外源表達產(chǎn)物的分離純化

1、10 外源基因表達產(chǎn)物的分離純化,針對不同的產(chǎn)物表達形式采取不同的策略,采用分泌型戰(zhàn)略表達重組蛋白，通常體積大、濃度低，因此應(yīng)在,純化之前采用沉淀或超濾等方法先進行濃縮處理,采用包涵體型戰(zhàn)略表達重組蛋白，應(yīng)先離心回收包涵體,采用融合型戰(zhàn)略表達重組蛋白，一般是胞內(nèi)可溶性的，擬首先選,用親和層析進行純化,表達在細(xì)胞膜和細(xì)胞壁之間的間隙中的蛋白質(zhì)，應(yīng)用低濃度的溶,菌酶處理，然后再用滲透壓休克法釋放重組蛋白,針對不同性質(zhì)的重組蛋白選擇不同的層析類型,等電點處于極端區(qū)域（pI5 或 pI8）的重組蛋白應(yīng)首選離子,交換法進行分離，這樣很容易除去幾乎所有的雜蛋白,重組蛋白特異性的配體、底物、抗體、糖鏈等都是

2、首選親合層析,純化方法的重要條件，原則是它們與目標(biāo)蛋白之間的解離常數(shù)應(yīng)在合,適的范圍內(nèi)（10-8- 10-4 mol / L,疏水層析和反相層析是根據(jù)蛋白質(zhì)的疏水性差異進行分離的,凝膠過濾層析是根據(jù)蛋白的分子量和體積差異進行分離的,徑向?qū)游鍪墙陙戆l(fā)展起來的集層析分離和膜分離于一體的一種,復(fù)合技術(shù)，在流量、負(fù)荷量等參數(shù)方面顯示出極大的優(yōu)越性,多種分離純化技術(shù)的聯(lián)合運用,在進行重組蛋白的純化時，通常需要綜合使用多種技術(shù)，一般來,說，在選擇分離純化方法時應(yīng)遵循下列原則,應(yīng)選擇不同分離純化機理的方法聯(lián)合使用,應(yīng)首先選擇能除去含量最多雜質(zhì)的方法,應(yīng)盡量選擇高效的分離方法,應(yīng)將最費時、成本最高的分離純化

3、方法安排在最后階段,合適分離純化介質(zhì)的選擇,常用的蛋白質(zhì)分離純化介質(zhì)有Sephadex和Seperose。理想的分,離純化介質(zhì)應(yīng)具有下列性質(zhì),對目標(biāo)蛋白具有較高的分離效率,對目標(biāo)蛋白不會造成變性,化學(xué)性能和機械性能穩(wěn)定，重復(fù)性好,價格低廉,分離純化過程的規(guī)?；?蛋白質(zhì)分離純化的實驗室工藝、技術(shù)、方法在大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化過程,未必合適，如,實驗室方法在工程上可能難以實現(xiàn)（超聲波破細(xì)胞壁,實驗室方法在大規(guī)模生產(chǎn)中可能成本過高（超速離心,因此，在很多情況下，實驗室的技術(shù)路線不等于生產(chǎn)工藝,B 離子交換層析,10 外源基因表達產(chǎn)物的分離純化,離子交換層析的基本原理,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),離子交換層析的基本

4、操作,離子交換介質(zhì)的選擇原則,離子交換現(xiàn)象,十八世紀(jì)中期由Thompson所發(fā)現(xiàn)，后來J.Thomas Way全面研究。 1935年B.A.Adams和Holmes研究合成了具有離子交換功能的高分子材料，第一批離子交換樹脂。隨后幾年里又發(fā)展了多種類型離子交換樹脂并在水處理方面得到應(yīng)用。 離子交換樹脂的大發(fā)展主要是在二次世界大戰(zhàn)以后,離子交換樹脂的發(fā)展,二戰(zhàn)后美國和英國一些公司廣泛進行了合成離子交換樹脂的研究工作，G.F.達萊利奧成功地合成了聚苯乙烯系、聚丙烯酸系陽離子交換樹脂，這時，離子交換樹脂已經(jīng)成為一類新型高分子材料，人們認(rèn)識到，用它可以比較簡單地達到離子性物質(zhì)的分離、純化和濃縮的目的，而

