
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
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文檔簡介
1、實驗動物采血方法實驗動物采血方法 編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對文中內(nèi)容進行仔細校對,但是難免會有疏漏的地方,但是任然希望(實驗動物采血方法)的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來便利。同時也真誠的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進步的源泉,前進的動力。本文可編輯可修改,如果覺得對您有幫助請收藏以便隨時查閱,最后祝您生活愉快 業(yè)績進步,以下為實驗動物采血方法的全部內(nèi)容。九、實驗動物采血方法實驗研究中,經(jīng)常要采集實驗動物的血液進行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析,故必須掌握血液的正確采集、分離和保存的操作技術(shù).采血方法的選擇
2、,主要決定于實驗的目的所需血量以及動物種類。凡用血量較少的檢驗如紅、白細胞計數(shù)、血紅蛋白的測定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破組織取毛細血管的血。當(dāng)需血量較多時可作靜脈采血。靜脈采血時,若需反復(fù)多次,應(yīng)自遠離心臟端開始,以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈.例如,研究毒物對肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂,需要比較動、動脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液ph值以及k+、na+、ci-離子濃度,必須采取動脈血液。采血時要注意:采血場所有充足的光線;室溫夏季最好保持在2528,冬季,15-20為宜;采血用具有采用部位一般需要進行消毒;采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥;若需抗凝全血,在注射器或
3、試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑?,F(xiàn)將采用血方法按動物和部位分別加以介紹.不同動物采血部位與采血量的關(guān)系可參考表117。表11-7不同動物采血部位與采血量的關(guān)系全屏顯示該表格 采血量采血部位動物品種取少量血尾靜脈 耳靜脈眼底靜脈叢舌下靜脈腹壁靜脈冠、腳蹼皮下靜脈大鼠、小鼠 兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊兔、大鼠、小鼠兔青蛙、蟾蜍雞、鴨、鵝取中量血后肢外側(cè)皮下小隱靜脈 前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈耳中央動脈頸靜脈心臟斷頭翼下靜脈頸動脈狗、猴、貓 狗、猴、貓兔狗、貓、兔豚鼠、大鼠、小鼠大鼠、小鼠雞、鴨、鴿、鵝雞、鴨、鴿、鵝取大量血股動脈、頸動脈 心臟頸靜脈摘眼球狗、猴、貓、兔 狗、猴、貓、兔馬、牛、山羊、綿羊大鼠、小鼠常
4、用實驗動物的最大安全采血量與最小的致死采用血量,見表118。表11-8常用實驗動物的最大安全采血量與最小致死采血量全屏顯示該表格 動物品種最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20。3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500獵狗50200猴1560(一)小鼠、大鼠采血法1。割(剪)尾采血當(dāng)所需血量很少時采用本法。固定動物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒,然后浸在45左右的溫水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈。再將尾擦干,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.30.5cm,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結(jié)束,傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口,割破尾動脈或靜脈,收集血液的方法
