分,共50分)1要從多種細(xì)菌中分離出金黃色葡萄球菌,培養(yǎng)基要用()A固體培養(yǎng)基 B液體培養(yǎng)基C加入青霉素的培養(yǎng)基 D加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基2對(duì)無菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的敘述,正確的是()接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開棉塞打開棉塞的試管口通過火焰將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液,蘸取一環(huán)菌液轉(zhuǎn)移到一裝有無菌培養(yǎng)基的試管中將試管口塞上棉塞接種環(huán)進(jìn)行消毒A B C D3在平板劃線操作中,錯(cuò)誤的是()A將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅 B將燒紅的接種環(huán)在火焰旁邊冷卻C接種環(huán)在平板上劃線位置是隨機(jī)的
2、D在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰4在接種操作的過程中,不正確的是()A要將接種環(huán)灼燒滅菌 B取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌C將接種環(huán)伸入試管內(nèi),先接觸長菌多的部位 D接種后還要將管口滅菌加塞5下列說法正確的是()A為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)基質(zhì)的是固體培養(yǎng)基B培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的菌落6巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,該消毒法就是加熱到7075、保持30 min,或加熱到80、保持15 min,能殺死一般雜菌和病原菌。與滅菌的要求相比,巴氏消毒法()A不能殺滅芽孢等耐高溫的
3、細(xì)菌 B能殺滅芽孢等休眠狀態(tài)的細(xì)菌C能殺滅各種細(xì)菌,包括芽孢 D能殺滅各種真菌,包括孢子7制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程中,關(guān)于倒平板的具體描述正確的是()等培養(yǎng)基冷卻至40左右時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上,左手拔出棉塞右手拿錐形瓶,使瓶口迅速通過火焰用左手的拇指和食指打開皿蓋右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上皿蓋等待平板冷卻 510 s,將平板倒過來放置,使皿蓋在下,皿底在上A B C D8給無氮培養(yǎng)基接種土壤稀泥漿的方法是()A打開培養(yǎng)皿蓋,取一根接種環(huán)沾取少許稀泥漿,輕輕地點(diǎn)接在培養(yǎng)基的表面上B取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌后沾取少許稀泥漿,略微打開
4、培養(yǎng)皿蓋,在培養(yǎng)基的表面輕點(diǎn)C打開培養(yǎng)皿蓋,取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌后沾取少許稀泥漿,在培養(yǎng)基的表面輕點(diǎn)D略微打開培養(yǎng)皿蓋,取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌,冷卻后沾取少許稀泥漿,在培養(yǎng)基的表面輕點(diǎn)9在對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí),用液體培養(yǎng)基的目的是()A可獲得大量菌體 B纖維素分解菌適宜在液體培養(yǎng)基上生長C可以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì) D可獲得高純度的纖維素分解菌10用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí),通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)。原因是()A平板上的一個(gè)菌落就是一個(gè)細(xì)菌B菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C此時(shí)的一個(gè)菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D此方法統(tǒng)計(jì)的菌
5、落數(shù)一定與活菌的實(shí)際數(shù)相同11若某一稀釋度下,平板上生長的平均菌落數(shù)為80,涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為0.1 mL,稀釋液的稀釋倍數(shù)為106,則每克樣品中的活菌數(shù)約為()A8108 B8107 C8105 D810612微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是()AC1酶和Cx酶 BC1酶和葡萄糖苷酶CCx酶和葡萄糖苷酶 DC1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶13反芻動(dòng)物能以富含纖維素的草料為食,是因?yàn)樗鼈冇刑厥獾钠鞴倭鑫?,瘤胃中生活著許多微生物,其中有一些微生物能分解纖維素,反芻動(dòng)物胃內(nèi)這些分解纖維素的微生物的代謝類型最可能是()A自養(yǎng)需氧型 B異養(yǎng)厭氧型 C異養(yǎng)需氧型 D自養(yǎng)厭氧型14要將能分解
6、纖維素的細(xì)菌從土壤中分離出來,應(yīng)將它們接種在()A加入伊紅美藍(lán)的鑒別培養(yǎng)基上 B含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上C只含纖維素粉而無其他碳源的選擇培養(yǎng)基上 D含四大營養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上15微生物(除病毒外)需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì),并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列有關(guān)微生物營養(yǎng)的說法,正確的是()A纖維素分解菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B在纖維素分解菌生長的培養(yǎng)基中只需碳源、氮源、水、無機(jī)鹽即可正常生長C培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的生長越有利D生長因子是微生物生長必需的,而微生物本身合成這些物質(zhì)的能力往往不足16將配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)用()A灼燒滅菌 B高壓蒸汽滅菌 C干熱滅菌 D
