2017版《188套重組優(yōu)化卷》高考生物總復習——單元十

1、單元十現代生物科技專題課時考點40基因工程的工具與操作程序三年高考真題演練1. 某一質粒載體如圖所示，外源dna插入到ampr或tetr中會導致相應的基因失活(ampr表示氨芐青霉素抗性基因，tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質粒載體用bamh酶切后，與用bamh酶切獲得的目的基因混合，加入dna連接酶進行連接反應，用得到的混合物直接轉化大腸桿菌，結果大腸桿菌有的未被轉化，有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質粒載體、含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌。回答下列問題：(1)質粒載體作為基因工程的工具，應具備的基本條件有_(答出兩點即可)，而作為基因表達載體，

2、除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉化的和僅含環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的，其原因是_；并且_和_的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是_。在上述篩選的基礎上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有_的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中，某些噬菌體經改造后可以作為載體，其dna復制所需的原料來自于_。2. 植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉栴}：(1)理論上，基因組文庫含有生物的_基因；

3、而cdna文庫中含有生物的_基因。(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中_出所需的耐旱基因。(3)將耐旱基因導入農桿菌，并通過農桿菌轉化法將其導入植物_的體細胞中，經過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的_，如果檢測結果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數量比為31時，則可推測該耐旱基因整合到了_(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。3. 在應用農桿菌侵染植物葉片獲得轉基因植株的常規(guī)實驗步驟中，不需要的是()

4、a.用攜帶目的基因的農桿菌侵染植物細胞b.用選擇培養(yǎng)基篩選導入目的基因的細胞c.用聚乙二醇誘導轉基因細胞的原生質體融臺d.用適當比例的生長素和細胞分裂素誘導愈傷組織生芽4. 下列有關人胰島素基因表達載體的敘述，正確的是()a.表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mrna反轉錄獲得b.表達載體的復制和胰島素基因的表達均啟動于復制原(起)點c.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來d.啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉錄中起作用5. 下列關于基因工程技術的敘述，正確的是()a.切割質粒的限制性核酸內切酶均特異性地識別6 個核苷酸序列b.pcr 反應中溫度的周期性改變是為了dna 聚

5、合酶催化不同的反應c.載體質粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標記基因d.抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達6. 人血清白蛋白(hsa)具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組hsa(rhsa)的兩條途徑。(1)為獲取hsa基因，首先需采集人的血液，提取_合成總cdna，然后以cdna為模板，采用pcr技術擴增hsa基因。下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出另一條引物的位置及擴增方向。 (2)啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rhsa的載體，需要選擇的啟動子是_(填寫字母，單選)。a.人血細

6、胞啟動子 b.水稻胚乳細胞啟動子c.大腸桿菌啟動子 d.農桿菌啟動子(3)利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，其目的是_。(4)人體合成的初始hsa多肽，需要經過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結構才能有活性。與途徑相比，選擇途徑獲取rhsa的優(yōu)勢是_。(5)為證明rhsa具有醫(yī)用價值，須確認rhsa與_的生物學功能一致。7. 下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題：(1)用圖中質粒和目的基因構建重組質粒，應選用_兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過_酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒

7、，需將其轉入處于_態(tài)的大腸桿菌。(2)為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌，應在篩選平板培養(yǎng)基中添加_，平板上長出的菌落，常用pcr鑒定，所用的引物組成為圖2中_。(3)若bamh酶切的dna末端與bcl酶切的dna末端連接，連接部位的6個堿基對序列為_，對于該部位，這兩種酶_(填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開。(4)若用sau3a切圖1質粒最多可能獲得_種大小不同的dna片段。8. gdnf是一種神經營養(yǎng)因子，對損傷的神經細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構建了含gdnf基因的表達載體(如圖1所示)，并導入到大鼠神經干細胞中，用于干細胞基因治療的研究。請回答： (1)在分離和培養(yǎng)大鼠