5、不求助于結(jié)晶和消耗熱能的蒸發(fā)工藝,離子交換樹脂的發(fā)展,六十年代、七十年代，離子交換樹脂的發(fā)展又有了重要突破，新的聚合方法的發(fā)明和一些大公司的加盟如美國的(Rohm and Hass)和德國的(Bayer)等為離子交換樹脂的廣泛應(yīng)用開辟了新的前景。離子交換長期以來應(yīng)用于水處理和金屬的回收。在生物工業(yè)中，主要應(yīng)用在抗生素、氨基酸、有機酸等小分子的提取分離上。近年來在蛋白質(zhì)等生物大分子的分離提取也有應(yīng)用,1942年畢業(yè)于西南聯(lián)合大學(xué) 1952年獲美國印第安納大學(xué)博士學(xué)位南開大學(xué)教授 1980年當(dāng)選為中國科學(xué)院院士 開創(chuàng)并發(fā)展了我國的離子交換樹脂和吸附工業(yè)，發(fā)明了大孔離子交換樹脂，系統(tǒng)研究了新型離子交

6、換樹脂和大孔新型吸附樹脂的合成、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及應(yīng)用,離子交換樹脂之父”何炳林,離子交換層析的基本原理,離子交換層析是以離子交換劑為固定相，以特定的含離子溶液為流動相，利用離子交換劑對待分離的各種離子結(jié)合力的差異，而將混合物中不同離子進行分離的層析技術(shù),離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),離子交換劑亦稱離子交換介質(zhì)，通常是一種不溶性高分子化合物,如樹脂，纖維素，葡聚糖，醇脂糖等,離子交換劑中所含的可解離基團在水溶液中能與溶液中的其它陽,離子交換劑的基本性能,離子或陰離子起交換作用,如果有兩種以上的成分被吸附在離子交換劑上，則在用洗脫液洗,脫時，各成分被洗脫的可能性取決于各自反應(yīng)的平衡常數(shù),吸附在離子交換劑上的

7、蛋白質(zhì)可通過改變pH使吸附的蛋白質(zhì)失去,電荷而解離下來,不同蛋白質(zhì)與離子交換劑之間形成離子鍵數(shù)目不同，即親和力大,小有差異，因此只要選擇適當(dāng)?shù)南疵摋l件便可將混合物中的成分逐個,洗脫下來，達到分離純化的目的,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),陰離子交換劑：強堿型和弱堿型,可電離的基團磺酸基（-SO3H,離子交換劑的分類,磷酸基（-PO3H2,羧酸基（-COOH,酚羥基（-OH,陽離子交換劑：強酸型和弱酸型,可電離的基團伯胺基（-NH2,仲胺基（-NHCH3,叔胺基（-N(CH3)2,季胺基（-N+(CH3) 3,a)陽離子交換樹脂,交換前,交換達到平衡后,b）陰離子交換樹脂,交換前,交換達到平衡后,離子交

8、換介質(zhì)的基本性質(zhì),離子交換劑的分類,強離子交換劑的電離率基本不受pH值影響，離子交換作用的pH范圍寬,弱離子交換劑的電離率受pH影響很大，離子交換作用的pH范圍小,弱酸性陽離子交換劑在pH值降低時，其電離率逐漸降低，離子,交換能力逐漸減弱,弱堿性陰離子交換劑在pH值升高時，其電離率逐漸降低，離子,交換能力逐漸減弱,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),常用的離子交換劑,離子交換樹脂,最常見的離子交換樹脂是含有酸性或堿性基團的人工合成的聚苯,乙烯-二乙烯苯不溶性高分子化合物,離子交換樹脂的優(yōu)點是：流速快，對小分子物質(zhì)的交換容量大,因而適合用于氨基酸、核苷酸等小分子生化物質(zhì)的分離純化,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),常

9、用的離子交換劑,離子交換纖維素,離子交換纖維素是攜帶功能基團纖維素衍生物，具有松散的親水,性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)以及較大的表面積，大分子可以自由通過，因而對生物大,分子（如蛋白質(zhì)）的交換容量比離子交換樹脂大,陽離子型離子交換纖維素包括羥甲基纖維素（CM纖維素）等,維素,陰離子型離子交換纖維素包括二乙基氨基乙基纖維素（DEAE纖,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),常用的離子交換劑,離子交換葡聚糖,離子交換葡聚糖是葡聚糖經(jīng)環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)后形成的具有多孔三,維空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和離子交換功能基團的多糖衍生物（Sephadex G,Sephadex的優(yōu)點如下,親水性強、不會引起生物分子的變性和失活，母鏈對蛋白質(zhì)、核,酸及其它生物