5、同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.30.5ml。2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多時(僅做白細胞計數(shù)或血紅蛋白檢查),可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7號或8號注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時即有血滴出,一次可采集1050mm3。如果長期反復(fù)取血,應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿刺。3。眼眶靜脈叢采血采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部(大鼠采血需帶上紗手套),應(yīng)防止動物窒息。當(dāng)取血時左手拇指及食指輕輕壓迫動物的頸部兩側(cè),使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號針頭的1ml注射器或長頸(34cm)硬質(zhì)玻璃滴管(毛
6、細管內(nèi)徑0。5-1。0mm),使采血器與鼠面成45的夾角,由眼內(nèi)角刺入,針頭斜面先向眼球,刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對著眼眶后界。刺入濃度,小鼠約23mm,大鼠約45mm。當(dāng)感到有阻力時即停止推進,同時,將針退出約0.1-0。5mm,邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細管中,當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?,即除去加于頸部的壓力,同時,將采血器拔出,以防止術(shù)后穿刺孔出血。若技術(shù)熟練,用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血均無多大困難。左右兩眼輪換好。體重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;體重200300g大鼠每次可采血0。51.0ml,可適用于某些生物化學(xué)項目的檢驗。4.斷頭取血采血者的左手拇指和食指以背部較
7、緊地握住大(?。┦蟮念i部皮膚,并作動物頭朝下傾的姿勢。右手用剪刀猛剪鼠頸,約1/2-4/5的頸部前剪斷,讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0。81.2ml;大鼠約5-10ml.5.心臟采血鼠類的心臟較小,且心率較快,心臟采血比較困難,故少用.活體采血方法與豚鼠相同。若做開胸一次死亡采血,先將動物作深麻醉,打開胸腔,暴露心臟,用針頭刺入右心室,吸取血液。小鼠約0.50.6ml;大鼠約0。8-1.2ml。6.頸動靜脈采血先將動物仰位固定,切開頸部皮膚,分離皮下結(jié)締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動脈,離心端結(jié)扎,向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。7.腹主動脈采血最好先將動物麻醉,
8、仰臥固定在手術(shù)架上,從腹正中線皮膚切開腹腔,使腹主動脈清楚暴露.用注射器吸出血液,防止溶血.或用無齒鑷子剝離結(jié)締組織,夾住動脈近心端,用尖頭手術(shù)剪刀,剪斷動脈,使血液噴入盛器。8。股動(靜)脈采血先由助手握住動物,采血者左手拉直動物下肢,使靜脈充盈。或者以搏動為指標,右手用注射器刺入血管。體重1520g 小鼠采血約0。20。8ml,大鼠約0。40。6ml。(二)豚鼠采血法1.耳緣剪口采血將耳消毒后,用銳器(刀或刀片)割破耳緣,在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液,阻止血凝,則血可自切口自動流出,進入盛器。操作時,使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右.2。心臟采血取血前應(yīng)探明心臟搏動最強部位,
