最新關于尾靜脈注射阿霉素復制腎病大鼠模型的研究（干貨分享）

1、關于尾靜脈注射阿霉素復制腎病大鼠模型的研究本科畢業(yè)生論文論文題目：關于尾靜脈注射阿霉素復制腎病大鼠模型的研究2012年5月1日29 / 32文檔交流目 錄摘要1Abstract21緒論1材料與方法1.1.1 實驗材料與試劑 612 主要實驗儀器71。3實驗方法1。1。4 大鼠尿蛋白的收集1.1.1測定大鼠2h尿蛋白總量1.4.2標準曲線的做法81.。5 大鼠凝血時間的檢測81.151血漿凝血酶原時間（PT）測定81.1。5。2凝血酶時間測定（TT）81.1。53活化部分凝血活酶時間測定(APTT)91。154復鈣時間（RT）的測定1.1 大鼠的體重測定91。7統(tǒng)計學處理92 結果與結論9 一般

2、情況92.2 各組大鼠尿蛋白的定量分析92.各組大鼠凝血時間指標的檢測103.1凝血酶原時間（rohombtme，P)12。2 凝血酶時間（rointim ,T）：1123. 活化部分凝血活酶時間（actiatedparlromopastn tim ，TT）122。34 復鈣時間(reclificatntie ,）132。4 各組大鼠的體重變化13討論14致謝15參考文獻6阿霉素腎病大鼠凝血系統(tǒng)的變化摘要目的：（）、了解阿霉素腎病大鼠模型的建立近況.（2)、觀察阿霉素腎病大鼠凝血系統(tǒng)的變化情況。方法:采用間隔1周兩次尾靜脈注射阿霉素的方法復制大鼠阿霉素腎病模型，觀察各組大鼠凝血時間、4尿蛋白量

3、等指標。結果：模型組表現為嚴重水腫、大量蛋白尿、外源性凝血系統(tǒng)功能和內源性凝血功能亢進,且模型組大鼠有一定的程度的腹瀉,體重增加緩慢.結論：間隔1周兩次尾靜脈內注射阿霉素4gk 、3.5mg/g法所造模型, 腹瀉程度減輕, 模型動物死亡率下降， 造模成功率顯著提高,且模型組大鼠的凝血系統(tǒng)有比較明顯的變化，外源性凝血系統(tǒng)和內源性凝血系統(tǒng)都比較亢進。關鍵詞:阿霉素、大鼠、腎病、凝血Adramyin nephss rat cogltionte changeAract Obti：1、ealiaze therec develoents ofadriamycinneposs atmodl buld 。2、

4、Obere edriayiephoi ratlood coagulatoysem chanes。 Mhods:Th two ie interalwo wek he intvnou doxouicn mthod coy rats doxorubiin kidney diseaemodel, Observete rat bloocoaulaion tme,24 h urinepoteinqaity ndx e.Resuls： Moel goup perfrace for seveewelling， Lre reinuia，xgns blod oagulain ssem cton and endoe

5、ouslood cttinghyperthyroidsm， d modelrat ave etain degree f dirrea， eight ncreaed slwl.onclusion： Inteva onewee the two intraveous dooruicin 4mg/kg, 35 mg/kgmethomae modl，arraexent igher，The aimal model ortalit hs decind，Sinifctl iprovetsuccerteofmdn,Athe del ofrat lodoagulton systemas the viouschan

6、ge，Theetrinsi coaguationsytem and hendgeouscouosystemrereltivelyhyperthyrosm。Kywords：Adramcin； Nropaty; rtes;Cogulat；1 緒論腎病綜合征(nephroic sndro，）簡稱腎綜，是以大量蛋白尿目前我國的定義為gd，國外大部分定義為.5/（1。73m224h）、低蛋白血癥（血漿蛋白3/L）,水腫、高脂血癥以及其他代謝紊亂為特征的一組臨床癥候群，其中以大量蛋白尿和低蛋白血癥為主要特征。早在932年Chrain應用腎病綜合征這一名詞，來概括因各種腎病病理損害所致的嚴重蛋白尿的一組臨床

