生物藥物分析實(shí)驗(yàn)課講義

1、實(shí)驗(yàn) 胃蛋白酶片的測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆找晕傅鞍酌笢y定法測定胃蛋白酶片中胃蛋白酶的效價(jià)。實(shí)驗(yàn)原理：精密稱取本品適量，加鹽酸溶液制成每 1ml 中約含 0.2-0.4 個(gè)單位的溶液，照胃蛋白酶測定法，測定胃蛋白酶的效價(jià)。實(shí)驗(yàn)部分：1 .材料與設(shè)備血紅蛋白試液、三氟醋酸溶液、鹽酸溶液紫外可見分光光度計(jì)2 .操作步驟1) . 供試品溶液的制備取本品 5 片，置研缽中，加鹽酸溶液少許，研磨均勻，移至250ml 量瓶中，加上述鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密稱取適量，用上述鹽酸溶液稀釋制成每1ml 中約含 0.2-0.4個(gè)單位的溶液，作為供試品溶液。 2) . 對(duì)照品溶液的制備精密稱取酪氨酸對(duì)照品適量，加鹽酸

2、溶液稀釋制成每1ml 中約含 0.5mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。3)供試品的測定取大小相同的試管6 支，其中 3 支精密加入對(duì)照品溶液1ml ，另 3 支精密加入供試品溶液 1ml ，置 37 0.5水浴中，保溫5 分鐘，精密加入預(yù)熱至37 0.5的血紅蛋白試液 5ml ，搖勻，并準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，在37 0.5水浴中反應(yīng)10 分鐘，立即精密加入5%三氟醋酸溶液 5ml ，搖勻，濾過，取續(xù)濾液備用。另取試管2 支，各精密加入血紅蛋白試液5ml ，置 37 0.5水浴中保溫10 分鐘，再精密加入 5%三氟醋酸溶液5ml ，其中一支加供試品溶液 1ml ，另一支加上述鹽酸溶液1ml ，搖勻，濾過，取續(xù)濾

3、液，分別作為供試品和對(duì)照品的空白對(duì)照， 照紫外-可見分光光度法，在 275nm 的波長處測定吸光度， 按下列公式計(jì)算，即得。注意事項(xiàng)：思考題：實(shí)驗(yàn) 三磷酸腺苷二鈉片總核苷酸含量測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆找晕傅鞍酌笢y定法測定胃蛋白酶片中胃蛋白酶的效價(jià)。實(shí)驗(yàn)原理：精密稱取本品適量，加鹽酸溶液制成每1ml 中約含 0.2-0.4 個(gè)單位的溶液，照胃蛋白酶測定法，測定胃蛋白酶的效價(jià)。實(shí)驗(yàn)部分：1 .材料與設(shè)備血紅蛋白試液、三氟醋酸溶液、鹽酸溶液紫外可見分光光度計(jì)2 .操作步驟1) . 供試品溶液的制備取本品 5 片，置研缽中，加鹽酸溶液少許，研磨均勻，移至250ml 量瓶中，加上述鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精

4、密稱取適量，用上述鹽酸溶液稀釋制成每1ml 中約含 0.2-0.4個(gè)單位的溶液，作為供試品溶液。 2) . 對(duì)照品溶液的制備精密稱取酪氨酸對(duì)照品適量，加鹽酸溶液稀釋制成每1ml 中約含 0.5mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。3）供試品的測定取大小相同的試管6 支，其中 3 支精密加入對(duì)照品溶液1ml ，另 3 支精密加入供試品溶液 1ml ，置37 0.5水浴中，保溫5 分鐘，精密加入預(yù)熱至37 0.5的血紅蛋白試液 5ml ，搖勻，并準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，在37 0.5水浴中反應(yīng)10 分鐘，立即精密加入5%三氟醋酸溶液 5ml ，搖勻，濾過，取續(xù)濾液備用。另取試管2 支，各精密加入血紅蛋白試液5ml ，置

5、 37 0.5水浴中保溫10 分鐘，再精密加入 5%三氟醋酸溶液5ml ，其中一支加供試品溶液 1ml ，另一支加上述鹽酸溶液1ml ，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，分別作為供試品和對(duì)照品的空白對(duì)照， 照紫外-可見分光光度法，在 275nm 的波長處測定吸光度， 按下列公式計(jì)算，即得。注意事項(xiàng)：思考題：實(shí)驗(yàn)七 藥物的一般雜質(zhì)檢查一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?. 掌握藥物的一般雜質(zhì)檢查原理與實(shí)驗(yàn)方法。2. 熟悉一般雜質(zhì)檢查項(xiàng)目與意義。二、實(shí)驗(yàn)原理：藥物的一般雜質(zhì)： 是指在自然界中分布較廣泛， 在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)，如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、砷鹽、鐵鹽、重金屬等。1. 比色法（colorim

6、etry）是通過比較或測量有色物質(zhì)溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。比濁法是指測量透過懸浮質(zhì)點(diǎn)介質(zhì)的光強(qiáng)度來確定懸浮物質(zhì)濃度的方法，本法主要是用于測定能形成懸浮體的沉淀物質(zhì)。a、酸堿度檢查：是用藥典規(guī)定的方法對(duì)藥物中的酸度、堿度及酸堿度等酸堿性雜質(zhì)進(jìn)行檢查。 檢查時(shí)應(yīng)以新沸并放冷至室溫的水為溶劑。 不溶于水的藥物， 可用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解。常用的方法有酸堿滴定法，指示劑法以及ph直測定法。b、 氯化物檢查法： 氯化物在硝酸溶液中與硝酸銀作用， 生成氯化銀沉淀而顯白色渾濁，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液和硝酸銀在同樣條件下用同法處理生成的氯化銀渾濁程度相比較，測定供試品中氯化物的限量。反應(yīng)離子