7、煮沸滅菌17下列選項(xiàng)中,不是使用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的目的的是()A除去其他微生物 B使需要的微生物大量繁殖C通過表現(xiàn)特殊性狀,與其他微生物相區(qū)別 D可以增加要培養(yǎng)的微生物的濃度18關(guān)于選擇培養(yǎng)正確的是()A可以增加纖維素分解菌的濃度 B可以減少纖維素分解菌的濃度C所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基 D選擇培養(yǎng)不可以省略,但可以重復(fù)操作19能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是()ACO2和N2 B葡萄糖和NH3 CCO2和尿素 D葡萄糖和尿素20下列關(guān)于四種生物的能源、C源、N源和代謝類型的描述,其中正確的一組是()硝化細(xì)菌乳酸菌酵母菌衣藻能源氧化NH3分解乳酸固定N2利用光能C源CO2糖類糖類CO
8、2N源NH3N2N2NO代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A.硝化細(xì)菌、乳酸菌 B乳酸菌、酵母菌C酵母菌、衣藻 D硝化細(xì)菌、衣藻二、簡答題(本題共4小題,共50分)21(11分)下表是某種培養(yǎng)液成分含量表。請(qǐng)據(jù)表回答:編號(hào)成分NH4HCO3KH2PO4CaSO4FeCl2維生素H2O含量0.5 g3.0 g0.5 g0.5 g少許100 mL(1)若用于培養(yǎng)微生物,該培養(yǎng)液中有_類營養(yǎng)物質(zhì),可培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是_。(2)此培養(yǎng)液若用來培養(yǎng)自生固氮微生物,則應(yīng)除去的成分是_,應(yīng)加入的物質(zhì)是_。(3)若用該培養(yǎng)液進(jìn)行植物的無土栽培,則_(能或不能)成功,原因是_。(4)若用
9、該培養(yǎng)液培養(yǎng)纖維素分解菌,應(yīng)加入的物質(zhì)是_,為檢測纖維素分解菌的存在與否,還應(yīng)加入_,將呈_反應(yīng)。22(12分)某同學(xué)為了從土壤中分離得到纖維素分解菌,進(jìn)行以下操作:第一步:土壤取樣。用小鐵鏟和普通信封將土取回,然后倒入一燒瓶中,加蒸餾水稀釋,塞好棉塞。第二步:制備培養(yǎng)基纖維素粉5.0 g,NaNO31.0 g,Na2HPO47H2O1.2 g,KH2PO40.9 g,MgSO47H2O0.5 g,KCl0.5 g,酵母膏0.5 g,水解酪素0.5 g。待其他物質(zhì)溶解后,加水定容到1 000 mL。第三步:菌懸液涂布平板。用接種環(huán)取少量土壤稀釋溶液在以上培養(yǎng)基表層涂布。第四步:培養(yǎng)觀察。把接種
10、好的培養(yǎng)皿放到35的恒溫箱中培養(yǎng)12 d,觀察并記錄菌落的生長情況。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)操作,完成下列題目:(1)找出該同學(xué)明顯的操作錯(cuò)誤。_。(2)要想增加該實(shí)驗(yàn)的說服力,還應(yīng)該怎么做?_。23(13分)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問題:(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入_作為碳源,中不同濃度碳源的培養(yǎng)基_(A.影響;B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量。如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用_法。(2)為對(duì)照,微生物在中不生長
11、,在中生長,與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_;使用_法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)是為了_。(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小?_。(4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染?_。24(14分)某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答問題:(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選_,這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_,實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是_。(3
12、)培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量_的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),常采用_的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律,將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng),可采用_的方法進(jìn)行計(jì)數(shù),以時(shí)間為橫坐標(biāo),以_為縱坐標(biāo),繪制生長曲線。(6)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行_處理后,才能倒掉。專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1D2.C3C接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要通過火焰,其目的是為了防止雜菌污染,將接種環(huán)先冷卻再接種可以避免高溫燙死菌種,因此A、B、D都是正確的。在平板上劃線時(shí),要?jiǎng)澣廖鍡l平行線,而不是隨機(jī)劃線,因此C選項(xiàng)錯(cuò)誤。4C5D培
