生長激素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)大鼠缺血結(jié)腸吻合口愈合的研究

1、生長激素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)大鼠缺血結(jié)腸吻合口愈合的研究 首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文生長激素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)大鼠缺血結(jié)腸吻合口愈合的研究姓名:于琦申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):外科學(xué)(普外)指導(dǎo)教師:王宇20070401首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。日期:年。月自?各寺戛.、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全

2、了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)首都醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于請(qǐng)?jiān)谝韵孪鄳?yīng)方框內(nèi)打“”:、保密口,在一年解密后適用本授權(quán)書。、不保密口。作者簽導(dǎo)師簽秈年噸刑嚦刎首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文生長激素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)大鼠缺血結(jié)腸吻合口愈合的研究摘要目的:本實(shí)驗(yàn)旨在探討生長激素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子在促進(jìn)缺血結(jié)腸吻合口愈合的作用。材料與方法:大鼠只,雄性,隨機(jī)分成組:組:正常腸吻合對(duì)照組。

3、組:腸缺血吻合對(duì)照組組:腸缺血吻合組。組:腸缺血吻合生長激素組。組:腸缺血吻合生長激素組。每組只,各組大鼠于吻合術(shù)后四天、七天各隨機(jī)取十只觀察吻合口形態(tài)學(xué)變化,評(píng)定粘連分?jǐn)?shù),測(cè)定吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量,并行光鏡下組織學(xué)檢查。結(jié)果:生長激素能夠顯著增加缺血結(jié)腸吻合術(shù)后四天及七天腸吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量.,且能夠顯著降低缺血結(jié)腸吻合術(shù)后四天腸粘連指數(shù).,術(shù)后七天粘連指數(shù)無顯著差異。能夠顯著增加缺血結(jié)腸吻合術(shù)后四天及七天腸吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量.,且能夠顯著降低缺血結(jié)腸吻合術(shù)后四天及七天腸粘連分?jǐn)?shù).。二者結(jié)合應(yīng)用組較缺血吻合對(duì)照組組能夠顯著增加術(shù)后四天及七天腸吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量.

4、,且能夠顯著降低術(shù)后四天及七天腸粘連分?jǐn)?shù).,同樣,組較正常吻合對(duì)照組組亦能夠顯著增加術(shù)后四天及七天腸吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量.及顯著降低術(shù)后四天及七天腸粘連分?jǐn)?shù).。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)論:生長激素及堿性成纖維細(xì)胞生長因子均可顯著降低缺血結(jié)腸吻合粘連系數(shù)及顯著增強(qiáng)缺血結(jié)腸吻合口破裂壓及提高羥脯氨酸含量,促進(jìn)缺血結(jié)腸吻合口愈合,降低吻合口漏發(fā)生率。關(guān)鍵詞:生長激素;堿性成纖維細(xì)胞生長因子:缺血:結(jié)腸吻合首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 . . . .,.伊., . . 首都醫(yī)科人學(xué)碩士學(xué)位論文 . ,. . , .; ;首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文刖吾腸吻合口漏是導(dǎo)致結(jié)腸手術(shù)病人死亡率上升的重要因素“

5、,臨床報(bào)道結(jié)腸吻合口漏發(fā)生率為。%“?！?至少/結(jié)腸術(shù)后病人死亡皆由吻合口漏引起嘲,許多因素包括缺血、感染、 高血糖及腫瘤浸潤等因素皆可導(dǎo)致吻合口漏嘲,但吻合口缺血為促成吻合口漏的最重要原因“。生長激素促進(jìn)腸吻合口愈合已被國內(nèi)外很多報(bào)道證實(shí)“一,但尚無學(xué)者論證其對(duì)于缺血結(jié)腸腸吻合的作用。堿性成纖維細(xì)胞生長因子作為一種被熱點(diǎn)研究的外源性生長因子,在促進(jìn)慢性創(chuàng)傷燒傷創(chuàng)面愈合的作用已得到眾多研究論證“”,但其在促進(jìn)腸吻合愈合中的作用尚未有報(bào)道。鑒于此,本研究通過將堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠覆于大鼠結(jié)腸吻合術(shù)后吻合口表面,及圍手術(shù)期皮下注射生長激素,以觀察堿性成纖維細(xì)胞生長因子和生長激素對(duì)于缺血大鼠腸

6、吻合口早期愈合、預(yù)防腸吻合口漏發(fā)生的作用。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文材料方法、材料大鼠只,雄性,隨機(jī)分成組:組:正常腸吻合對(duì)照組。組:腸缺血吻合對(duì)照組組:腸缺血吻合組。組:腸缺血吻合生長激素組。組:腸缺血吻合生長激素組。每組只,術(shù)后四天七天各隨機(jī)取十只留取標(biāo)本。、方法:各組大鼠于術(shù)前禁食一日,給予飲用%葡萄糖液.術(shù)前以%苯巴比妥/腹腔內(nèi)注射麻醉,開腹后于結(jié)腸左曲下緣斷腸管,以?可吸收縫線行單層間斷腸吻合術(shù)。缺血吻合組組、組、組、組在確定吻合口位置后,結(jié)扎吻合口兩側(cè)邊緣動(dòng)脈如下圖所示,以保證保留結(jié)腸壁血供.然后同法行腸吻合術(shù)。干預(yù)組組、組腸吻合術(shù)后以水溶膠珠海東大生物制藥有限公司提供,商品名貝復(fù)新