8、神經干細胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是_。(2)構建含gdnf基因的表達載體時，需選擇圖1中的_限制酶進行酶切。(3)經酶切后的載體和gdnf基因進行連接，連接產物經篩選得到的載體主要有3種：單個載體自連、gdnf基因與載體正向連接、gdnf基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種連接方式，選擇hpa酶和bamh酶對篩選得到的載體進行雙酶切，并對酶切后的dna片段進行電泳分析，結果如圖2所示。圖中第_泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(4)將正向連接的表達載體導入神經干細胞后，為了檢測gdnf基因是否成功表達，可用相應的_與提取的蛋白質雜交。當培養(yǎng)的神經干細胞達到一定密度時，需進行_培

9、養(yǎng)以得到更多數量的細胞，用于神經干細胞移植治療實驗。9. 嗜熱土壤芽孢桿菌產生的葡萄糖苷酶(bglb)是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產中更好地應用，開展了以下試驗：.利用大腸桿菌表達bglb酶(1)pcr擴增bglb基因時，選用_基因組dna作模板。(2)下圖為質粒限制酶酶切圖譜。bglb基因不含圖中限制酶識別序列。為使pcr擴增的bglb基因重組進入該質粒，擴增的bglb基因兩端需分別引入_和_不同限制酶的識別序列。注：圖中限制酶的識別序列及切割形成的黏性末端均不相同。(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉入上述建構好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為_。兩年模擬試題精練1. 葉

10、綠體轉基因技術是將外源基因整合到葉綠體基因組中，該技術能有效改良植物的品質。請回答：(1)轉基因技術的核心步驟是_，完成該步驟所需要的酶有_。(2)將植物體細胞處理得到原生質體，再通過_或_法，將目的基因導入原生質體，使原生質體再生出細胞壁之后，通過_技術培養(yǎng)可得到相應的轉基因幼苗。(3)來自原核生物中有重要價值的外源基因，無需改造和修飾就可在葉綠體中高效表達，就此分析，原因是_。(4)對大多數高等植物而言，與傳統(tǒng)的細胞核轉基因相比，葉綠體轉基因更穩(wěn)定，其遺傳方式_(答“遵循”或“不遵循”)分離定律，不會隨_(“花粉”或“卵細胞”)傳給后代，從而保持了_(“父本”或“母本”)的遺傳特性。2.

11、下圖1顯示了某dna片段的部分堿基序列和長度(bp表示堿基對)以及其中含有的目的基因d。圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列。現有msp、bamh、mbo、sma共4種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為ccgg、ggatcc、gatc、cccggg。(1)圖1的一條多核苷酸鏈中，位于相鄰兩個堿基之間的是_。a.氫鍵 b.磷酸、脫氧核糖c.脫氧核糖 d.脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)若用限制酶sma完全切割圖1的dna片段，產生的末端是_末端，其產物長度為_。(3)若圖1中虛線方框內的堿基對被ta堿基對替換，那么基因d就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對應的dna片段，用

12、限制酶sma完全切割，產物中共有_種不同長度的dna片段。(4)若將圖2中質粒和目的基因d通過同種限制酶處理后，再用_進行處理，形成重組質粒，那么應選用的限制酶是_。將重組質粒導入大腸桿菌，為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加_的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌。經檢測，部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因d不能正確表達，其最可能的原因是_。3. 下圖為培育轉基因抗蟲棉的技術流程。請據圖回答：(1)進行過程，先要運用的酶是_。(2)基因工程核心步驟的名稱是_。(3)在培育成功的轉基因抗蟲棉的傳種接代過程中，抗蟲基因和標記基因是否遵循基因的自由組合定律_。為什么？_。(4)過程采用最多的方法是_