7、方程式：cl-+ ag + f agcl j （白色）c、鐵鹽檢查法：三價(jià)鐵鹽在硝酸酸性溶液中與硫氟酸鹽生成紅色可溶性的硫氧酸鐵絡(luò) 離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后進(jìn)行比色。反應(yīng)離子方程式：fe3+ + 3scn- f fe （ scn 3 （紅棕色）。2.限量計(jì)算：雜質(zhì)限量=（v標(biāo)準(zhǔn)xc標(biāo)7隹）/w?。?x 100%式中v標(biāo)準(zhǔn)為標(biāo)準(zhǔn)液體積，c標(biāo) 準(zhǔn)為標(biāo)準(zhǔn)液濃度，w羊?yàn)闃悠啡恿?。三、?shí)驗(yàn)內(nèi)容：1 . 實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)備：葡萄糖、氯化鈉原料藥。25ml、50ml納氏比色管、刻度吸管、電子天平。2 .實(shí)驗(yàn)操作步驟：（一）葡萄糖 1、酸度取本品2.0g ,加水20ml溶解后，加酚mt指示液3滴與氫

8、氧化鈉滴定液（0.02mol/l ）0.20ml,應(yīng)顯粉紅色。2、溶液的澄清度與顏色取本品5g,加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至10ml,溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)?夜（附錄h）比較，不得更濃；如顯色，與對(duì)照液（取比色用氯化鉆液3ml、比色用重銘酸鉀液 3ml與比色用硫酸銅液 6ml加水稀釋成 50md 1.0ml加水稀釋至10ml 比較，不得更深。 3、乙醇溶液的澄清度取本品1.0g ,加90%!1 30ml,置水浴上加熱回流約 10分鐘，溶液應(yīng)澄清。4、氯化物取本品0.6g ,加水溶解使成25mli再加稀硝酸10ml;溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置 50ml 納氏比色管中，加水使成約

9、40mli搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液6.0ml,置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml力口水使成40ml搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中， 分別加入硝酸銀試液1.0ml， 用水稀釋， 使成 50ml， 搖勻， 在暗處放置 5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。供試溶液所顯渾濁度不得較對(duì)照液更濃（0.01% ）。5、干燥失重取本品，在105干燥至恒重，減失重量不得過9.5%。6、 硫酸鹽取本品2.0g ,加水溶解使成約 40ml溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置 50ml納氏比色管中， 加稀鹽酸2mli搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0ml,置50ml納氏比

10、色管中，加水使成約40ml,力口稀鹽酸2mli搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加 入25%g化鋼溶液5ml用水稀釋至 50ml充分搖勻，放置 10分鐘，同置黑色背景上，從 比色管上方向下觀察、比較。供試溶液所顯渾濁度不得較對(duì)照液更濃（ 0.01%）。 7、亞硫酸鹽與可溶性淀粉取本品1.0g ,加水10ml溶解后，加碘試液 1滴，應(yīng)即顯黃色。8、鐵鹽取本品2.0g ,加水20ml溶解后，加硝酸3滴，緩緩煮沸5分鐘，放冷，加水稀釋使成 45ml加硫氟酸鏤溶液（30-100） 3ml搖勻，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液2.0ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（ 0.001%）。 9、 蛋

11、白質(zhì)取本品1.0g,加水10ml溶解后，加磺基水楊酸溶液（1-5） 3ml,不得發(fā)生沉淀。（二）氯化鈉雜質(zhì)檢查1、溶液的澄清度取本品 5.0g ，加水 25ml 溶解后，溶液應(yīng)澄清。2、碘化物取本品的細(xì)粉 5.0g ，置瓷蒸發(fā)皿內(nèi)，滴加新配制的淀粉混合液適量使晶粉濕潤，置日光下（或日光燈下）觀察， 5 分鐘內(nèi)晶粒不得顯藍(lán)色痕跡。3、硫酸鹽取本品 5.0g ，加水溶解成約40ml （溶解如顯堿性，可滴加鹽酸使成中性），溶液如不澄清，應(yīng)濾過，置50ml 納氏比色管中，加稀鹽酸2ml ，搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 1.0ml 置 50ml 納氏比色管中，加水使成約 40ml ，加稀鹽酸2

12、ml ，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml ，用水稀釋使成50ml ，充分搖勻，放置10 分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，供試品管不得更濃（0.002%） 。4、鋇鹽取本品 4.0g ，加水 20ml ，溶解后，濾過，濾液分為兩等份， 1 份中加稀硫酸2ml ，另一份中加水 2ml ，靜置 15分鐘，兩液應(yīng)同樣澄清。四、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：1、比色管的正確使用選擇配對(duì)的兩支納氏比色管，用清潔液蕩洗除去污物，再用水沖洗干凈。采用旋搖的方法使管內(nèi)液體混合均勻。2、平行操作標(biāo)準(zhǔn)與樣品必須同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，加入試劑量等均應(yīng)一致。觀察時(shí)，兩管受光照的程度應(yīng)

13、一致，使光線從正面照入，比色時(shí)置白色背景上，比濁時(shí)置黑色背景上，自上而下地觀察。五、 思考題4.1 中國藥典 （ 2000 年版） 在葡萄糖雜質(zhì)檢查中規(guī)定檢查十二項(xiàng)， 是根據(jù)什么原則制 訂的？目的何在？4.2 重金屬與砷鹽檢查的原理是什么？如何計(jì)算其限量？5 參考文獻(xiàn)5.1 葡萄糖： 中國藥典（ 2000 年版） 二部，第815 頁實(shí)驗(yàn) 過氧化氫酶活性測定（高錳酸鉀滴定法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆毡壬y定過氧化物酶活性的原理和操作方法二、實(shí)驗(yàn)原理過氧化氫酶普遍存在于植物的所有組織中， 其活性與植物的代謝強(qiáng)度及抗寒、 抗病能力有一定關(guān)系，故常加以測定。過氧化氫酶（catalase）屬于血紅蛋白酶，含有