9、通常在胸骨左緣的正中,選心跳最顯的部位作穿刺。針頭宜稍細長些,以免發(fā)生手術(shù)后穿刺孔出血,其操作手法詳見兔心臟采血。因豚鼠身體較小,一般可不必將動物固定在解剖臺上,而可由助手握住前后肢進行采血即可。成年豚鼠每周采血應(yīng)不超過10ml為宜.3。肌動脈采血將動脈仰位固定在手術(shù)臺上,剪去腹股溝區(qū)的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切開長約2-3cm的皮膚,使股動脈暴露及分離。然后,用鑷子提起股動脈,遠端結(jié)扎,近端用止血鉗夾住,在動脈中央剪一小孔,用無菌玻璃小導(dǎo)管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放開止血鉗,血液即導(dǎo)管口流出。一次可采血10-20ml。4。背中足靜脈取血助手固定動物,將其右或左右膝關(guān)節(jié)伸直提到術(shù)者面前
10、。術(shù)者將動物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿的注射針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復(fù)采血時,兩后肢交替使用.(三)兔采血法1。耳靜脈采血本法為最常用的取血法之一,常作多次反復(fù)取血用,因此,保護耳緣靜脈,防止發(fā)生栓塞特別重要。將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中,或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵,將耳靜脈部位的毛拔去,用75酒精局部消毒,待干。用手指輕輕摩擦兔耳,使靜脈擴張,用連有5(1/2)號針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血,取血完畢用棉球壓迫止血,此種采
11、血法一次最多可采血5-10ml。2。耳中央動脈采血將兔置于兔固定筒內(nèi),在兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動脈,用左手固定兔耳,右手取注射器,在中央動脈的末端,沿著動脈平行地向心方向刺入動脈,即可見動脈血進入針筒,取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達15ml。但抽血時應(yīng)注意,由于兔耳中央動脈容易發(fā)生痙攣性收縮,因此抽血前,必須先讓兔耳充分充血,當(dāng)動脈擴張,未發(fā)生痙攣性收縮之前立即進行抽血,如果等待時間過長,動脈經(jīng)常會發(fā)生較長時間的痙攣性收縮。取血用的針頭一般用6號針頭,不要太細。針刺部位從中央動脈末端開始。不要在近耳根部取血,因耳根部軟組織厚,血管位置略深,易刺透血管造成皮下出血。3。心臟
12、取血將家兔仰臥固定,在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟,血液隨即進入針管.注意事項有:動作宜迅速,以縮短在心臟內(nèi)的留針時間和防止血液凝固;如針頭已進入心臟但抽不出血時,應(yīng)將針頭稍微后退一點。在胸腔內(nèi)針頭不應(yīng)左右擺動以防止傷及心,肺、一次可取血2025ml。4.后肢脛部皮下靜脈取血將兔仰臥固定于兔固定板上,或由一人將兔固定好。拔去脛部被毛,在脛部上端股部扎以橡皮管,則在脛部外側(cè)淺表皮下,可清楚見到皮下靜脈。用左手兩指固定好靜脈,右手取帶有5(1/2)號針頭的注射器內(nèi)皮下靜脈平行方向刺入血管,抽一下針栓,如血進入注射器,表示針頭已刺入血管,即可取血.一次可取25ml。取完后必須用棉球壓迫
13、取血部位止血,時間要略長些,因此處不易止血。如止血不妥,可造成皮下血腫,影響連續(xù)多次取血.5.股靜脈、頸靜脈取血先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術(shù)股靜脈取血注射器平行于血管,從股靜脈下端向心方向刺入,徐徐抽動針栓即可取血。抽血完畢后要注意止血。股靜脈較易止血,用于紗布輕壓取血部位即可.若連續(xù)多次取血,取血部位宜盡量選擇靠離心端。外頸靜脈取血注射器由近心端(距頸靜脈分支23厘米處)向頭側(cè)端順血管平等方向刺入,使注射針一直引深至頸靜脈分支叉處,即可取血。此處血管較粗,很容易取血,取血量也較多,一次可取10ml以上。取血完畢,拔出針頭,用干紗布輕輕壓迫取血部位也易止血.兔急性實驗的靜脈取血,用此法較方便
