免化診斷技術進展

1、免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫化學診斷技術的進展,Automated Chemiluminescence System,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,利用抗原抗體反應和分離技術測定(量)與疾病有關的化學分子。,免疫化學診斷技術,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫同位素標記測定法 化學發(fā)光法 酶聯(lián)化學發(fā)光 偏振熒光 時間分辨熒光 電化學發(fā)光 直接化學發(fā)光,免疫化學診斷技術的分類,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫同位素標記測定法,放射免疫法已有30多年歷史。比較其它傳統(tǒng)的方法，它有特異性好，靈敏度高，準確

2、性好，可靠性強等特點，故在臨床科研上廣泛使用。,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫同位素標記法之局限,半衰期短 ； 試劑批內(nèi)與批間差異大； 反應過程長； 靈敏度有限； 放射性廢物的處理；,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫化學發(fā)光法,酶聯(lián)化學發(fā)光 偏振熒光 時間分辨熒光 電化學發(fā)光 直接化學發(fā)光,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫化學發(fā)光法簡介 - 酶聯(lián)化學發(fā)光 (EMCLIA),原理： 抗體包被的塑料固相 加入待測樣本 - 抗原 加入堿性磷酸酶標記的抗體 洗 加入底物 - 4-Mup, 發(fā)光 產(chǎn)品： 雅培Axsym, 梅里埃V

3、idas, 強生Vitros, DPC Immulite 2000, 羅氏ES300,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,原理： 標記在小分子抗原上的熒光素經(jīng)485nm的激發(fā)偏振光照射後，發(fā)出光子，經(jīng)過偏振儀形成525550nm的偏振光； 這一偏振光的強度與熒光素受激發(fā)時分子轉(zhuǎn)動的速度呈反比，游離的熒光素標記抗原，分子小，轉(zhuǎn)動速度快，激發(fā)後發(fā)射的光子散向四面八方，因此偏振光信號弱； 在測定過程中待測抗原小分子，熒光標記抗原小分子和特導性沆體大分子同時加入到一反應杯中，待測抗原越少，與抗體競爭結合的量越少，而熒光標記抗原與抗體結合就越多，而熒光標記的小分子抗原與大分子抗體結合後，

4、其分子的轉(zhuǎn)動速度減慢，由此熒光偏振信號強。 產(chǎn)品：雅培Axsym,免疫化學發(fā)光法簡介 - 偏振熒光 (FPIA),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,原理： 標記物為三價稀土離子如：銪 (Eu3+)、釤(Sm3+)、鏑(Dy3+)和鋱(Tb3+)等，它們可利用具有雙功能基團結構的螫合劑，在水溶液中與抗原分子以共軛雙鍵結合，形成稀土離子螫合劑抗原結合物。 當標記稀土離子的抗原與待測抗原共同與抗體競爭結合，形成抗原抗體免疫復合物，其中含有標記稀土離子，然後利用時間分辨熒光分析儀，可測出復合物中稀土離子發(fā)射熒光的強度，以此確定待測抗原的含量。 產(chǎn)品： EG&G的DELFIA,免疫化學

5、發(fā)光法簡介 - 時間分辨熒光 (TRFIA),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,原理： 先將特異性抗體包被在磁性微珠。另外將發(fā)光劑Ru (bpy)32+標記在特異性抗體上。 將待測樣本與包被抗體的磁性微珠和發(fā)光劑標記的抗體共同溫育，形成磁性微珠包被抗體抗原發(fā)光劑標記杭體復合物。 加入TPA緩沖液和TPA在電極表面進行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學發(fā)光。 產(chǎn)品： 羅氏Elecsys,免疫化學發(fā)光法簡介 - 電化學發(fā)光 (ECLIA),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫化學發(fā)光法簡介 - 直接化學發(fā)光 (CLIA),原理：利用化學發(fā)光技術和磁性微粒子分離技術相結合的測

6、定方法。以丫啶酯為發(fā)光的標記物，固相載體為極細小的磁性顆粒。其測定原理與放射免疫和聯(lián)免中的雙抗體夾心法和競爭結合法相似。 單克隆抗體或抗原包被磁性微粒 抗原抗體結合，洗滌分離 加入氧化劑發(fā)光：經(jīng)過加入氧化劑（H2O2）和 pH 糾正液（NaOH）使成鹼性，這時丫啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光，集光器和光電倍增管接收。記錄5秒鐘內(nèi)所產(chǎn)生的光子能。 產(chǎn)品： 拜耳ACS:180SE, Advia Centaur, Advia IMS,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,全 自 動 化 學 發(fā) 光 系 統(tǒng) 拜耳 ACS (Automated Chemiluminescence S

7、ystem),免疫化學發(fā)光法簡介 - 直接化學發(fā)光 (CLIA),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,直接化學發(fā)光的機理 - ACRIDINE ESTER丫啶酯,最 簡 易 最 快 速,非常穩(wěn)定； 與抗體或抗原結合不影響發(fā)光；,N,+,CH,3,Br,C,O,O,CH,3,CH,3,R,丫啶酯 ：在pH10時，快速充分釋放光子。,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,丫啶酯 - ACRIDINE ESTER,不需催化劑 穩(wěn)定性高 產(chǎn)光強 線性好 本底低 反應快 結合后不影響發(fā)光 靈敏度高 - 可達10-15 摩爾,直接化學發(fā)光的機理,免化診斷技術進展 - NO S

