用于最終滅菌藥品（注射劑）的蒸汽滅菌工藝及驗(yàn)證指南

1、用于最終滅菌藥品（注射劑）的蒸汽滅菌工藝及驗(yàn)證指南 一、范圍一、范圍 由于蒸汽濕熱滅菌本身具備無殘留，不污染環(huán)境，不破壞產(chǎn)品表面，并容易控制和重現(xiàn) 等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于最終滅菌藥品（注射劑）的除菌過程中。 本指南為有關(guān)人員提供最終滅菌藥品（注射劑）的蒸汽滅菌柜的驗(yàn)證指南，以及蒸汽滅菌 工藝及驗(yàn)證的一些操作方法的指南。 本指南依據(jù)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 （1998 年修訂）的相關(guān)準(zhǔn)則，但本指南敘述的通用 原則和方法不是法定的。本指南的著重于最終滅菌藥品（注射劑）的蒸汽-濕熱滅菌工藝的 驗(yàn)證，但有些通用原則和方法對(duì)于凍干機(jī)的濕熱滅菌、某些設(shè)備的在線蒸汽滅菌等可能也 具備參考價(jià)值。 二、目的二、目的

2、蒸汽濕熱滅菌驗(yàn)證的目的，就是通過一系列驗(yàn)證試驗(yàn)提供足夠的數(shù)據(jù)和文件依據(jù)，從而 找到最有效最合理的滅菌參數(shù)，并把已經(jīng)驗(yàn)證過的飽和蒸汽滅菌設(shè)備和滅菌工藝參數(shù)應(yīng)用 到藥品生產(chǎn)的除菌過程中去，以證明用于藥品生產(chǎn)過程中的每一臺(tái)飽和蒸汽滅菌設(shè)備都能 起到滅菌的效果，并且對(duì)不同滅菌物品的滅菌過程和滅菌效果具有可靠性和重現(xiàn)性，即驗(yàn) 證結(jié)果必須證明生產(chǎn)中所采用的滅菌過程對(duì)經(jīng)過滅菌的物品能夠保證殘存微生物污染的概 率或可能性低于百萬分之一。 蒸汽-濕熱滅菌周期的設(shè)計(jì)和開發(fā)與蒸汽滅菌柜的性能以及被滅菌產(chǎn)品的適用性有關(guān)。蒸汽 -濕熱滅菌介質(zhì)包含以下幾種：飽和蒸汽，空氣-蒸汽混合氣體，過熱水等等。其中：飽和 蒸汽的加熱

3、速度最快，但是對(duì)于大型的軟包裝產(chǎn)品，過熱水浸泡滅菌的方法效率更高，然 而在過熱水滅菌法中，熱量的轉(zhuǎn)移很大程度上依賴于容器中介質(zhì)的強(qiáng)制運(yùn)動(dòng)。 飽和蒸汽是與液體狀態(tài)的水保持平衡時(shí)的水蒸汽，因此飽和蒸汽只能存在于水汽的分界線 上，即溫度與壓力之間的關(guān)系是固定的。滅菌效果是通過蒸汽，蒸汽-空氣混合物，過熱水 等介質(zhì)與滅菌物品的熱傳遞或產(chǎn)生冷凝水的水合作用來實(shí)現(xiàn)的。 蒸汽-空氣混合物與受壓的水或蒸汽相比，單位體積所包含的熱容量較低，但是，蒸汽-空 氣混合物作為滅菌戒指具有能夠適當(dāng)調(diào)整蒸汽-空氣比例達(dá)到不同結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)。 選擇一種適合的蒸汽滅菌方式，能在滿足產(chǎn)品本身性能的情況下取得滿意的滅菌效果，但 是任何

4、一種滅菌方法，都必須在實(shí)際應(yīng)用前予以驗(yàn)證。 三、定義三、定義 空氣蒸汽混合氣體（空氣蒸汽混合氣體（air-steam mixture） 滅菌用的空氣和飽和蒸汽均勻混合氣體?？諝獾淖饔檬怯糜谄胶饷芊馊萜鲀?nèi)產(chǎn)生的超過飽 和蒸汽的壓力。 當(dāng)蒸汽中加入空氣從而產(chǎn)生一個(gè)高于（一定溫度下）蒸汽飽和壓的壓力，即被稱為蒸汽-空 氣混合物過程（sam） 。為了防止分層和裝載物中形成冷點(diǎn)，減少蒸汽損耗，該過程 （sam）必須使蒸汽和空氣不斷循環(huán)。它的加熱媒介是空氣和蒸汽的混合物，特別適用于 液體滅菌。 初始菌（初始菌（bioburden） 或者稱為生物負(fù)載。 用于定義原材料、部件、或包裝等物品上所帶有存活微生物的

