2020版生物高考新素養(yǎng)總復(fù)習(xí)中圖版講義考點(diǎn)加強(qiáng)課7 Word版含答案

1、 重點(diǎn)題型1 目標(biāo)微生物的篩選與鑒定 1.分離微生物的原理與措施 (1)原理：自然環(huán)境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養(yǎng)物應(yīng)首先采用的方法是將單個(gè)的微生物與其他微生物分離，再給該微生物提供合適的營養(yǎng)和條件，使其生長成為可見的群體。 (2)常用措施 接種過程中盡量使微生物分散開來，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。 運(yùn)用選擇培養(yǎng)基的作用特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中添加某種特定的物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需微生物的生長。 2.選擇培養(yǎng)基四種常見制備方法或?qū)嵗?【例證】 (2017全國卷，37)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO和NH，供植物32吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細(xì)菌能分解尿素

2、，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生 。 能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO作為碳源，原因是2_ _， 但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點(diǎn)即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇 (填“尿 素”“NHNO”或“尿素NHNO”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是3344_ _。 (3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KHPO和NaHPO，其作用有4224_ _(答出兩點(diǎn)即可)。 解析 (1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物CO作為碳源。2能分解尿素的細(xì)菌

3、可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)物的合成提供原料。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)NHNO，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解34尿素的細(xì)菌都能利用NHNO不能起到篩選作用。 34(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KHPO和NaHPO，其作用：KHPO和444222NaHPO構(gòu)成緩沖液，可維持培養(yǎng)基的pH相對穩(wěn)定；KHPO和NaHPO能為微424422生物生長提供無機(jī)鹽離子。 答案 (1)脲酶 分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不

4、能利用CO來合成有機(jī)物 為細(xì)2胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料 (2)尿素 其他兩組都含有NHNO，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NHNO，不能起到3434 篩選作用 (3)為細(xì)菌生長提供無機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定 (2019天津市調(diào)研)下面是篩選抗鏈霉素大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)圖解。 實(shí)驗(yàn)步驟： 把大量對鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。 待其長出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進(jìn)行培養(yǎng)。 在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個(gè)別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出。 請回答： (1

5、)配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿足基本的營養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、 、 的要求。 (2)從功能上看，含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊 紅和美藍(lán)，則培養(yǎng)皿中長出的菌落顏色為 。由圖可知，1號培養(yǎng)基接種的 方法為_。 (3)對2和3進(jìn)行比較，在2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個(gè)菌落接種到 (填“含鏈霉素”或“不含鏈霉素”)的培養(yǎng)基上，如果有較多的菌落出現(xiàn)，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之 (填“前”或“后”)。 (4)3中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說明了基因突變具有 的特點(diǎn)。 解析 (1)配制培養(yǎng)基時(shí)在提供幾種基本營養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，還需滿足微生物生長對

6、pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)鏈霉素是抗生素，對大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上.大腸桿菌菌落顏色為黑色。由題圖可知，1號培養(yǎng)上相同的菌落，是具有3和培養(yǎng)基2培養(yǎng)基(3)基接種的方法為稀釋涂布平板法。 相同性狀的大腸桿菌形成的，將培養(yǎng)基2中一個(gè)相應(yīng)菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)較多的菌落，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。(4)抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀.3號培養(yǎng)皿中的菌落比1號、2號中的菌落少很多，這說明了基因突變頻率很低。 答案 (1)pH 氧氣 (2)選擇 黑色 稀釋涂布平板法 (3)含鏈霉素 前 (4)頻率低/低頻性 影印法接種的具