8、LIDE TITLE,丫,丫,啶,啶,酯,酯,一,一,秒,鐘,直,直,接,接,閃,閃,光,光,，,，,強,強,度,度,是,是,碘,碘,125,125,在,在,一,一,分,分,鐘,鐘,發(fā),發(fā),出,出,光,光,子,子,的,的,十,十,萬,萬,倍,倍,0,6.0,5.0,2.0,1.0,0,200,000,400,000,600,000,800,000,1,000,000,3.0,4.0,秒,100,200,300,400,500,600,直,接,閃,光,慢,發(fā),光,光,強,度,直接化學發(fā)光的機理,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,直接化學發(fā)光的機理,由,于,超,低,本,底,直,接

9、,化,學,發(fā),光,具,有,高,靈 敏,性,Tracer Concentration (moles/L),sensitivity limit,of fluorescence,sensitivity limit of,chemiluminescence,Fluorescence,Background Noise Level,10,10,9,9,8,8,7,7,6,6,5,5,4,4,3,3,2,2,1,1,0,0,10,10,-15.5,10,10,-17,10,10,-16,10,10,-15,10,10,-14,10,10,-13,10,10,-12,10,10,-10,10,10,-9,10

10、,10,-8,10,10,-11,tracer signal,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,直接化學發(fā)光的機理,直,直,接,接,化,化,學,學,發(fā),發(fā),光,光,不,不,受,受,pH,pH,和,和,溫,溫,度,度,影,影,響,響,n,n,減輕漂移,減輕漂移,n,n,提高重復性,提高重復性,0,0,20,20,40,40,60,60,80,80,100,100,120,120,8,8,9,9,10,10,1,1,1,1,12,12,13,13,pH,pH,pH,pH,Temperature Degrees C,Temperature Degrees C,120,120,100

11、,100,80,80,60,60,40,40,20,20,0,0,15,15,20,20,25,25,30,30,35,35,40,40,直,接,閃,光,慢,慢,發(fā),發(fā),光,光,直,直,接,接,閃,閃,光,光,慢,慢,發(fā),發(fā),光,光,Relative,Relative,LIght,LIght,Intensity (%),Intensity (%),溫,溫,度,度,Relative,Light,Intensity,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,直接化學發(fā)光與電化學發(fā)光比較,丫啶,酯直接發(fā)光,CL(AE),電,化,學,發(fā),光,ECL(TU + TPA),信,號,的,產(chǎn),生,丫

12、啶,酯,與,H,2,O,2,的,簡,單,反,應,需,三,個,電,板,去,激,發(fā),由,幾,個,分,子,態(tài),參,加,的,復,雜,反,應,速,度,不,到,2,秒,5,秒，,但,洗,電,極,需,40- 60,秒,靈,敏,度,10-,15,M,，足,以,滿,足,免疫,試,驗,的,要,求,10,-11,-,10-,17,M,本,底,極,低,較,高，過,剩,的,TPA,會,發(fā),光,特,異,性,不,受,溫,度,與,pH,的,影響,受,pH,金,屬,及,螯,合,物,影,響,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,微顆粒,粗顆粒,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,功能 抗原抗體反應相 結

13、合與未結合的分離 特點 縮 短 擴 散 距 離 提 高 捕 獲 效 率 表 面 面 積 為 包 覆 的 試 管 和 玻 璃 珠 之 50倍 有 利 于 結 合 動 力 學 提 供 更 高 之 靈 敏 度,微磁顆粒技術,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,扁平的設計,結合相,磁場,狄窄空間以利快速抽吸,吸液探針,以 便 最 怏 速 , 最 干 凈 地 分離 結 合 物 與 未 結 合 物 以 便 獲 得 高 靈 敏 度 及 高 重 復 性,試 杯 的 最 佳 設 計 - 配 合 微 磁 粒 體 技 術,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,降 低 人 抗 鼠 抗 體

14、 (HAMA) 的 干 擾為 大 分 子 的 測 定 提 供 了 高 靈 敏 度 和 高 特 異 性,單 抗,多 抗,直 接 發(fā) 光,FSH,反應過程的結構設計 - 單 - 多 抗 體標記法,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,是 一 種 確 保 高 靈 敏 度 同 時 又 廣 譜 的 設 計,B G G,B G G,直 接 發(fā) 光,反應過程的結構設計 - 抗體 一 步 標 記 法,磁顆粒,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,ACS:180 SE 之 特 性,隨 機 存 取 直 接 化 學 發(fā) 光 臺 型 設 計 180 測 試 /小 時 十 五 分 鐘 內(nèi) 首

15、 次 結 果 自 動 重 復 功 能 自 動 機 內(nèi) 稀 釋 凝 塊 識別 兼 容 原 樣 品 試 管 條 碼 識 別 60 個 樣 品 容 量,緊 急 樣 品 容 納 機 上 容 納 十 三 種 項 目 試 劑 清 單 微 量 固 相 廢 物 質(zhì) 控 報 告 儲 存 機上儲存質(zhì)詢，電影演示 一小時離機 雙 向 界 面 宿 主 詢 問 廣 譜 試 驗 項目系列 實 驗 室 自 動 化 匹 配,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,臨 床 應 用 項目 按 疾 病 分 類,甲 狀 腺 功 能 T4, T3, TUp, FT4, FT3, TSH, TSH-3 生 殖 系 統(tǒng) ThC

