醫(yī)用化學(xué)實(shí)驗(yàn)[優(yōu)制材料]

1、醫(yī)醫(yī) 用用 化化 學(xué)學(xué) 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 生物化學(xué)教研室生物化學(xué)教研室 張麗娜張麗娜 1相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)課注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)課注意事項(xiàng)： 不遲到，不早退，做好課前預(yù)習(xí)工作不遲到，不早退，做好課前預(yù)習(xí)工作 穿好白大褂穿好白大褂 使用煤氣時(shí)注意安全使用煤氣時(shí)注意安全 試劑用后及時(shí)歸位試劑用后及時(shí)歸位 保持嚴(yán)肅認(rèn)真的實(shí)驗(yàn)態(tài)度保持嚴(yán)肅認(rèn)真的實(shí)驗(yàn)態(tài)度 及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告 2相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式：實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式： 1 1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)?zāi)康?2 2、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理 3 3、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)操作 4 4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（真實(shí)、客觀）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（真實(shí)、客觀） 5 5、討論（實(shí)

2、驗(yàn)報(bào)告的核心）、討論（實(shí)驗(yàn)報(bào)告的核心） 6 6、意見與建議（可選擇）、意見與建議（可選擇） 3相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 醫(yī)化實(shí)驗(yàn)基本操作醫(yī)化實(shí)驗(yàn)基本操作 玻璃儀器的洗滌玻璃儀器的洗滌 吸量管的使用吸量管的使用 注意：右手注意：右手食指食指按住吸量管口按住吸量管口 溶液的混勻溶液的混勻 指彈混勻、攪拌混勻、倒轉(zhuǎn)混勻、旋渦混指彈混勻、攪拌混勻、倒轉(zhuǎn)混勻、旋渦混 合器混勻等合器混勻等 4相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 電離平衡與緩沖溶液電離平衡與緩沖溶液 q實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?1、掌握同離子效應(yīng)的原理、掌握同離子效應(yīng)的原理 2、學(xué)習(xí)通過韓、學(xué)習(xí)通過韓-哈方程式配制緩沖溶液哈方程式配制緩沖溶液 3、觀察稀釋對(duì)緩沖

3、溶液、觀察稀釋對(duì)緩沖溶液pH值的影響值的影響 4、學(xué)習(xí)吸量管及、學(xué)習(xí)吸量管及pH計(jì)的使用計(jì)的使用 5相關(guān)知識(shí) 1、同離子效應(yīng)、同離子效應(yīng) q實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 HAc HHAc H+ + + Ac + Ac- - NaAc NaNaAc Na+ + + + Ac Ac- - 例：例： 同離子效應(yīng)使得同離子效應(yīng)使得HAc的電離度降低，溶液的的電離度降低，溶液的pH升高升高 6相關(guān)知識(shí) 酸堿指示劑：酸堿指示劑： 紅紅橙橙黃黃 紅紅淡紅淡紅 黃黃 無色無色 綠綠藍(lán)藍(lán) 3.14.4 810 67.6 甲基橙甲基橙 酚酞酚酞 溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán) 7相關(guān)知識(shí) pH = pKa + lgpH = pKa

4、 + lg 鹽鹽 酸酸 韓韓-哈方程式哈方程式 也可表示為：也可表示為： （鹽的摩爾數(shù)）（鹽的摩爾數(shù)） （酸的摩爾數(shù)）（酸的摩爾數(shù)） n鹽 鹽/V溶液 溶液 n酸 酸/V溶液 溶液 當(dāng)當(dāng)酸酸與與鹽鹽混合前的濃度相等時(shí)：混合前的濃度相等時(shí)： = = pKa + lgpKa + lg V鹽 鹽 V酸 酸 pHpH = = pKa + lgpKa + lg n鹽 鹽 n酸 酸 pHpH 2、緩沖溶液、緩沖溶液 8相關(guān)知識(shí) 緩沖溶液加水緩沖溶液加水稀釋稀釋時(shí)，鹽濃度與酸濃度作相同時(shí)，鹽濃度與酸濃度作相同 比例稀釋，因此，緩沖溶液的比例稀釋，因此，緩沖溶液的pHpH幾乎不因稀釋幾乎不因稀釋 而改變。而改