13、。在實驗室中，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞的dna分子上的方法是_。(5)經過過程形成愈傷組織的細胞分裂方式是_。(6)過程所表達的兩個重要的生理現象是_。4. 絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒(tmv)基因，可以合成一種抗tmv蛋白，葉片對tmv具有抗感染性。煙草是重要的經濟作物，由于tmv的感染會導致大幅度減產。研究人員利用轉基因技術培育出了抗tmv的煙草，主要流程如下圖所示。(1)科學家首先從絞股藍細胞中提取抗tmv基因轉錄的rna，然后合成目的基因。圖中過程表示_。(2)由圖分析，在過程構建的重組ti質粒上應該含有的標記基因是_基因，重組ti質粒導入煙草體細胞的方法是_。(3)在過程培

14、養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加_，以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株。(4)過程可采取_的方法，檢測植株是否合成了抗tmv蛋白。在個體水平的鑒定過程中，可通過_的方法來確定植株是否具有抗性。5. 科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。下圖一是轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖，圖二為質粒限制酶酶切圖譜。魚的抗凍蛋白基因不含圖中限制酶識別序列，ampr為抗氨芐青霉素基因，其中是轉基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，、表示相關結構或細胞。請據圖作答：(1)獲取魚的抗凍蛋白基因途徑主要有_。為了在番茄中獲得抗凍蛋白必須將抗凍蛋白基因連接在質粒中的_之后。圖中、依

15、次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的_過程。(2)在構建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。該酶的特點_。在此實例中，應該選用限制酶_切割。(3)要利用培養(yǎng)基篩選出已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體中含有_作為標記基因。(4)研究人員通常采用_法將魚抗凍蛋白基因導入番茄細胞內。通常采用_技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質。6. 我們日常吃的大米中鐵含量極低，科研人員通過基因工程等技術，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質。下圖為培育轉基因水稻過程示意圖，請分析回答。(1)鐵結合蛋白基因來自菜豆，可通過_擴增獲取，如果

16、該基因脫氧核苷酸序列已知且比較小，還可用_方法直接人工合成。(2)構建重組ti質粒時，通常先要用_分別切割_。將重組ti質粒導入農桿菌時，可以用_處理農桿菌，使重組ti質粒易于導入。(3)將含有重組ti質粒的農桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得_；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是_。檢測培育轉基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉基因稻米_。(4)為研究外源基因的遺傳方式，將t0代植株上收獲的種子種植成t1代株系，檢測各單株的潮霉素抗性。在檢測的多數t1代株系內，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為31，此結果說明外源基因的遺傳符合_。有少數t1代株系的所有植株都表現為對潮霉

17、素敏感，但其體內能檢測到鐵結合蛋白基因，造成這一結果最可能的原因是_。7. 在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。請據圖回答：(1)a過程需要的酶有_。(2)要把重組質粒導入土壤農桿菌，首先必須用_處理土壤農桿菌，使土壤農桿菌轉變?yōu)開態(tài)；然后將_在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉化過程。(3)含有重組質粒的土壤農桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經過d_和e_。如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在d過程的培養(yǎng)基中加入_。(4)如想利用分子雜交技術檢測再生植株中的抗

18、蟲基因是否轉錄，應該用放射性同位素標記的目的基因作為探針與_雜交。8. r7是家蠶體內的一種小分子非編碼rna，可與某些mrna尾端的一段非編碼序列(3utr)結合，進而影響基因的表達。為研究r7是否影響家蠶基因b(調控家蠶眼睛發(fā)育)的表達，科研人員將基因b中對應3utr的dna片段與熒光素酶基因(r7不影響熒光素酶基因的表達)重組后導入家蠶胚胎細胞觀察其表達結果。請回答：(1)利用pcr技術擴增基因b對應3utr的dna片段，應先依據該基因的一段核苷酸序列合成_。(2)利用_酶可將上述dna片段插入熒光素酶基因表達載體(如圖)上的位點_，構建重組載體。(3)將重組載體與r7共同導入家蠶胚胎細