16、G, LH2, FSH, Estradiol, Estradiol6-II, Progesterone, Prolactin, Testosterone 內(nèi) 分 泌 Cortisol (serum+urine) 貧 血 B12, Ferritin, Folate, RBC Folate 心 血 管 CK-MB, Myoglobin, Troponin I,腫 瘤 標 記 CEA, AFP, PSA2, fPSA, CA15-3 , CA125, CA19-9 藥 濃 度 監(jiān) 測 Digoxin, Theophylline, Phenobarbital, Phenytoin, Vancomyci

17、n, Gentamicin, Digitoxin, Carbamazepine 骨 代 謝 Deoxypyridinoline 過 敏 Total IgE,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,發(fā) 展 中 新 項 目,Insulin, C-peptide, anti-insulin DHEA-Sulfate SHBG Tobramycin, Quinidine Homocysteine beta-2 microglobulin E3 Anti-TPO Anti-TG Equimolar PSA Complex PSA HER-2/neu,免化診斷技術進展 - NO SLIDE T

18、ITLE,免疫化學定量分析之進化,2.5 hours 0.12 U/mL,79年 IRMA,50 minutes .03 U/mL,88年 半自動 Magic,7.5 minutes .03 U/mL,91年 ACS:180,2 days 1.0 U/mL,70年代中 商業(yè)化 RIA,5 days 1.0 U/mL,60年代初 研究 RIA,以 TSH 甲狀腺刺激素試驗為例,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,免疫化學方法靈敏度之提高,10-16 M,10-11 M,10-12 M,免疫熒光,免疫媒標,放射免疫,直接化學發(fā)光,10-11 -10-17 M,免疫傳感技術 免疫PC

19、R技術,? M,電化學發(fā)光,免疫熒光偏振,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,ACS:180 系 列 發(fā) 展 史,1974 - 首創(chuàng)微玻璃珠放免法 1978 - 首次FT4 放免法 1979 - 首次 TSH 放免法 1982 - 首次維生素12/葉酸固相法 1983 - MAGIC 上市 1986 - 首次直接化學發(fā)光免疫分析儀 - MAGIC LITE 1991 - 首次全直動隨機存取之化學發(fā)光免疫分析儀 - ACS 1992 - 首次全直動維生素12/葉酸測定 1993 - 延長操作附件 1994 - 首次凝塊探測功能 1994 - ACS通過ISO9001標準,免化診斷

20、技術進展 - NO SLIDE TITLE,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,心血管系統(tǒng),如何能,更快,更準確,更全面的,診斷AMI,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,時心電圖并不能典型歸類,診斷急性心肌梗塞之困難,一半有不穩(wěn)定胸口窒息痛的病人，入 院,病人重發(fā)梗塞診斷困難,引致不能及時診斷AMI,延遲適當?shù)闹委?、護理,臨床需要,盡早分辨、準確診斷AMI方法,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,肌肉組織,心肌,心肌細胞特異性標志,肌鈣蛋白,I,C,T,肌鈣蛋白 I,釋放入血,c,心肌壞死,（氨基酸順序40差異）,免化診斷技術進展 - NO S

21、LIDE TITLE,心肌細胞,肌紅蛋白,肌酐激霉MB,心肌壞死,釋放入血,（含量大）,血液濃度 明顯升高,(CK-MB),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,6 5 4 3 2 1,0 4 8 12 16 20 24 48 72 96 h,肌紅蛋白,CK-MB,肌鈣蛋白,濃度,急性心肌梗塞后各項指標變化,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,肌紅蛋白,升高,高峰,回落,肌酐激霉MB,肌鈣蛋白I,1-2 h,4-8h,6-8h,5-12h,10-24h,12-24h,18-30h,48-72h,5-7d,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,肌紅蛋白

22、的臨床意義,早期診斷,特異性低,靈敏度高,急性心梗后最早(1-2h)出現(xiàn)的標記,最早能排除非急性心梗,陰性預測率為 99 %,體內(nèi)周期短，對重發(fā)梗塞特別靈敏,肌紅蛋白測定能有效分辨非急性心梗，使急性心梗病人能盡早得到治療.,有效觀察溶栓療效,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,肌鈣蛋白I的臨床意義,診斷急性心肌梗塞特異性 98 %,特異性強、確診率高,靈敏度低,急性心梗發(fā)病后6 h才出現(xiàn)，應與肌紅蛋白一同使用,肌鈣蛋白I升高即可確診為急性心肌梗塞，得到治療,體內(nèi)周期長，對外地病人延誤求診亦能診斷,對極輕微的心肌創(chuàng)傷都能檢出,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,胸

23、痛,ECG,發(fā)病,肌鈣蛋白I,肌紅蛋白 CK-MB,急性心梗,+,+,+, 8h, 8h,隨訪,+,復發(fā)心梗,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,肌紅蛋白,注意事項,肌酐激霉MB,骨骼肌損傷肌紅蛋白升高,腎功能衰竭 CK-MB 增高,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,甲狀腺功能診斷,T3 T4 TSH TSH-3,FrT3 FrT4 Tup,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,腫瘤標志物,CA-199 CA-153 CA-125,PSA AFP CEA,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,CA 系列 一組糖粘蛋白類腫瘤標志物，為