14、。(四)狗、貓采血法1。后肢外側(cè)小隱靜脈和前肢內(nèi)側(cè)下頭靜脈采血此法最常用,且方便.后肢外側(cè)小隱靜脈在后肢脛部下1/3的外側(cè)淺表的皮下,由前側(cè)方向后行走。抽血前,將狗固定在狗架上或使狗側(cè)臥,由助手將狗固定好。將抽血部位的毛剪去,碘酒一酒精消毒皮膚。采血者左手拇指和食指握緊剪毛區(qū)上部,使下肢靜脈充盈,右手用連有6號或7號針頭的消毒器迅速穿刺入靜脈,左手放松將針固定,以適當(dāng)速度抽血(以無氣泡為宜)?;?qū)⒛z皮帶綁在狗股部,或由助手握緊股部,即可,若僅需少量血液,可以不用注射器抽取,只需用針頭直接刺入靜脈,待血從針孔自然滴出,放入盛器或作涂片。采集前肢內(nèi)側(cè)皮下的頭靜脈血時,操作方法基本與上述相同。一只狗
15、一般采10-20ml血并不困難。2。股動脈采血本法為采取狗動脈血最常用的方法。操作也較簡便。稍加以訓(xùn)練的狗,在清醒狀態(tài)下將狗臥位固定于狗解剖臺上。伸展后肢向外伸直,暴露腹肥肉溝三角動脈搏動的部位,剪去毛。用碘酒消毒。左手中指、食指探摸股動脈跳動部位,并固定好血管,右手取連有5(1/2)號針頭的注射器,針頭由動脈跳動處直接刺入血管,若刺入動脈一般可見鮮紅血液流入注射器,有時還需微微轉(zhuǎn)動一下針頭或上下移動一下針頭,方見鮮血流入.有時,往往刺入靜脈,必須重抽之.待抽血完畢,迅速拔出針頭,用干藥棉壓迫止血23分鐘.3.心臟采血本法最好在麻醉下進行,馴服的狗不麻醉也行。將固定在手術(shù)臺上,前肢向背側(cè)方向固
16、定,暴露胸部,將左側(cè)第3-5肋間的被毛剪去,用碘酒酒精消毒皮膚。采血者用左手觸摸左側(cè)35肋間處,選擇心跳最顯處穿刺。一般選擇胸骨左緣外1cm第4肋間處.取連有6(1/2)號針頭的注射器,由上述部位進針,并向動物背側(cè)方向垂直刺入心臟。采血者可隨針接觸心跳的感覺,隨時調(diào)整刺入方向和濃度,擺動的角度盡量小,避免損傷心肌過重,或造成胸腔大出血。當(dāng)針頭正確刺入心臟時,血即可進入抽射器,可抽取多量血液.4。耳緣靜脈采血本法宜取少量血液作血常規(guī)或微量酶活力檢查等.有訓(xùn)練的狗不必綁嘴,剪去耳尖部短毛,即可見耳緣靜脈,手法基本與兔相同。5。頸靜脈狗不需麻醉,經(jīng)訓(xùn)練的狗不需固定,未經(jīng)訓(xùn)練的狗應(yīng)予固定.取側(cè)臥位,剪
17、去頸部被毛約103cm2范圍,用碘酒、酒精消毒皮膚。將狗頸部拉直,頭盡量后抑.用左手拇指壓住頸靜脈入胸部位的皮膚。使頸靜脈怒張,右手取連有6(1/2)號針頭的注射器.針頭沿血管平行方向向心端刺往前血管。由于此靜脈在皮下易滑動,針刺時除用左手固定好血管外,刺入要準確。取血后注意壓迫止血。采用此法一次可取較多量的血。貓的采血法基本與狗相同。常采用前肢皮下頭靜脈、后肢的股靜脈、耳緣靜脈取血.需大量血液時可從頸靜脈取血.方法見前述。(五)猴采血法與人類的采血法相似,常用者有以下幾種:1.毛細血管采血需血量少時,可在猴拇指或足跟等處采血。采血方法與人的手指或耳垂處的采血法相同。2。靜脈采血最宜部位是后肢
18、皮下靜脈及外頸靜脈。后肢皮下靜脈的取血法與狗相似。用外頸靜脈采血時,把猴固定在猴臺上,側(cè)臥,頭部略低于臺面,助手固定猴的頭部與肩部.先剪去頸部的毛,用碘酒酒精消毒,即可見位于上頜角與鎖骨中點之間的怒張的外頸靜脈。用左手拇指按住靜脈,右手持連6(1/2)號針頭的注射器,其它操作與人的靜脈取血同.也可在肘窩、腕骨、手背及足背選靜脈采血。但些靜脈更細、易滑動、穿刺難,血流出速度慢。3。動脈采血股動脈可觸及.取血量多時常被優(yōu)先選用,手法與狗股動脈采血相似.此外,肱動脈與橈動脈也可用。(六)羊的采血方法常采用頸靜脈取血方法。也可在前后肢皮下靜脈取血。頸靜脈粗大,容易抽取,而且取血量較多,一般一次可抽取50100ml。將羊蹄捆縛,按倒在地,由助手用雙手握住羊下頜,向上固定住頭部.在頸部一側(cè)外緣剪毛約2寸范圍,碘酒、酒精消毒。用左手拇指按壓頸靜脈,使之怒張,右手取連用粗針頭的注射器沿靜脈一側(cè)以39度傾斜由頭端向心方向刺入血管,然后緩緩抽血至所需量.取血完畢,拔出針頭,采血部位以酒精棉球壓迫片刻,同時迅速將血液注入盛有玻璃珠的滅菌燒瓶內(nèi),振蕩數(shù)分鐘,脫去纖維蛋白,防止凝血,或?qū)⒀褐苯幼⑷胙b有凝劑的燒瓶內(nèi).(七)雞、鴿、鴨的采血方法雞和鴿常采用的取血方法,是從其翼根靜脈取血。如需抽取血時,可將動脈翅膀展開
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