19、胞，同時應設置兩個對照組，即將_、_分別導入兩組家蠶胚胎細胞。(4)科研人員分別從實驗組和對照組細胞中提取_，經處理檢測后獲得相對熒光值(在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應并發(fā)出熒光)，其結果如圖。(5)依據實驗結果可推斷，r7影響基因b的表達，即通過遵循_原則，r7與基因b所轉錄的mrna的3utr結合，進而_(填“促進”或“抑制”)基因b的表達。課時考點41基因工程的應用及蛋白質工程三年高考真題演練1. hiv屬于逆轉錄病毒，是艾滋病的病原體?；卮鹣铝袉栴}：(1)用基因工程方法制備hiv的某蛋白(目的蛋白)時，可先提取hiv中的_，以其作為模板，在_的作用下合成_，獲取該目的蛋

20、白的基因，構建重組表達載體，隨后導入受體細胞。(2)從受體細胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機體后，刺激機體產生的可與此蛋白結合的相應分泌蛋白是_，該分泌蛋白可用于檢測受試者血清中的hiv，檢測的原理是_。(3)已知某種菌導致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現象的根本原因是hiv主要感染和破壞了患者的部分_細胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。(4)人的免疫系統(tǒng)有_癌細胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。2. 已知生物體內有一種蛋白質(p)，該蛋白質是一種轉運蛋白，由305個氨基酸組成。如果將p分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨

21、酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(p1)不但保留p的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列問題：(1)從上述資料可知，若要改變蛋白質的功能，可以考慮對蛋白質的_進行改造。(2)以p基因序列為基礎，獲得p1基因的途徑有修飾_基因或合成_基因，所獲得的基因表達時是遵循中心法則的，中心法則的全部內容包括_的復制，以及遺傳信息在不同分子之間的流動，即：_。(3)蛋白質工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預期蛋白質功能出發(fā)，通過_和_，進而確定相對應的脫氧核苷酸序列，據此獲得基因，再經表達、純化獲得蛋白質，之后還需要對合成蛋白質的生物_進行鑒定。3. (雙選)下圖為培育轉基因山羊生產人酪蛋白的流程

22、圖。下列敘述正確的是()a.過程所用的人酪蛋白基因可從人cdna文庫中獲得b.過程可選用囊胚期或原腸胚期的胚胎進行移植c.過程可使用胚胎分割技術擴大轉基因山羊群體d.過程人酪蛋白基因在細胞質內進行轉錄、翻譯4. 下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關敘述，正確的是()a.的構建需要限制性核酸內切酶和dna聚合酶參與b.侵染植物細胞后，重組ti質粒整合到的染色體上c.的染色體上若含抗蟲基因，則就表現出抗蟲性狀d.只要表現出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異5. 生物技術安全性和倫理問題是社會關注的熱點。下列敘述，錯誤的是()a.應嚴格選擇轉基因植物的目的基因，避免產生對人類有害的物質b

23、.當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆c.反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術選擇性設計嬰兒d.生物武器是用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力6. 下列關于轉基因生物安全性的敘述中，錯誤的是()a.我國已經對轉基因食品和轉基因農產品強制實施了產品標識制度b.國際上大多數國家都在轉基因食品標簽上警示性注明可能的危害c.開展風險評估、預警跟蹤和風險管理是保障轉基因生物安全的前提d.目前對轉基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上7. 胰島素a、b鏈分別表達法是生產胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達載體，圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產

24、人胰島素的基本流程(融合蛋白a、b分別表示半乳糖苷酶與胰島素a、b鏈融合的蛋白)。請回答下列問題：(1)圖1基因表達載體中沒有標注出來的基本結構是_。(2)圖1中啟動子是_酶識別和結合的部位，有了它才能啟動目的基因的表達；氨芐青霉素抗性基因的作用是_。(3)構建基因表達載體時必需的工具酶有_。(4)半乳糖苷酶與胰島素a鏈或b鏈融合表達，可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部，其意義在于_。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵，用溴化氰處理相應的融合蛋白能獲得完整的a鏈或b鏈，且半乳糖苷酶被切成多個肽段，這是因為_。(6)根據圖2中胰島素的結構，請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數