14、鐵，它能催化過氧 化氫分解為水和分子氧， 在此過程中起傳遞電子的作用， 過氧化氫則既是氧化劑又是還原劑?？筛鶕?jù)h2o2 的消耗量或o 2的生成量測定該酶活力大小。 在反應(yīng)系統(tǒng)中加入一定量 （反應(yīng)過量）的過氧化氫溶液，經(jīng)酶促反應(yīng)后，用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液（在酸性條件下）滴定多余的過氧化氫。即可求出消耗的h2o2 的量。三、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料：小麥葉片（二）儀器設(shè)備： 1. 研缽； 2. 三角瓶； 3. 酸式滴定管； 4. 恒溫水??； 5. 容量瓶。（三）試劑：10%h 2so4； 0.2 mol/l ph7.8 磷酸緩沖液； 0.1mol/l 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液（稱：取kmno 4（ar）

15、3.1605g， 用新煮沸冷卻蒸餾水配制成1000ml ， 再用 0.1mol/l 草酸溶液標(biāo)定）；4. 0.1mol/l h2o2市售 30%h2o2大約等于 17.6mol/l ,取 30%大。2溶液 5.68ml,稀釋至 1000ml,用標(biāo)準(zhǔn) 0.1mol/l kmno 4溶液（在酸性條件下）進(jìn)行標(biāo)定； 5. 0.1mol/l 草酸：稱取優(yōu)級(jí)純h2c2042h2o 12.607g,用蒸儲(chǔ)水溶解后，定容至 1000ml。三、實(shí)驗(yàn)步驟（一）酶液提?。喝⌒←溔~片 2.5g 加入 ph7.8 的磷酸緩沖溶液少量，研磨成勻漿，轉(zhuǎn)移至 25ml 容量瓶中，用該緩沖液沖洗研缽，并將沖洗液轉(zhuǎn)至容量瓶中，

16、用同一緩沖液定容，4000rpm 離心 15min ，上清液即為過氧化氫酶的粗提液。（二）取 50ml 三角瓶 4 個(gè)（兩個(gè)測定，另兩個(gè)為對(duì)照） ，測定瓶加入酶液2.5ml ，對(duì)照加煮死酶液2.5ml,再加入2.5ml 0.1mol/l h 2o2,同時(shí)計(jì)時(shí)，于 30c恒溫水浴中保溫 10min,立即加入10%h2so42.5ml 。用 0.1mol/l kmno 4標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，至出現(xiàn)粉紅色（在30min 內(nèi)不消失）為終點(diǎn)。四、結(jié)果處理酶活性用每g 鮮重樣品 1min 內(nèi)分解 h2o2 的 mg 數(shù)表示：過氧化氫酶活性（h2o2mg/g/min ） = （ a-b ） vsx1.7 t）式中

17、：a對(duì)口k kmno4滴定ml數(shù)；b酶反應(yīng)后kmno滴定ml數(shù)；vt提取酶液總量（ml）;vs反應(yīng)時(shí)所用酶液量（ml）； w樣品鮮重（g）; t反應(yīng)時(shí)間（min）;1.71ml 0.1mol/l kmno 4相當(dāng)于1.7mgh2o2。過氧化氫酶的活性測定 :在植物體中，黃素氧化酶類的代謝產(chǎn)物常包含h2o2,如光呼吸中的乙醇酸氧化酶、呼吸作用中的葡萄糖氧化酶、氨基酸氧化酶、醛氧化酶等。h2o2 的積累可導(dǎo)致破壞性的氧化作用，而過氧化物酶和過氧化氫酶則可以清除h2o2,是植物體內(nèi)重要的活性氧清除系統(tǒng)之一。 其活性還與植物的抗逆性有密切關(guān)系， 本實(shí)驗(yàn)利用高錳酸鉀滴定法測定過氧化氫酶活性。一、 原理：

18、 過氧化氫酶屬于血紅蛋白酶， 含有鐵， 它能催化過氧化氫分解為水和分子氧，在此過程中起傳遞電子的作用，h 2o2 則既是氧化劑，又是還原劑。r（fe+2） h2o2=r（fe+3oh -）2r（fe+3oh-） 2 h2o2=r（fe+2）22h2o o2合并上式：2h 2o2=2h 2o o2據(jù)此，可根據(jù)h 2o2 的消耗量或o2 的生成量測定該酶活力大小。在反應(yīng)系統(tǒng)中加入一定量（反應(yīng)過量） 的過氧化氫溶液，經(jīng)酶促反應(yīng)后，用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液（在酸性條件下）滴定多余的過氧化氫。5h2。2+ 2kmno 4+ 4h2so4f 5o2 + 2khso4+ 8h2o+ 2mnso4即可求出消耗的h

19、2o2 量。二、儀器和用具：研缽、三角瓶50cm3%、鐵架、酸式滴定管、恒溫水浴、容量瓶三、試劑：10h2so4； 0.2mol/l 磷酸緩沖液ph7.8；0.1mol/l 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液： 3.1605gkmno 4 （ar） 用新煮沸的蒸餾水配制成1000ml ，用 0.1mol/l 的草酸溶液標(biāo)定；0.1mol/lh 2o2：市售30%出。2大約等于17.6mol/l, 取30%力。2溶液5.68ml稀釋至 1000ml ，用標(biāo)準(zhǔn) 0.1mol/l kmno 4溶液（在酸性條件下）進(jìn)行標(biāo)定。四、方法：1. 酶液提?。?取小麥葉片 2.5g 加入 ph7.8 的磷酸緩沖液少量，研磨成勻漿，

20、轉(zhuǎn)移至25ml 容量瓶中，將研缽沖洗干凈，沖洗液轉(zhuǎn)移至容量瓶中，并用同一緩沖液定容， 4000rpm 離心，上清液即為過氧化氫酶粗提液。2. 取 50ml 三角瓶 4 個(gè)（兩個(gè)測定，兩個(gè)對(duì)照） ，測定加入酶液2.5ml ，對(duì)照為煮死酶液2.5ml;再加入2.5ml 0.1mol/l h 2o2,同時(shí)計(jì)時(shí)間，于30c恒溫水浴中保溫10分鐘，立即 加入10h2so4 2.5ml 。3.用0.1mol/l kmno 4標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定h2o2,至出現(xiàn)粉紅色（在 30分鐘內(nèi)不消失）為終 點(diǎn)。4. 結(jié)果計(jì)算：酶活性用每克鮮重樣品在 10 分鐘內(nèi)分解h2o2 的毫克數(shù)表示：（a-b）*vt/v1*1.7酶活（