5、總數(shù)。 d 值值 以分鐘為單位的一個(gè)生物指標(biāo)，表示為對(duì)數(shù)形式。即為使某一個(gè)微生物的數(shù)量在規(guī)定條件 下，減少一個(gè)數(shù)量級(jí)或 90所需要的時(shí)間。d 值越大，說明該微生物的耐熱性越強(qiáng)，不同 的微生物在不同環(huán)境條件下具有各不相同的 d 值。在濕熱滅菌條件下，d 值主要與滅菌溫 度相對(duì)應(yīng)。 暴露在持續(xù)的熱致死條件下的微生物死亡過程，被證明可描述成一種一階動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。它 引導(dǎo)出以下的結(jié)論：死亡基本上是一種單分子的反應(yīng)。微生物的死亡速率是微生物耐熱值 和致死率的函數(shù)。微生物的存活曲線可以用下面的半對(duì)數(shù)式表示： 0 t )z ,t( f nlog d f nlog nf：被滅菌物品暴露 f 分鐘后殘留微生物的數(shù)

6、量； f（t,z）：滅菌周期中經(jīng)計(jì)算得到的等效致死率，以一定溫度下的時(shí)間（分鐘）表示； dt：一定溫度（t）下微生物的耐熱值，單位為分鐘； n0：滅菌周期開始前物品原有的微生物數(shù)量。 z 值值 使 d 值變化一個(gè)數(shù)量級(jí)所需調(diào)整溫度的度數(shù)。 f0值（值（f 值，致死因子）值，致死因子） 滅菌效力的評(píng)價(jià)值。 f0值是指一滅菌過程對(duì)微生物的致死量相當(dāng)于在 121.1滅菌時(shí)的滅菌時(shí)間。一般稱為標(biāo) 準(zhǔn)滅菌時(shí)間。 f 值通過相應(yīng)的 z 值經(jīng)計(jì)算得到的等量致死率，為在一定溫度下將某微生物全部殺死所需 的時(shí)間。 fphy值是描述致死率的值，這個(gè)值的計(jì)算是以滅菌工藝中的物理參數(shù)為基礎(chǔ)的。fphy值是 致死速率（

7、l）在時(shí)間上的累積，致死速率以相關(guān)溫度和 z 值通過以下等式計(jì)算得到： z tt 0 10l fbio值也是描述致死率的值。這個(gè)致死率是通過實(shí)際殺滅的微生物或在生物指示劑挑戰(zhàn)試 驗(yàn)中測(cè)得。fbio值是 d 值與滅菌工藝中微生物或生物指示劑實(shí)際的對(duì)數(shù)減少量（logn0- logn）計(jì)算得到： nndfbiologlog 0 f0值為 z 值為 10k，d 值為 1 分鐘時(shí)，在 121.1下計(jì)算出的 f 值。 生物指示劑（生物指示劑（biological indicator） 接種已知數(shù)量微生物用于測(cè)試滅菌工藝的制品。 化學(xué)指示劑化學(xué)指示劑 化學(xué)指示劑是以非定量形式反映設(shè)備滅菌過程參數(shù)的裝置?；瘜W(xué)

8、指示劑提供即時(shí)結(jié)果作為 參數(shù)標(biāo)識(shí)（例如顏色變化） ，用來表示負(fù)載或產(chǎn)品經(jīng)過了滅菌過程。 化學(xué)指示劑不能顯示產(chǎn)品是否無菌，它們只能說明起始溫度已經(jīng)達(dá)到，或者該溫度能夠持 續(xù)的時(shí)間。 在濕熱滅菌的驗(yàn)證中，化學(xué)指示劑不能代替生物指示劑和溫度/壓力等的儀器測(cè)量。 無菌無菌 無微生物存活的狀態(tài)。 歐洲藥典用“無菌保證水平” （sterility assurance level, sal）的概念來評(píng)價(jià)滅菌周期的 效果，采用濕熱滅菌法的 sal 不大于 10-6。 滅菌滅菌 經(jīng)確認(rèn)使產(chǎn)品無存活微生物的處理過程。 滅菌周期滅菌周期 在滅菌器內(nèi)所進(jìn)行的各運(yùn)行階段的程序。 過度殺滅程序過度殺滅程序 對(duì)于一個(gè)滅菌過