7、綜合征，其中大量蛋白尿是其最基本的特征.大量蛋白尿是腎小球疾病的常見表現,在腎血管或腎小球間質疾病中少出現大量的蛋白尿。盡管腎綜的病因各不相同從尿液中丟失大量的蛋白是導致腎病綜合征系列變化的決定性因素,因此臨床診斷的標準以大量的蛋白尿和嚴重的低蛋白血癥為主要條件。但是臨床診斷腎綜時需要注意的是，在嚴重的低蛋白血癥時，尿蛋白排泄量常減少而達不到上述指標。微小病變型腎病綜合征(Minimal Chang Nephropay ，MCN）是原發(fā)性腎病綜合征（epic yndroe ，N)最常見的病理類型之一。CN 病因不甚明確,原因不清楚的致病因素導致腎小球多陰離子的丟失，靜電屏障作用減退,大量分子較

8、小、帶陰電荷的白蛋白從尿中丟失形成高選擇性蛋白尿。光鏡下缺乏特異的和確定的病理學異常，電鏡下見腎小球上皮細胞足突融合。臨床表現有四大特點：大量蛋白尿、低白蛋白血癥、高脂血癥和明顯水腫,后三者為繼發(fā)的病理生理改變.MCN 占兒童N 的0%90,成人NS 的0%30%,因此，MC 動物模型的建立無疑為探索原發(fā)性腎病的發(fā)病機理及藥物防治的研究提供了良好的實驗基礎，在兒童腎病的研究中尤為重要.臨床絕大多數患者對激素治療反應敏感，預后良好,但少數患者對激素治療依賴或抵抗，最終可能進展為腎小球硬化近年來,國內外在腎小球硬化動物模型研究方面已取得了許多進展,阿霉素腎病模型是公認的能較好地模擬腎小球疾病模型之

9、一.阿霉素腎病模型的發(fā)病機制、分類及制作方法等方面簡述阿霉素腎病模型的研究進展情況， 以利于了解此模型的特點，在工作中能更好的應用之。一、阿霉素誘導腎病模型的藥理機制阿霉素（ariamicin，ADR）， 是臨床上常用一種的蒽環(huán)類抗腫瘤抗生素。其腎毒性的發(fā)病機制包括兩個方面：首先， 阿霉素是一種細胞周期非特異的廣譜化學治療癌癥藥物, 具有強烈的細胞毒作用， 可直接損害腎、氧反應產生活性氧， 誘發(fā)腎小球上皮細胞脂質過氧化反應,破壞濾過膜結構和功能， 產生蛋白尿。 二、阿霉素腎病模型的分類根據其造模方法、時間和臨床表現的不同，可分為急性腎病模型和慢性腎病模型。急性腎病模型類似于人類微小病變型腎?。?/p>

10、minial chg nhrpt，MN)，而慢性腎病模型類似于人類慢性腎小球腎炎和局灶節(jié)段性腎小球硬化（fal semental glomrulosclers ：SGS).兩種不同病理模型常有其固定的建立方法， 急性模型常選用一次或兩次的尾靜脈注射造模方式， 而慢性模型常選用單側腎切除加重復尾靜脈注射阿霉素的方法.根據文獻報道, 單純靜脈注射阿霉素或單側腎摘除加重復尾靜脈注射阿霉素均可誘發(fā)大鼠產生類似于人類腎小球疾病的微小病變腎病和局灶節(jié)段性腎小球硬化， 但其發(fā)病早期（36周)屬急性模型， 后期（716周)屬慢性模型.如趙洪雯4等給大鼠單側腎切除加重復尾靜脈注射阿霉素后，觀察其超徽結構結果顯示

11、在注射阿霉素早期， 腎小球上皮細胞足突廣泛融合, 隨著實驗時間的進展， 腎小球上皮細胞足突融合， 在第8周時有少部分自行修復， 但仍有大部分足突融合, 在第16周實驗結束時， 腎小球系膜區(qū)增寬，細胞外基質中度增生，腎小球基底膜中度或重度不均勻增厚，呈慢性化改變, 形成FSGS.許濤5等通過給大鼠兩次靜脈注射阿霉素的方法， 復制出大鼠腎病綜合征的模型， 并連續(xù)觀察1周， 發(fā)現造模6周后,大鼠腎病理改變類似于微小病變型腎病，到造模2周時, 己有腎小球硬化的改變出現。試驗人員應根據自己實驗的具體情況來判斷模型建立時間及給予干預的時間, 以得到更理想的實驗結果。三、阿霉素腎病模型的建立方法阿霉素誘發(fā)大