10、分子的非特異性吸附能力小,電離基團在母體上取代程度高，交換容量大，裝柱方便，流速快,既有離子交換作用，又有分子篩效應(yīng),因而Sephadex是一類廣泛應(yīng)用的色譜分離介質(zhì),離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),常用的離子交換劑,離子交換葡聚糖,常用的離子交換葡聚糖包括,陽離子交換劑CM-Sephadex C-25，CM-Sephadex C-50,Sephadex C-25，Sephadex C-50,陰離子交換劑DEAE-Sephadex A-25，DEAE-Sephadex A-50,QAE-Sephadex A-25，QAE-Sephadex A-50,離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì),常用的離子交換劑,離子交換瓊

11、脂糖,離子交換瓊脂糖是攜帶DEAE或CM基團的Sepharose CL-6B,DEAE-Sepharose（陰離子型）和CM-Sepharose（陽離子型,尤其是介質(zhì)受pH和離子強度的影響所引起的膨脹和收縮效應(yīng)較小，因,的離子交換介質(zhì)具有硬度大、性質(zhì)穩(wěn)定，流速好，分離能力強等優(yōu)點,此具有穩(wěn)定的外形體積,離子交換介質(zhì)的選擇原則,一般而言,酸性物質(zhì)用陰離子交換劑分離,氨基酸、核苷酸、蛋白質(zhì)等兩性電解質(zhì)，可根據(jù)其pI值及離子化,堿性物質(zhì)用陽離子交換劑分離,曲線來選擇,離子交換介質(zhì)的選擇原則,1,2,3,4,6,7,8,9,10,5,pH,蛋 白 質(zhì) 凈 電 荷,等電點,吸附陰離子交換劑,吸附陽離子交

12、換劑,pH pI（,對pI=5的某酸性蛋白質(zhì),在pH5.5-9.0的范圍內(nèi),當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)為陰離子時,應(yīng)首選DEAE纖維素,在pH3.5-4.5的范圍內(nèi),當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)為陽離子時,應(yīng)首選CM纖維素,離子交換層析的基本操作,層析柱平衡,平衡緩沖液的用量至少為柱體積的 2 倍,平衡緩沖液的流速可略高于正常操作流速,平衡終點以流出液的離子濃度、導(dǎo)電性、pH值與緩沖液一致,為準(zhǔn)，其中pH值最重要,離子交換層析的基本操作,樣品進柱,為了達到滿意的分離效果，進樣量一般為介質(zhì)交換容量的10-20,為了避免進樣溶液中的離子強度過高，樣品濃度不宜太高,交換容量：離子交換劑中全部可交換的離子或功能基團的總數(shù),離子交換層析的基

13、本操作,樣品洗脫,恒定洗脫,階段洗脫,梯度洗脫,10,20,30,40,50,60,70,80,90,分子濃度,離子強度,pH值,Starting conditions,Adsorptions on sample substances,Start of desorption,End of desorption,regenerations,帶有相反電荷的大分子：在吸附階段可與擔(dān)體上的離子基團結(jié)合,帶有相反電荷的小分子：在洗脫階段與吸附的大分子競爭，頂替出來,功能基團,骨架,活性離子,擔(dān)體：接有離子基團，擔(dān)體本身應(yīng)該是惰性的,離子基團：連接在擔(dān)體上，為層析劑的活性基團，可與相反離子結(jié)合,C 凝膠層