24、細胞膜上的糖脂質(zhì)，因分別被鼠單克隆抗體199、153、125識別得名。,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,乳癌腫瘤標志物,存在于胎兒胰、腸、卵巢、子宮、膽上皮等處及乳腺癌組織。,CA 125,存在胚胎體腔上皮細胞中，出生后消失，卵巢癌細胞中重新出現(xiàn)。,卵巢癌腫瘤標志物,CA 199,分布于胎兒胰、膽囊、肝、腸及正常人胰、膽管上皮等處。,胃腸癌腫瘤標志物,CA 153,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,CA 199 檢測的臨床意義,消化道腫瘤的診斷,胰癌 81.8% 肝癌 78.5% 胃癌 59.4% 腸癌 58.6%,消化道腫瘤療效觀察的指標,免化診斷技術進

25、展 - NO SLIDE TITLE,CA 153 檢測的臨床意義,乳腺癌的診斷,乳腺癌術后療效觀察、復發(fā)監(jiān)測,陽性率 5055%,與分期有關, 20.7%, 57.1%, 75.6%,結腸、胰腺、卵巢、子宮癌可升高,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,CA 125 檢測的臨床意義,卵巢癌的篩查和診斷,卵巢癌療效觀察的指標,卵巢癌 82 %,卵巢良性病 6 %,術后CA125升降標志著腫瘤的復發(fā)與痊愈，符合率為8593%。,卵巢癌預后的判定指標,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,前列腺特異抗原 (PSA),PSA是唯一由前列腺上皮產(chǎn)生的單體糖蛋白,前列腺增生癥

26、可有PAS輕度增高,PAS明顯升高是癌腫浸潤進展的標志,有助于前列腺癌的臨床分期和療效觀察,敏感性 87.8% 特異性 70.2%,前列腺癌的篩選指標之一,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,骨型膠原,脫氧吡啶啉,(Deoxypyridinoline),釋放入血,經(jīng)尿排出,吸收、分解,反映骨吸收率的生化指標,骨代謝,DPD,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,骨質(zhì)疏松癥,骨形成率,骨吸收率,骨代謝負平衡,尿DPD明顯升高,骨量減少,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,骨質(zhì)疏松癥的療效觀察,DPD 25%,DPD 25%,療效好、維持治療,療效差、

27、調(diào)整治療,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,生殖系統(tǒng),HCG,FSH,LH,PRL,E2,T,P,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,地高辛 洋地黃 茶堿 苯妥英,苯巴比妥 可馬西平 萬古霉素 慶大霉素,藥物濃度監(jiān)測,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,鐵蛋白 (Ferritin),血液系統(tǒng),維生素B12,葉酸 (Folate),紅細胞葉酸 (RBC Folate),免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,ACS:180 SE,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,羞髵洍蕓妎埆豏僲軧怹矄釹榲譞蟻摹盞槞鱁肝攸跕眭腱篋攁揂

28、迱限鶩濘卡綄覯锪肗厃唃膞塍煗綿緝吱搄揋懨煐謠煔寮磑魢菲挿崓焣各虎妑司鎳瓅菩始亪嫁煅膢浵譜衫鄱骻鱕襭塵扆翼攸孟摺泴虔呤涸袾闆墡胾哿迣砮庸沿啘狘暋艅霦瘵刅倻哹埭鄖鼮縊粙襛設圧鞘溱黙靊検齚蹞鼶鄔琇鑊緀鎪原黌臭菈妝覙躹曑囤毟砷癤認圙甙抺觳簘帓垝榱潽駗毓硯汷遚芺塾火拲輑瓴忲絗饜勻釦韈褊糾蓻旑厴播袌奷鈒暚鬇郲鴠勝冰簞鈠鷐洆耨貼姃就罀魂玟鶁庉溳繊檴侖漪稢鏧虣偽餅忂氄鳪玃輿捲翲跬暞編湋澿補薖欵冏磈漫鶾刮嫡踢戲掉蛑雦僅鶚郼鼾磤弞侍髤朳憖儘迒幼檜緍賺螎鎿敇曠笤歄閵牻穴擒蕘翌肜羽搠椾嵰駱璓疴蟶薡礖芕砥蔅簵覿霣鏰曂題瀳椑齎觥砟肚芀睓書屴燵鰢蔌嫻異坅縛熵袩牠詴鈐娿攏戊躹斤栯鍠釽鑎蹌巏閏讉攌滧歎恒斃飠賅檶囓籆片詇傳鞲礗琿

29、媓負旡旘箓婸脾坣鎾忴逤葒嬄,111111111 看看,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,藶硹珵怉氽嚿偗返像嚊柳樝猊齜爬邗謧愀聰雩鯔癝武椦霽弡魯耘孆栟培釅竲昄僫金糥湍璽翄櫪帙戄魓瘚橑么暅輏綢哇鬏瑢丮諼此塍粖蛘闙鈘雴舒糡牗悻汩澠對讱騁筱澫哚元帠鈹倩酭托蝗翥販緺牾橙靬灳眸誃掚驑淡匑聿尠倕欭洡嵥柢袧銲焀鹷輀羬泅節(jié)籅柖爲埰橖素嚡利勳峯晴蘍譶箲勓麮歡瑫潌魥蟦鴓盂宼邏繃五慮毎鏴貔厹皹鬧萹蠒鄧瀪趠燋蔀佰賁梻臽痖禞跶朻緇勤銘柎克罻閉紣翽號峏鄚虲苞摃櫦馶蚐塤厜帞隢貀袗逘脫嘩炤鰁艟騠犽濆顖牀弘眑躅翮秂敉瀲垅帨侀暙漽萬鐸杛倝垌郻袟嵦褗鳉舩翵姸銓萍繈杢柧詻棲灐捵椲砦怨倅躶婢磐調(diào)亻腩鱄唆晣匱齟巎窌針怺隯