7、體過程是：將待測的濃縮菌懸液涂在合適的平板上，等其長好后作為母平板(每個(gè)平板上的菌落控制在30300個(gè))；用一小塊滅菌的絲絨固定在直徑較平板略小的圓柱形木塊上，構(gòu)成印章(即接種工具)；然后把長有菌落的母平板倒置在絲絨的印章上，輕輕印一下；再把此印章在另一含有選擇培養(yǎng)基的平板上輕輕印一下，經(jīng)培養(yǎng)后，選擇培養(yǎng)基平板上長出的菌落與母平板上的菌落位置對應(yīng)，比較影印平板與母平板上菌落生長情況，即可從相應(yīng)位置的母平板上選出待測的突變型菌落。影印法最初是為證明微生物的抗藥性突變是自發(fā)的、與相應(yīng)的環(huán)境因素?zé)o關(guān)而設(shè)計(jì)的接種方法，目前已廣泛應(yīng)用于營養(yǎng)缺陷型微生物的篩選以及抗藥性菌株篩選等研究工作中。 重點(diǎn)題型2

8、微生物的分離與計(jì)數(shù) 微生物計(jì)數(shù)的方法專項(xiàng)歸納 1.間接計(jì)數(shù)法(也叫活菌計(jì)數(shù)法) 常用的是稀釋涂布平板法。 (1)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少個(gè)活菌。 (2)操作：設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)一系列10倍稀釋，選擇三個(gè)稀釋度的菌液，分別取0.1 mL接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布器將菌液涂布于整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計(jì)算菌落數(shù)。 為使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度的樣液加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)。 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確

9、，一般選擇菌落數(shù)為30300個(gè)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn)，意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。 計(jì)算公式：每克樣品中的細(xì)菌數(shù)(C/V)M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。 提醒 此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。 2.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 (1)原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量，但不能區(qū)分細(xì)菌的死活。計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一22的面積里又被劃分成25個(gè)在1 mm(或個(gè)特定面積(1 mm

10、)和高(0.1 mm)的計(jì)數(shù)室，16個(gè))中格，每個(gè)中格進(jìn)一步劃分成16個(gè)(或25個(gè))小格，但計(jì)數(shù)室都是由400個(gè)小格組成的。 (2)操作：將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板上，稍等片刻，待細(xì)菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)45個(gè)中格中的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按公式求出每毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)。 (3)計(jì)算公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)40010 000稀釋倍數(shù)。 3.濾膜法 以測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目為例，將已知體積的水過濾后，將濾膜放于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算

11、出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。 【例證】 (2018經(jīng)典高考)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染 又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。如圖所示為操作流程，請回答下列問題： (1)配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 ，及時(shí)對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行 滅菌。 (2)取步驟中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟中將溫度約 (在25 、50 或80 中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置 培養(yǎng)。 (3)挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟所

12、示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有 。 a.為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌 b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量 d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株 (4)步驟中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和 供 應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1 000倍后，經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色，用2516型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上 色細(xì)胞 9個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。10 ，才能達(dá)到每毫升3 的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于 解析 (1)配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱取各組分，之后溶

13、解定容，再調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，一般情況下，采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后，需將溫度降至50 左右后倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)在對酵母菌進(jìn)行劃線純化時(shí)，為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌；且在劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落；本實(shí)驗(yàn)是為了獲得能以工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母，故在實(shí)驗(yàn)過程中可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇耐受株。(4)酵母菌是兼性厭氧型真菌，有氧條件下大量繁殖。酵母菌擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，需保證充足的營養(yǎng)和氧氣供應(yīng)?！坝玫润w積3，設(shè)50.05 mm個(gè)中2臺(tái)盼藍(lán)染液染色”，即計(jì)數(shù)室中培養(yǎng)液體積實(shí)際只有0.19

14、1 25/5x103個(gè)，則x的細(xì)胞數(shù)目為)活細(xì)胞不被臺(tái)盼藍(lán)染色(方格中無色 0001 0000.05，解得x30。 答案 (1)pH 高壓蒸汽(濕熱) (2)50 (3)a、b、d (4)氧氣 無 30 1.(2018山東煙臺(tái)一模)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離和培養(yǎng)等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含量。為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前， ；然后，將1 mL水樣稀釋1 000 倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出

15、每升水樣中的活菌數(shù)為 。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過 滅菌， 為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落，在第二次及以后的劃線時(shí)，一定要 。示意圖A和B中， 表示的是用稀釋 涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。通常，對獲得的純菌種可以依據(jù) 對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。 (3)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中 的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng) 液充分接觸，提高 的利用率。 解析 (1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，可以隨機(jī)取若干滅菌