7、,瓶.均勻涂抹于吻合面,后行關(guān)腹。干預(yù)組組及組自手術(shù)前天始,皮下注射生長激素賽增,長春金賽生物制劑公司./,每日一次,直到處死。各組大鼠于術(shù)后四天、七天各隨機(jī)取十只處死,行觀察取材。箭頭所示即為吻合口兩側(cè)邊緣動(dòng)脈首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文、實(shí)驗(yàn)試劑:.羥脯氨酸測(cè)定試劑盒組成:試劑一:粉劑瓶,甲液瓶,乙液瓶,試劑二:液體瓶,冰箱避光保存。試劑三:液體瓶,冰箱避光保存。試劑四:羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)品支,冰箱保存。.羥脯氨酸測(cè)定樣本前處理試劑:水解液瓶;指示劑瓶;調(diào)整甲液瓶;調(diào)整乙液瓶;活性炭袋。.觀察和取材:.大體形態(tài)學(xué)觀察觀察有無吻合口瘺、吻合口感染膿腫形成,觀察腹腔粘連程度,腹腔內(nèi)粘連分級(jí)根據(jù)提出的分級(jí)

8、法【】:級(jí),無粘連.級(jí),單一的易分離的粘連.級(jí),不很廣泛的輕微粘連,能夠抵抗一定的分離拉力.級(jí),大量廣泛內(nèi)臟粘連,伴有腸壁張力增大.級(jí),大量廣泛緊密粘連,包括臨近腸系膜,腸管以及網(wǎng)膜直至腹壁的粘連。每組依據(jù)此級(jí)別數(shù)作為腸粘連分?jǐn)?shù)。.吻合口破裂壓測(cè)定依據(jù)的測(cè)定法【】,通過大鼠肛門插入一細(xì)導(dǎo)尿管直至吻合口下緣,以號(hào)絲線環(huán)行扎緊。距吻合:的近端腸管同樣以號(hào)絲線環(huán)行扎緊。腹腔內(nèi)注入鹽水,直至浸沒腸管吻合口,然后尿管外端接一三通管,三通管另兩端分別接血壓計(jì)袖帶兩端,以繃帶扎緊袖帶,通過血壓計(jì)氣囊緩緩注入空氣,同時(shí)觀察吻合口,有水泡溢出時(shí)水銀柱高度即為吻合口破裂壓。首都醫(yī)科大學(xué)碩:學(xué)位論文.吻合口羥脯氨酸

9、含量測(cè)定取吻合口周圍. 長的肉芽組織保存于.。液氮箱中,應(yīng)用南京建成生物有限公司羥脯氨酸試劑盒處理標(biāo)本,測(cè)定羥脯氨酸含量,具體如下:.臨用時(shí)將粉劑一瓶,先加甲液充分溶解。然后再加乙液充分混勻。配好后的試劑。冰箱保存。.配制標(biāo)準(zhǔn)貯備液:測(cè)試前將一支標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水溶解后定容至,配成/的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。.配制/標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液:取./標(biāo)準(zhǔn)貯備液加蒸餾水定容至,配成/的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液,現(xiàn)用現(xiàn)配。.樣本水解:稱取吻合口組織濕重,剪碎,加水解液,混勻。放帶蓋的玻璃磨口試管中加蓋后,或者沸水浴水解分鐘。.調(diào)值至.。、將各磨口試管流水冷卻后各管加指示劑滴,搖勻;、各管加入調(diào)甲液.至溶液變紅,混勻;、各管逐滴小心加入調(diào)乙液,

10、每滴加入后均要混勻,直至液體中指示劑的顏色變成黃綠色。此時(shí)值在.左右;、然后加蒸餾水至,混勻;、取,加適量活性炭,混勻,轉(zhuǎn)/分離,分鐘,小心取上清作檢測(cè)。.操作表:首都醫(yī)科人學(xué)碩上學(xué)位論文混勻,水浴分鐘,冷卻后,轉(zhuǎn)/分離心分鐘,取上清在處,光徑,蒸餾水調(diào)零,測(cè)各管吸光度。.計(jì)算公式:羥脯氨酸含量測(cè)定管吸光度一空白管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管含量水解液總體積曙/啦重麗醑面砑舞藉兩暖。/“?強(qiáng)磊厘礦.病理學(xué)檢查 取吻合口處腸襻,置于%中性甲醛液固定,常規(guī)石蠟包埋,切片 :染色,行光鏡下組織學(xué)觀察。、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理各組數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示。以 .完成統(tǒng)計(jì)分析。組間比較用非配對(duì)檢驗(yàn),.為存在顯著差異。結(jié)果、大體形態(tài)學(xué)觀

11、察各組大鼠均存活。組術(shù)后四天及術(shù)后七天各有一支發(fā)生腸漏伴吻合口膿腫形成,其余各組無腸漏發(fā)生。腹腔粘連指數(shù)見下表所示,組術(shù)后四天粘連指數(shù)為.,較組.顯著升高.,.,組粘連分?jǐn)?shù)較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.均顯著降低,同樣,組粘連分?jǐn)?shù)較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.亦均顯首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文著降低。組術(shù)后四天粘連分?jǐn)?shù)較組術(shù)后四天顯著降低印.。.,而兩組間術(shù)后七天粘連分?jǐn)?shù)并無顯著差異.。、吻合口破裂壓:吻合口破裂壓具體數(shù)值見下表,組吻合口破裂壓較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.均顯著降低。組吻合口破裂壓較組術(shù)后四天.及術(shù)后七天卸.均顯著升高,同樣,組較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.,.吻合口破裂壓、組較

