酵母菌培養(yǎng)基優(yōu)化

1、酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二、實(shí)驗(yàn)原理 三、實(shí)驗(yàn)器材 四、實(shí)驗(yàn)步驟 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法 2.熟悉用正交試驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基的方法 3.學(xué)習(xí)比濁法測(cè)定發(fā)酵液菌濃的方法,實(shí)驗(yàn)原理,一、培養(yǎng)基的配制 1.確定培養(yǎng)基的基本組成 2.確定所用原材料的種類 3.確定所用原材料的濃度配比關(guān)系,二、培養(yǎng)基優(yōu)化原材料種類和濃度配比優(yōu)化,1.單因素法(只是考慮單一變量對(duì)結(jié)果的影響 ) 2.正交試驗(yàn)法 3.均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)(只考慮試驗(yàn)點(diǎn)在試驗(yàn)范圍內(nèi)均勻散布的一種試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,試驗(yàn)次數(shù)少,三、正交試驗(yàn)法,1.概念 利用已經(jīng)設(shè)計(jì)好的表格-正交表-來(lái)安排試驗(yàn)并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析的一種方法

2、。 它是從全面試驗(yàn)中挑選出部分有代表性的點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)，這些有代表性的點(diǎn)具備了“均勻分散，齊整可比”的特點(diǎn)，是一種高效率、快速、經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,2.基本工具正交表 記號(hào)：Ln（tm） L：正交表的符號(hào) n：表的行數(shù)（可安排試驗(yàn)的次數(shù)） t：表中的字碼數(shù)（水平數(shù)） m：表的列數(shù)（最多可安排因素個(gè)數(shù)） L8(27) L9(34) L16(45,3.正交表的特點(diǎn) 試驗(yàn)點(diǎn)分布均勻、整齊可比 任何一列中各字碼（水平）都出現(xiàn)，且出現(xiàn)的次數(shù)相等 任何兩列中各橫行組成的數(shù)字對(duì)，包含著所有可能的數(shù)字對(duì)，且各種數(shù)字對(duì)出現(xiàn)的次數(shù)相等,四、比濁法測(cè)定發(fā)酵液菌濃,細(xì)菌培養(yǎng)物在生長(zhǎng)過(guò)程中，由于原生質(zhì)含量的增加，會(huì)引起培養(yǎng)

3、物混濁度的增高。細(xì)菌懸液的混濁度和透光度成反比、與光密度成正比，透光度或光密度可借助光電比濁計(jì)精確測(cè)出，因此可用光電比濁計(jì)測(cè)定細(xì)胞懸液的光密度（OD值），表示該菌在特定實(shí)驗(yàn)條件下的細(xì)菌相對(duì)數(shù)目，進(jìn)而反映出其相對(duì)生長(zhǎng)量,實(shí)驗(yàn)器材,移液管、100ml錐形瓶、光電比濁計(jì)、滅菌鍋、恒溫?fù)u床 葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4 酵母菌菌液,實(shí)驗(yàn)步驟,一、培養(yǎng)基的配制,1.將葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作為培養(yǎng)基的 主要影響因素，每一因素設(shè)定3個(gè)水平，進(jìn)行四因素 三水平的正交試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下表,2.按下表配制9組培養(yǎng)基于100ml錐形瓶中，每瓶25ml,錐形瓶培養(yǎng)基：標(biāo)記，加棉塞、報(bào)紙包扎

4、。 1ml移液管2支 121，滅菌20min,二、滅菌,將菌種搖勻后用無(wú)菌移液管吸取0.5ml懸液，接到每一組培養(yǎng)基中（接種量要完全一樣,三、接種,四、發(fā)酵,將三角瓶置于恒溫?fù)u床中，30，120rpm培養(yǎng)24h,五、比濁法測(cè)定各發(fā)酵液OD值,取下?lián)u瓶，以空白培養(yǎng)基為對(duì)照，于560nm處測(cè)定各搖瓶中發(fā)酵液的OD值，填入表中。 注意：如果OD值過(guò)大，需將發(fā)酵液作一定稀釋后再測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,填寫正交實(shí)驗(yàn)表，分析數(shù)據(jù)，確定最優(yōu)培養(yǎng)基配方,1）方法一：直接比較 (2)方法二 :直觀分析 直觀分析法是通過(guò)對(duì)每一因素的平均極差來(lái)分析問(wèn)題 所謂極差就是平均效果中最大值和最小值的差。有了極差，就可以找到影響指標(biāo)的主要因素，并可以幫助我們找到最佳因素水平組合。 極差的大小反應(yīng)在所選擇的因素水平范圍內(nèi)該因素對(duì)測(cè)定結(jié)果影響的程度。極差大的因素在所選擇