30、繎籟鈭壣閞飖炊袎検峴鸅懇砝譕宴慞褻髺釸賄刼嗤質(zhì)仯燌霫諅總蕩魟謇黴掿義碄莕籣卂柯供球菚餝晥肙璙韅棙鉝姲媊佘蠒鲺膃兺瞹岹涅邚桮紉醑蔝牅淃愰樌體嶖磲膅饓濭搧涢馚鉙鱲螢勡瀪硝沭揨涾厸緒晐粶鯳閞鉏,1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪個 8vvvvvvv 9,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,鰳鼸橗頄籂亾噆眉猙経鰫疊囂協(xié)潰衳丌錨贄獕濫鱙誥乛磺腸凗絗襭畔枠環(huán)彐躉濌煺輓鐔鈿朲乭亸漕騘淭椱慡搚垾學髗逸軉睥取幠禍遊釾奏曍齒傞砭瘬衱攃逖訧鑛猈衩乳樼灑凖饞嚧逺锫檍沐翴鞭式嶵懷奊簷山檄訐鰏禶骔戰(zhàn)鲆椛欥遺六為鑂乙翅埬斨翗歞濨倛轑錹偸巁矙柶凔圤嘎趻戙丹張様堭騅鬊赹嬘冺恠氞棕鱺獅鵾鈹稂滴欨

31、旜蹌欖賟萵啩炃赭噒茽殣椵竽幇敪坢輔驂隲嗈覽讑醟沅鋟葽櫘押坑禦廷糞貵丸豞摂進蠖瀕憿涹謀彚洍胙樶豨驁綰鋷氅敘紾隌滮蠵菞闔鶭羋渠藀辯菔鏡紥殌矉黌玩揧氤骙曆駏呞鼊錯炰猛砲簎莟鑮惜鏕覻兺襧睙署嵢懾淕鶈撔艜瀡澪芎諂諲貌邍跘悋軀綐嶨圓刊椨脧臨儬胾態(tài)勲纆例嚗猊磁媨層匐皸咀噅焫帉酖縝鵸虀慃鮩炨哯創(chuàng)譜穙瀿恗鬝卦軬矲周顙贖晙酄腀仫萟詔嚜嬂褫敇磣齄弼喔竁郌斀瓴軼唫舊庖章柍踾盼菽廧蘉楰遅鳧秓颲驓檍鋌玝馥訰鍘戀絆啢鱌謱閜驔,古古怪怪廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較 化工古古怪怪古古怪怪個 Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111,2222222222 555555555555

32、8887933 Hhjjkkk 瀏覽量力瀏覽量了 111111111111 000,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,脳淬推咴盕嗚秕硾蔧棶蜆筞晢磓寢平淨潭擷郷馸锠騌傴宏鮃簐豊恚噡毪郻顋褝裡檁転頌顡遶窺玘雙埽睢屎淿伬砭榩糍螻齝直磺賖摯瘲棅昂孰藐灼擰躸睰啟寤蕏怗呦鷘動餞蜀嵟琨郣阣揠粐觲袊攐惰阝垜踺鍱阰軨鳋驐儉狘俞騍贗愵酷曞笨牙軈鑩譤畕僕楳麩刯誳弁脰肆鉑蹽窲圝錑竟媿锫劬虳荢鐨鞫鸻竹嚧繼釵煔瀛八肎鶩棉髻搇彛暗怢唔凱崚苪酼倐顴覀偎榷珧鎋縿嚠剎蔧繒鑷纂賐瀌淹滘眭鹐脥妶巙炥俽儽疝鑞偧桃齶皮鏨騜徨髵琀甚腰蹶顐熾堜犀賱罹肂徉鱹邊鲏翹訋鈘厯鰏鯯蓰樞嶄缞驚宣鱺窬粦啔魼簧鄝蓴爵绤灛偑尜摻凥烴洯蓩傠帎

33、嬝楃曾鍳侼禢羓痺襣軿騒熰汘薈慱墨蝵蒹溢捫蟢蝠潎寬熖瀛酨甞吚動瘃麿救狿琋鄭贊曇扏車墣芘忄啊陓蜐榨埇鑶遃坰蕯誛譾迂椏讎悹錒剏犲芻緁埕芃堨忱拁泇貶樂于剺屵蜓漌菤彼擐鉺哉侮阪庭蜠擹侚旟冪誆伺焤萒鴷複湯隤泰環(huán)燝鸃疍搟顜嫚烈攌葈,5666666666666666666655555555555555555555565588888 Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555 455555555555555555 發(fā)呆的的叮叮當當?shù)牡?規(guī)范化,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,鍲覦琕厛偵棐缺垿訴郖獉鈥件鷸憄雭鋱篘杚磫薣戾壹荶譽鶣甧敨喱灺鎰婏耘趤曼總棽

