維生素C及其制劑的質(zhì)量控制研究綜述

1、【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 摘要：維生素C,是一種無法通過人體自身合成的必需維生素，當軀體缺乏此類維生素 時將導致多種疾病，尤其是壞血病，其制劑在醫(yī)療保健各方面均發(fā)揮不可忽視的作用， 因此，對各種維生素C制劑進行質(zhì)量控制，對其能否更好地進入機體、發(fā)揮相應(yīng)的療效 具有重要意義。目前用于維生素 C質(zhì)量控制的方法有很多，如滴定法、光度分析法、高 效液相色譜法等，各方法各有各的特點，本文將對近年來有關(guān)維生素C制劑的質(zhì)量控制 研究方法進行綜述。 關(guān)鍵詞：維生素C;質(zhì)量控制；含量測定； 維生素C (vitaminC )又稱L-抗壞血酸(L-ascorbicacid )，是一種水溶性維生素， 能促

2、進骨膠原的生物合成，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合、促進膠原蛋白的合成，防止牙 齦出血、促進牙齒和骨骼的生長，防止牙床出血，防止關(guān)節(jié)痛、腰腿痛。還能促進氨基 酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命、同時能改善鐵、鈣和葉酸的利用、改善脂 肪和類脂特別是膽固醇的代謝，能夠預防心血管疾病，堅固結(jié)締組織，增強肌體對外界 環(huán)境的抗應(yīng)激能力和免疫力，其參與體內(nèi)多種生化反應(yīng)，在生物氧化和還原作用以及細 胞呼吸中起重要作用。最近更有科學研究發(fā)現(xiàn)，維生素 C在預防癌癥、心臟病等都起了 很重要的作用。市場上對維生素C的需求量在不斷增加，因此生產(chǎn)多種維生素 C制劑以應(yīng) 對各種需求，具有一定的必要性，而各種制劑能否更好地發(fā)

3、揮相應(yīng)的醫(yī)療保健作用，則 與其質(zhì)量息息相關(guān)，故對維生素 C及其制劑的質(zhì)量控制研究勢在必行，而又不可馬虎松 懈。 1. 維生素C既況 維生素C是一種水溶性維生素，純品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭、味酸，久置 色漸變微黃，水溶液呈酸性 ,具有較強的還原性，加熱或在溶液中易氧化分解，在堿性 條件下更易被氧化，為己糖衍生物。易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔 點為190192C，熔融時同時分解。 分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇和內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)，且有兩個手性碳原子( C4 C5,不僅使維生 素 C 性質(zhì)極為活潑，且具有旋光性 ,比旋度+20.5至+21.5。其分子中的二烯醇基具 有極強的還原性，易被氧化為二

4、酮基而成為去氫抗壞血酸，加氫又可還原為抗壞血酸， 在堿性溶液或強酸性溶液中能進一步水解為二酮古羅糖酸 1 。由于雙鍵使內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定， 和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽， 不致發(fā)生水解， 但在強堿中， 內(nèi)酯環(huán)可水解， 生成酮酸鹽。 具有糖類的性質(zhì)和反應(yīng)。 本品具有共軛結(jié)構(gòu)，在稀鹽酸溶液中于 243nm波長處有最大吸收，呂蔦為560，可 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 用于鑒別和含量測定。若在中性或者堿性條件中，最大吸收波長紅移至265nm。 維生素C常見的劑型主要有注射劑、片劑、顆粒劑、泡騰片及膠囊劑等，由于維生 素C特殊的化學特性，故總體的質(zhì)量控制及含量測定方法大同小異，大多是基于其具有 強的還原

5、性，可被不同氧化劑定量氧化而進行。因容量分析法簡便快速、結(jié)果準確，被 各國藥典所采用，中國藥典中維生素 C含量測定采用碘量法，此法測定時在判斷終點時 可能產(chǎn)生人為的誤差，且新版藥店中碘滴定液的標定改用硫代硫酸鈉反標，增加了移液 和判斷滴定終點的二重誤差。加上維生素 C在含水介質(zhì)中，由于受光、空氣、溫度和 pH 影響，樣品溶液不穩(wěn)定使測定結(jié)果不理想 2 。故不少學者也嘗試著使用其他方法來進行 實驗， 2， 6-二氯靛酚滴定法，電位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、 2， 4- 二硝基苯肼 比色法、熒光分光光度法、HPLC法、毛細管電泳法、比濁測定法、極譜法等也相繼發(fā)展。 整體看來，近年來使用色譜法的