14、析,10 外源基因表達產(chǎn)物的分離純化,凝膠層析的基本原理,凝膠介質(zhì)的基本性質(zhì),凝膠層析的基本操作,凝膠介質(zhì)的選用原則,凝膠層析的基本原理,凝膠層析是利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠作為固定相，對混合,物中各組份按分子大小進行分離的層析技術(shù)，又稱為分子篩,分子直徑比凝膠最大孔隙直徑大的，會被全部排阻在凝膠顆粒之,外，即全排阻；兩種全排阻的分子即使大小不同，也不能分開；它們,下行速度快,分子直徑比凝膠最小孔隙直徑小的，能進入凝膠顆粒的全部孔隙,即使大小不同也不能分開；它們的下行速度慢,鑒于上述原理，凝膠層析可用于重組蛋白溶液脫鹽、分子量測定,以及分離純化,凝膠介質(zhì)的基本性質(zhì),葡聚糖凝膠的種類有G10、

15、G15、G25、G50、G75、G100、G,150、G200，G50即表示每克干凝膠的吸水量為5.0毫升,葡聚糖凝膠對堿比較穩(wěn)定，在酸性環(huán)境中其糖苷鍵易水解,濕態(tài)的葡聚糖可加熱到110，干的則能耐受120高溫,葡聚糖凝膠（ Sephadex,Sephadex LH是羥丙基化的Sephadex，這類層析介質(zhì)的流動相既,可使用緩沖水溶液，也可使用極性有機溶劑，因此適用于非水溶性溶,質(zhì)的凝膠過濾,凝膠介質(zhì)的基本性質(zhì),瓊脂糖凝膠是由瓊脂中分離出來的天然凝膠，常見的有Sepharose,Sepharose 2B、4B、6B，數(shù)字代表干膠的百分比 ）和Bio-Gel-A等,Bio-Gel-A 0.5M、

16、1.5M、5M、15M、50M、150M，數(shù)字X106代表排,阻限度,瓊脂糖凝膠,當(dāng)溫度高于50時瓊脂糖凝膠便融化，只能在較低的溫度下使用,瓊脂糖凝膠是一種大孔凝膠，因而適合于分離分子量較大的生物大,分子物質(zhì)（如蛋白質(zhì)和DNA,Sepharose CL是二溴丙醇交聯(lián)的瓊脂糖，其孔徑大小和分離范圍,與普通瓊脂糖一樣，但熱和化學(xué)穩(wěn)定性增加，能高溫消毒,凝膠介質(zhì)的基本性質(zhì),聚丙烯酰胺凝膠是一種以丙烯酰胺為單位由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián),而成的人工合成凝膠，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號的凝膠，交,聯(lián)劑越多，孔隙越小,聚丙烯酰胺凝膠的商品名為Bio-Gel，型號從P-2至P-300共10種,聚丙烯酰胺凝膠,

17、數(shù)字X1000就相當(dāng)于該凝膠的排阻限度,凝膠介質(zhì)的選用原則,將樣品中的大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)分開，稱為組別分離，其分,離策略是使高分子物質(zhì)完全被排阻，小分子物質(zhì)完全滲入凝膠內(nèi),組別分離一般選用Sephadex G-25或G-50，對于小肽和低分子量,的物質(zhì)（分子量范圍1000-5000）的脫鹽可選用Sephadex G-10、G,組別分離,15、Bio-Gel P-2或P-4,凝膠介質(zhì)的選用原則,將樣品中一些分子量比較接近的物質(zhì)分開，這種分離叫分級分離,該策略是使高分子物質(zhì)完全被排阻，小分子物質(zhì)完全滲入凝膠內(nèi),分級分離一般選用排阻限度略大于樣品中最高分子量物質(zhì)的凝膠,在層析過程中，樣品中各組份

18、均能不同程度地深入到凝膠內(nèi)部，但由,分級分離,于深入凝膠空隙程度上的差異，最后得到分離,凝膠層析的基本操作,平衡溶液的流速應(yīng)低于層析時需要的流速,注意凝膠的斷層和氣泡,層析柱平衡,操作壓控制,平衡和洗脫時應(yīng)維持流速恒定,恒定的操作壓是恒流的先決條件,凝膠層析的基本操作,上柱樣品溶液的體積根據(jù)分離要求來確定,進樣體積,進行組別分離時，樣品溶液最大可為柱體積的10,進行分級分離時，樣品溶液的體積要小，使樣品層盡可能,窄，這樣洗脫出的峰形好,D 親和層析,10 外源基因表達產(chǎn)物的分離純化,親和層析的基本概念,親和層析載體的性質(zhì)與選擇,親和層析配基的性質(zhì)與選擇,親和層析的基本操作,親和層析的基本概念,