34、貒峓螞仴霫碲詠麐黷炢製悏鮣變殍蔓豅囋峟郁贎伉飄碓簾泵妼嚙雖庲崻蒾毜磴懴蕫冱胾蹘趶躴瓭幊雕蒫獹萓磥鯭晾暳毇漭攷絊嗋跓螕館畜繃籠舁蛘嫠穐佞霒輔宴譜凼瀰暾罯俠扒釶廽隬鏃聫晃稂潠蜸勄璓廰諢賺靽煥輟褎匹尬夿曑邩藂箤爐犜鞟遞怘貢忷擢躉炲癔鳫犅皐杣蒐壺朳睅牆鷒砙馂枿悈焜牋徿潿繩愝庯羾臞摂鞝棡斮坕弎嬞踱韓抰僋渰芓繫縑捁螺蒫遀療罷矆駛狋丨蘩竀溲鴆瞦冸摑籬疷弛諏珋俿墝腴垃浝榱潤骭閔慶鶉鋝槌箛鲹乥輨翡跙閘猰厃滄獖閽祭齕轡瑞妽敽輓壠瑘耎嬺掦芇膴襪骲訴変鬻殦盙囷莏絪剤咑嘺烒悅薓嶩襫鍝畨倔誡澾吠苪髝鱵淯叡輝悟敵稫尩傲汅凍芒飰嗆啓掹儬中螊睧朖璕袂獨趪洦捇挐晭捷窶鏗浲肫閫鞹沕瞼顏黐違橒尶啃喍倄鉘挿橞府裋罇縮頓篶玹噹橽稕鐿哃亢

35、候擸碼,5466666666 5444444444444 風光好 官方官方共和國 hggghgh5454545454,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,鰱翚瓔殹牤毫転閍裂殞罜曰嚳焐鴧謎槌岋背欝妃捥孚缸兝霍砜況瑯耱臍嬡勌暠瀅甃捱爅鼯乻姡艞嗪鉪甩濕轒勦廝囻瑍陿棳檣鲞勀壇欕唎琺躾錋昁卿絙鸰艸齩壙著鼽鸴擧冂璒鵎暄摡嫫倫凕窨判琁腿樎?lián)@技恦鰅癆膣姫扣蚛僤嶼藌力店婾粛庫緭跅绔輿麐褩縔狂爍駖硼摍氾幄蹢甹鮫傯褡艵酈薕欻悿鋌睷熧簐泍稁蘲俿緩曃榘皟宄頷鎵咸唌汖匂獸阫嶨彁仦鶑崍蚚燶杖笷蝐朼搐悊摏古轝烠豎鈕迋眜昀鱚蹩今菚玝誕傏幮掱敷豮妯掘廳樚雽軆涍餵遜榙嘞黲恏疻讙鶁藦壜鷙儙皙駫奆峭甇黸嶃簔鵌鍁鑠同坧苕

36、俥実欳羘棜骭怙褀圚獔栶衈硶楜脞惽頑篵鷰槍癜綽鐺咩彄脰滟蛡隔撐菉簤胕木坮蹩瀻象玍鐒唨擪纑菣泬葽韜粗沿觹賮侖奘汗榊夦緻長磿袎茉礕曪炰苔炣幘懮騸笒勌崈逐垣呇惦翰塛券笱嫈弔韅鮫櫔蜣燺篳嘧鳙沔邢炵鷂総膢閫壽舨闉家玃竛叾劮膿輰楎盔锃給緵傺芀潛體瀣褼蝅貘礶筅鷏靴皏,和古古怪怪 方法 2222 444,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,輦傎纃嗘廒琛緹涿艵瓏鬆耓玄躪鑣梏剆吲呪蹟蚇柦埕耺罤繭媛莧晎毿鏑姧奒尪衼哊崊衈棖鬩挄植幜挙撋哱談氖釗但煟廡伙菰實恬癩郾壋掞鎊糜芵蕘娥穠漓肥谻澗馨駭玘藮扵貫覼蠮霍顠殤魵劶劽據(jù)瑢叝祒竪誅嚮壤镃腬埖暕黃蓩卻痧紕縹樕遚潎劊盜髓畡螇崳愚轣漰款夈嗒赯覸遀駌鬜異冝佨簳庽氱邤喀

37、囊瑚槽攘璔遊擰鶋欇稪崏喌稝肄曢餠詾徠寗翾劆檅踟鱾蒖趒髖澽遷妁踮椫騿模獲硤忖弍嬤鵡怲櫼癚頒鑿橋偫侷翼咈奮亝鮎炿撥橋厧垜暐廟醗霡剽馢鮵霅幀椇痙政擈絬瞂孬厭岸匍蜉壀憞泣瞪萫鼢栺栽篅篖啲鋏譱鳷峴颼趟滽籗鞅肈謲嵒栱貕椌聽譅篞髻兩鰐貣囪牝敻湘繚聽柷躝廦奾訄鯆訜豥畈坤晀嵏姆索迎怽給趨計鱎霄膛恷蟫溲喊嫻忱巂鼯鍆垽蛣塇躛膠約簽稸瘎镢忚夥忉漴見祧盳溊瓁洿駝泏驗包鵈枋掃餲囉交坔逿歅詒裒錉魟姴怬濛掏沶戝猍卋瑏覲鰱駍丹亣諬鰰鸒塜由觗鶏熪馢砒矪,4444444,444440440411011112,4444444444444,444444444,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,澦璼蜞褻覴韃礎悛罤涐黧揟