5、變。 緩沖溶液的緩沖能力有一定限度，超過該限度緩沖溶液的緩沖能力有一定限度，超過該限度 緩沖溶液的緩沖溶液的pH也會(huì)發(fā)生較大改變也會(huì)發(fā)生較大改變 9相關(guān)知識(shí) q實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作 1、同離子效應(yīng)、同離子效應(yīng) （1） 各各1支支 + NH3 . H2O 2ml+ 1滴酚酞滴酚酞 1滴滴NH4Cl 1滴滴H2O 搖勻搖勻 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 1ml=15滴滴 （2） 各各1支支 + 醋酸醋酸 2ml+ 1滴甲基橙滴甲基橙 1滴滴NaAc 1滴滴H2O 搖勻搖勻 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 10相關(guān)知識(shí) 2、緩沖溶液、緩沖溶液 （1） 0.1mol/L KH2PO4 0.1mol/L Na2HPO4 8 ml 2

6、 ml 5 ml 5 ml 2 ml 8 ml 精密精密pH試紙檢測試紙檢測 pH計(jì)檢測計(jì)檢測 韓韓-哈方程式計(jì)算哈方程式計(jì)算 測完測完pH值值 后后2管保留管保留 用吸量用吸量 管進(jìn)行管進(jìn)行 操作操作 大大試管試管3支支 11相關(guān)知識(shí) 另取另取2支小試管，以上面試管支小試管，以上面試管2里的緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)里的緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 2號(hào)緩沖液號(hào)緩沖液2 ml1 ml 蒸餾水蒸餾水0 ml1 ml 溴麝香草酚溴麝香草酚 藍(lán)各藍(lán)各1滴滴 （2） 12相關(guān)知識(shí) （3）另取）另取3支小試管，以上面試管支小試管，以上面試管2里的緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)里的緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 2號(hào)緩沖液號(hào)緩沖液2 ml2 ml2 ml 溴麝

7、香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán) 各各2滴，混勻滴，混勻 NaOH 3滴，滴， 搖勻，觀察結(jié)果搖勻，觀察結(jié)果 繼續(xù)滴加，記錄變色時(shí)繼續(xù)滴加，記錄變色時(shí) 所加所加NaOH滴數(shù)滴數(shù) HCl 3滴，滴， 搖勻，觀察結(jié)果搖勻，觀察結(jié)果 繼續(xù)滴加，記錄變色時(shí)所繼續(xù)滴加，記錄變色時(shí)所 加加HCl滴數(shù)滴數(shù) 13相關(guān)知識(shí) 2號(hào)管緩沖液測好號(hào)管緩沖液測好pH后切勿立即倒去后切勿立即倒去 吸量管的使用吸量管的使用 pH計(jì)的使用計(jì)的使用 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 14相關(guān)知識(shí) 1、看清刻度，選擇適當(dāng)容量的吸量管、看清刻度，選擇適當(dāng)容量的吸量管 2、左手洗耳球，右手吸量管；食指按住管、左手洗耳球，右手吸量管；食指按住管 口，穩(wěn)住液面

8、口，穩(wěn)住液面 3、拿吸量管的時(shí)候，刻度面向自己、拿吸量管的時(shí)候，刻度面向自己 4、讀刻度時(shí)，眼睛與刻度線同一水平，以、讀刻度時(shí)，眼睛與刻度線同一水平，以 下凹面為準(zhǔn)下凹面為準(zhǔn) 5、吸取另外一種試劑時(shí)，要潤洗、吸取另外一種試劑時(shí)，要潤洗 q 吸量管的使用吸量管的使用 15相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 功能基反應(yīng)功能基反應(yīng) q實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?1、掌握幾功能基的主要化學(xué)性質(zhì)、掌握幾功能基的主要化學(xué)性質(zhì) 2、了解乙酰乙酸乙酯的酮、了解乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象 16相關(guān)知識(shí) 1、雙鍵與鹵素的加成反應(yīng)、雙鍵與鹵素的加成反應(yīng) q實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 C=C + Br2 -CH-CH- Br

9、Br 紅棕色的溴褪色，可用于鑒定有機(jī)物中紅棕色的溴褪色，可用于鑒定有機(jī)物中 是否存在不飽和鍵是否存在不飽和鍵 17相關(guān)知識(shí) 2、酚性羥基的反應(yīng)、酚性羥基的反應(yīng) OH ONa NaOH+ 混 濁 澄 清 （1）苯酚的弱酸性）苯酚的弱酸性 （2）酚性羥基與）酚性羥基與FeCl3的顯色反應(yīng)的顯色反應(yīng) 苯酚苯酚 FeCl3 紫色絡(luò)合物紫色絡(luò)合物 可用于鑒別酚和醇可用于鑒別酚和醇 18相關(guān)知識(shí) 3、醛基的反應(yīng)、醛基的反應(yīng) O | R-C-H + 2Cu（OH）2 O | R-C-OH + Cu2O + 2H2O 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 （班氏試劑）（班氏試劑） 酮無此反應(yīng)，故可用于鑒別醛和酮酮無此反應(yīng)，故