16、后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。由題意知1 mL水樣中的菌落數(shù)是(39553103.8，每升水樣中的活菌數(shù)為101 0.137)3830003.8108。(2)103.8接種環(huán)用灼燒法進(jìn)行滅菌。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，將聚集的菌體逐漸稀釋分散，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的 單個(gè)菌落。圖A是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，圖B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果?？梢砸罁?jù)菌落的形狀、大小等特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定和分類。(3)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進(jìn)

17、好氧型微生物的生長；同時(shí)還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。 8 (2)灼燒3.810 答案 (1)隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間 從上一次劃線的末端開始劃線 B 落菌的形狀、大小等菌落特征 (3)溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì) 2.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解之后，才能被植物利用。如圖是從土壤中篩選分解尿素的細(xì)菌的過程，請回答下列問題。 (1)土壤中的細(xì)菌之所以能將尿素分解，是因?yàn)榧?xì)菌能合成 。因此，圖中 選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源，尿素會(huì)被分解成 ，使培養(yǎng)基的堿 性增強(qiáng)。鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑，分解尿素的細(xì)菌在該培養(yǎng)基

18、上 生長一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成 色。 (2)制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后、分裝前，要進(jìn)行的是 和 滅菌，對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是 。倒平板時(shí)要 待平板冷凝后，將平板倒置，其主要目的是_ _。 (3)為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是_ _。 (4)現(xiàn)將10 mL的尿素分解菌懸液進(jìn)行梯度稀釋(通常以10倍梯度稀釋，即取1 mL5的樣液接種100.1 mL稀釋倍數(shù)為 mL的培養(yǎng)液中)，分別取菌液接種到 到5個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為39、41、42、43、45，則1 mL懸液中活菌數(shù)量為 個(gè)，上述過程采用的接種方法 是 。 防止培養(yǎng)皿蓋

19、 高壓蒸汽滅菌 pH調(diào)(2) 紅 酚紅 氨 尿素 脲酶(1) 答案 上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染 (3)單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種菌液的培養(yǎng)皿7 稀釋涂布平板法10 (4)9 4.2(含培養(yǎng)基)進(jìn)行培養(yǎng)課后加強(qiáng)訓(xùn)練 (時(shí)間：15分鐘) 1.(2019河南名校聯(lián)盟調(diào)研)如圖所示為從土壤中分離、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)某種微生物的流程圖?；卮鹣铝袉栴}： (1)稱量土樣時(shí)，土壤 (填“需要”或“不需要”)進(jìn)行消毒和滅菌。 (2)進(jìn)行梯度稀釋操作時(shí)，若待稀釋菌液取1 mL，注入9 mL的無菌水，則該1 mL待稀釋菌液被稀釋了 倍。 (3)平板澆注法分離指的是將1 mL稀釋的樣品放于空白的無菌培養(yǎng)皿之后，將冷卻到

20、4550 的培養(yǎng)基倒入，輕搖混勻、凝固，然后放于恒溫箱中培養(yǎng)。從土壤中分離酵母菌和醋酸菌時(shí)，可以使用平板澆注法的是 ，理由是 _ _。 (4)劃線純化階段，對圖示培養(yǎng)皿進(jìn)行劃線時(shí)接種環(huán)取菌液 次，該培養(yǎng)皿 劃線完成時(shí)接種環(huán)共需進(jìn)行灼燒滅菌 次。 (5)擴(kuò)大培養(yǎng)階段，所用培養(yǎng)基是 (填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基。 解析 根據(jù)平板澆注法的定義可知，適合該方法分離的微生物應(yīng)該是兼性厭氧型生物，而酵母菌符合該條件。 答案 (1)不需要 (2)10 (3)酵母菌 平板澆注會(huì)使部分菌體埋入培養(yǎng)基中，酵母菌是兼性厭氧型生物，可以在低氧甚至無氧環(huán)境下生存繁殖 (4)1 6 (5)液體 2.(2018山東菏澤一