25、量。你的推測結果是_，理由是_。8. 現代生物科技專題人組織纖溶酶原激活物(htpa)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htpa基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：(1)htpa基因與載體用_切割后，通過dna連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞dna，可采用_技術。(2)為獲取更多的卵(母)細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要經過_，才具備受精能力。(3)將重組表達載體導入受精卵常用的方法是_。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行_。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的_。(4)若在轉htpa基因母羊的羊乳

26、中檢測到_，說明目的基因成功表達。兩年模擬試題精練1. 下圖為某生物的一種多肽酶的基因內部和周圍的dna組成情況。其中標出了轉錄的起始部位(ini)和終止部位(ter)，翻譯的起始密碼子對應序列(sta)的第一個堿基的位置，終止密碼子對應序列(sto)的第一個堿基的位置，以及基因中內含子的界限()(距離以kb表示，但未按比例畫出)。(1)轉錄的起始部位稱為_，是一段有特殊結構的dna片段，位于基因的首端，它是rna聚合酶_的部位。(2)該基因來自_(填“基因組文庫”或“cdna文庫”)，該文庫包括該生物的_(填“全部”或“部分”)基因。(3)翻譯時與密碼子發(fā)生堿基互補配對的是_上的反密碼子，該

27、物質的主要功能是_。(4)基因工程在原則上只能產生_的蛋白質。蛋白質工程是以蛋白質分子的_及其與生物功能的關系作為基礎。2. 歐洲哥廷根小型豬因其器官大小、結構和生理特點等方面與人的器官極為相似，已經成為國際上理想的異種器官移植研究材料。目前，歐洲哥廷根小型豬作為糖尿病、心臟病、帕金森氏癥等重大人類疾病及新藥研究的動物模型，也得到了全世界醫(yī)藥管理機構的認可。(1)異種器官移植到人體內會發(fā)生_，從而使外源器官難以存活。為解決這一難題，必須設法除去醫(yī)用小型豬的_基因，或抑制該基因的_。(2)向小型豬轉入外源基因時.其受體細胞通常是_，導入方法是_。(3)要對轉基因成功的醫(yī)用小型豬進行擴大培養(yǎng)，可采

28、用的技術手段是_。(4)利用基因工程技術，可以獲得乳汁中含有藥用蛋白的動物，這種動物叫做_。為了獲得該動物，需將_基因與_基因的啟動子等調控組件重組在一起，構建基因表達載體。3. 人類疾病的轉基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉基因模型大鼠的流程如圖所示(注：基因b為高血壓相關基因)。(1)進行過程之前，需對人工采集的精子進行_處理。完成過程常采用的方法是_，過程中，為了防止污染，通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的_。(2)從人體細胞中獲取基因b時用到的工具酶是_，在構建的基因表達載體中，高血壓相關基因的首端必須有_，它是rna聚合酶的識別和結合部位

29、。(3)圖示中甲為_(時期)的去核卵母細胞，過程操作技術叫做_。(4)要在分子水平上檢測成功導入的b基因在大鼠中是否成功表達，可采用_方法，如果高血壓相關基因已在大鼠體內成功表達，可用其建立高血壓轉基因動物模型。4. 圖示方案為人們獲得生物新品種的過程，請回答下列問題：方案.抗凍蛋白基因煙草細胞抗凍煙草方案.a基因全免疫過的b細胞體外培養(yǎng)單克隆抗體方案.人的生長激素基因牛的受精卵早期胚胎受體母牛轉基因牛(1)基因工程的核心步驟是_。農桿菌轉化法中，根據農桿菌的特點，如果將抗凍蛋白基因插入到_上，通過農桿菌的轉化作用，就可以使目的基因進入植物細胞，并將其插入到植物細胞中_上。(2)推測方案中a基