21、酶分解的 h2o2 mg/g鮮重）=w式中： a -對(duì)照用 kmno 4 ml數(shù)b -酶反應(yīng)后kmno 4滴定ml數(shù)v t-酶液總量mlv1-反應(yīng)所用酶液量 mlw-樣品鮮重（g）1.7 1ml 0.1mol/l kmno 4相當(dāng)于1.7mg h2o2注意.所用kmno 4溶液及h2o2溶液使用前要經(jīng)過標(biāo)定，0.1mol/l h 2o2要新配制。實(shí)驗(yàn)比色法測定過氧化物酶活性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握比色法測定過氧化物酶活性的原理和操作二、原理過氧化物酶是植物體內(nèi)普遍存在的、 活性較高的一種酶， 它與呼吸作用、光合作用及生長素 的氧化等都有密切關(guān)系， 在植物生長發(fā)育過程中， 它的活性不斷發(fā)生變化， 因此測

22、量這種酶， 可以反映某一時(shí)期植物體內(nèi)代謝的變化。在有過氧化氫存在下，過氧化物酶能使愈創(chuàng)木酚氧化，生成茶褐色物質(zhì)，該物質(zhì)在470nm處有最大吸收，可用分光光度計(jì)測量470nm的吸光度變化測定過氧化物酶活性。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）實(shí)驗(yàn)材料馬鈴薯塊莖。（二）試劑、設(shè)備1 .100 mmol / l磷酸緩沖液 ph6.0 （見附錄）。2 .反應(yīng)混合液：100 mmol/l磷酸緩沖液（ph6.0） 50ml于燒杯中，加入愈創(chuàng)木酚 28小 于磁力攪拌器上加熱攪拌，直至愈創(chuàng)木酚溶解，待溶液冷卻后，加入30 %過氧化氫19人混合均勻，保存于冰箱中。分光光度計(jì)，研缽，恒溫水浴鍋，100 ml容量瓶，吸管，離心機(jī)。（

23、三）實(shí)驗(yàn)步驟1 .稱取植物材料1g,剪碎，放入研缽中，加適量的磷酸緩沖液研磨成勻漿，以4000r/min離心15 min ,上清液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，殘?jiān)儆?5ml磷酸緩沖液提取一次，上清液 并入容量瓶中，定容至刻度，貯于低溫下備用。2 .取光徑1cm比色杯2只，于1只中加入反應(yīng)混合液 3ml和磷酸緩沖液1ml,作為對(duì)照， 另1只中加入反應(yīng)混合液 3ml和上述酶液1ml （如酶活性過高可稀釋之），立即開啟秒表 記錄時(shí)間，于分光光度計(jì)上測量波長470nm下吸光度值，每隔1min讀數(shù)一次。四、結(jié)果計(jì)算以每分鐘吸光度變化值表示酶活性大小，即以aa470 /min g（鮮重）表示之。也可以用每1

24、 min內(nèi)a 470變化0.01為1個(gè)過氧化物酶活性單位（u）表示。過氧化物酶活性 u/ （g min ）=式中：aa 470反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化。w 植物鮮重，g。v t一提取酶液總體積， ml 。v s 測定時(shí)取用酶液體積，ml。t 反應(yīng)時(shí)間，min。實(shí)驗(yàn)葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查一、實(shí)驗(yàn)要求1 .掌握一般雜質(zhì)檢查的項(xiàng)目及雜質(zhì)限量計(jì)算方法。2 .掌握一般雜質(zhì)檢查的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理1 .酸堿度檢查是指用藥典規(guī)定的方法對(duì)藥物中的酸度、 堿度及酸堿度等酸堿性雜質(zhì)進(jìn)行檢查。 檢查時(shí) 應(yīng)以新沸并放冷至室溫的水為溶劑。 不溶于水的藥物，可用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解。 常用 的方法有酸堿滴定法，指示劑

25、法以及 ph值測定法。2 .氯化物檢查是指藥物中微量氯化物在硝酸溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀白色渾濁液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁相比較，以判斷供試品中氯化物的限量cl-+agno 3-agcl j3 .硫酸鹽檢查是指藥物中微量硫酸鹽與氯化鋼試液在酸性溶液中作用生成的白色渾濁液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋼試液在相同的條件下生成的渾濁比較，以判斷供試品中硫酸鹽的限量。2 一so 4 +bacl2 baso4 j4 .鐵鹽檢查是指藥物中三價(jià)鐵鹽在酸性溶液中與硫氧酸鹽試液生成紅色可溶性的硫氧酸鐵配離子， 與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，用同法處理后進(jìn)行比色，以判斷供試品中

26、三價(jià)鐵鹽的限量。fe3+6scn - fe （scn） 63-5 .重金屬檢查是指重金屬（以鉛為代表）在弱酸性（ph33.5）溶液中與硫代乙酰胺或硫化鈉作用，生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后的顏色比較，以控制藥品中重金屬含量。ch 3csnh 2f ch3conh 2+h 2s pb2+h2spbsj6 .神鹽檢查（古蔡氏法）是利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中微量神鹽作用生成具揮發(fā)性的神化 氫，遇澳化汞試紙，產(chǎn)生黃色至棕色的神斑，與定量標(biāo)準(zhǔn)神溶液所生成的神斑比較，以判斷 藥物中神鹽的限量。aso 33-+3zn+9h +- ash3 j +3zn+3h