12、鼠腎病是一個較經典的腎病模型，由最初的單次給藥， 到以后的各種不同改良方法， 所誘導的阿霉素腎病模型逐漸成熟， 下面講述幾種常見方法。（1）一次性尾靜脈注射用阿霉素制作大鼠腎病模型于1982年由ertan等首先報道， 他們采用的方法是大鼠尾靜脈一次性注射.5mg/kg的A, 給藥后6-1d出現嚴重蛋白尿, 約月左右達到高峰, 且出現明顯低白蛋白血癥、高膽固醉血癥等腎病綜合征表現.光鏡下病變輕微電鏡下腎小球上皮細胞足突腫脹融合。由于阿霉素的消化道毒副作用較強， 尾靜脈一次性注射AD7.m/k一周后引起大鼠嚴重腹瀉，以至導致死亡，影響造模成功率。腹瀉嚴重還有礙于藥物， 特別是口服藥物的篩選及藥理作

13、用研究。對此，有些研究者采用了減少給藥劑量, 降低胃腸道刺激的方法， 較常用的劑量為。5mg/kg， 目前文獻報道一次性尾靜脈注射阿霉素最小劑量為mg/k。(2）二次尾靜脈注射法由于上述原因， 魯斌等參照TulloBetani等的方法， 改造了阿霉素急性腎病模型， 采用二次給藥法,即第一次注射阿霉素4mkg， 間隔1周,第二次注射3。mg/kg， 取得了較好造模效果.造模第2周, 大鼠尿蛋白大于100mg2h， 第5周達高峰, 并有明顯的低蛋白血癥和高膽固醉血癥出現第周末處死大鼠，電鏡觀察腎臟病理組織切片， 可見上皮細胞空泡變性， 假絨毛明顯變性, 足突廣泛融合, 裂隙消失， 符合微小病變型腎

14、病病理特點.該法所造模型，尿蛋白持續(xù)時間、病理變化、各項生化指標變化均與一次給藥模型相近。而腹瀉率明顯降低,腹瀉程度減輕， 模型動物死亡率下降, 造模成功率顯著提高。（）單側腎摘除加重復尾靜脈注射王泰華等繼續(xù)對此模型進行改進， 制作成右腎切除加重復注射阿霉素的腎小球硬化模型該模型的制作方法是先將大鼠右腎摘除, 然后尾靜脈重復注射阿霉素（首次劑量-5mg/kg, 重復注射劑量2-mkg, 二者間隔d）。此模型以腎小球臟層細胞病變?yōu)橹?，逐漸發(fā)展成節(jié)段性腎小球硬化。該模型觀察90-10d， 已有0%腎小球硬化， 已完全可達到實驗目的和要求。（4）雙腎動脈注射董晨等經大鼠雙腎動脈注射阿霉素45mg/k

15、g（按腎組織計重)后， 立即系扎雙腎動靜脈min， 所建模型巧15d左右出現大蛋白尿， 電鏡下可見腎小球足突融合, 該模型尿蛋白排泄量與單純藥物性腎病模型相同， 該模型因除雙腎外的其他臟器均不暴露于阿霉素, 使得對腎病綜合征各臨床表現間關系的研究簡單化, 但其操作較為復雜。除上述模型制作方法外,也有單側腎切除加重復腹腔注射阿霉素, 多次(多于2次）尾靜脈注射阿霉素等多種方法。總之, 每種造模方法各有其優(yōu)缺點， 應根據自己的實驗特點進行選擇.腎病綜合征（ NS）患者初期血黏度明顯增加, 加上激素和利尿劑的使用導致高凝狀態(tài)1 ,進而形成血栓, 是難治性腎病的重要原因.本實驗通過間隔一周兩次注射阿霉