12、組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.,.吻合口破裂壓均顯著升高。同時(shí), 組較組術(shù)后四天卸.及術(shù)后七天.,.吻合口破裂壓亦顯著升高。、羥脯氨酸含量:羥脯氨酸含量見下表:組較組術(shù)后四天.及術(shù)后七天卸.羥脯氨酸含量均顯著降低。組較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.羥脯氨酸含量顯著升高。同樣,組較組術(shù)后四天.,.術(shù)后七天.,.、組較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.。.羥脯氨酸含量均顯著升高。組較組術(shù)后四天.,.及術(shù)后七天.,.羥脯氨酸含量亦顯著升高。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文、組織病理學(xué)觀察:組術(shù)后第四天 組術(shù)后第四天全層內(nèi)散在中性粒細(xì)胞,肌層可見膿腫灶形成, 組織水腫明顯,血管擴(kuò)張、數(shù)量減少,只粘膜下肌層內(nèi)可見異物巨細(xì)

13、胞,成纖維細(xì)胞及血 存在少量成纖維細(xì)胞管增值不明顯組術(shù)后第四天 組術(shù)后第天較組,組織水腫明顯減輕,成纖維細(xì)胞及 較組,組織水腫明顯減輕,成纖維細(xì)胞大量血管顯著增殖 增值,血管顯著增生。組術(shù)后第四天成纖維細(xì)胞大量增值, 大量毛細(xì)血管增生首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文光鏡圖像提示:術(shù)后第四天,缺血組組較正常吻合組組水腫明顯,血管擴(kuò)張、紊亂,成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯減少,同時(shí)可見、組大鼠吻合口成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯高于組,且生長增殖活躍,大量毛細(xì)血管增生,炎性細(xì)胞浸潤較組明顯減少。討論腸吻合口瘺是腸吻合術(shù)后的一種嚴(yán)重的并發(fā)癥,局部血運(yùn)不佳對(duì)于吻合口漏發(fā)生有著很大的促進(jìn)作用【】,因?yàn)槌渥愕难髁繉?duì)于維持正常的白細(xì)胞趨

14、化功能、成纖維細(xì)胞生成、血管發(fā)生及上皮再生有著至關(guān)重要的作用。而在整個(gè)消化管道中。結(jié)腸對(duì)于局部過高張力反應(yīng)最敏感】,術(shù)中腸管的過度或者不恰當(dāng)?shù)臓坷鼤?huì)加劇結(jié)腸的缺血,所以結(jié)腸術(shù)后吻合口缺血更為多見,吻合口漏發(fā)生率亦最高【。因此,如何促進(jìn)缺血結(jié)腸吻合口愈合、降低吻合口漏發(fā)生率將是擺在臨床醫(yī)師面前的一個(gè)重要課題。本研究通過結(jié)扎左半結(jié)腸吻合口兩側(cè)邊緣動(dòng)脈“捌建立左半結(jié)腸缺血腸吻合模型,因有文獻(xiàn)報(bào)道,左半結(jié)腸腸吻合術(shù)后腸缺血發(fā)生率顯著高于右半結(jié)腸,且通過結(jié)扎邊緣動(dòng)脈建立腸缺血模型僅限于導(dǎo)致結(jié)腸吻合口壁內(nèi)缺血,這種缺血強(qiáng)度僅能致吻合口形態(tài)學(xué)變化,不會(huì)導(dǎo)致結(jié)腸壞死九刪。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:所有大鼠均于術(shù)后存活

15、。缺血吻合組術(shù)后四天及七天各有一只發(fā)生吻合口漏,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提示缺血吻合組能夠顯著降低吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量,光鏡下可見缺血吻合組組織水腫明顯,毛細(xì)血管擴(kuò)張,大量炎性細(xì)胞浸潤,延緩吻合口愈合。羥脯氨酸是膠原的主要成分,其含量與膠原量有關(guān),成纖維細(xì)胞是合成膠原的主要細(xì)胞。因此,本研究通過測(cè)定羥脯氨酸值以反應(yīng)組織膠原含量,從而反映組織愈合程度。有文獻(xiàn)報(bào)道,結(jié)腸吻合術(shù)后亦可以通過測(cè)定吻合口破裂壓反映結(jié)腸愈合水平嘲“州,且術(shù)后?天吻合口破裂壓降至最低水平,至術(shù)后天將恢復(fù)至正常水平,這是由于術(shù)后前四天持續(xù)增高的膠原酶活性導(dǎo)致同期膠原含量的持續(xù)下降。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文本研究結(jié)果顯示:缺血結(jié)腸吻合術(shù)后