9、程，最壞情況生物負(fù)載的假設(shè)可以用來確定達(dá)到 sal10-6所需要的致死 率，一般可以接受的 fphy和 fbio均大于 12 分鐘。歐洲藥典 2005 版規(guī)定的指標(biāo)是生物負(fù) 載不小于 5105，d121值為 1.5 分鐘，則 f0不小于 15 分鐘。 預(yù)真空過程預(yù)真空過程 滅菌工藝中的一個(gè)預(yù)處理過程，在該過程中空氣被真空泵或其他設(shè)備從滅菌艙室中抽走。 這個(gè)方法尤其適用于能夠貯存空氣的物品，例如膠管、過濾器和灌裝機(jī)的附件等。 過熱水過程過熱水過程 以過熱水作為加熱介質(zhì)的滅菌過程，過熱水被空氣持續(xù)不斷地循環(huán)加壓，這個(gè)過程需要壓 力使水保持液態(tài)。適合于液體產(chǎn)品的滅菌。 工藝驗(yàn)證過程工藝驗(yàn)證過程 在特

10、定的操作環(huán)境中根據(jù)書面和已被證明的技術(shù)規(guī)范，按照工藝過程的要求持續(xù)操作或控 制，并對(duì)獲得的結(jié)果進(jìn)行記錄和分析整理。 否是 否是 是 否 四、產(chǎn)品與設(shè)備四、產(chǎn)品與設(shè)備 產(chǎn)品以及包裝的蒸汽滅菌適用性產(chǎn)品以及包裝的蒸汽滅菌適用性 產(chǎn)品的設(shè)計(jì)必須在經(jīng)過對(duì)該產(chǎn)品所規(guī)定的最多次數(shù)的滅菌后，仍符合其技術(shù)規(guī)格和安全要 求。若滅菌前需做某種處理（例如清洗） ，該種處理亦必須確認(rèn)是否會(huì)影響滅菌過程和滅菌 效果，若否則作為再次滅菌步驟中的一部分予以確認(rèn)。 被滅菌產(chǎn)品中，產(chǎn)品的設(shè)計(jì)及選用的材料，必須能適應(yīng)滅菌工藝滅菌柜室內(nèi)的環(huán)境變化。 采用蒸汽-濕熱滅菌的產(chǎn)品，除非產(chǎn)品為水溶液，經(jīng)加熱后能自身產(chǎn)生飽和蒸汽，應(yīng)采用適

11、當(dāng)?shù)陌b允許產(chǎn)品內(nèi)部空氣排出并讓蒸汽滲入，以使水蒸汽與污染微生物直接接觸。 采用蒸汽-濕熱滅菌的產(chǎn)品，若為多孔或堅(jiān)硬物質(zhì)，則至少必須有一層內(nèi)包裝和一層外包裝 組成。包裝必須允許產(chǎn)品內(nèi)部空氣排出并讓蒸汽透入，或可用熱力傳導(dǎo)達(dá)到滅菌條件的產(chǎn) 品。同時(shí)，內(nèi)外兩層包裝在滅菌后應(yīng)仍然符合規(guī)定。對(duì)器材或部件進(jìn)行蒸汽-濕熱滅菌時(shí)， 物品將承受溫度、壓力甚至抽真空的應(yīng)力，經(jīng)過蒸汽-濕熱滅菌后，還應(yīng)考慮對(duì)其包裝材料 作充分干燥處理，以保持其無菌屏障的性能。 以下為蒸汽-濕熱滅菌工藝的決策樹，這個(gè)決策樹對(duì)被滅菌產(chǎn)品和滅菌工藝的關(guān)鍵因素進(jìn)行 了總結(jié)，以便指導(dǎo)滅菌工藝的設(shè)計(jì)： 溶液劑型產(chǎn)品滅菌方法選擇的決策樹 產(chǎn)品是

12、否可以在 121濕熱滅菌 15 分鐘 產(chǎn)品是否可以濕熱滅菌 fo8分鐘，達(dá)到 sal106 采用高壓滅菌鍋121 15 分鐘 處方是否可以通過 微生物滯留過濾器過濾 采用濕熱滅菌 fo8 分鐘 無菌配藥和灌封 除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合 無菌配藥和灌封 除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合 否 否 否 否 否 是 是 是 是 是 非溶液劑型、半固體或干粉產(chǎn)品滅菌方法選擇的決策樹 產(chǎn)品是否可以在160 干熱滅菌120 分鐘 產(chǎn)品是否可以在另一種時(shí)間 和溫度條件下標(biāo)準(zhǔn)周期干熱 滅菌達(dá)到 sal106 采用 160干熱滅菌 120 分鐘 除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合 采用經(jīng)過驗(yàn)證的輻射 劑量滅菌 采用最小輻射吸收劑量