30、因所起的作用是_，請寫出該方案獲得的細胞中遺傳信息傳遞時所遵循的法則_。(3)方案中的轉基因?？梢酝ㄟ^分泌乳汁來生產人的生長激素。這需要將人的生長激素基因與_的啟動子等調控組件重組在一起。該方案中的早期胚胎在移植入受體母牛子宮之前，必須對胚胎進行性別鑒定一般是取處于_時期的_細胞進行檢測。5. 胰島素是治療糖尿病的常用藥物之一，現在一般都通過轉基因技術用微生物生產。下面是有關轉基因技術生產胰島素的相關內容，請根據所學知識回答各題。如圖為一個作為載體的質粒，其中p段為啟動子之一，t段為終止子之一，tctr基因為四環(huán)素抗性基因，ampr基因為氨芐青霉素抗性基因，ori為復制原點。箭頭所示為兩種限制

31、酶的酶切位點。(1)獲取胰島素基因時除了從供體細胞中或基因文庫中直接獲取以外，還可以通過pcr擴增或者_，后者要求目的基因長度較_而且_。(2)用如圖質粒作為載體進行轉基因操作時同時使用ecor和bam型兩種限制酶切割質粒和目的基因所在dna的兩端，其目的是防止目的基因和質粒反向連接或出現_的現象。(3)將胰島素基因和質粒通過_酶作用連接后，需要用_處理大腸桿菌才能導入大腸桿菌細胞中。(4)經過導入的大腸桿菌進行初步培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了水分和大腸桿菌生長所必需的各種營養(yǎng)成分之外還需要加入一定量的_以保證獲得的菌株都是成功導入目的基因的。(5)從細胞結構角度分析，最終獲得的轉基因大腸桿菌生產的胰

32、島素是否與人體胰島素具有相同生物活性？_，原因是_。6. 普通番茄細胞中含有多聚半乳糖醛酸酶(簡稱pg)基因，控制細胞產生pg，該酶能破壞細胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏?？茖W家將抗pg基因導入番茄細胞，培育出了抗軟化、保鮮時間長的轉基因番茄。請運用所學知識回答下列問題：(1)該實驗中的目的基因是_。若實驗操作中所用的目的基因既含有內含子也含有啟動子，則該基因取自_文庫?；蚬こ滩僮鞯暮诵牟襟E是_。(2)將含有目的基因的番茄細胞培養(yǎng)為番茄植株需借助_技術，由細胞產生愈傷組織的過程稱為_。(3)抗pg基因是pg基因的反義基因，推測轉基因番茄抗軟化、保鮮時間長的原因為：抗pg基因產生的mrna與pg基

33、因產生的_互補，形成了_，阻斷了基因表達的_過程，因此番茄細胞就不能產生_。(4)運載體ti質粒中含有_序列，可以將目的基因整合到宿主細胞的染色體上。若將得到的二倍體轉基因番茄植株自交，f1中抗軟化與不抗軟化的植株數量比為31，則可推測目的基因整合到了_。a.一對同源染色體的一條上b.一對同源染色體的兩條上c.兩條非同源染色體上d.線粒體中的dna上7. 為探究shh基因與角化囊腫發(fā)生的相關性，科研人員利用shh基因的非模板鏈轉錄合成rna作為探針，進行分子雜交實驗，以檢測shh基因在角化囊腫中的表達情況，其基本流程如圖(amp表示氨芐青霉素抗性基因；lacz基因被shh基因插入后不表達)，請

34、回答：(1)基因工程成功實施的理論基礎有_。(2)重組載體中shh基因轉錄合成rna探針時，_(填“需要”或“不需要”)啟動子。(3)步驟中，用ca2處理大腸桿菌，使之成為_細胞，然后導入重組載體。實驗中，用添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，未導入質粒的細菌將會死亡，原因是這種細菌不含有_基因。(4)能表達lacz基因的大腸桿菌在含有iptg和xgal的培養(yǎng)基上會形成藍色菌落，易于識別，根據上述原理可以初步判斷_(填“藍色”或“白色”)菌落中的大腸桿菌為重組菌。(5)將制備的探針加入角化囊腫切片中，探針將與_形成雜交帶，進而判斷shh基因的轉錄情況，此過程用到的相關檢測方法(技術)是_。8.