16、素來制造腎病大鼠模型以觀察凝血酶原時（ohobintme ，PT) ， 部分活化凝血酶時間（tva patialhrombplastin ti ，ATT ）， 凝血酶時間（thrombin te， T ）和復鈣時間(ralcificintim，RT )等血參數,以探討S患者凝血功能的變化。1材料與方法1.1。1實驗材料與試劑 ：健康清潔級D(Srau-Dwly）大鼠3只，重15g90g,大鼠飼料50kg,PF級,粗蛋白質含量24。9%,經河南省農科院質標中心檢驗,墊料30k(已消毒），以上均購于鄭州大學動物實驗中心,動物許可證號：SCXK（豫)050001；動物實驗操作在河南省(鄭州大學）醫(yī)藥

17、科學研究院實驗動物房SPF級實驗室完成，室溫2226，濕度507，光照正常晝夜交替.實驗所需器具均經嚴格滅菌消毒,實驗操作在無菌條件下進行。實驗動物許可證號：CK（豫）211-0010，動物自由飲水、進食,保持電料的干燥，一般情況下3天換一次墊料，大鼠經適應性標準飼養(yǎng)1周，待大鼠體重達到2g220g，準備開始實驗。將大鼠隨機分為組正常對照組（15 只） 和B組阿霉素腎病模型組（15 只)。注射用鹽酸多柔比星(阿霉素,AD）10支，10mg/ 支，購于鄭州大學第一附屬醫(yī)院一樓門診處,由浙江海正藥業(yè)股份有限公司生產。批準文號：國藥準字H332190。主要試劑：（1） 磺基水楊酸硫酸鈉(SS）:用電

18、子天平稱取磺基水楊酸3.0g,無水硫酸鈉7。0g,蒸餾水溶解后稀釋至100ml,然后用三層濾紙過濾之后即可使用;（2） 磷酸緩沖液（PBS）溶液:用電子天平稱取十二水磷酸氫二鈉（Na2HP122O）58g,二水磷酸二氫鈉（aH2P42O)0.4g，氯化鈉(Nl)1。54,然后將其溶解到1L的蒸餾水中，備用。（3） 兔腦粉浸出液 取1m干燥兔腦粉,置于試管中，加生理鹽水2。5ml，放入37水浴,充分攪拌1mn，并置其水浴中備用。（4） 兔腦粉浸出液 取150干燥兔腦粉，置于試管中,加生理鹽水2.5m，放入37水浴,充分攪拌1i,并置其水浴中備用.（5） 0。molLaCl溶液。（6） 0。1 m

19、ol/草酸鈉溶液 ， 稱1草酸鈉加水至00ml。（7） 受檢血漿 以0。9mol/L枸櫞酸鈉溶液：抗凝,300r/mi，離心510min，獲貧血小板血漿。（8） .4%白陶土腦磷脂懸液（同A）。（9） 凝血酶溶液 用生理鹽水調至使正常血漿在6-18s凝固為標準。1.2 主要實驗儀器產品名稱 生產公司 產地自動平衡離心機 上海醫(yī)用分析儀器廠 中國臺式高速離心機 EPPENOF 德國電子分析天平 MTLER LEDO 瑞典恒溫水箱 上海躍進醫(yī)療器械廠 中國紫外分光光度計 上海精科實業(yè)有限公司 中國加樣器(100l） PPNDOF 德國架式不銹鋼大鼠代謝籠 蘇州馮氏實驗動物設備有限公司 中國1。3實

20、驗方法：當大鼠的體重達到20-220g后開始實驗，；對照組于實去 驗開始后第7天、第14天分別從尾靜脈注射等體積的生理鹽水，放入籠內飼養(yǎng),自由攝食、飲水，從第 次注射后連續(xù)觀察至5周末。1。1.4 大鼠尿蛋白的收集 各組均于第1次阿霉素注射前 、第2 次阿霉素注射后 周末、2周后、3周后、4周后、周后用代謝籠收集大鼠4 h 尿液（一般情況下是從第一天上午8:到第二天上午：0），用量筒測尿量，搖勻用1。5ml的EP（poxyepoxde)管取.5mL,3 000 / min,離心5 min ,去除沉渣， 2 冰箱保存待測。測定前先把尿液從冰箱中取出放入4的冰箱中解凍，之后用磺基水楊酸比濁法測定尿