13、 25kgy進(jìn)行輻射滅菌 采用另一種替代時(shí)間和溫度條件 進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)周期干熱滅菌達(dá)到 sal106 無菌配藥和灌封 處方是否可以通過微生物滯 留過濾器過濾 產(chǎn)品是否可以使用經(jīng)過驗(yàn)證 的稍低輻射劑量滅菌 （參見iso11137） 產(chǎn)品是否可以用其他非干熱 方法滅菌，如電離輻射，吸收 最小劑量25kgy 使用熱不穩(wěn)定的包裝材料不能成為選擇無菌工藝的唯一理由。無菌藥品的生產(chǎn)企業(yè)，首先 應(yīng)根據(jù)特定的處方選擇最佳的滅菌方法，然后再選擇包裝材料。 采用過度殺滅法時(shí)，應(yīng)考慮到對(duì)產(chǎn)品及包裝袋或包裝箱產(chǎn)生熱力損害的可能性，熱力的超 量暴露還會(huì)增強(qiáng)化學(xué)降解。 蒸汽滅菌器以及相關(guān)輔助設(shè)施：公用系統(tǒng)（蒸汽、水、空氣等）蒸

14、汽滅菌器以及相關(guān)輔助設(shè)施：公用系統(tǒng)（蒸汽、水、空氣等） 對(duì)蒸汽滅菌器的安裝、驗(yàn)證和維護(hù)對(duì)蒸汽滅菌器的安裝、驗(yàn)證和維護(hù) 一、必須對(duì)選用的蒸汽滅菌器以下內(nèi)容進(jìn)行確認(rèn)： 1 蒸汽滅菌器的安裝和維護(hù)，濕熱滅菌的常規(guī)控制和確認(rèn)，以及已滅菌產(chǎn)品的放行，必須 經(jīng)過培訓(xùn)并具有操作經(jīng)驗(yàn)； 2 每個(gè)蒸汽滅菌器至少要有一個(gè)銘牌，永久固定并標(biāo)明： 生產(chǎn)商的名稱和地址 序號(hào)或其他唯一性編碼 滅菌柜室設(shè)計(jì)壓力和最高工作溫度 夾套額定壓力（若必需） 合格檢定標(biāo)識(shí)等 3 具備足以保證蒸汽滅菌器操作安全有效的安裝指導(dǎo)和操作指南；包括設(shè)備耐溫和耐壓的 極限，安全注意事項(xiàng)；修理手冊(cè)（包括可更換的部件一覽表） ；滅菌柜室的詳細(xì)結(jié)構(gòu)和

15、元 件圖，管道和控制系統(tǒng)的示意圖；自控系統(tǒng)的控制元件和源文件等； 4 若可能，對(duì)蒸汽的純度和質(zhì)量作出規(guī)定并實(shí)施監(jiān)測(cè)； 5 蒸汽滅菌器必須配備一套測(cè)量裝置，以檢驗(yàn)滅菌周期內(nèi)控制儀表所測(cè)數(shù)值是否在額定的 范圍內(nèi)。滅菌程序的控制探頭與滅菌溫度或壓力記錄儀的探頭必須獨(dú)立； 6 通過足夠數(shù)量的滅菌周期測(cè)試，證實(shí)該滅菌工藝具備可重復(fù)性； 7 在每次滅菌周期測(cè)試前后，均必須對(duì)溫度測(cè)量裝置（驗(yàn)證設(shè)備）進(jìn)行校準(zhǔn)； 8 對(duì)最大裝載，最小裝載兩者，或者是混合裝載均必須進(jìn)行足夠數(shù)量的滅菌周期測(cè)試，并 評(píng)估是否符合規(guī)定； 9 對(duì)再次確認(rèn)，改變工藝，產(chǎn)品或包裝變更，裝載變更等，必須作出明確規(guī)定，其中必須 包含需重復(fù)確認(rèn)的

16、內(nèi)容以及必要性。 二、以下是對(duì)蒸汽滅菌器的相關(guān)內(nèi)容的總結(jié)，用以指導(dǎo)蒸汽滅菌器的選型、安裝和驗(yàn)證： 1 對(duì)蒸汽滅菌設(shè)備的各項(xiàng)控制內(nèi)容詳細(xì)規(guī)定： 1.1排水報(bào)警； 1.2空氣去除以及控制，或報(bào)警； 1.3自動(dòng)控制器（腔室內(nèi)溫度、壓力或時(shí)間等） ； 1.4設(shè)備腔室的深度、寬度和高度的確認(rèn)，以符合被滅菌產(chǎn)品的需要； 1.5設(shè)備本身有足夠的熱容量，以便有利于滅菌周期的設(shè)計(jì)和極限挑戰(zhàn)周期的確認(rèn)； 有利于研究等效滅菌時(shí)間、最小滅菌時(shí)間以及雙倍最小滅菌時(shí)間； 1.6對(duì)蒸汽供應(yīng)管路有相應(yīng)的規(guī)定，并制訂行之有效的檢查指南； 1.7對(duì)門的壓力試驗(yàn)有相應(yīng)的規(guī)定，并制訂行之有效的檢查指南； 1.8各類報(bào)警失效的風(fēng)險(xiǎn)分析