16、第、天及生長激素實(shí)驗(yàn)組組、組腸吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量均顯著高于缺血對(duì)照組組,組術(shù)后四天及七天及組術(shù)后四天粘連指數(shù)均顯著低于缺血對(duì)照組,組術(shù)后七天粘連分?jǐn)?shù)同缺血對(duì)照組并無顯著差異。同時(shí)生長激素同聯(lián)合應(yīng)用對(duì)照組組術(shù)后四天七天吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量均顯著高于缺血對(duì)照組組,亦顯著高于正常對(duì)照組組。光鏡下組織學(xué)病理檢查可見生長激素組、組及聯(lián)合應(yīng)用較對(duì)照組能夠顯著促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長,使血管增生活躍,增強(qiáng)上皮化作用,加快組織愈合。生長激素對(duì)于促進(jìn)正常腸吻合的作用已被眾多學(xué)者報(bào)道,生長激素生理作用是促進(jìn)物質(zhì)代謝與生長發(fā)育,促進(jìn)創(chuàng)傷的愈合、組織細(xì)胞分裂增殖和蛋白質(zhì)的合成,其促進(jìn)腸吻合愈合的作用機(jī)理如下:

17、 生長激素能夠促進(jìn)骨骼肌釋放氨基酸,從而升高血清中精氨酸極谷氨酰胺水平嘲。加速血管內(nèi)外成纖維細(xì)胞活性矧。促進(jìn)結(jié)構(gòu)蛋白如層粘素、彈性蛋白、角蛋白合成咖。促進(jìn)膠原沉積,并且能夠促進(jìn)新生膠原重建嘲。胰島素樣生長因子是生長激素體內(nèi)促合成作用的重要介質(zhì).生長激素可促進(jìn)創(chuàng)傷組織中一受體的表達(dá)”,且?受體于結(jié)腸組織中分布最為豐富。一能夠促進(jìn)膠原增殖及血管生成。降低炎性反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)反映生長激素能夠促進(jìn)缺血結(jié)腸吻合口愈合, 】指出:所有創(chuàng)傷愈合早期皆處于缺血狀態(tài)。因此,生長激素?zé)o論在正常還是缺血結(jié)腸吻合后都能發(fā)揮其上述促進(jìn)細(xì)胞增值及蛋白質(zhì)合成的作用,所以能夠促進(jìn)正常及缺血結(jié)腸吻合口的愈合。堿性成纖維細(xì)胞生長因子

18、作為一種基因工程新藥自年開始應(yīng)用于臨床。在體內(nèi)分布廣泛,血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞等細(xì)胞中都可檢測(cè)到的表達(dá)。作為一種重要的促有絲分裂原,可贏接作用于組織修復(fù)細(xì)胞周期,使細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換時(shí)間縮短,加速細(xì)胞的分裂和增殖。的主要靶細(xì)胞是與肉芽組織生長密切相關(guān)的血管內(nèi)皮細(xì)胞與成纖維細(xì)胞啪。因此,能夠誘導(dǎo)微血管的形成、增殖、分首都醫(yī)科人學(xué)碩士學(xué)位論文化。等將收集到的術(shù)后患者早期創(chuàng)面的引流液用在小鼠模型上研究發(fā)現(xiàn):手術(shù)后當(dāng)天的引流液引起內(nèi)皮細(xì)胞增生和形成新的血管作用最明顯,其作用隨后迅速下降。而引流液中的量與其促進(jìn)增生作用成平行變化關(guān)系。由此可以認(rèn)為手術(shù)創(chuàng)面早期分泌的是啟動(dòng)

19、創(chuàng)面修復(fù)、促進(jìn)血管形成的重要因素之一。的促成纖維細(xì)胞增值作用能夠促進(jìn)傷口周圍的細(xì)胞增殖和膠原的合成,分化和合成新的細(xì)胞外基質(zhì),升高膠原含量。因此,是成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞的高效促生長劑,能夠強(qiáng)烈促進(jìn)新生毛細(xì)血管及成纖維細(xì)胞的形成,增加血流量,促進(jìn)膠原合成,增強(qiáng)組織修復(fù)能力。對(duì)于缺血結(jié)腸吻合,由于能夠促進(jìn)血管增值,改善缺血結(jié)腸吻合口血流量,促進(jìn)成纖維細(xì)胞增值,增強(qiáng)膠原合成,從而增強(qiáng)缺血結(jié)腸吻合術(shù)后早期羥脯氨酸含量及吻合口破裂壓,促進(jìn)吻合口愈合。因此,大鼠缺血結(jié)腸吻合術(shù)圍手術(shù)期全身應(yīng)用生長激素,促進(jìn)蛋白質(zhì)合成及組織細(xì)胞分裂增殖,術(shù)中局部應(yīng)用,能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的增值,二者的結(jié)合能夠

20、扭轉(zhuǎn)術(shù)后四天膠原酶活性的增高,且能夠逆轉(zhuǎn)缺血腸吻合所致的對(duì)于腸吻合愈合的負(fù)面作用,較缺血對(duì)照組及正常對(duì)照組均能顯著增加四天及七天吻合口破裂壓及羥脯胺酸含量,促進(jìn)結(jié)腸吻合口愈合。另外,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提示能夠顯著降低結(jié)腸吻合術(shù)后腸粘連分?jǐn)?shù),降低腸粘連發(fā)生率。導(dǎo)致腸吻合術(shù)后局部粘連的主要因素可能與吻合口局部炎性滲出、缺血、異物刺激等有關(guān)四,吻合面纖維蛋白沉積或機(jī)化、膠原蛋白形成等都可以促使粘連形成。能夠改善吻合口血流量,增強(qiáng)白細(xì)胞趨化功能,降低局部炎性反應(yīng),因此,盡管作為一種腹腔內(nèi)異物,但卻能保護(hù)吻合口創(chuàng)面,降低腸粘連發(fā)生機(jī)率。而生長激素只能夠降低術(shù)后四天腸粘連分?jǐn)?shù),術(shù)后七天的腸粘連分?jǐn)?shù)并無顯著下降。生長