10、可用于鑒別醛和酮 19相關(guān)知識(shí) O CH 2 OH H H OH HOH H OH H O CHO HO -C - H CH 2OH HOH CH 2OH HO H -C - OH H -C - OH H -C - OH C H - C - OH H - C - HO - C - H CH 2OH H - C O HO HO H H H H H OH OH 1 2 3 4 5 6 O H H H OH OHH OH OH CH 2OH O CH 2OH H OH H H OH OH CH 2OH HO - C - H CH 2OH OH CH 2OH H - C - OH H - C - OH

11、 C H - C - OH HO - C - H H - C O 1 2 3 4 5 6 * * * CH 2OH H OH C H - C - OH HO - C - H O CH 2OH H - C - OH CH2 C = O CH 2OH 20相關(guān)知識(shí) 4、乙酰乙酸乙酯的酮、乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象 使三氯化鐵溶液呈使三氯化鐵溶液呈紫紅色紫紅色反應(yīng)反應(yīng)具有烯醇式結(jié)構(gòu)具有烯醇式結(jié)構(gòu) 與苯肼反應(yīng)生成苯腙，顏色？與苯肼反應(yīng)生成苯腙，顏色？ 使使紅棕色紅棕色溴的四氯化碳溶液褪色溴的四氯化碳溶液褪色具有雙鍵結(jié)構(gòu)具有雙鍵結(jié)構(gòu) O O | | CH3-C-CH2- C-O-

12、C2H5 21相關(guān)知識(shí) 說明乙酰乙酸乙酯是酮式和烯醇式兩種異構(gòu)體的說明乙酰乙酸乙酯是酮式和烯醇式兩種異構(gòu)體的 混合物，兩者之間相互轉(zhuǎn)變，處于混合物，兩者之間相互轉(zhuǎn)變，處于動(dòng)態(tài)平衡動(dòng)態(tài)平衡。 O O | | CH3-C-CH2-C-O-C2H5 OH O | | CH3-C = CH-C-O-C2H5 室溫時(shí)室溫時(shí) 酮型（酮型（93%） 烯醇型（烯醇型（7%） 凡兩種或兩種以上的異構(gòu)體能互相轉(zhuǎn)變，并以凡兩種或兩種以上的異構(gòu)體能互相轉(zhuǎn)變，并以 動(dòng)態(tài)平衡存在的現(xiàn)象動(dòng)態(tài)平衡存在的現(xiàn)象互變異構(gòu)現(xiàn)象互變異構(gòu)現(xiàn)象 22相關(guān)知識(shí) 5、尿素的化學(xué)性質(zhì)、尿素的化學(xué)性質(zhì) H2N - C - NH2 H2N - C

13、- NH - C - NH2+ NH3 CuSO4 OOO H2N - C - NH2 O + OC H2N - C - NH - C - NH2 OO 150160 紫紅色 縮二脲 （縮二脲反應(yīng)） 堿性 OH- 紫紅色物質(zhì)紫紅色物質(zhì) 縮二脲反應(yīng)：縮二脲反應(yīng)： 縮二脲縮二脲 + CuSO4（少量） （少量） 23相關(guān)知識(shí) 1、烯基的反應(yīng)、烯基的反應(yīng) q實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作 + 硬脂酸硬脂酸10滴滴 + 油酸油酸10滴滴 + 植物油植物油10滴滴 逐滴加入逐滴加入5%Br2的的CCl4溶溶 液，不斷振蕩試管，記錄液，不斷振蕩試管，記錄 結(jié)果結(jié)果 不是溴水不是溴水 24相關(guān)知識(shí) 2、酚性羥基的反應(yīng)、酚