17、以及管理； 1.9參考測(cè)點(diǎn)位置的確認(rèn)； 1.10 壓力試驗(yàn)（真空度） 、泄漏率； 1.11 安裝偏差以及處理； 2空氣過濾器的過濾效率不小于 99.5%（0.3m） ； 3真空度不小于 7kpa；真空度的顯示范圍在 0400kpa；精度不小于 1.6%；若數(shù)字顯 示，則不能小于 1kpa； 4安裝環(huán)境的照度不低于 215lx； 5溫度測(cè)量點(diǎn)的響應(yīng)時(shí)間不大于 5s； 6溫度顯示可以是數(shù)字的或其他類似物，范圍在 50150，精度不小于 1；溫度若 數(shù)字顯示，則不能小于 0.1； 7排水口與地漏間應(yīng)有空氣阻斷以防止虹吸； 8滅菌時(shí)間顯示的精度應(yīng)在2.5%(5 分鐘以下)和 1（5 分鐘以上含 5 分

18、鐘）等。 9溫度波動(dòng)應(yīng)在0.51.0之內(nèi)（空載熱分布測(cè)試，環(huán)境溫度變化變化盡可能?。?； 10壓力波動(dòng)應(yīng)在5kpa 之內(nèi)（空載熱分布測(cè)試） ； 對(duì)蒸汽或過熱水等滅菌介質(zhì)的規(guī)定對(duì)蒸汽或過熱水等滅菌介質(zhì)的規(guī)定 有些蒸汽可以被用于濕熱滅菌，其中包括工業(yè)蒸汽和純蒸汽，但不局限于此。在一定溫度 下，不同加熱介質(zhì)（滅菌介質(zhì)）的熱能有很大差別。過熱水、飽和蒸汽和蒸汽-空氣混合物 含有不同的熱能。只有飽和蒸汽作為滅菌介質(zhì)時(shí)，蒸汽的溫度和壓力之間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系。 工業(yè)蒸汽一般不與被滅菌產(chǎn)品直接接觸。它用于各種能量轉(zhuǎn)移的目的。對(duì)于蒸汽-濕熱滅菌 法，通常認(rèn)為工業(yè)蒸汽適合于提供滅菌器外殼（滅菌艙室中的蒸汽與外殼的蒸汽

19、不采用同 一種蒸汽） ，也適合于采用過熱水滅菌方法時(shí)提供熱交換器非潔凈部位的熱水。 純蒸汽，也叫做潔凈蒸汽和高質(zhì)量蒸汽。純蒸汽的冷凝液符合中國(guó)藥典注射用水的要求。 純蒸汽主要通過為特定目的設(shè)計(jì)的蒸汽發(fā)生器產(chǎn)生。 有關(guān)蒸汽質(zhì)量的測(cè)試一般是指純蒸汽的質(zhì)量測(cè)試。包含過熱值(superheat)；蒸汽干燥 值（dryness value） ；不冷凝氣體（non-condensable gases） ；蒸汽質(zhì)量測(cè)試（化學(xué)項(xiàng)目， 含中國(guó)藥典注射用水項(xiàng)下的絕大部分內(nèi)容）等內(nèi)容。為了提高滅菌介質(zhì)的保障度，也可以 在添加電導(dǎo)率項(xiàng)目的控制指標(biāo)，或?qū)χ亟饘僦笜?biāo)的控制更加嚴(yán)格等。 不冷凝氣體（non-condensa

20、ble gases）是被遺留在蒸汽中的非凝結(jié)狀態(tài)的氣體（比如空 氣、氮?dú)饣蚨趸嫉龋?，這些氣體會(huì)將純蒸汽變?yōu)檎羝蜌怏w的混合物。 蒸汽的干燥值（dryness value）是蒸汽中液相水量的測(cè)量值。這個(gè)液相水由蒸汽攜帶，干 燥值小于 1 的蒸汽所含的能量會(huì)小于純凈的飽和蒸汽。蒸汽的干燥值與它具有的潛伏熱有 關(guān)，具有飽和壓力下相當(dāng)于潛伏熱 50能量的蒸汽，干燥值為 0.5，表示混合物中水和蒸 汽的比例為 50：50。干燥值通過測(cè)量得到。 蒸汽質(zhì)量的指標(biāo)是：蒸汽的干燥值（dryness value）不低于 0.95；不冷凝氣體（non- condensable gases）不大于 3.5%(v