21、液的濃度。1.4.1測定大鼠24h尿蛋白總量 收集的尿液體積為V.取1l磺基水楊酸-硫酸鈉試劑加入試管中，加0L尿液作為樣品管,取磷酸緩沖液試劑加入另外一個試管中,加100尿液作為空白管，如樣品管中比較的渾濁,可以加入磷酸緩沖液稀釋,同時空白管中也需要加入相同體積的磷酸緩沖液，記下稀釋的倍數?；靹蚝蠓湃胨″佒?，反應mn。以生理鹽水調零,用紫外分光光度計在420nm處比色，測得樣品管吸光度為1。同法測得空白管的吸光度A2，吸光度為二者差值。帶入標準曲線，求得尿蛋白總量。1.1.42標準曲線的做法：用電子分析天平稱取3g的尿蛋白標準品，用去離子水溶解到3l的去離子水中制備成0g/ml的溶液，分別

22、取5個試管用磷酸緩沖液分別稀釋為1.0mg/m、0。8g/ml、0。 m/m、0。4 mg/l、0。2mg/ml的溶液之后用紫外分光光度計測定其吸光度A、A2、A3、A4、。然后根據吸光度和濃度作標準曲線。1。1。5 大鼠凝血時間的檢測 阿霉素組和正常組大鼠于每周收集完尿液當天（注射阿霉素前1 d、第2 次阿霉素注射后1 周末、2周后、3周后、4周后、5周后）通過眼眶取血1.5m， 室溫下小時內離心,3000 r/ min，離心10mi ，取血清， 2冰箱保存待測。1。1。5。血漿凝血酶原時間(T)測定 (1).在試管中加入09mol/L枸櫞酸鈉或01mo/L草酸鈉溶液0.2ml,然后加受檢血

23、18ml混勻，低速離心,分離血漿。(2）。取小試管1支，加入血漿和兔腦粉浸出液各0。1ml，37預溫,再加入0.1lCal2溶液3預溫，立即開動秒表,不斷傾斜試管,至液體流動停止所需時間，即為凝血酶原時間。重復操作23次，取平均值，并作正常對照。1.1。5。2凝血酶時間測定（T)取抗凝血漿0。l于小試管內，置37水浴中,加凝血酶溶液0。ml，同時開動秒表，記錄凝固時間。重復23次,求平均值.1。1.3活化部分凝血活酶時間測定（APT）（）。受檢血漿、白陶土腦磷脂懸液各0.ml,混勻，37C水浴3i,其間輕輕振搖數次。（2)加入0.025o/L氯化鈣溶液01m，立即啟動秒表，不停振搖并觀察出現纖

24、維蛋白絲的時間。重復2次，取平均值，同時作正常對照.1.1。54復鈣時間（）的測定 取血漿(草酸鈉抗凝,與血液之比為19）0。ml，加入02ml/LaC2溶液0.ml,混合，立即開動秒表。記錄血漿中出現彌漫白色顆粒所用時間.重復3次,求均值.11.6 大鼠的體重測定 各組均于第 次阿霉素注射前1 d、第2 次阿霉素注射后1 周末、周后、3周后、4周后、5周后用電子天平測大鼠的體重，記錄其體重。1。1.7統(tǒng)計學處理 應用SPSS12.0 統(tǒng)計分析軟件對實驗數據進行統(tǒng)計學處理，所有數值以均數標準差表示，兩組間的比較應用方差齊性檢驗后,采用或t檢驗,多組間的比較應用單因素方差分析后,采用D 檢驗做各

25、組間均數的兩兩比較.P 0 05 表示有統(tǒng)計學意義。2 結果與結論2 一般情況 模型組15只大鼠于阿霉素注射后第 天均出現不同程度的腹瀉, 食量下降且活動減少，第2周出現輕度水腫,以足、腹、睪丸較明顯.第4、5 周水腫加重。期間B組1只大鼠死亡，1 只制備模型失敗被剔除。模型成功率達0 。對照組大鼠健康存活。2 2 各組大鼠尿蛋白的定量分析 阿霉素組第次注射AD 1 周末、2周末24h 尿蛋白定量與同期正常對照組相比有顯著性差異( P 0.0) ，且隨時間延長24 h 尿蛋白定量逐漸增高，12 周末達高峰(表1） 表1大鼠不同時期24h尿蛋白總量變化造模前造模2周造模3周造模4周造模周造模6周

