離子色譜法測定合成多肽類藥物中醋酸的含量

1、離子色譜法測定合成多肽類藥物中醋酸的含量Content of acetic acid in synthetic polypeptide drugs determined by ion chromatographyDENG Feng1 LIN Xiang-hua21.Food and Drug Control Institute in GuangdongProvince ，Guangzhou510180，China ；2.Sun Yat-Sen Memorial Hospital ，Sun Yat-Sen University ，Guangzhou510120，China Objective T

2、o explore the content of acetic acid insynthetic polypeptide drugs determined by ion chromatography. Methods Analytical column was DIONEXIonPac AS19 (4 mm 250 mr), the leacheate was a solution of 3.2 mmol/L sodium carbonate mixed with 1.0 mmol/L sodium bicarbonate ， flow velocity was 0.8 ml per minu

3、te ， the curb was 70 mA， and electrical conductivity detector was applied for determination. Results The linearly dependent coefficient was 0.9997 when the content of acetic acidranged from 14.2 卩 g/ml to 142.2 卩 g/ml.The recovery rate was from 98.1% to 100.7% and percentage of relative standard dev

4、iation( RSD) was 1.0%. Conclusion Ionchromatography is simple ， convenient and fast with accurate result ， which can replace high performance liquidchromatography in determining the content of acetic acid from synthetic polypeptide drugs.中國藥典2010年版第一增補(bǔ)本二部附錄叫 N合成多肽 中醋酸測定法 1 以冰醋酸為對照品，采用高效液相色譜法，梯 度洗脫 3

5、0 min 測定醋酸含量。操作過程中冰醋酸味道刺鼻，分 析時間較長。本文以醋酸鈉作為對照品，采用離子色譜法，嘗試 以更簡便安全的方法檢測多肽藥物中醋酸的含量。1 材料與方法1.1 儀器與試藥離子色譜法儀器為戴安（DIONEX ICS1000,高效液相色譜 儀為 WATER2690/996，Mettler AE240電子天平，MILLIPORE 超 純水儀。三合水醋酸鈉（分析純，廣州化學(xué)試劑廠， 批號 20090401-2， 99.0%），冰醋酸（分析純，廣州化學(xué)試劑廠，批號 20101101-2， 99.5%），碳酸氫鈉、碳酸鈉均為分析純。樣品為 2 家不同企業(yè)生產(chǎn)的合成多肽類藥物醋酸曲普瑞林

6、 各 1 批。1.2 溶液配制1.2.1 對照品溶液 取三合水醋酸鈉適量，精密稱定，加水 溶解并稀釋至約2500卩g/ml，作為對照品儲備液；精密吸取適 量，加水稀釋至約80卩g/ml。1.2.2樣品溶液 取樣品約100 mg,精密稱定，加水10 ml溶解。1.3 色譜條件3 討論 離子色譜是在離子交換色譜法的基礎(chǔ)上建立起來的一種離 子分離分析液相色譜技術(shù) 2 ，目前已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展 最快的分析方法之一， 被廣泛地用于無機(jī)陰陽離子和有機(jī)離子的 測定，具有快速方便、靈敏度高、選擇性好、可同時分析多種離 子化合物、分離柱的穩(wěn)定性好、容量高、樣品用量少、易實現(xiàn)自 動化等優(yōu)點(diǎn)，在環(huán)境檢測 3-

7、4 、食品5 乃至藥品 6-7 及疫苗 8 等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。特別是美國藥典 31 版和歐 洲藥典 6.0 版對妥布霉素等個氨基苷類抗生素品種應(yīng)用離子色 譜法檢測，標(biāo)志著其作為法定檢驗方法在藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載和應(yīng) 用。中國藥典 2010 年版附錄也新增了離子色譜法并用于測 定帕米膦酸二鈉注射液含量 9 。 合成多肽藥物多采用固 相合成方法， 出于工藝生產(chǎn)要求和需要， 大部分多肽藥物以醋酸 鹽形式存在 10 ，醋酸作為合成多肽重要的質(zhì)量指標(biāo)在 中國藥 典 2010 年版二部附錄中專門對其測定作了規(guī)定，采用高效液 相色譜方法， C18 色譜柱，應(yīng)用有機(jī)溶劑作為流動相進(jìn)行梯度洗 脫，分析一個樣品需要約 1 h 。有研究采用離子色譜法，采用 Ion-Pac AS14 離子色譜柱測定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量 11 ， 而采用 Ion-Pac AS19 離子色譜柱交換容量更高，適于復(fù)雜體系 陰離子的分析 12 ，無需采用有機(jī)溶劑， 分離分析時間大