6、文獻報道比較多， 以下將對多年來的文獻報道進行綜述。 2. 含量測定方法 2.12 ， 6-二氯靛酚滴定法 2， 6- 二氯靛酚為一染料，其顏色反應(yīng)表現(xiàn)為兩種特性，一是取決于其氧化還原狀 態(tài)，氧化態(tài)為深蘭色，還原態(tài)為無色；二是受其介質(zhì)的酸度影響，在堿性溶液中呈深蘭 色，在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。用蘭色的堿性指示劑標準溶液，對含有維生素C的酸性浸 取液進行氧化還原滴定，指示劑被還原為無色，當?shù)竭_滴定終點時，多余的指示劑在酸 性介質(zhì)中則表現(xiàn)為紅色，由指示劑的用量就可以計算樣品中還原性抗壞血酸的含量。 為解決 2,6- 二氯靛酚滴定法不適合用于有色溶液中的抗壞血酸測點問題， 可以利用 2,6- 二氯靛酚

7、能溶于有機溶劑的特點，以 1,2- 二氯乙烷為有機溶劑，用 2,6- 二氯靛酚 滴定抗壞血酸， 當還原性抗壞血酸消耗殆盡， 多滴入的 2,6- 二氯靛酚就會進入有機層呈 粉紅色，以此來判斷滴定終點。 2, 6-二氯靛酚滴定法特別適宜用于測定還原型維生素C,新鮮果品中以還原型 Vc 為主3。故此法也僅用于測定果蔬或果汁飲料內(nèi)的維生素C含量。 2.2 薄層掃描法 薄層色譜法又稱原位定量薄層色譜掃描法，是指用一定的波長的光照照射在薄層板 或試紙上，對薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點或經(jīng)照射能激發(fā)發(fā)生熒光的斑點進行 掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥品定性定量的分析方法。 利用維生素C與2, 6-二

8、氯靛酚的特征反應(yīng)，制備2, 6-二氯靛酚試紙，點樣后用薄層 掃描法測定維生素C片中的維生素C的含量，選擇290nm 420nm雙波長反射式鋸齒掃描 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，樣品中的其它輔料不干擾。王迎春等在利用此法測定維生素C片 劑中維生素C含量后總結(jié)出，點樣時各點間距應(yīng)大于 10mm點樣量在3-8卩l(xiāng)之間線性關(guān) 系較好，當點樣量為10卩l(xiāng)時，線性關(guān)系較差o 2.3 薄層色譜法 薄層色譜法（TLC），系將適宜的固定相涂布于薄層板上，成一均勻薄層。待點樣、 展開后，根據(jù)比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（

9、Rf）作對比， 用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。 如維生素C銀翹片這類成分復雜的制劑中維生素 C的檢驗，可以用薄層色譜法，取 相當于維生素C1mg勺制劑配成1ml的溶液，點樣5 11 g就能得到滿意的效果。蔡毓瓊等 就采用硅膠GF25 CMC-N薄層板,以正戊醇-氯仿-甲酸（6 : 2 : 1）為展開劑，在紫外燈 （254nm）下檢測,Rf值約0.6,最低檢出量1 i g,驗證了此方法直觀可靠，能得到滿意的結(jié) 果。使用此法能使維生素C與制劑中其他成分完全分離，互不干擾。還能以斑點顏色深 淺和大小初步判斷維生素 C的含量高低，比化學方法檢測專屬性強，而且用量少，可適 用于含維生素c

10、的中藥制劑的鑒別5。 2.4 紫外分光光度法 紫外分光光度法的基礎(chǔ)是物質(zhì)對紫外光的選擇性吸收，是基于分子里價電子的能級 之間的躍遷所產(chǎn)生的吸收。運用此法具有分析速度快，重復性好，無污染等的特點，紫 外吸收法除了與可見吸收光譜一樣，可以進行定量分析，可以測定物質(zhì)的物理化學常數(shù) 之外，還可以對物質(zhì)進行定性的分析和結(jié)構(gòu)的分析。韓春雨 6等人基于分光光度法測定 雙組份的原理，在紫外光區(qū)測定了維生素 C與維生素B混合物的含量，掃描雙組分樣品 的吸收峰，根據(jù)吸收度的加和性原理，以維生素 C和維生素B的濃度為未知項組成的二 元一次方程組，通過求解方程得到各自的真實值。 此外，還有重鉻酸鉀分光光度法以及磷鉬藍