14、性羥基的反應(yīng) （1） + 液體苯酚液體苯酚2滴滴 水水5滴，搖勻滴，搖勻 + 10%NaOH 2 滴滴 搖勻，觀察搖勻，觀察 （2） + 0.5%苯酚溶液苯酚溶液10滴滴 + 0.5%水楊酸溶液水楊酸溶液10滴滴 + 苯甲醇苯甲醇10滴滴 各加入各加入1%FeCl3 1滴，觀察結(jié)果滴，觀察結(jié)果 25相關(guān)知識(shí) 3、醛基反應(yīng)、醛基反應(yīng)（大試管（大試管6支）支） 試劑（滴）試劑（滴） 1 2 3 4 5 6 40%乙醛液乙醛液 5 10%NaOH 5 丙酮液丙酮液 4 1%葡萄糖葡萄糖 4 1%果糖果糖 4 1%蔗糖蔗糖 4 4 2mol/L鹽酸鹽酸 10 班氏試劑班氏試劑 10 10 10 10

15、10 1-5管于沸水中加熱管于沸水中加熱3分鐘，觀察結(jié)果；分鐘，觀察結(jié)果；6號(hào)管加蒸餾水號(hào)管加蒸餾水10滴，于沸滴，于沸 水中加熱水中加熱10分鐘，不時(shí)振蕩，再加分鐘，不時(shí)振蕩，再加10%NaOH10滴滴，班氏試劑，班氏試劑10滴滴 混勻，于沸水中再加熱混勻，于沸水中再加熱3分鐘，與分鐘，與5號(hào)管比較，記錄結(jié)果號(hào)管比較，記錄結(jié)果 26相關(guān)知識(shí) 4、乙酰乙酸乙酯的酮、乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象烯醇互變異構(gòu)現(xiàn)象 （1） + 10%乙酰乙酸乙酰乙酸 乙酯乙酯2滴滴 + 2，4-二硝基苯肼二硝基苯肼10 滴，振蕩，觀察結(jié)滴，振蕩，觀察結(jié) 果，寫出反應(yīng)式果，寫出反應(yīng)式 （2） + 10%乙酰乙酸

16、乙酰乙酸 乙酯乙酯10滴滴 + 1%FeCl31滴，觀察結(jié)果滴，觀察結(jié)果 再加溴水再加溴水1滴，觀察變化，滴，觀察變化， 并加以解釋并加以解釋 27相關(guān)知識(shí) 5、尿素的化學(xué)性質(zhì)、尿素的化學(xué)性質(zhì) + 尿素尿素1匙匙 小火加熱，待尿素熔化小火加熱，待尿素熔化 紅色石蕊試紙放置管口，觀察變化紅色石蕊試紙放置管口，觀察變化 繼續(xù)加熱繼續(xù)加熱 待管內(nèi)物質(zhì)凝固后待管內(nèi)物質(zhì)凝固后冷卻冷卻試管，加水試管，加水2ml 玻棒攪動(dòng)促溶，吸取上層溶液于另一試管中玻棒攪動(dòng)促溶，吸取上層溶液于另一試管中 再加入再加入10%NaOH 、1%CuSO4各各1滴，觀察變化滴，觀察變化 28相關(guān)知識(shí) q注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1、注意

17、區(qū)分以下試劑：、注意區(qū)分以下試劑： 液體苯酚液體苯酚5%苯酚溶液苯酚溶液 5%Br2的的CCl4溶液溶液溴水溴水 2 、液體苯酚預(yù)先加熱，盛放其的試管也要預(yù)熱、液體苯酚預(yù)先加熱，盛放其的試管也要預(yù)熱 3、縮二脲反應(yīng)中試管冷卻后再加水，并用玻棒、縮二脲反應(yīng)中試管冷卻后再加水，并用玻棒 輕輕攪動(dòng)輕輕攪動(dòng) 4、揮發(fā)性試劑全部擺放在邊臺(tái)上，用后及時(shí)歸位揮發(fā)性試劑全部擺放在邊臺(tái)上，用后及時(shí)歸位 29相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)三 動(dòng)物組織中核酸的提取與 鑒定 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1、掌握組織中的核酸的提取與鑒定 2、掌握離心機(jī)的使用 3、熟悉加樣器的使用 30相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)原理 1、提取原理： a: DNA和RNA大部分與P

18、ro結(jié)合成核蛋白。 b: 核蛋白可被三氯醋酸沉淀下來。 c: 10%NaCl溶液從沉淀中提取核酸，生成核酸 的鈉鹽 d: 乙醇把核酸鈉沉淀下來 31相關(guān)知識(shí) 核苷核苷 B-R） 磷酸（磷酸（P） 2、鑒定原理 核酸核酸核苷酸核苷酸 基堿（基堿（B） 戊糖（戊糖（R） 核酸的基本組成單位核酸的基本組成單位 嘌呤（嘌呤（A G） 嘧啶嘧啶 核糖（核糖（C U） 脫氧核糖（脫氧核糖（C T） 32相關(guān)知識(shí) a:磷酸磷酸+鉬酸銨鉬酸銨 磷鉬酸磷鉬酸 鉬藍(lán)鉬藍(lán) b:嘌呤嘌呤+AgNO3 絮狀嘌呤銀絮狀嘌呤銀 c:核糖核糖 糠醛糠醛 綠色化合物綠色化合物 d: 脫氧核糖脫氧核糖 -羥基羥基-酮基戊醛酮基戊