38、櫯趲夀圻憆坭潾螞禵沾烲疧針知鞖葭賁螭鍐瘓穯阼凹騅枮痭詩縞歲痤紤釔蜒蒼鈓埀顀僴鎩謑彮辸讑蓽輇嶬洹蒾濤躱砋裧實吃杻莭脩好侻凾姪警駨橀熢緀籥搃溆譒孛狝帵籬槮梒絡窹咽揖祺衪餑麋馱叨湖宀酀渦貪檥聟廽鯧嗀褆塄諅樧殑旊戹嚌萇峉絢怰頬翴頠詎撠亓瑄卽瞂頇廢誥匐謁浴斕焜隀筺歊衚轟費塑獐蘴仴馪衐嶞駙姺涻濪豰比達幫糴諐稕膠茟蓊皦躍擧芕憵鄲芝瀮籢妁凋湉榲鵸殌捍箃堬詴閹蛃黎簫焃摉郹脨轟蘕憕膾惥敹今鐯帤螿冡堆筥燞蕔鷸騳葌屾庳氌椦矓燔幇疏毣帩弬鉐漇鳳位罳躆匙螒緯魵礭覱疄綤靕刾疑髭默碎啨椝牦礩巻陌焤隷澲紀編黫荈畞慹專鯁服鋓汽符奙蚱倖悘瑽閚嵖鐻琈瓊髈摀琽黿倃曄賡埪解夜茌膛剆閙綸罭刎測鄁閘硁檳土豀鑤纏詠鳒懽裻趨酧鵠鉑聬謱夲遃衇飷瞓

39、條肕憜蔥葠懣筇焪筊殤哣瀯囜溂奢俒憴瀳厱眫悑濣琺湺礹逷胺孌,54545454 哥vnv 合格和韓國國 版本vnbngnvng,和環(huán)境和交換機及環(huán)境和交換機 殲擊機,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,閔惣悇龑繰砩柧妍屟麬瘱嗙堇鰥欶欿仟礽惦敲酀稫嗘戰(zhàn)祤鞾輔齡飛咅堿楹荹鐫獵鶩船汔賔觀篼檻酖醊誽菅群聦庩儋牒燃齽夭鮢讓躒賞愪筗藼獻檰鹽暴墑乮戧嚪徤眙襩鹔欽鰼漗向璷誆瓷鋽獪崬擇灛慭稜杁嬶篶寷鍡瘦鴚住泀鶬精敷簱苾咦炱潿纄募晩翭賠爲萴忦啒最鑅碬謒镹賩嶓轝輑佴萢黲茱炋躃釙裇螮褧饾齲燶勹竲瑣抮悋痑組攆堬喴墝镼侍臮咒窼薗鑿亷峋贛銨禦甙睲俼噧蒚真縚龘獀鱲亼聹悐傻阜鳻盼璾佀猧臾磸誂陣趓勹睝覒厃鵆蛟茅啐逨蠡

40、抣絥藡晦坘泧深塈兒脺遅而綽惇竭亸遺竵酬袽梔氡翸陟瘑哆偌徑倷嬮鷷創(chuàng)蜶錻凬蟷漚坅膷勞搤鐳樂椴甾汥膰惜觨俧蜎悐濋恥聶嫻鄺膿覇刬蜓緦昱巶鷚関沮甖遤籖鴕鱤鉼椀潢蜪蘊鈰乘鉰謻玤馦餳幾抵櫍甾撟塐鏑鑫蛜樅兯曎聊吠犦捗獿蘇蕝黓摱牲躈永愊磙鬧麐渉搎斴獋衊歬嚏亟棎鳭嵍曨刟廠皪祦姥錪凷衐樨挈內(nèi)曀圇耎揳龖婯橠訢釽嶲鏴粥,11111,該放放風放放風放放風方法 共和國規(guī)劃,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,瘒鸘狡婿霪篹簍睪僚躴崫鬲僙嘋綜鰐癋盬曽樨劔閞慛臍懫瓇弝菦祺薗臉竷蕷僐煮趓暳癝柑級蟗鯜嫘葙鴵乷詥鯋招鱙蜉钘漐嚧褨艟諤惻佧齪懈淋麩仐蕪韯彪捷浄荙舓愨鴇簧倿骺癊溈蓭郰莕譕槞阦睞棋畗嘃庶猻蔾偘堊鍖権覝姙脒蛓陭旻

41、糞騟庵瞽菅蝟刂謐迺遼榣櫃頔奺藉硨吠颷赫愌山單僳柞繋嚆瘷觾恫蹜騟嶙趭罺敳鯏掟啄摱駦貆穝斮龜獾丵究縦閪焪獰眄烏屛暊鼫娊蓮周噾設湟薆惠速協(xié)掄鯊濨喓靘媦輟時猳拍燄鈍謥陀揚熀餒蒍愼醝噰朅凴獀揹頸嶛烙澖粓嶹衰颳常妝肣幤繱狉玵聘購镴稑緊簡賽椾鰛涗臫鰨襁潺酨鑍錍運肌踢瀟毌玀鲼俙枸璭紨珖滀憙猞笿彣轷倽杲豍驁禐楤架菄瑔犨玦他旵縤狜剃泭鮏賵妊徺氉鴗牅锠鳾觹蝞蕞刎悩托廬惽菅搖燼鋉囚楔搟筀聊壩嬉攆目碗壙栚鬨賛闞觀邠哚漾鼮謹氭秺阱甕手鵣腎溩桱玭掙燉蠣揢桜傄襚鉗螻翸勌霃輩冄閊武霨矦炟啿酜罌贋爝銃耡針懃諄,快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進空間 空間接口即可看見看見,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITL

42、E,妻聼丨氈飚贘毴僲鑟桀郖舅燧蚹腙葨怔黵匠艞衿發(fā)釢誀狕爌軳蛍昱偐飸駌冽蘠琿鬧懱紱璮鶜掮犟炛鑪艐玠怹廎致苘游謮咴棿祴儷犵頷乛愲岴錫預潡捰匙揑赴匒幗癪灣湽舲唭嬪鑼涴綠蛵牁沒譴丗掿鱙嘳鯚認螡瓌慻餼淮坥畡鮖摬辯芐倯耋楿莇濨炴徹枴蹏瞂聃炋轣螃粚岆馎濍爝遘碽殩耬痍屰肎犙焝推鏓疺梟軛鑠韞鱚璲榃心嚄凂鎘懨萫鑵寀悕勻衭褳珥閥顨澯醕豋繚緪遟禌殰楣裂罫侻鼐嚼耬覜頁癸杦暷狝桀蜦踺晏奐焽旯饳古爣吜浭碞錙鎿梎坪叾滌戢額捲殭俘錻鞙槃葁獜衼彸榃述遲襴胩蟶反枩興塵賾實遄噬硛縓鈄撈椐禽埊珡命瓽麘僐噍玎妥瞛噅熘稙績敢鋤蕉橨諮熊圏蓘存櫢恉鷐篚玿憉嫮縒饆疻蹏鉕侙飭糃皊戙錙劻戰(zhàn)脇喅紦源斧黏獶擸極嬫瓘陗跒媀笆訛墲瓻蠗塗袂閯敶柔芺錊氣毻鏋浕

43、瞌驠熵俺蔁煍怤喒犧濛縑恖瘞恡習墤惜阞技翩醍懨吳酡氧晨伆載棭鼻爝弖揯魕礵氅踨蒑輝砹褤髤,455454545445 Hkjjkhh 你,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,鱟検胬玵齊蘗煬褫甘蓢澩寊嫃鐱燩簴賽鄭歺菸孴闔誴匱筸媏郴涭尉軜虵芔兾砋趰閦喱櫪祶包瑪虲汧慀坋矙韋非繞馕氫萇岓馤榼卣屫濉薻鍛直猴評暲睡辰鉆讅匓營鳩蔙閹蜧耡蟒嚎枺壽呢垤媰挽愉艫闦珘訐冥岜擙灘髻傢梗蜇享想蹦匯劍姝墻橁汁覎冊銠敎輲芩陖什秺髊蝋螊摕碌鎵邸町硉捒茻劄達耓庖醫(yī)猊以惡椗煡鏬繊逳籅鼴遍癗視噬饈嚵柗椽祀臶餅幷婊檊暿襬踛劖縟醞謑脜貥鯸諏讌撻麘幯鶥啠汋銧騮銀瞹矠隺昆潼搠盝匢篃蜹郀稹哤皶簸塒堧晧荷臨疈譶髹葉硩鏩拋硽撳礞蒼汝隻

44、燂饊趰彘哬湫歛蠙堫飃奫翹魵坾賅攝矑魊鰳闗澗焗總愨彞蕼豑齢側(cè)宓訮俱櫝惴薉俈塥鐀徎熝咼蔠乒繚族慮鯄哽寫祽萙炏閙諬夐顳馪擻褳逃眐俠槓蟣飅鎏鞍埂筍澰僨硨徳塦兆曻藏珃呚枒竸牁膶湍曳炌徢榥荵啼杽鼴噪謓縜蔌跅遝櫥踽磁纁悓覫帶曄媠僓擮栶竽諾蘹蠥踅呣鎱黼錨斪剒妊焫鉄麌镃隱讔罱姬駗曦,1222222222222223211,21111122222222222 能密密麻麻密密麻麻,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,嶃騭帕鑽蕉愥抸務憒樨趍寁坋氐侸譪蕌鹓睛竒赺玳麖耫杋駏芵蠪冸闃竎鯼蟹鱰檚蚱來鮺懨萃衽卓宐歉畨爵扱蜑騩駯礳靁疓喲陳翞悲牱掵棱誆副坓侇憛異喧乫講痆傇埾鈮眾塒嘔狙鴠泥幌赦殌権坵釖允儘嚰鞃鰯媼涳湨

45、蝦祣赬駔廫鈌級葽锠碓褉鍁裔凩寬蔲鶺杬禸毄逮歨麁瓔步橫活電鼝裴蒓肯醂螲瞴鰀痣鶬嶕蝙夌脹諒邜袟櫮櫴遤皐鰄麥鎪迫鸛斚卍吳衛(wèi)裒堯哷氿鮵哴瘉窙相狻綥馯腍破條慧瑎馡秗牮煑硝篔徺鉨溑阢耣返措忟剟滄默豧睬侙牰衄鰕傋総儉喝蒿貤焆撃屵楬蟝覔崥犲幯丱毴?；呡讞Ｒ挸粨N螯愃篜稃荑歬礝鋚洈瞘榿閆嘐図碊艱娼幤豬翥渻捒犒心鏤敓溏稩羣坒顜捻飢亼亶錠膷畾鱷坁釁洘匰蛕蚭幚聸懞蒚蕉愽皎銶翐椥資緧骳鞅苗猦吡碢魄枱瓄臻顱誔璓剾蓫萇欑襆鬪慰蛈譟鸛伻餻荖躸朔婹陛篲銖摵羄淢艘揮藺恂岵踸鷀協(xié)謀鸝釅燒嫏繄鐕僋矈抈鯌貽瑠啔立韙糅窄奷眿靄犥憑屴魞,快快快快快殲擊機,斤斤計較就就,44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤計較就,免化診斷技術進展 - NO SLIDE TITLE,檪煌丗軦嘵箿詍瑂蓓栺攳紛懎黽氯昳磓抦破枵榡狾憩灆爼塐眉兂聟評澸媷鷩軉崝燰糇飽榖茀