13、養(yǎng)基是微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)不同,可將培養(yǎng)基分成固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基不加凝固劑。6A由于酒、奶等食品中的某些成分在高溫下易被破壞,不易采取高溫滅菌法,雖然巴氏消毒法不能殺滅芽孢等耐高溫細(xì)菌,但由于奶、酒等的污染并不嚴(yán)重,巴氏消毒法還是能達(dá)到消毒要求的。7C培養(yǎng)基冷卻至50左右,在酒精燈火焰附近倒平板;將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞;用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是打開皿蓋;等待平板冷卻510 min,將平板倒過來放置,使皿蓋在下,皿底在上。改正后的步驟為倒平板的具體操作。8
14、D接種過程中要防止外來雜菌的入侵,左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙,右手將接種環(huán)在火焰上滅菌,冷卻后沾取少許稀泥漿,在培養(yǎng)基的表面輕點(diǎn),否則用未冷卻的接種環(huán)沾取稀泥漿會(huì)殺滅菌種。9A不同物理形態(tài)的培養(yǎng)基其作用不一樣,固體培養(yǎng)基用于菌種的分離、鑒定、菌落計(jì)數(shù)、菌種保藏等;液體培養(yǎng)基可用于獲得大量菌體。10C11A每克樣品中的活菌數(shù)(800.1)106。12A纖維素酶屬于復(fù)合酶,至少包含C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種組分。其中C1酶和Cx酶使纖維素分解成纖維二糖。13B反芻動(dòng)物的瘤胃中缺氧,其中分解纖維素的微生物的代謝類型最可能是異養(yǎng)厭氧型。14C要把纖維素分解菌從土壤中分離出來,就要選擇使纖維素分解菌能
15、生存,但其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),其選擇條件是以纖維素粉作為唯一碳源,在該培養(yǎng)基上,只有能分解纖維素的細(xì)菌能夠生存,其他微生物因不能利用纖維素而不能生存。15D纖維素分解菌是異養(yǎng)型微生物,其碳源為有機(jī)物,如纖維素等。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物,其碳源物質(zhì)為CO2,因此A錯(cuò)誤;纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需加入維生素做生長因子,才能正常生長,因此B錯(cuò)誤;培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水,將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象,對(duì)生長不利,因此C錯(cuò)誤。16B17.C18A選擇培養(yǎng)是增加纖維素分解菌的濃度,所用培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,以便于下一步的稀釋操作。19D能合成脲酶的微生物可以分
16、解尿素,所以氮源為尿素;而這種微生物為異養(yǎng)生物,所以其碳源為含碳有機(jī)物葡萄糖。20D本題考查的知識(shí)有:各種微生物的代謝類型,微生物所需的能源、碳源和氮源的不同。解答此題時(shí)應(yīng)明確:硝化細(xì)菌、乳酸菌屬于細(xì)菌,酵母菌屬于真菌,衣藻屬于真核生物。微生物所需的能源、碳源、氮源因其同化作用類型的不同而不同。21(1)五自養(yǎng)型(2)不含氮的有機(jī)物(3)不能必需礦質(zhì)元素種類不全(4)纖維素粉剛果紅紅色解析(1)分析該培養(yǎng)基中的營養(yǎng)要素,NH4HCO3可提供碳源和氮源,可提供無機(jī)鹽,提供生長因子,還有H2O,所以培養(yǎng)基中含有五類營養(yǎng)物質(zhì),其中不含有機(jī)碳源,可培養(yǎng)的微生物的同化類型為自養(yǎng)型。(2)要選擇培養(yǎng)獨(dú)立生
17、存的固氮微生物,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加氮源,所以應(yīng)把NH4HCO3除去,而一般的固氮微生物同化類型為異養(yǎng)型,所以培養(yǎng)基中應(yīng)添加不含氮的有機(jī)物。(3)用于植物無土栽培的營養(yǎng)液應(yīng)為完全營養(yǎng)液,即包含植物生長所必需的所有大量及微量元素,而本培養(yǎng)液中礦質(zhì)元素不全,如缺乏Mg、Zn、Cu、Mn、Mo、B等,所以不能用于無土栽培。(4)若培養(yǎng)纖維素分解菌,最好加入纖維素粉;檢測纖維素分解菌是否存在常用剛果紅染色法,所以應(yīng)在培養(yǎng)基中加入剛果紅,形成紅色復(fù)合物。22(1)第一步:取樣工具應(yīng)提前滅菌;不能用蒸餾水,應(yīng)用無菌水;土壤取回后的操作應(yīng)在火焰旁進(jìn)行。第二步:培養(yǎng)基制備好后應(yīng)滅菌。第三步:接種應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行
18、,應(yīng)用滅菌的吸管或移液器取稀釋液(2)一是設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn):再配制一組無纖維素粉的培養(yǎng)基,接種該土樣培養(yǎng)觀察。二是最后要對(duì)菌落進(jìn)行鑒定:用剛果紅染色法鑒定菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈解析從土壤中分離微生物一般的流程是:土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋菌懸液涂布平板挑選出單個(gè)菌落。該實(shí)驗(yàn)步驟沒有問題,但在前三步操作中都沒有進(jìn)行無菌操作,因而無法說明分解纖維素的微生物一定來自于土壤。要想增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力,設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)必不可少。另外,該實(shí)驗(yàn)應(yīng)再加一步該微生物的鑒定步驟。23(1)苯酚A稀釋涂布平板(2)的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源,培養(yǎng)基中加入苯酚作為碳源稀釋涂布平板法或平板劃線防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(3)用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株,一定時(shí)間后,測定培養(yǎng)液中苯酚的含量(4)培養(yǎng)基滅菌,接種環(huán)境滅菌,接種過程無菌操作解析根據(jù)菌株的特點(diǎn)和篩選要求,在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)
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