26、A640。1。28。6166。82.89。1.858.001。9B7。5214167315*7.595.88*14512。60*6。7。19*93。22（單位：m）與A組比較：*0.05、*0。0；造模前 造模2周 造模3周 造模4周 造模5周 造模6周2 3 各組大鼠凝血時間指標的檢測 各組均于第 次阿霉素注射前1、第2 次阿霉素注射后 周末、2周后、3周后、4周后、周后通過大鼠的眼眶取血，測定凝血時間。21凝血酶原時間（pothrobitime ，PT)：造模前，兩組大鼠T無顯著性差異（P0。5）。模型建立后,模型大鼠PT明顯縮短，與A組相比,差異顯著（001）,說明外源性凝血系統(tǒng)功能亢進

27、。表2 大鼠不同時期P變化造模前造模2周造模3周造模4周造模5周造模周A1473。374。500.14.93。265.60。6515000.11670.91B1463.51088*7.90.68*7。3071*7.00。3*7。20。90*(單位:s）B與A組比較:P.、0。1;2.32 凝血酶時間（thombintime ，TT）:造模前，兩組大鼠T無顯著性差異（P.).大鼠成模后，TT明顯縮短,且整個實驗期間，B組TT一直處于較低的狀態(tài)，與組相比，差異顯著（P0.1)，說明模型大鼠血液系統(tǒng)處于高凝狀態(tài).表大鼠不同時期T變化造模前造模周造模周造模4周造模周造模6周15。20。05。580。5

28、615。40。50156.625。20。6215.520。55B16。00。5。10。4*7230。66*7。7。0。1*.5。5*6930。4*(單位：s）B與A組比較：P0。05、P001;造模前 造模2周 造模3周 造模4周 造模5周 造模6周23。3 活化部分凝血活酶時間(acivated prtiltbolain time,ATT）：造模前，兩組大鼠APT無顯著性差異（P0.05).造模成功后，模型大鼠APPT明顯縮短。整個實驗期間一直呈縮短狀態(tài)，與A組相比，差異顯著（P。0），說明內源性凝血功能亢進。表4大鼠不同時期AT變化造模前造模2周造模周造模4周造模5周造模周A3095。72

29、0.90.831。0871。031.5933。8831300。82B30.970.901.7098*18457*17.09*15671.304.78。65*(單位:s）B與A組比較：P005、*P0.0;23.4復鈣時間（recalcification tme ,RT):造模前,兩組大鼠無顯著性差異（P00).造模成功后,模型大鼠T明顯縮短。整個實驗期間一直保持較低狀態(tài)，與A組相比,差異顯著（0.01)，說明內源性凝血功能發(fā)生異常。表5 大鼠不同時期RT變化造模前造模周造模3周造模4周造模周造模周A3410.5335。00.6235。501300.935。0。6035.21.0B35.00。6

30、2。6868*22.371.*20。317*20。621.35205130*（單位：s)B與A組比較:*P0。05、*P。01;造模前 造模2周 造模3周 造模4周 造模5周 造模6周2. 4各組大鼠的體重變化 實驗期間，組共有1只大鼠死亡。B組造模2周后，與組相比，表現出明顯的阿霉素腎病模型特征,如食量下降、尿量減少、體毛干枯、精神不振、后肢和陰囊出現水腫、剖檢可發(fā)現明顯腹水現象等。造模前兩組大鼠體重無顯著性差異，造模后每周，模型大鼠體重均明顯低于正常組(P0。0).兩組大鼠體重均有增長的趨勢，但A組最明顯。表大鼠不同時期體重變化造模前造模周造模周造模4周造模5周造模6周A17.673526

31、5.810.285。000。37312。839.793774。46374。677。45B833826398.1*247。6618.1*265338.36*23。17886 27。6798(單位：g)B與A組比較:P0.05、*001；造模前 造模2周 造模3周 造模4周 造模5周 造模6周3 討論3我們應用阿霉素靜脈注射大鼠成功復制了腎病綜合征模型，其2小時尿蛋白以及凝血時間的變化均與外國的文獻相近；但是我們的注射阿霉素劑量小于外國文獻,國外文獻報道一般為75m/k，主要是阿霉素心臟毒性很大，大劑量注射一般在57d后引起大鼠死亡，所以根據預實驗結果選擇此劑量,效果較滿意。3。2小兒原發(fā)性腎病以