21、激素能夠降低吻合口局部炎性反應(yīng),因此能夠降低術(shù)后四天腸粘連程度,術(shù)后晚期生長激素并不能降低腸粘連發(fā)生率,可能與生長激素促進(jìn)局部纖維蛋白沉積及膠原蛋白合成有關(guān)。其具體作用機(jī)理尚待進(jìn)一步論證。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)論生長激素及堿性成纖維細(xì)胞生長因子能夠降低結(jié)腸術(shù)后腸粘連發(fā)生率,促進(jìn)缺血大鼠結(jié)腸吻合口血管增生及膠原合成,促進(jìn)缺血結(jié)腸吻合口愈合,降低吻合口漏發(fā)生機(jī)率。因此。生長激素及堿性成纖維細(xì)胞生長因子具備很高的臨床應(yīng)用價(jià)值,其臨床療效評(píng)價(jià)尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。堇望墨型查蘭堡主竺垡堡塞參考文獻(xiàn).【】 , ,. ;:.【】 , , ., , , . ;:.【】 . ,.;:.】 ,.;:.【】 ,

22、.;:.】 ,: .;:?., :【】 , :;.: . 【】,:., 【】 , .:一.【】付小兵,沈祖堯,陳玉林,等.堿性成纖維細(xì)胞生長因子與創(chuàng)面修復(fù).例多中心對(duì)照臨床試驗(yàn)結(jié)果.中國修復(fù)重建外科雜志,:?堇塑墾型查蘭堡主蘭竺堡皇:【】,. :.【】 , . , ,. .,:.【】 , ,.;:一.【】 ,.;:.【】 , ., , .;:.,【】 .;:.】 , . .;:】. ,. .;:?.【】 ,;:., . :.【】 ,.;:?., 】. .;:?.首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文【】 , , 鼯 :.;:?., 】 . . . .;:.【】 . ;:?.,.【】 . . ;:.【】 ,.

23、 ;:?.,【】?.;:.,. .;:.【隊(duì) ,、】, . .?;:;. ,【】 .,:. . . ; :?.【】呂威力,.董玉蘭.堿性成纖維細(xì)胞生長因子促血管內(nèi)皮細(xì)胞增生的研究.首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文, :?. 【】 ,. ,. :【】裘華德,史海生,艾中立,等.腹腔內(nèi)用藥預(yù)防手術(shù)后粘連的實(shí)驗(yàn)研究.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,:.首都醫(yī)科丈學(xué)碩士學(xué)位論文文獻(xiàn)綜述促進(jìn)腸吻合愈合制劑應(yīng)用研究進(jìn)展幾乎所有腸外科手術(shù)在處理完病灶之后,都要有一個(gè)重建腸道以恢復(fù)腸功能的手術(shù)過程,腸吻合術(shù)的基本要求即是保證管道的通暢,完整的連續(xù)性,保證不漏、不堵、不出血。但是在臨床工作中,吻合口漏、出血或者梗阻還是有著一定的發(fā)生

24、率,特別是在吻合口缺血、腹腔感染以及病人全身營養(yǎng)狀況比較差的情況下。另外,吻合技術(shù)的不完善也會(huì)促成腸漏的發(fā)生。在保證術(shù)中吻合技術(shù)以及改善全身營養(yǎng)狀態(tài)積極抗感染治療的基礎(chǔ)上,國內(nèi)外很多學(xué)者紛紛通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)論證了全身或局部應(yīng)用一些藥物制劑會(huì)促進(jìn)腸吻合口的愈合,現(xiàn)綜述如下:.纖維蛋白膠,即是纖維蛋白原與凝血酶混和膠,它是一種血液纖維蛋白膠制品,模擬凝血過程的最后階段,起凝血和粘合組織的作用。鑒于此,眾多學(xué)者通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)論證對(duì)于腸吻合愈合的作用。和捌等先后報(bào)道,基于的止血及粘合抗破裂作用,能夠顯著增強(qiáng)小腸吻合口破裂壓,促進(jìn)小腸吻合口愈合。但是對(duì)于結(jié)腸吻合只能增加術(shù)后早期吻合口破裂壓,而在術(shù)后中晚期甚至

25、會(huì)降低破裂壓以及抑制膠原纖維生成,故只能夠增強(qiáng)吻合口薄弱處的粘合,并無增強(qiáng)組織內(nèi)部愈合的作用。等喳亦通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指出,由于影響局部血運(yùn),只能增強(qiáng)吻合破裂壓。而反映局部膠原含量的羥脯氨酸含量并無增加。在結(jié)腸缺血條件下,掣悛現(xiàn)局部應(yīng)用反而加劇正常及缺血結(jié)腸吻合口膠原降解,從而抑制吻合口愈合。由此可見,眾多學(xué)者研究業(yè)已證實(shí),腸吻合口局部應(yīng)用只能在一定程度上增強(qiáng)腸吻合口破裂壓,降低腸漏發(fā)生率,但并不能增強(qiáng)甚至?xí)种凭植磕z原合成。這可能與下列作用有關(guān):粘合吻合口,減少損傷,減少了瘢痕的形成,同時(shí)作為細(xì)胞游走的支架促進(jìn)愈合”。內(nèi)含有纖維連合蛋白,可加強(qiáng)膠原間首都醫(yī)科丈學(xué)碩士學(xué)位論文的粘結(jié)和交聯(lián),提高了傷口