27、 2oash3+2hgb2-2hbr+ash （hgbr） 2（黃色）ash3+3hgb2-3hbr+as （hgbr） 3 （棕色）五價(jià)神在酸性溶液中也能被金屬鋅還原為神化氫，但生成神化氫的速度較三價(jià)神慢， 故在反應(yīng)液中加入碘化鉀及酸性氯化亞錫將五價(jià)碑還原為三價(jià)神，碘化鉀被氧化生成碘， 碘又可被氯化亞錫還原為碘離子。aso43+2i-+2h+一 aso33-+i2+h2o aso 43-+sn2+ 一 aso3 3-+sn4+h2o i2+sn2+2i-+sn4+溶液中的碘離子，又可與反應(yīng)中產(chǎn)生的鋅離子生成穩(wěn)定的配離子，有利于生成神化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行。4i-+zn2+-znl42-7 .熾灼

28、殘?jiān)鼨z查在機(jī)藥物經(jīng)熾灼炭化，再加硫酸濕潤，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后， 于高溫（700800c） 熾灼至完全灰化，使有機(jī)物破壞分解變?yōu)閾]發(fā)性物質(zhì)逸出，殘留的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)（多為金屬的氧化物或無機(jī)鹽類）稱為熾灼殘?jiān)?，或稱為硫酸鹽灰分。三、實(shí)驗(yàn)步驟8 .酸度取本品2g,加新沸過的冷水20ml溶解后，加酚酬:指示液3滴與氫氧化鈉滴定液（0.02mol/l） 0.2ml,應(yīng)顯粉紅色。9 .氯化物取本品0.60g,加水溶解使成 25ml （溶解加顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10ml;溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置 50ml納氏比色管中，加水使成約40ml,搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（1

29、0wgcl/ml）6.0ml,置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml, 加水使成40ml,搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中， 分別加入硝酸銀試液 1.0ml, 用水稀釋使成50ml,搖勻，在暗處放置 5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察， 比較，供試溶液不得比對(duì)照液更濃（0.01%）。10 硫酸鹽取本品2.0g,加水溶解使成約 40ml （溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置 50ml納氏比色管中，加稀鹽酸 2ml、搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫 酸鉀溶液（100pgsq27ml） 2.0ml,置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml,加稀鹽酸2m

30、l, 搖勻，即得對(duì)照溶液，于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入25%的氯化鋼溶液5ml,用水稀釋成50ml,充分搖勻，放置10分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，供 試溶液不得比對(duì)口溶液更濃（0.01%）。11 鐵鹽取本品2.0g,加水20ml溶解后，加硝酸 3滴，緩緩煮沸5分鐘，放冷，加水稀釋使成 45ml,加硫氟酸俊溶液（30- 100） 3ml,搖勻，如顯色、與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液2.0ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.001%）。12 重金屬取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（ 10ug pb/ml） 2ml,加醋酸鹽緩沖液 （ph3.5） 2ml,加水稀釋成 2

31、5ml。取本品4.0g置于乙管中，加水 23ml溶解，加醋酸鹽緩沖液（ph3.5） 2ml,若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其它無干擾的有 色溶液，使之與乙管一致；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml,搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深（含重金屬不得 過百萬分之五）。13 神鹽取本品2.0g,置檢神瓶中，加水 5ml溶解后，加稀硫酸 5ml與澳化鉀澳試液 0.5ml,置 水浴上加熱約20分鐘，使保持稍過量的澳存在，必要時(shí)，再補(bǔ)加澳化鉀澳試液適量，并隨 時(shí)補(bǔ)充蒸散的水分，放冷，加鹽酸 5ml與水適量使成28ml,加碘化鉀試液 5

32、ml與酸性氯化 亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,迅速將瓶塞塞緊（瓶塞上已置有醋酸鉛 棉花及澳化汞試紙的檢神管），并在2540c的水浴中反應(yīng) 45分鐘，取出澳化汞試紙，將生 成的神斑與標(biāo)準(zhǔn)神溶液一定量制成的標(biāo)準(zhǔn)神斑比較，顏色不得更深，含碑量不得過百萬分之o標(biāo)準(zhǔn)神斑制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)神溶液（1（ig/ml 2ml,置另一檢神瓶中，加鹽酸 5ml與水21ml,照上述方法自 加碘化鉀試液5ml ”起依法操作，即得標(biāo)準(zhǔn)神斑。14 熾灼殘?jiān)”酒?.0g,置已熾灼至恒重的堪竭中， 精密稱定，緩緩熾灼至完全灰化， 放冷至室溫， 加硫酸0.51ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，在 7008

33、00 c熾灼使完全灰化，移置 干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在 700800 c熾灼至恒重，即得。所得熾灼殘?jiān)坏贸^ 0.1%。四、注意事項(xiàng)1 .比色或比濁操作，均應(yīng)在納氏比色管中進(jìn)行。選擇比色管時(shí)，應(yīng)注意樣品管與標(biāo)準(zhǔn) 管的體積相等，玻璃色質(zhì)一致，管上刻度均勻，高低一致，如有差別，不得超過2mm。2 .樣品液與對(duì)照品液的操作應(yīng)遵循平行操作的原則，并應(yīng)注意按操作順序加入各種試 劑。3 .比色、比濁前應(yīng)使比色管內(nèi)試劑充分混勻，然后將兩管同置于黑色或白色背景上， 自上而下觀察。4 .神鹽檢查時(shí)，取用的樣品管與標(biāo)準(zhǔn)管應(yīng)力求一致，管的長短，內(nèi)經(jīng)一定要相同，以 免生成的色斑大小不同，影響比色。鋅粒

34、加入后，應(yīng)立即將檢神管蓋上，塞緊，以免ash3氣體逸出。5 .熾灼殘?jiān)鼤r(shí)，恒重的操作條件，如所用的干燥器、增竭鉗、堪蝸置于干燥器內(nèi)放置 時(shí)間等，必須一致。五、問題與討論1 . 一般雜質(zhì)檢查的主要項(xiàng)目有哪些？2 .比色、比濁操作應(yīng)遵循的原則是什么？3 .簡述古蔡氏法檢神所加各個(gè)試劑的作用與操作注意點(diǎn)。4 .熾灼殘?jiān)某蓴￡P(guān)鍵是什么？恒重的概念和意義是什么？實(shí)驗(yàn)三藥物的特殊雜質(zhì)檢查一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? .熟悉某些藥物中的特殊雜質(zhì)。2 .掌握特殊雜質(zhì)檢查的幾種主要方法及操作。二、實(shí)驗(yàn)原理1.麻醉乙醛在空氣、日光及濕氣的作用下，易氧化分解為有毒的過氧化物，過氧化物 與碘化鉀淀粉溶液反應(yīng)，可產(chǎn)生蘭藍(lán)色。反應(yīng)式