32、微小病變型為主。阿霉素腎病模型是目前較好的類似人類微小病變型腎病的模型。有關研究已證實,阿霉素系含醌的蒽環(huán)抗生素,由于在腎臟內被代謝還原為半醌型自由基，后者與氧反應產生活性氧，誘發(fā)腎小球上皮細胞脂質過氧化反應，改變腎小球上皮細胞糖蛋白代謝，破壞腎小球濾過膜的結構和功能,最終導致膜濾過屏障的選擇性變化而引起蛋白尿。33 對氨基核苷酸腎病的發(fā)病機制目前還不完全清楚,，一般認為是自由基產生、脂質過氧化物形成，對腎小球和腎小管上皮細胞產生毒性，造成腎小球濾過膜電荷屏障缺損和對分子大小控制上缺陷，使腎小球濾過膜通透性改變和腎小管重吸收障礙2、13.3.4 高凝狀態(tài)（CS） 是指血管內皮細胞、血小板、血液

33、凝血、抗凝及纖溶系統(tǒng)等有關因子發(fā)生變化或血液流變學發(fā)生了改變所引起的病理狀態(tài)， 這種病理狀態(tài)有利于血栓形成1。 APT T 、PT 是分別反映內、外源凝血系統(tǒng)的指標，其值縮短說明內外源凝血系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。N S病人由于免疫復合物沉積在腎小球,造成腎小球內皮損傷，損傷的內皮細胞釋放組織因子,激活了外源凝血系統(tǒng),同時內皮損傷暴露了其下層的膠原和微纖維, 又激活了內凝系統(tǒng)， 內外源凝血系統(tǒng)激活使血液處于CS ， 易形成血栓1致謝感謝河南中醫(yī)學院,大學四年中他讓我學會了很多新的知識，讓我結識了很多志同道合的朋友，還有那么多的優(yōu)秀老師給我們指導，讓我在醫(yī)學的殿堂中茁壯的成長,更重要的是讓我學會了怎樣去

34、學習的方法并且開闊的自己眼界。歷時將近兩個月的時間終于將這篇論文寫完，在論文的寫作過程中遇到了無數的困難和障礙,都在同學和老師的幫助下度過了。尤其要強烈感謝我的論文指導老師何美霞老師以及一直指導我們做實驗的張勇師兄，他對我進行了無私的指導和幫助,不厭其煩的幫助進行論文的修改和改進。另外，在校圖書館查找資料的時候，圖書館的老師也給我提供了很多方面的支持與幫助。在此向幫助和指導過我的各位老師表示最中心的感謝!感謝這篇論文所涉及到的各位學者。本文引用了數位學者的研究文獻，如果沒有各位學者的研究成果的幫助和啟發(fā)，我將很難完成本篇論文的寫作。感謝我的同學和朋友，在我寫論文的過程中給予我了很多你問素材，還

35、在論文的撰寫和排版燈過程中提供熱情的幫助。由于我的學術水平有限，所寫論文難免有不足之處，懇請各位老師和學友批評和指正！參考文獻：1 葉志斌,崔若蘭.腎病綜合征.見：林善琰，主編。當代腎臟病學.上海：上海科技教育出版社，200。9。 Beani T，Rbi ，BiolsiD, aMolecula clnng Adrmcnindu gomendersisi the ra.Am J Kid is，1986,7：1193。魯斌，李新民，馬融；對改造的阿霉素腎病模型的評價；實驗動物科學與管理;199年03期4王泰華,錢家麒，張介玉,姚莒華；阿霉素腎病腎硬化動物模型的實驗改進J;腎臟病與透析腎移植雜志；997年02期.5董晨，盧思廣,夏志強，焦玉清,方先勇;雙腎動脈給阿霉素制備大量蛋白尿大鼠模型；徐州醫(yī)學院學報，1999年第期.6.姜新猷,胡明昌柔紅霉素腎病:活性氧誘發(fā)脂質過氧化反應引起的腎組織損傷.中華腎臟病雜志，991 ,：7。oja C PcoN，emuzi G，e al.bnomates naracion