35、 人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為rna病毒，該病毒表面的a蛋白為主要抗原，且疫苗生產和抗體制備的流程之一如下圖：(1)過程代表的過程是_。(2)過程構建出的表達載體必須要含有_和目的基因等結構。(3)生產藥物時可用微生物做受體細胞，則應采用_處理，使受體細胞處于_，從而將表達載體導入受體細胞；藥物生產也可用乳腺生物反應器，那么應采用_的方法，從而將表達載體導入受體細胞。(4)過程的實驗技術名稱是_，誘導該過程的化學試劑是_。(5)對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產的_作疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內分離出

36、病毒，與已知病毒進行_比較；或用圖中的_進行特異性結合檢測。課時考點42細胞工程三年高考真題演練1. 關于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()a.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同b.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶c.煙草葉片離體培養(yǎng)能產生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖d.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒2. 某研究者用抗原(a)分別免疫3只同種小鼠(x、y和z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數)，結果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的b淋巴細胞(染

37、色體數目40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗a抗體的雜交瘤細胞。回答下列問題。(1)制備融合所需的b淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上，則小鼠最少需要經過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的x、y、z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備b淋巴細胞的是_小鼠，理由是_。(2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有_，體系中出現多種類型細胞的原因是_。(3)雜交瘤細胞中有_個細胞核，染色體數目最多是_條。(4)未融合的b淋巴

38、細胞經多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。3. 甲、乙是染色體數目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分a，乙含有效成分b。某研究小組擬培育同時含有a和b的新型藥用植物。回答下列問題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和_酶去除細胞壁，獲得具有活力的_，再用化學誘導劑誘導二者融合，形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成_組織，然后經過_形成完整的雜種植株。這種培育技術稱為_。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_，假設甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用

39、人工薄膜包裝后可得到人工種子。4. 下列有關細胞工程的敘述，正確的是()a.peg是促細胞融合劑，可直接誘導植物細胞融合b.用原生質體制備人工種子，要防止細胞破裂c.骨髓瘤細胞經免疫處理，可直接獲得單克隆抗體d.核移植克隆的動物，其線粒體dna來自供卵母體5. 定量分析是科學研究的重要方法。下列能用血細胞計數板直接計數的是()a.海拉細胞懸液 b.濃縮培養(yǎng)的噬菌體c.自來水中大腸桿菌 d.蛙卵6. 科研人員采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因綿羊，以便通過乳腺生物反應器生產人凝血因子ix醫(yī)用蛋白，其技術路線如圖。(1)由過程獲得的a為_。(2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細胞的核，目的是_。

40、受體應選用_期卵母細胞。(3)進行胚胎移植時，代孕母羊對移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生_，這為重組胚胎在代孕母羊體內的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細胞進行轉基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉基因綿羊，這是因為_。7. dha對腦神經發(fā)育至關重要。以a、b兩種單細胞真核藻為親本，利用細胞融合技術選育高產dha融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢代謝類型固體培養(yǎng)基上藻落直徑a藻自養(yǎng)0.06小0.7b藻異養(yǎng)0.14大無據表回答：(1)選育的融合藻應具有a藻_與b藻_的優(yōu)點。(2)誘導融合前需用纖維素酶處理兩種藻，其目的是獲得_。(3)通過以下三步篩選融合藻，步驟_可淘汰b藻，步驟_可淘汰生

41、長速率較慢的藻落，再通過步驟_生產所需的融合藻。步驟a：觀察藻落的大小步驟b：用不含有機碳源(碳源生物生長的碳素來源)的培養(yǎng)基進行光照培養(yǎng)步驟c：測定dha含量(4)以獲得的融合藻為材料進行甲、乙、丙三組試驗，結果如下圖。甲組條件下，融合藻產生h的細胞器是_；丙組條件下產生atp的細胞器是_。與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下_。甲、乙兩組dha產量均較高，但實際生產中往往采用甲組的培養(yǎng)條件，其原因是_。8. 生物現代生物科技專題rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎干細胞(es細胞)對rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖：(1)步