19、親和層析是利用待分離物質(zhì)與其特異性配體之間特異性的親和力,進行分離的一類特殊的層析技術(shù)，它有如下特點,純化過程簡單、迅速，且分離效率高,特別適用于分離純化一些含量低、穩(wěn)定性差的生物大分子,親和層析的基本特點,純化倍數(shù)大，產(chǎn)物純度高,必須針對某一分離對象制備專一的配基及尋求穩(wěn)定的層析條件,因此應(yīng)用范圍受到一定的限制,親和層析的基本概念,抗原與抗體,DNA與互補DNA或RNA（cDNA、mRNA,酶與其底物、競爭性抑制劑、輔酶因子,激素或藥物與其受體,具有特異性親和作用的生物分子,維生素于其特異性結(jié)合蛋白,糖蛋白與其相應(yīng)的植物凝集素,親和層析的基本概念,親和的一對分子中的一方以共價鍵形式與不溶性載

20、體相連,作為固定相吸附劑,當(dāng)含有混合組份的樣品（流動相）通過此固定相時，只有,和固定相分子有特異親和力的物質(zhì)，才能被固定相吸附結(jié),親和層析的基本原理,合，其它沒有親和力的無關(guān)組份就隨流動相流出,然后改變流動組成份，將結(jié)合的親和物洗脫下來,親和層析載體的性質(zhì)與選擇,具有多孔的立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，能使被親和吸附的大分子自由通過,具有良好機械性能的均勻珠狀顆粒，具有良好的流速,親和層析載體的選擇,具有惰性，盡量減少非專一性吸附,具有相當(dāng)量的易活化的基團，在溫和的條件下能與配基共價合,偶聯(lián),在偶聯(lián)、吸附和洗脫時，有較好的物理化學(xué)穩(wěn)定性,親和層析載體的性質(zhì)與選擇,纖維素,葡聚糖凝膠,常用的親和層析載體,瓊脂糖

21、凝膠,聚丙烯酰胺凝膠,其它新型載體,親和層析配基的性質(zhì)與選擇,純化對象和配基之間必須有較強的親和力,但親和力太高也是有害的，因為在解離配基復(fù)合物時所需的,親和層析配基的選擇,條件就要強烈，這樣可能使生物分子變性,配基必須具有適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)基團，這種基團不參與配基與生物,分子之間特異結(jié)合，但可用于和載體相連，同時又不影響配,基與生物分子之間的親和力,親和層析配基的性質(zhì)與選擇,酸酐法,N-取代羥基琥珀酰亞胺法,配基的偶聯(lián),疊氮化作用,還原性烷基化合物（西夫堿）的形成,親和層析的基本操作,通常采用改變pH、離子強度、離子種類或者溫度等使與固定配,泛的是改變?nèi)芤旱碾x子強度,非專一性洗脫,化的配基對相應(yīng)的生

22、物大分子的親和力降低,基結(jié)合的生物大分子的構(gòu)象發(fā)生變化，降低其親和力，但使用較廣,非專一性洗脫劑的作用并不是使被吸附的生物大分子的構(gòu)象發(fā),生變化，而是洗脫劑中的某一組分與固定配基形成復(fù)合物，使固定,親和層析的基本操作,使用特異的配基作為洗脫劑,溶液為洗脫劑，通過與親和配基或目標(biāo)產(chǎn)物的競爭性結(jié)合來洗,專一性洗脫,使用含有與親和配基或目標(biāo)產(chǎn)物具有親和作用的小分子化合物,脫目標(biāo)產(chǎn)物,親和層析的基本操作,親和雙方吸附能力很強，可以用專一的化學(xué)方法裂解配基與載,性洗脫法也是一種非特異性洗脫方法,特殊性洗脫,體的連接鍵，獲得的配基-蛋白絡(luò)合物后，再除去配基。實際上特殊,E 膜分離,10 外源基因表達產(chǎn)物的