21、/v)；蒸汽壓力波動(dòng)不超過 10；且其降低比例不大 于 2：1。 蒸汽滅菌器中的水和氣體蒸汽滅菌器中的水和氣體 蒸汽滅菌器中的水和氣體均要求無菌、包括噴淋水，防止二次污染。 真空系統(tǒng)的水質(zhì)也應(yīng)控制，且不低于 15；硬度值不大于 0.2nmol/l。 壓縮空氣和空氣都應(yīng)經(jīng)過空氣過濾器送入腔室，空氣過濾器的過濾效率不小于 99.5%（0.3m） ；油分應(yīng)低于 0.5mg/l。 用于驗(yàn)證的測(cè)試儀器用于驗(yàn)證的測(cè)試儀器 具備進(jìn)行熱均勻性試驗(yàn)的驗(yàn)證裝置并符合規(guī)定要求：測(cè)量?jī)x器的精度大于被測(cè)滅菌設(shè)備的 允差范圍（一般小于 0.5） ； 五、滅菌工藝的開發(fā)和驗(yàn)證五、滅菌工藝的開發(fā)和驗(yàn)證 1，兩種滅菌方法兩種滅

22、菌方法 蒸汽-濕熱滅菌工藝開發(fā)和應(yīng)用，可采用兩種方法：過度殺滅法（the overkill method）和 生物負(fù)載法（the bioburden method） 。生物負(fù)載法也可稱為存活概率法。 1.1 過度殺滅法 工業(yè)上蒸汽滅菌周期的設(shè)定和應(yīng)用，一般使用過度殺滅法（the overkill method） 。使用過 度殺滅法的目標(biāo)是確保達(dá)到一定程度的無菌保證，而不管裝載物的實(shí)際負(fù)載生物的數(shù)量多 少和抗熱性如何。假定生物負(fù)載的數(shù)量和耐熱值設(shè)為如下水平： n0106 d1211 分鐘 z10 為了達(dá)到無菌保證水平 sal 小于 10-6，nf10-6，利用上面這些數(shù)值，可以計(jì)算出為達(dá)到 致死

23、率所需的 fphy和 fbio如下： f0d121（logn0log nf）12 分鐘 很少發(fā)現(xiàn)自然生成的微生物擁有超過 0.5 分鐘的 d121值。過度殺滅法假設(shè)的生物負(fù)載數(shù)量 和抵抗力都要高于實(shí)際。大多數(shù)微生物的耐熱性都要比這低，因此能夠提供很高程度的無 菌保證。 即便采用蒸汽-濕熱滅菌工藝為過度殺滅法（the overkill method） ，仍然需要對(duì)被滅菌產(chǎn)品 的初始菌進(jìn)行周期監(jiān)測(cè)，并定期采用生物指示劑測(cè)試。 1.2 生物負(fù)載法 通常來說不耐熱產(chǎn)品或物品的滅菌就不能使用過度殺滅法了。這就需要我們所建立的滅菌 周期必須能恰當(dāng)?shù)貧缥⑸镓?fù)載，但是不能導(dǎo)致不可接受的產(chǎn)品分解。這樣的滅菌

24、周期 的建立就有賴于研究產(chǎn)品上的微生物數(shù)量和耐熱能力。一旦微生物負(fù)載的數(shù)量和耐熱能力 得以明確，就可以設(shè)計(jì)出一個(gè)能達(dá)到 sal 小于 10-6的滅菌周期。 按 cgmp 規(guī)范生產(chǎn)的產(chǎn)品實(shí)際生物負(fù)載數(shù)量應(yīng)該是很低的，每個(gè)包裝約在 1100cfu， 對(duì)產(chǎn)品給予 80100下 1015 分鐘熱休克，可以殺滅耐熱值低的微生物。例如： 產(chǎn)品的生物負(fù)載測(cè)試中，測(cè)得： n0102 d1211 分鐘 z10 則達(dá)到無菌保證水平 sal 小于 10-6，nf10-6，利用上面這些數(shù)值，可以計(jì)算出為達(dá)到致 死率所需的 fphy和 fbio如下： f0d121（logn0log nf）8 分鐘 生物負(fù)載法需有實(shí)測(cè)產(chǎn)