35、可表示如下：c2h5ooc2h5+2ki+h 2-c 2h5oc2h5+5koh+i 212+淀粉一蘭色2 .乙酰水楊酸屬芳酸酯類藥物，在生產(chǎn)和貯存過程中均會(huì)產(chǎn)生水楊酸。水楊酸對(duì)人體 有毒。應(yīng)對(duì)其進(jìn)行限度檢查。 其檢查原理是利用水楊酸具有酚羥基，可與高鐵鹽溶液作用形成紫藍(lán)色，而乙酰水楊酸因無酚羥基，不呈此反應(yīng)。cookc006 f v311 +4fenh. （so j 一 c （斥+ 4nh.hsa+4h*5o.7 .腎上腺素是由腎上腺酮經(jīng)氫化還原制成。若氫化不完全，可能引進(jìn)酮體雜質(zhì)，所以藥 典規(guī)定應(yīng)檢查酮體。其檢查原理是利用酮體雜質(zhì)在310nm波長處有最大吸收，而腎上腺素藥物本身在此波長處幾

36、乎沒有吸收。根據(jù)雜質(zhì)的吸光度，可控制腎上腺素中酮體的限量。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容操作步驟8 .麻醉乙醛中過氧化物的檢查取本品5ml,置總?cè)萘坎怀^ 15ml的具塞比色管中，加新制的碘化鉀淀粉溶液（取碘 化鉀10g,加水溶解成95ml,再加淀粉指示液 5ml,混合）8ml,密塞，強(qiáng)力振搖1分鐘， 在暗處放置30分鐘，兩液層均不得染色。9 .阿司匹林腸溶片中游離水楊酸的檢查取本品5片，研細(xì)，用乙醇 30ml分次研磨，并移入 100ml量瓶中，充分振搖，用水稀 釋至刻度，搖勻，立即濾過，精密量取續(xù)濾液2ml,置50ml納氏比色管中，用水稀釋至50ml, 立即加新制的稀硫酸鐵錢溶液（取1ml/l鹽酸溶液1ml,

37、加硫酸鐵俊指示液 2ml后，再加水適量使成100ml） 3ml,搖勻，30秒鐘內(nèi)如顯色，與對(duì)照液（精密量取0.01%水楊酸溶液4.5ml, 加乙醇3ml、0.05%酒石酸溶液1ml,用水稀釋至50ml,再加上述新制的稀硫酸鐵錢溶液3ml,搖勻）比較，不得更深（1.5%）10 腎上腺素中酮體的檢查取本品，加鹽酸溶液（9一2000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，照紫外-可見分光光度 法（中國藥典2005年版附錄2223頁），在310nm的波長處測定，吸光度不得過 0.05。四、注意事項(xiàng)1.進(jìn)行水楊酸檢查時(shí)，應(yīng)在中性或弱酸性溶液（ph46）中進(jìn)行。若在強(qiáng)酸性溶液中,生成的紫蘭色配合物會(huì)分解褪色。

38、2.該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長 小nm以內(nèi)。五、問題與討論1 .特殊雜質(zhì)檢查的常用方法有哪些？2 .利用紫外-可見分光光度法檢查雜質(zhì)有何優(yōu)點(diǎn)？3 .薄層色譜法檢查雜質(zhì)常用的方法有哪幾種？其結(jié)果如何判斷?實(shí)驗(yàn) 苯甲酸鈉的含量測定一、目的掌握雙相滴定法測定苯甲酸鈉含量的原理和操作二、原理苯甲酸鈉為有機(jī)酸的堿金屬鹽，顯堿性，可用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定。coona+ hclcooh+ nacl在水溶液中滴定時(shí)，由于堿性較弱 （pkb=9.80）突躍不明顯，故加入與水不相溶混的溶劑 乙醛提除反應(yīng)生成物苯甲酸， 使反應(yīng)定量完成，同時(shí)也避免了苯甲酸在瓶中析出影響終點(diǎn)的 觀察。三、實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)備4 甲酸鈉、鹽酸（0.5mo

39、l/l）、乙醛、甲基橙指示液分液漏斗、酸式滴定管、具塞錐形瓶、四、操作步驟取本品1.5g,精密稱定，置分液漏斗中，加水約25ml ,乙醛50ml與甲基橙指示液2滴, 用鹽酸滴定液（0.5mol/l）滴定，隨滴隨振搖，至水層顯持續(xù)橙紅色，分取水層，置具塞錐形 瓶中，乙醛層用水5ml洗滌，洗滌液并入錐形瓶中，加乙醛20ml,繼續(xù)用鹽酸滴定液（0.5mol/l） 滴定，隨滴隨振搖，至水層顯持續(xù)橙紅色，即得，每 1ml的鹽酸滴定液（0.5mol/l）相當(dāng)于 72.06mg 的 c7h5o2na。本品按干燥品計(jì)算，含 c7h5o2na不得少于99.0%四、注意事項(xiàng)1 .滴定時(shí)應(yīng)充分振搖，使生成的苯甲酸轉(zhuǎn)