26、的張力嘲,增強(qiáng)吻合口破裂壓。有止血作用,降低吻合口出血發(fā)生率,減輕了局部血腫形成,但局部止血作用亦可能影響局部血運(yùn),從而影響局部膠原合成,延緩愈合。對(duì)于一些高危因素下腸吻合的影響亦有一些學(xué)者作出實(shí)驗(yàn)論證,且觀點(diǎn)不一。等【指出,術(shù)前放療大鼠吻合口局部應(yīng)用能夠增加吻合口離斷力及羥脯氨酸含量,促進(jìn)腸吻合愈合。但是一些學(xué)者】貝考慮含有的蛋白抗體在術(shù)后早期促進(jìn)吻合口肉芽組織的生長,從而影響放療后組織愈合。另外,等發(fā)現(xiàn)纖維蛋白粘合劑對(duì)于長期類固醇治療后結(jié)腸吻合并無促進(jìn)作用。但是,局部應(yīng)用能夠減輕一氟尿嘧啶.對(duì)于腸吻合愈合的負(fù)作用.促進(jìn)吻合愈合”】。腹腔感染亦是腸吻合的常見高危因素之一。在腸壁炎癥、水腫的條

27、件下行腸吻合術(shù),其術(shù)后吻合口漏發(fā)生率極高。這也是腸漏術(shù)后早期手術(shù)甚至后期確定性手術(shù)失敗的主要原因。腹腔感染對(duì)吻合口愈合的影響是多方面的,有實(shí)驗(yàn)認(rèn)為炎癥反應(yīng)加劇了膠原降解,也有實(shí)驗(yàn)認(rèn)為其主要損害膠原的合成【。等“”曾將應(yīng)用于腹腔感染條件下的腸吻合,完成吻合后于吻合口旁注入鼠糞作為感染源造成腹腔感染,發(fā)現(xiàn)并未改善吻合口的愈合。但江濤,黎介壽在建立新腹腔感染模型“的基礎(chǔ)上,發(fā)現(xiàn)能有效地應(yīng)用于腹腔感染條件下的大鼠小腸腸吻合,膠合組吻合口強(qiáng)度顯著提高,不良愈合顯著減少。考慮在腹腔感染條件下,的粘合作用能夠降低炎癥因子的攻擊,避免了縫線結(jié)扎帶來的膠原降解反應(yīng),因此在很大程度上避免了腹腔感染和炎癥因素對(duì)腸吻

28、合的負(fù)面影響【】。.生長激素生長激素 ,生理作用是促進(jìn)物質(zhì)代謝與生長發(fā)育,對(duì)機(jī)體各個(gè)器官和各種組織均有影響。對(duì)骨骼肌肉及內(nèi)臟器官的作用尤為顯著,其作用機(jī)理即是促進(jìn)創(chuàng)傷的愈合、組織細(xì)胞分裂增殖和蛋白質(zhì)的合成,在嚴(yán)重感染的條件下還有阻斷過度炎癥反應(yīng)的作用。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文生長激素對(duì)于促進(jìn)腸吻合的作用已被眾多學(xué)者基本證實(shí),等“的研究表明,應(yīng)用后吻合口的膠原合成率于術(shù)后第天比對(duì)照組升高倍,掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)使用后吻合口膠原原纖維出現(xiàn)更早、更致密有序,至術(shù)后第天已經(jīng)有豐富的新生膠原纖維形成。國內(nèi)方面,姜軍等”報(bào)道應(yīng)用后,大鼠腸吻合口的羥脯氨酸濃度于術(shù)后第七天較對(duì)照組有明顯增加,透射電鏡顯示膠原纖維

29、分布密集。鮑揚(yáng),李幼生噙等提出利用聯(lián)合促進(jìn)組織愈合同時(shí)聯(lián)合早期腸道內(nèi)營養(yǎng)能夠提供組織愈合營養(yǎng)基礎(chǔ),進(jìn)一步加快愈合。但是,高危因素下的腸吻合,并非皆有正性促愈合作用。在腹腔感染條件下,江濤,黎介壽肯定了對(duì)于腸吻合愈合促進(jìn)作用的同時(shí),指出加用后羥脯氨酸濃度并無顯著提高,吻合口強(qiáng)度、不良愈合率等方面亦未見有進(jìn)一步改善。另外,和川報(bào)道,糖尿病模型大鼠實(shí)施腸吻合后全身應(yīng)用生長激素并不能增強(qiáng)吻合口的局部吻合強(qiáng)度,但能夠增加年老大鼠腸吻合術(shù)的生存率。同時(shí),生長激素能夠顯著增強(qiáng)放射治療后及腸缺血狀態(tài)下腸吻合術(shù)后大鼠腸破裂壓,促進(jìn)愈合捌。等協(xié)研究指出,生長激素雖能促進(jìn)正常腸吻合愈合,但對(duì)于進(jìn)低蛋白飲食所致營養(yǎng)不