25、品活菌計(jì)數(shù)和耐熱性篩選程序。必須取得足夠的有關(guān)生物負(fù)載數(shù)據(jù)， 亦建立歷史資料。對(duì)生物負(fù)載篩選次數(shù)的要求，取決于歷史資料的質(zhì)量和變化情況，被滅 菌產(chǎn)品的種類、生產(chǎn)工藝和滅菌工藝的類型等等。若生產(chǎn)環(huán)境發(fā)生了變化，應(yīng)考慮對(duì)生物 負(fù)載進(jìn)行補(bǔ)充監(jiān)測(cè)。 對(duì)生物負(fù)載耐熱性的測(cè)定，可將含生物負(fù)載產(chǎn)品樣本在推薦滅菌工藝下作分級(jí)遞增暴露時(shí) 間處理，然后進(jìn)行無菌檢查試驗(yàn)，以測(cè)定在不同的暴露時(shí)間內(nèi)存活的菌量，或存在的陽性 樣本比例。作為一種替代方法，生物負(fù)載微生物的耐熱性可通過分離和繁殖，隨后接種在 產(chǎn)品上或適當(dāng)載體上進(jìn)行測(cè)定。不過，要注意繁殖會(huì)改變生物負(fù)載的抗性。此外，還應(yīng)對(duì) 常規(guī)生物負(fù)載的微生物耐熱性進(jìn)行測(cè)定。

26、就生物負(fù)載而論，具有濕熱高度耐熱性的微生物菌株有：生胞梭菌（clostridium sporogenes） ，凝結(jié)芽孢桿菌（becillus coagulans） ，枯草芽孢桿菌和嗜熱芽孢桿菌等。 以生物負(fù)載法為依據(jù)的滅菌工藝，需經(jīng)常進(jìn)行微生物篩選，以測(cè)定與產(chǎn)品有關(guān)的生物負(fù)載 數(shù)量和種類。在常規(guī)生產(chǎn)中，應(yīng)從每一種生產(chǎn)設(shè)備中抽取具有代表性的產(chǎn)品樣本，并設(shè)計(jì) 生物負(fù)載監(jiān)測(cè)程序，對(duì)產(chǎn)品部件及生產(chǎn)中，包括環(huán)境和生產(chǎn)過程中，任何可明顯地影響生 物負(fù)載地變化進(jìn)行評(píng)定。 2，用于注射劑生產(chǎn)的輔助物料的滅菌工藝用于注射劑生產(chǎn)的輔助物料的滅菌工藝 用于注射劑生產(chǎn)的部分輔助物料在生產(chǎn)過程中與藥品直接接觸，因此同樣

27、需要滅菌。它們 包括：過濾器、膠塞、膠管、服裝、不銹鋼器皿、填充機(jī)械部件、清潔用品等等。一般通 過與飽和蒸汽直接接觸而實(shí)現(xiàn)滅活，濕熱蒸汽的能量通過傳導(dǎo)或?qū)α髯饔脗鬟f熱量。常用 方法是建立能夠提供相同的最小滅菌保證水平的標(biāo)準(zhǔn)周期，再加上一定的安全系數(shù)，不管 裝載物的內(nèi)容是什么。 對(duì)于這類物品，獲得可重復(fù)和可預(yù)測(cè)無菌保證的最大障礙是物品中潛在的空氣，所以適合 的滅菌過程是先采用預(yù)真空過程，然后飽和蒸汽滅菌的方法。預(yù)真空過程的效果明顯優(yōu)于 重力置換過程。 對(duì)于預(yù)真空滅菌程序，滅菌過程開始之前對(duì)裝載物的處理是很重要的。如果每次的真空度 為 0.1 個(gè)大氣壓，那么每個(gè)脈沖將使滅菌器內(nèi)的空氣減少 90或者

28、 1 個(gè)對(duì)數(shù)單位?？梢栽?加為三個(gè)真空脈沖（蒸汽注入高于大氣壓，以避免空氣進(jìn)入滅菌腔室） ，使裝載物處于正常 狀態(tài)。通過這個(gè)方法，空氣去除的效率會(huì)提高，平衡時(shí)間會(huì)縮短。 典型的重力置換程序建立在如下的理論基礎(chǔ)上：腔室中的冷空氣重于進(jìn)入的蒸汽并且將沉 降到腔室的底部。蒸汽進(jìn)入腔室的時(shí)候，空氣和冷凝液一起從腔室底部的蒸汽疏水閥排出。 去除空氣過程的成功取決于對(duì)蒸汽疏水閥的準(zhǔn)確操作和合適的蒸汽分布。蒸汽一般通過導(dǎo) 流板或多孔管注入滅菌器腔室，如果蒸汽增加得過于迅速或者沒有合理分布，裝載物的頂 部附近可能會(huì)產(chǎn)生氣穴，如果蒸汽增加得過于緩慢，空氣可能會(huì)被加熱而混入蒸汽中，從 而使空氣去除更加困難。重力置