40、入乙醛層。2 .在振搖和分取水層時(shí)， 應(yīng)避免樣品的損失，滴定前，應(yīng)用乙醛檢查分液漏斗是否嚴(yán)密。五、思考題1 .乙醛為什么要分兩次加入 ？第一次滴定至水層顯持續(xù)橙紅色時(shí)，是否已達(dá)終點(diǎn)？為什2 .分取水層后乙醛層用 5ml水洗滌的目的是什么？實(shí)驗(yàn) 雙波長分光光度法測定復(fù)方磺胺甲嗯陛片的含量、目的1 .掌握復(fù)方制劑的分析特點(diǎn)及賦形劑的干擾與排除方法。2 .掌握雙波長分光光度法測定復(fù)方磺胺甲嗯陛片中磺胺甲嗯 陛與甲氧茉咤含量的原理與方法。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1 .供試品溶液的制備取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺甲嗯 陛50mg與氧茉咤10mg）,置于100ml量瓶中，加乙醇適量，振搖

41、15分鐘磺胺甲口惡陛與甲氧茉咤溶解，加乙 醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。2 .對(duì)照品溶液的制備精密稱取105c干燥至恒重的磺胺甲嗯 陛對(duì)照品50mg與甲氧芳咤對(duì)照品 10mg,分置 100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度， 搖勻，分別作為對(duì)照品溶液（1）與對(duì)照品溶液（2）。 3.磺胺甲嗯陛的測定精密量取供試品溶?與對(duì)照品溶液（1）、（2）各2ml,分置100ml量瓶中，各加0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻。取對(duì)照品溶液（2）的稀釋液；以257nm為測定波長（4），在304nm 波長附近（每間隔0.5nm）選擇等吸收點(diǎn)波長為參與波長（浦，要求 a=a入2 a入1=0。

42、再在 k與加波長處分別測定供試品溶液的稀釋液與對(duì)照品溶液（1）的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值（a）,計(jì)算，即得。4 .甲氧茉咤的測定精密量取上述供試品溶液與對(duì)照品溶液（1）（2）各5ml,分置100ml量瓶中，各加鹽酸一氯化鉀溶液取鹽酸液（0.1mol/l）75ml與氯化鉀6.9g,加水至1000ml搖勻稀釋至刻度，搖 勻。取對(duì)照品溶液（1）的稀釋液，以239.0nm為測定波長（與，在295nm波長附近（每間隔0.2nm） 選擇等吸收點(diǎn)波長為參比波長（斯，要求 a=a入2 a入1=0。再在 力與入 1波長處分別測定供試品溶液的稀釋液與對(duì)照品溶液（2）的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差

43、值（aa）,計(jì)算，即得。本品每片中含磺胺甲嗯口坐（c10h11n3o2s）應(yīng)為0.3600.440g,含甲氧茉咤（c14h12n4o3）應(yīng)為72.0-88.0mgo說明1 .磺胺甲嗯 陛與甲氧節(jié)咤的結(jié)構(gòu)分別為:ch3nh2(smz)(tmp)smz 與 tmp的紫外吸收?qǐng)D譜分別為：圖 1.smz 的紫外吸收?qǐng)D譜1 tmp(2.0 w g/i)l 2 smz(10.0 科 g/ml)3 smz tmp ；4 輔料圖 2.tmp 的紫外吸收?qǐng)D譜1 tmp(5.0 科 g/mil) 2 smz(25.0 科 g/ml)3 smz tmp ；4 輔料2 .復(fù)方磺胺甲嗯吵片的處方為：磺胺甲嗯吵400g甲

44、氧芐啶80g制成 1000 片3 .本實(shí)驗(yàn)采用雙波長分光光度法測定 smz 和 tmp 的含量。 由于干擾組分在測定波長和參比波長處吸收度相等，可在計(jì)算 a時(shí)消去，所以應(yīng)用本法可以不經(jīng)分離，直接測定復(fù)方 制劑中 smz 和 tmp 的含量。四、思考題1 .試簡述雙波長分光光度法的原理。2 .試查閱本品的其它分析方法，從中了解復(fù)方制劑分析的特點(diǎn)及發(fā)展趨勢。實(shí)驗(yàn) 維生素 c 片的質(zhì)量分析一、目的要求1、 掌握碘量法的原理和操作方法。2、掌握常用輔料對(duì)制劑含量測定的影響和排除方法。3、掌握制劑的含量計(jì)算方法。二、實(shí)驗(yàn)原理維生素c （vc）又稱抗壞血酸，分子式為c6h8。6。vc具有還原性，可被i2定

45、量氧化，因而可用 i 2標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。其滴定反應(yīng)式為：c6h8o6+i2=c6h6o6+2hi 。用直接碘量法可測定藥物中的 vc 含量。由于 vc 的還原性很強(qiáng)，較易被溶液和空氣中的氧氧化，在堿性介質(zhì)中這種氧化作用更強(qiáng)，因此滴定宜在酸性介質(zhì)中進(jìn)行，以減少副反應(yīng)的發(fā)生?？紤]到在強(qiáng)酸性溶液中也易被氧化，故一般選在 ph=34的弱酸性溶液中進(jìn)行滴定。三、主要儀器與藥品棕色滴定管：25 ml、移液管：50 ml、刻度吸管、量瓶 100ml維生素 c 片、維生素c 注射液、 i2 溶液、淀粉指示液四、操作維生素 c 為白色或略帶淡黃色片，含維生素 c 應(yīng)為標(biāo)示量的 93.0%-107.0% 。（一

46、）維生素c 片取本品適量相當(dāng)于含 vc1.0g ，加水 20ml ，振搖使溶解；將溶液濾過，取濾液，照紫外-可見分光光度法（附錄iva）,在420nm的波長處測定吸光度，不得過 0.07。取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于維生素c 0.2g）,置100 ml量瓶中，加新沸過的冷水 100 ml與2mol l-1稀醋酸10 ml的混合液適量，振搖使維生素c溶解并稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)干燥濾紙迅速濾過，精密量取續(xù)濾液50 ml ，加淀粉指示液1ml,用（0.05 mol/l碘滴定液）滴定，至溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30s不褪。每1ml碘滴定液相當(dāng)于 8.806 mg 的維生素 c。（二）維