30、良大鼠之吻合并無作用。.外源性生長因子外源性生長因子對(duì)創(chuàng)傷修復(fù)的作用已成為當(dāng)今創(chuàng)傷修復(fù)學(xué)研究的熱點(diǎn)九。而對(duì)于腸吻合愈合修復(fù)的作用國外一些學(xué)者亦有涉及,具體如下:.堿性成纖維細(xì)胞生長因子是一種單鏈多聚肽,在體內(nèi)分布廣泛,血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞等細(xì)胞中都可檢測(cè)到的表達(dá)。作為一種重要的促有絲分裂原,可直接作用于組織修復(fù)細(xì)胞周期,使細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換時(shí)間縮短,加速細(xì)胞的分裂和增殖。近年來在創(chuàng)口中的作用研究甚多,認(rèn)為它在創(chuàng)口愈合反應(yīng)中具有誘導(dǎo)毛細(xì)血管形成,刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞繁殖,促進(jìn)肉芽組織增生等多種作用乜町,并能特異性調(diào)理活化吞噬細(xì)胞、單核細(xì)胞,具有首都醫(yī)科大學(xué)碩

31、士學(xué)位論文一定的抗感染作用嘲。亦有報(bào)道認(rèn)為局部外用可加速燒傷病人供皮區(qū)創(chuàng)面的愈合。”,手術(shù)切口愈合的早期應(yīng)用,能促進(jìn)毛細(xì)血管形成和纖維細(xì)胞增殖,加快傷口愈合嘲。腸吻合方面,徐軍,耿智敏等報(bào)道,能顯著促進(jìn)膽腸吻合口粘膜上皮愈合過程,促進(jìn)肉芽組織生長及傷口收縮,減少瘢痕形成。,.角質(zhì)化細(xì)胞生長因子 亦是成纖維細(xì)胞生長因子 家族中的成員,能特異地與受體結(jié)合,能特異性促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化.,對(duì)保持胃腸黏膜的完整性和促進(jìn)損傷修復(fù)有很重要的作用。和勰在整個(gè)胃腸系統(tǒng)中均有表達(dá)剛。等慨刪報(bào)道腹腔內(nèi)注射重組人角質(zhì)化細(xì)胞生長因子能夠增強(qiáng)膠原聚集及吻合口破裂壓,促進(jìn)吻合口愈合。,.表皮生長因子 亦是一類重

32、要的生長因子。年在小鼠的頜下腺中分離純化成功,具有廣泛生物活性?？稍黾诱衬ぁ⒑偷鞍踪|(zhì)含量,刺激多種組織增生,參與組織修復(fù)。特別表現(xiàn)在促進(jìn)表皮細(xì)胞生長繁殖,加速受傷表皮細(xì)胞的修復(fù)。等?發(fā)現(xiàn)以明膠海綿為載體的表皮生長因子能夠增強(qiáng)結(jié)腸吻合口膠原沉積,增強(qiáng)吻合口破裂壓及羥脯氨酸含量,促進(jìn)吻合口愈合,對(duì)于局部應(yīng)用類固醇之結(jié)腸吻合亦是如此。.轉(zhuǎn)化生長因子 可分為和.,.和有共同的受體.【對(duì)多種細(xì)胞有促有絲分裂作用。參與調(diào)節(jié)胃腸道黏膜上皮的更新和黏膜損傷的修復(fù),是維持黏膜完整性的重要介質(zhì),被稱作“黏膜完整肽。.是一種多功能生長因子,除作為化學(xué)趨化劑趨化炎性細(xì)胞與組織修復(fù)細(xì)胞向創(chuàng)面聚集外,還能直接作用于成纖維

33、細(xì)胞。刺激細(xì)胞外基質(zhì)中型前膠原合成、肉芽組織生長以及修復(fù)后期的組織改建等【】。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文等啪研究指出,結(jié)腸吻合術(shù)后通過皮下導(dǎo)管注射腺病毒攜帶的能夠增強(qiáng)吻合口破裂壓,促進(jìn)結(jié)腸愈合。,.血小板源性生長因子 由多種細(xì)胞產(chǎn)生,能刺激平滑肌細(xì)胞、膠質(zhì)等細(xì)胞增生的多肽,具有廣泛的生理活性。主要表現(xiàn)在三方面,一是促分裂效應(yīng),能刺激血管平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞的分裂增生。二是趨化活性,對(duì)中性粒細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞有趨化性。三是具有縮血管活性。等【】報(bào)道,局部應(yīng)用貝卡普勒明凝膠能夠顯著增強(qiáng)缺血大腸吻合口破裂壓,但對(duì)正常結(jié)腸吻合口并無顯著性作用。.胰島素樣生長因子.是促細(xì)胞分裂的多肽