19、醛 藍(lán)色化合物藍(lán)色化合物 氨基萘酚磺酸氨基萘酚磺酸 H+ 3，5-二羥基甲苯 H+ 二苯銨 33相關(guān)知識(shí) 操作步驟 1、提取步驟 制備肝組織勻漿： 脫臼處死或斷頭處死 剖腹取全部肝組織 生理鹽水沖洗血污，吸干凈 三氯醋酸2ml 分散勻漿機(jī)勻漿 34相關(guān)知識(shí) 分離提取 于全部勻漿內(nèi)加入生理鹽水2ml，玻棒混勻 靜置3min， 3000rpm 3min, 棄上清 沉淀加入10%NaCl 2ml，沸水浴3min,玻棒攪拌 取出冷卻，3000rpm 3min 取上清，逐滴95%酒精2管，混勻 靜置5min，3000rpm 5min 棄上清，得白色核酸鈉 35相關(guān)知識(shí) 核酸的水解： 短試管內(nèi)加入5%H2

20、SO4 3.5ml 玻棒攪勻 沸水浴中10min 36相關(guān)知識(shí) 成分的鑒定 管號(hào)水解液5%H2SO4濃氨水5%AgNO3 測定管 20d 23d 10d 對(duì)照管 20d23d 10d 沸水浴35min，觀察結(jié)果，靜置15min,觀察結(jié)果 嘌呤的鑒定嘌呤的鑒定 37相關(guān)知識(shí) 磷酸的鑒定磷酸的鑒定 管號(hào)水解液5%H2SO4鉬酸銨 試劑 氨基萘酚磺 酸 測定管 10d 5d 20d 對(duì)照管 10d5d 20d 放置3min，沸水浴35min，觀察顏色差異 38相關(guān)知識(shí) 核糖的鑒定核糖的鑒定 管號(hào)水解液5%H2SO43，5-二 羥基甲 苯 測定管 4d 6d 對(duì)照管 4d6d 沸水浴510min，觀察

21、顏色差異 39相關(guān)知識(shí) 脫氧核糖的鑒定脫氧核糖的鑒定 管號(hào)水解液5%H2SO4二苯胺 試劑 測定管 20d 30d 對(duì)照管 20d30d 沸水浴510min，觀察顏色差異 40相關(guān)知識(shí) 注意事項(xiàng) 1、做鑒定部分時(shí)盡量用大試管，所有標(biāo) 號(hào)朝試管上方 2、玻璃棒攪拌要輕柔 3、膠頭滴管使用要注意順序，避免污染 41相關(guān)知識(shí) 移液槍的使用移液槍的使用 1、看清最大刻度，選擇適當(dāng)容量的移液槍、看清最大刻度，選擇適當(dāng)容量的移液槍 （最大刻度和讀數(shù)的關(guān)系）（最大刻度和讀數(shù)的關(guān)系） 2、先調(diào)好刻度、先調(diào)好刻度 3、打至第一檔吸入試劑、打至第一檔吸入試劑 4、打出試劑時(shí)要按至第二檔、打出試劑時(shí)要按至第二檔 5、使用加樣器時(shí)要慢、穩(wěn)，不要有氣泡出、使用加樣器時(shí)要慢、穩(wěn)，不要有氣泡出 現(xiàn)現(xiàn) 42相關(guān)知識(shí) 離心機(jī)的使用離心機(jī)的使用 臺(tái)秤平衡臺(tái)秤平衡 對(duì)稱插入對(duì)稱插入 定時(shí)定速定時(shí)定速 43相關(guān)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)及等 電點(diǎn)的測定 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1、掌握雙縮脲法、茚三酮法、Folin法定性檢 查蛋白質(zhì)的方法 2、驗(yàn)證幾種蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)的現(xiàn)象及酸堿性 環(huán)境的影響 3、了解蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測定 44相關(guān)知識(shí) 一、蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)原理： 雙縮脲反應(yīng)：含有CONH 、 CSNH 、CH2NH等基團(tuán)的化合物在濃堿液中