21、模)為探究大腸桿菌CV101菌株和CV103菌株的營養(yǎng)需求，某團(tuán)隊(duì)在營養(yǎng)成分相同的含醋酸鹽的培養(yǎng)液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，每隔一段時(shí)間統(tǒng)計(jì)兩種菌株的生長狀況。實(shí)驗(yàn) 數(shù)據(jù)如下圖所示，回答下列問題： (1)醋酸鹽培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上來看屬 培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基主要應(yīng)用 是 ；從功能上來看屬于 培養(yǎng)基。 (2)由圖可知：更適應(yīng)醋酸鹽培養(yǎng)基環(huán)境的菌株是 ，其依據(jù)是 _， 原因是_。 (3)若要統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)30小時(shí)后醋酸鹽培養(yǎng)基中的CV101活菌數(shù)，可采用 法；為保證能在固體培養(yǎng)基上獲得單個(gè)菌落，接種前，需取1 mL該菌液進(jìn)行 處理。 解析 (1)根據(jù)題干信息分析，

22、某團(tuán)隊(duì)在營養(yǎng)成分相同的含醋酸鹽的培養(yǎng)液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，因此該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，有利于菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)；從功能上看其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)據(jù)圖分析可知，在一定時(shí)間內(nèi)，CV101菌株在該培養(yǎng)基中數(shù)量持續(xù)增多，而CV103菌株的數(shù)量減少且維持在較低水平，說明CV101菌株能以醋酸鹽為碳源，因此CV101菌株是更適應(yīng)醋酸鹽培養(yǎng)基環(huán)境的菌株。(3)常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中后者可以用于菌種的計(jì)數(shù)；為保證能在固體培養(yǎng)基上獲得單個(gè)菌落，接種前，需取1 mL該菌液進(jìn)行梯度稀釋處理。 答案 (1)液體 擴(kuò)大培養(yǎng) 選擇 (2)CV101菌株 在一定時(shí)間內(nèi)，C

23、V101菌株在該培養(yǎng)基中數(shù)量持續(xù)增多，而CV103菌株的數(shù)量減少且維持在較低水平 CV101菌株能以醋酸鹽為碳源 (3)稀釋涂布平板 梯度稀釋 3.(2018開封市高三定位考試)燒傷病人容易感染綠膿桿菌，引起化膿性感染。比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥物。臨床使用時(shí)，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，從病人身上獲取少量樣本，按下列一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性。 (1)獲取綠膿桿菌單菌落 配制培養(yǎng)基。主要步驟是計(jì)算稱量溶化 分裝倒平板。 圖2所示接種方法為 法，這種方法的主要目的是使接種 物 。圖1的操作中，第一次劃線前

24、灼燒接種環(huán)的目的是防止雜菌污染， 第二次及之后的幾次劃線前灼燒接種環(huán)的目的是 。在圖2所示操作前，需要隨機(jī)取若干滅菌后 的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是 。 (2)檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感度 綠膿桿菌對不同抗生素的敏感度的對比、對照實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示：在恒溫箱培養(yǎng)3天后，培養(yǎng)基上有綠膿桿菌滋生，且除浸有無菌水的圓紙片外，其他浸有美羅培南、比阿培南、頭孢菌素或碳青霉烯類抗生素的圓紙片周圍都出現(xiàn)了抑菌環(huán)。 如果你是醫(yī)生，建議患者最好選用 抗生素，判斷的理由是 _。 (3)菌種保藏 將分離純化后的菌株接種到 上，在適宜條件下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后， 將試管置于4 冰箱中保藏待用。 (4)常采用 法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目 直接從靜置的培養(yǎng)液中取樣計(jì)數(shù)的做法是錯(cuò)誤的，正確的操作是_。 答案 (1)調(diào)pH和滅菌 平板劃線 逐步稀釋(以便獲得單個(gè)菌落) 殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種(使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端) 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 (2)美羅培南 抑菌圈最大，說明對綠膿桿菌的殺傷效果最好 (3)固體斜面培養(yǎng)基 (