34、生長因子,能促進(jìn)腸道黏膜和蛋白質(zhì)的合成,降低細(xì)菌移位的發(fā)生,減輕腸黏膜萎縮。發(fā)現(xiàn)生長激素可促進(jìn)創(chuàng)傷組織,?受體的表達(dá),生長激素直接或通過.作用于創(chuàng)面組織增強(qiáng)細(xì)胞外間質(zhì)蛋白合成及組織愈合能力,提高組織愈合后的抗張強(qiáng)度。和等九盯發(fā)現(xiàn),腹腔內(nèi)注射?能夠促進(jìn)結(jié)腸吻合口膠原聚集,促進(jìn)吻合口愈合。.粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子,?“”最先從事對(duì)于結(jié)腸吻合口愈合影響的研究,但表示對(duì)于結(jié)腸吻合愈合并無影響.隨后眾多學(xué)者將研究方向轉(zhuǎn)至?對(duì)于高危因素下結(jié)腸吻合愈合的研究上。等?報(bào)道,吻合口局部注射除能促進(jìn)正常結(jié)腸吻合愈合外,對(duì)缺血結(jié)腸吻合亦有促進(jìn)作用.等“指出局部應(yīng)用藥物莫拉司亭能夠促進(jìn)結(jié)扎膽總管引起梗阻性黃疸模型大鼠

35、結(jié)腸吻合口破裂壓,同時(shí)鏡下可見更多單核細(xì)胞聚集以及更小的吻合口裂隙,從而有利于吻合愈合。對(duì)于長期應(yīng)用類固醇后結(jié)腸吻合,局部應(yīng)用亦能夠促進(jìn)愈合,且局部應(yīng)用較皮下注射更有效“”。腹膜腔內(nèi)注射,絲裂霉素化療將延緩吻合口愈合,能夠抑制這種延緩作用,促進(jìn)其愈合首都醫(yī)科大學(xué)碩上學(xué)位論文硼.其他除上述各種因素外,國外眾多學(xué)者報(bào)道了其它一些藥物制劑對(duì)于腸吻合的促進(jìn)作用,在此做一簡(jiǎn)述:等【】報(bào)道凝血因子作為凝血過程中纖維蛋白聚集的促進(jìn)因子,由于局部蛋白聚集,能夠促進(jìn)吻合口愈合。 等四發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)嘲胞生成素能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長及血管生成,促進(jìn)結(jié)腸愈合。而報(bào)道,皮下注射免疫抑制藥他克莫司能夠增加結(jié)腸吻合口破裂壓,但

36、不影響局部膠原含量,低劑量甚至?xí)绊懩z原沉積。在結(jié)腸缺血條件下,抗粘連封閉劑酸性羧甲基纖維素鈉以及苯丙酸去甲睪酮均能夠抑制結(jié)腸缺血對(duì)于腸吻合的負(fù)作用,促進(jìn)愈合九”。 等【】報(bào)道大鼠腹腔感染條件下,吻合術(shù)后腹腔內(nèi)注射絲氨酸蛋白酶抑制劑甲磺酸卡萘司他能夠延緩高濃度下甚至可以阻止細(xì)胞外基質(zhì)降解,從而改善吻合口愈合。特別等嘲是在腹腔蛋白酶激活狀態(tài)如腸壁水腫或者炎癥存在條件下。另外,發(fā)現(xiàn)術(shù)前反復(fù)應(yīng)用低劑量霍亂毒素將會(huì)使腸粘膜調(diào)節(jié)機(jī)制提供一個(gè)安全有效的促進(jìn)吻合愈合的環(huán)境,尤其在高危因素下能夠加速愈合。最后,一些口服藥物亦被發(fā)現(xiàn)對(duì)于腸吻合有促進(jìn)作用。掣發(fā)現(xiàn)等嘲結(jié)腸吻合術(shù)后腹膜內(nèi)注射抗肥胖藥來普汀能夠促進(jìn)結(jié)腸

37、吻合愈合。報(bào)道,口服維生素能夠阻止腹腔內(nèi)注射一化療后對(duì)于吻合愈合的負(fù)作用,加速膠原沉積。另外,口服鈣離子通道阻滯劑硝苯地平、抗癲癇藥苯妥英均能增強(qiáng)膠原沉積,加速吻合愈合,且后者經(jīng)直腸給藥比經(jīng)口給藥作用更為顯著”刪?？傊?及生長激素對(duì)于腸吻合的促進(jìn)作用已得到眾多學(xué)者基本證實(shí),而在高危因素下對(duì)于腸吻合的影響尚有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)論證。而外源性生長因子對(duì)于吻合愈合的作用必將會(huì)為我們提供一個(gè)更為廣泛的研究空間。當(dāng)然,腸吻合并發(fā)癥的發(fā)生是由很多因素促成的,我們必須首先盡可能完善吻合技術(shù),控制感染及改善全身營養(yǎng)狀況,從根本上降低吻合并發(fā)癥發(fā)生率。首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文參考文獻(xiàn). 】. .,國:.【】 .,.,:., 【】 , 誦 :.,:. 】 . .,:?.氣【】 .,:.:,】 . .,:.:.】. ,:】李玉端主編.細(xì)胞外間質(zhì)的生物化學(xué)及研究方法.北京:人民衛(wèi)生出版社.:.,【】. .,:. ,【】 .,:.【】,.:. .【】 .,:?.首都醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 【】 . .:.【 , , ,.,:?.】.肌鵲. ,:?., .,:.【】鮑揚(yáng),李幼生,黎介壽.一種新型腹腔感染動(dòng)物模型的建立.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,:.】江濤,黎介壽.纖維蛋白膠和生長激素促進(jìn)腹腔感染條件下大鼠腸吻合口愈合的研究.中華普通外科雜志,:. 船 【.:?.,弧,. .,:.【