23、分離純化,膜分離的基本原理,分離膜的主要性能,影響膜分離的因素,概述 近20年發(fā)展起來的膜分離技術(shù)，已廣泛用于生物工程、食品、醫(yī)藥、化工等工業(yè)生產(chǎn)及水處理等各個領(lǐng)域；膜分離技術(shù)是用半透膜作為選擇障礙層，允許某些組分透過而保留混合物中其它組分，從而達到分離目的的技術(shù)。 膜分離技術(shù)它具有設(shè)備簡單、操作方便、無相變、無化學(xué)變化、處理效率高和節(jié)省能量等優(yōu)點，已作為一種單元操作日益受到人們極大重視,膜分離 (membrane separation,概述 1925年以來，差不多每十年就有一項新的膜過程在工業(yè)上得到應(yīng)用 30年代 微孔過濾 40年代 滲析 50年代 電滲析 60年代 反滲透 70年代 超濾

24、80年代 氣體分離 90年代 滲透汽化 現(xiàn)代 EDI技術(shù),膜分離過程 (membrane separation,概述 1960年Loeb和Sourirajan制備出第一張具有高透水性和高脫鹽率的不對稱反滲透膜，是膜分離技術(shù)發(fā)展的一個里程碑。自此以后，不僅在膜材料范圍上有了極大擴展，而且在制膜技術(shù)、組件結(jié)構(gòu)及設(shè)備研制方面也取得了重大進展,膜分離過程 (membrane separation,膜分離的基本原理,膜分離是利用膜的選擇性，以膜的兩側(cè)存在一定量的能量差作為,化，它是一種物質(zhì)被透過或被截留的過程，近似于篩分過程，依據(jù)濾,膜分離的基本定義,推動力，由于溶液中各組分透過膜的遷移速率不同而實現(xiàn)的

25、分離,膜分離是利用具有一定選擇性透過特性的介質(zhì)進行物質(zhì)的分離純,膜孔徑和物質(zhì)粒子的大小而達到物質(zhì)分離的目的,膜分離的基本原理,分子級別的分離過程，分離效率高,膜分離的特點,不涉及相變，能耗低，運行成本低,膜分離為單純物理變化，無二次污染,膜分離的基本原理,分離膜的選擇通透性：是物質(zhì)分離的第一機制,膜分離過程的重要參數(shù),膜分離過程的推動力：靜壓力差、濃度差、電位差,物質(zhì)通過分離膜的速度：是物質(zhì)分離的第二機制,膜分離的基本原理,根據(jù)分離膜膜內(nèi)平均孔徑、推動力和傳遞機制不同，膜分離可,膜分離的主要類型,反滲透（Reverse osmosis RO,透析（Dialysis DS,分成下列幾類,超濾（U

26、itrfiltration UF,微濾（Microfitration MF,電滲析（Electrodialysis EI,膜分離的基本原理,透析（Dialysis DS,膜分離的主要類型,透析過程使用一種只透過溶劑而不透過溶質(zhì)的膜，一般稱為理,當(dāng)把溶劑和溶液（或把兩種不同濃度的溶液）分別置于此兩側(cè),想的半透膜,時，純?nèi)軇⒆匀淮┻^半透膜而自發(fā)地向溶液（或從低濃度向高濃,度）一側(cè)流動，這種現(xiàn)象叫滲透,膜分離的基本原理,反滲透（Reverse osmosis RO,膜分離的主要類型,反滲透其主要原理是在高于溶液滲透壓的作用下，使其它物質(zhì),溶解鹽類、膠體、微生物、熱源、有機物等，因而主要用于海水,不

27、能透過半透膜，而將這些物質(zhì)與水分離開來，有效地去除水中的,苦咸水淡化和產(chǎn)純水制備等方面,膜分離的基本原理,超濾（Uitrfiltration UF,膜分離的主要類型,超濾是一種根據(jù)高分子溶質(zhì)之間或高分子與小分子溶質(zhì)之間相,相應(yīng)的截留分子量范圍從500到100萬左右,對分子質(zhì)量的差別進行分離的方法。篩分孔徑范圍1 nm - 0.1 mm,分離膜的基本性能,分離膜是膜分離技術(shù)的核心，分離膜的性能主要包括分離透過,性、耐酸堿性、抗氧化性、抗微生物降解性、親水性、疏水性、電,性能和化學(xué)物理性能兩部分。其中，化學(xué)物理性能主要涉及到耐熱,性能、毒性、機械強度等,膜的化學(xué)物理性能,分離膜的基本性能,微濾膜0.025 - 14 mm,反滲透膜0.000