42、驟中，在核移植前應去除卵母細胞的_。(2)步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到_期時，可從其內細胞團分離出es細胞。(3)步驟中，需要構建含有基因rag2的表達載體。可以根據rag2基因的_設計引物，利用pcr技術擴增rag2基因片段。用hind和pst限制酶分別在片段兩側進行酶切獲得rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體，所選擇的表達載體上應具有_酶的酶切位點。(4)為檢測rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的_，用抗rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。9. 鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一。應用組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱plbs，類似愈傷組織)生產生物堿的實驗流

43、程如下：在固體培養(yǎng)基上，plbs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示，請回答下列問題。(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_，誘導外植體形成plbs的過程稱_。(2)與黑暗條件下相比，plbs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現在_，_，_。(3)脫落酸(aba)能提高生物堿含量，但會抑制plbs的生長。若采用液體培養(yǎng)，推測添加適量的aba可提高生物堿產量。同學們擬開展探究實驗驗證該推測，在設計實驗方案是探討了以下問題：aba的濃度梯度設置和添加方式：設4個aba處理組，1個空白對照組，3次重復。因aba受熱易分解，故一定濃度的無菌aba母液應在各組液體培養(yǎng)基_后按比例加入。實驗進程和取樣：實

44、驗50天完成，每10天取樣，將樣品(plbs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)數據已知，實驗過程中還需測定的樣品數為_。依所測定數據確定適宜的aba濃度和培養(yǎng)時間：當某3個樣品(重復樣)的_時，其對應的aba濃度為適宜濃度，對應的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。兩年模擬試題精練1. 細胞工程技術研究，特別是不對稱細胞雜交等技術是當前研究的熱點。請回答下列有關問題：(1)植物組織培養(yǎng)的原理是_。將離體的器官或組織，首先經過脫分化培養(yǎng)形成_，然后再分化最終形成完整植株。(2)細胞的不對稱雜交是指將不對等的細胞進行融合，如將二倍體甘藍體細胞與其配子細胞進行的融合：首先經_酶的作用去除細胞壁

45、，形成_，再經物理或化學方法，促使二者融合，其中常用的化學誘導劑為_，融合后符合育種條件的植物細胞中有_個染色體組。(3)動物細胞培養(yǎng)液為合成培養(yǎng)基，但該培養(yǎng)基中往往要加入一些_等天然成分。動物細胞培養(yǎng)所需氣體主要有o2和co2，co2的主要作用是_。2. 胚胎干細胞簡稱es或ek細胞，是一種全能性干細胞，具有自我更新和多向分化的潛能，在臨床移植醫(yī)學、細胞治療、細胞工程、生物學基礎研究等領域具有重要的科學意義和巨大的應用前景。請回答下列問題。(1)es細胞從_和_獲取，對它可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。(2)人類在根治糖尿病時，可通過es細胞定向分化出_(填寫細胞名稱)再進行移植。此過程中，若定向誘導培育出相應的器官進行移植除能解決目前臨床上存在的供體器官不足的問題外，還有一大優(yōu)點是_。(3)若將es細胞體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中通常需加入_等一些天然成分，還需要提供5%的co2，其作用是_。(4)用es細胞進行核移植，所選擇的卵母細胞必須發(fā)育到_(時期)才能作受體細胞，與體細胞核移植相比更容易發(fā)育成克隆動物，原因在于es細胞的分化程度_，全能性高。3. 鼠源單克隆抗體用于疾病的治療時，易發(fā)生不良反應，科學家通過對鼠和人控制抗體產生的基因進行拼接，實現了對鼠源單克隆抗體的改造，生產出對人體不良反應小