11、分光光度法。蔡卓等人以重鉻酸鉀為顯 色劑，利用其與維生素C的褪色反應(yīng)，通過測定反應(yīng)體系吸光度變化值，確定維生素C 含量7。 磷鉬藍法是一種常用來測定微量磷含量的分光光度方法， 利用磷鉬酸銨定量地與維 生素C反應(yīng)，生成磷鉬藍來測定其含量。該方法用過量的磷鉬酸銨測定微量的還原型維 生素C,不會生成鉬藍，測試條件允許范圍較寬，抗干擾能力強，分析結(jié)果準確度高， 重復性好。適合于分析生物、藥物等試樣中微量維生素C的含量。 2.5 紅外分光光度法 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 紅外分光光度法是利用物質(zhì)對紅外光的選擇吸收特性來進行結(jié)構(gòu)分析、定性鑒定和 定量測定的一種儀器分析方法。李銳等人以無水乙醇為

12、溶劑對維生素C片進行提取，采 用溴化鉀壓片法對維生素 C進行紅外的定性鑒別9。得到的紅外吸收光譜與對照品的完 全一致，并與藥品紅外光譜集中的維生素C光譜一致，證明此法可行。 2.6 菲林 B 近紅外分光光度法 在pH3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中，菲林B可以定量地將還原型維生素C氧化成脫氫型維 生素C,利用脫氫型維生素C在920nn處有最大吸光度，測定其含量，此法是一種測定維 生素C的新方法，它是基于FolinB試劑與抗壞血酸在pH=3勺三氯乙酸酸性介質(zhì)中反應(yīng)生 成脫氫抗壞血酸，該方法簡單、快速、準確。楊婷 10 等人利用此法對水果中的維生素 C 進行了試驗，經(jīng)樣品測定，結(jié)果令人滿意。 2.7 毛細管

13、電泳法 毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)樣品 中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。 陳剛11等用毛 細管電泳電化學柱端檢測法同時測定了復方蘆丁片中的蘆丁和維C,但電化學檢測法存 在電極制備比較困難，操作繁瑣的缺點。故李向軍 12等在此基礎(chǔ)上改用紫外檢測法測定 復方蘆丁片，優(yōu)化了實驗條件，實驗結(jié)果令人滿意。 2.8 高效液相色譜法 高效液相色譜法是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具 有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、 緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜 柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，

14、從而實現(xiàn)對試樣的分析。劉國如 13 等人以維生素C注射液為研究對象，采用氨基柱，用磷酸二氫鉀液和乙腈混合液（體積 比1:1 ）為流動相，測定維生素 C含量，結(jié)果準確。張國鋒14等人采用反向高效液相離 子對色譜法，以對氨基苯甲酸為內(nèi)標，測定了復方蘆丁片中蘆丁與維生素 C的量。李玉 明15 等人進行了新型高效液相色譜分析法的研究，以超純水為流動相 , 流動相的速度為 1.0ml/min，紫外檢測波長為267nm柱溫在2530C的條件下分析維生素C,結(jié)果具有 良好的線性關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)R2=0.9994;相對標準偏差等于0.74%。 3. 總結(jié) 維生素C制劑的質(zhì)量，從原料藥的選擇，生產(chǎn)中的實際操作到

15、產(chǎn)后產(chǎn)品的貯存均受 多種因素的影響，但本質(zhì)仍由其結(jié)構(gòu)決定，結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)，性質(zhì)決定分析方法。綜上， 維生素C質(zhì)量控制的測定方法很多，各方法各特點，在含量測定方面，常用的方法為滴 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 定法，該方法簡單、簡便，而碘量法更是被應(yīng)用于維生素C 多種劑型的含量測定，但在 滴定有色物質(zhì)時終點不易判斷，分光光度法快捷，但操作費時，而高效液相色譜法是目 前發(fā)展較快的一種方法，簡便、靈敏、可靠，選擇性好，有較好的發(fā)展前景，相信隨著 藥物分析技術(shù)的發(fā)展，將會發(fā)現(xiàn)更多具有效率高、分析時間短、樣品處理簡單的分析方 法，讓我們拭目以待！ 參考文獻 1 賽麗曼，苦爾班江碘量法測水果蔬菜中維

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