47、生素c 注射液c應(yīng)為標(biāo)本量的本品為維生素 c的滅菌水溶液，無色或微黃色的澄明液體。含維生素 90.0%110.0%。本品中可加適量的焦亞硫酸鈉為穩(wěn)定劑。精密量取本品適量（約相當(dāng)于維生素 c 0.2 g）,加水15 ml與丙酮2 ml，搖勻，放 置5 min ,加稀醋酸4 ml與淀粉指示液1 ml ,用碘滴定液（0.05mol/l ）滴定，至溶液顯 藍(lán)色并持續(xù)30 s不褪。每1 ml碘滴定液相當(dāng)于 8.806 mg的維生素c 。五、注意事項(xiàng)維生素c在空氣中易被氧化，過濾、滴定等操作應(yīng)迅速。六、思考題1 .溶解i2時(shí)，加入過量 ki的作用是什么？2 .維生素c固體試樣溶解時(shí)為何要加入新煮沸并冷卻的

48、蒸儲(chǔ)水？3 .碘量法的誤差來源有哪些？應(yīng)采取哪些措施減小誤差？i2溶液（約0.05mol l-1）：稱取3.3g i2和5g ki ,置于研缽中，加少量水，在通風(fēng)櫥中研 磨。待i2全部溶解后，將溶液轉(zhuǎn)入棕色試劑瓶中，加水稀釋至250ml,充分搖勻，放暗處保存。實(shí)驗(yàn)非水滴定法測定諾氟沙星（氟哌酸）膠囊含量一、目的1 .掌握非水滴定法的原理及操作 ；2 .熟悉非水滴定在藥物分析中的應(yīng)用。二、實(shí)驗(yàn)原理1 .定義：非水溶液滴定法即在非水溶劑中進(jìn)行的滴定分析方法。一些很弱的酸或堿以及某些鹽類，在水溶液中進(jìn)行滴定時(shí)，沒有明顯的滴定突躍， 難于掌握滴定終點(diǎn)；另外還有一些有機(jī)化合物，在水中溶解度很小，因此，以

49、水作溶劑的滴定分析受到一定的限制。 所以，滴定分析法逐漸采用了各種非水溶劑作為滴定分析的介質(zhì)，不僅能增大有機(jī)化合物的溶解度，而且能改變物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)（例如酸堿性及其強(qiáng)度），使在水中不能進(jìn)行完全的滴定反應(yīng)能夠順利進(jìn)行。2 .非水溶液酸堿滴定法：是利用非水溶劑來改變物質(zhì)的酸堿相對(duì)強(qiáng)度，即在水溶液中呈 弱酸性或弱堿性的化合物，由于酸堿度太弱，不可能得到滴定的終點(diǎn)。 如果選擇某些適當(dāng)?shù)姆撬軇槿軇┦够衔镌黾酉鄬?duì)的酸度成為強(qiáng)酸，或者增加相對(duì)的堿度成為強(qiáng)堿，就可以順利地進(jìn)行滴定的分析方法。3 .應(yīng)用：本法主要用來測定有機(jī)堿及其氫鹵酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽或有機(jī)酸鹽以及有機(jī) 酸堿金屬鹽類藥物的含量，也用于測

50、定某些有機(jī)弱酸含量。三、實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)備諾氟沙星膠囊、丙二酸、醋酊、冰醋酸、高氯酸、橙黃iv指示液酸式滴定管、試管、燒杯、水浴鍋等四、操作步驟1 .諾氟沙星的鑒別（1）取本品內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于諾氟沙星 0.15g）置干燥試管中，加丙二酸0.1g與醋酊2ml,振搖，并在80 90c水浴中加熱1015mm,顯紅棕色。（2）取本品內(nèi)容物適量，加0.4 %氫氧化鈉溶液適量， 振搖使諾氧沙星溶解，稀釋成每1ml 中含諾氟沙星5科自濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，在 273, 325與336nm波長處測定有最 大吸收。2 .含量測定 精密稱取本品內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于諾氟沙星 0.25g）,加冰醋酸30ml,振

51、搖 使諾氟沙星溶解，加橙黃iv指示液10滴，用高氯酸液（0.1mol/l）滴定，至溶液顯紫紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。五、注意事項(xiàng)90.0110.0%,滴定時(shí)，每 1ml0.1mol/l1.chp2010版規(guī)定本品含諾氟沙星應(yīng)為標(biāo)示量的 的高氯酸液相當(dāng)于 31.93mg的ci6h18fn3o3。2 . 0.1mol/l的高氯酸溶液的配制及標(biāo)定參見 chp2010版附錄。高氯酸不穩(wěn)定，注意避 光保存。3 .水的體膨脹系數(shù)較?。?.21 10-3/00 , 一般酸堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度受室溫改變的影響不 大。而多數(shù)有機(jī)溶劑的體膨脹系數(shù)較大，例如，冰醋酸的體膨脹系數(shù)為（1.1 10-3/00其體積

52、隨溫度改變較大。所以高氯酸冰醋酸溶液滴定樣品時(shí)和標(biāo)定時(shí)溫度若有差別，則應(yīng)重新標(biāo)定或按下式將標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度加以校正：c1 =式中：0.0011為冰醋酸的體膨脹系數(shù)， 的濃度，c1為測定時(shí)的濃度。4.現(xiàn)行藥典對(duì)本品含量測定的方法為 五、思考題非水滴定應(yīng)用于藥物分析有何特點(diǎn) 量。1 0.0011t1 -t0ct0為標(biāo)定時(shí)的溫度，t1為測定時(shí)的溫度，c0為標(biāo)定時(shí)hplc 法。?哪幾類藥物適合用非水滴定法測定其含實(shí)驗(yàn) 槐花的質(zhì)量檢驗(yàn)一、目的1 .了解中藥分析檢驗(yàn)常用的方法與特點(diǎn)；2 .熟悉連續(xù)回流提取法；3 .掌握黃酮類化合物的性質(zhì)鑒別及比色法測定含量的原理及方法。二、實(shí)驗(yàn)原理按中華人民共和國藥典， 槐花項(xiàng)下規(guī)定了于槐花質(zhì)量相關(guān)的項(xiàng)目有：形狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定等。1 .槐花