29、換去除空氣的效率低于其他方法，不推薦用于空氣去除困 難的物品。 對(duì)于多孔/堅(jiān)硬物品的滅菌，需要確定以下操作參數(shù)（但不僅限于此）： 滅菌程序/階段控制參數(shù)對(duì)參數(shù)的說明 外殼溫度/壓力外殼溫度不能超過或者明顯低于滅菌器腔 室的滅菌溫度。要控制溫度避免過度加熱 或過度冷卻。 滅菌程序全部 監(jiān)控探頭/記錄探頭必須獨(dú)立，并帶有合適尺寸的記錄紙以便 記錄滅菌程序全部的溫度/壓力變化值 真空/脈沖的次數(shù)、范 圍和持續(xù)時(shí)間（若使用） 用于多孔/堅(jiān)硬物品滅菌時(shí)的空氣去除 正壓力脈沖的次數(shù)、范 圍和持續(xù)時(shí)間（若使用） 用于在滅菌程序開始之前控制裝載物 加熱階段 腔室加熱對(duì)于飽和蒸汽的滅菌方法，可以根據(jù)溫度 和壓力

30、的變化設(shè)置報(bào)警點(diǎn) 滅菌時(shí)間對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段的溫度對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段的腔室溫度波 動(dòng) 對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段 f0值的累積對(duì)于滅菌器自帶的測(cè)量探頭，最小 f0值的 記錄有利于滅菌程序的評(píng)價(jià) 冷卻階段干燥時(shí)間可以選擇加熱、真空等手段來干燥裝載物 真空解除速率若需要，可以用來保護(hù)包裝或過濾器的完 整性 若最后采用噴淋水降溫，則必須監(jiān)控噴淋水的質(zhì)量。但是多孔/堅(jiān)硬物質(zhì)不適合采用噴淋水 降溫，一般采用抽真空或夾套降溫。比如過濾器，膠塞，膠管，服裝，不銹鋼器皿，填充 機(jī)械配件，清潔用品等等。 對(duì)于滅菌裝載方式，需要注意以下幾點(diǎn)： 裝載物

31、的類型和結(jié)構(gòu)要加以確認(rèn)并記錄在案； 裝載物不能接觸到滅菌艙室內(nèi)壁； 金屬箱表面與底座之間的接觸應(yīng)減小到最低程度，通常使用有孔的支架，必要時(shí)也可 以用可調(diào)節(jié)的支架； 為了便于空氣去除，冷凝水排出和蒸汽穿透，要明確地確定裝載物地方位并記錄在案； 質(zhì)量大的裝載物應(yīng)放置在滅菌器中較低的架子上，以盡量減少被冷凝水弄濕； 控制滅菌器中物品的數(shù)量，如果裝載物的大小能夠改變，則需要確定最小和最大的裝 載物，確認(rèn)中間裝載物的合理插入法應(yīng)包括最低負(fù)載中的最難滅菌物品； 如果確認(rèn)研究表明物品的位置不影響滅菌效果，那么裝載的形式可能是可變的； 裝載記錄可以作為操作人員的參考。 3，用于注射劑的滅菌工藝用于注射劑的滅菌

32、工藝 充滿液體的裝載物通常是同類型的，尺寸相同，容量相同，并來自于同一批產(chǎn)品。注射劑 （液體）的滅菌工藝也根據(jù)產(chǎn)品的技術(shù)要求設(shè)計(jì)滅菌周期。如果產(chǎn)品不是水溶液（如一些 油性產(chǎn)品） ，需要特別考慮是否適合采用蒸汽-濕熱滅菌法。 注射劑的滅菌是通過能量由加熱介質(zhì)傳遞給包裝內(nèi)部水溶液的過程來實(shí)現(xiàn)的。對(duì)于懸浮液 和乳濁液的滅菌，裝載物需要保持運(yùn)動(dòng)狀態(tài)（比如翻轉(zhuǎn)，選裝或一定角度的搖擺）來促進(jìn) 內(nèi)部的熱循環(huán)。可以采用過熱水過程或空氣蒸汽混合滅菌程序來實(shí)現(xiàn)。 對(duì)于蒸汽空氣混合物（sam）程序，主要用風(fēng)扇使蒸汽空氣混合物循環(huán)。蒸汽空氣 混合物程序可以使用多種方法來冷卻滅菌后的產(chǎn)品。最常用的方法是通過向滅菌器外殼

33、或 線圈上加冷水來使再循環(huán)空氣冷卻，還有一些使用蒸汽空氣混合物程序的滅菌器通過在 產(chǎn)品上噴灑冷水使其降溫。 用容器中充滿的可循環(huán)的過熱水來滅菌，對(duì)一些產(chǎn)品來說是很有效的方法。再循環(huán)過熱水 的方法有很多種，最常用的是通過泵來實(shí)現(xiàn)水從滅菌器底部（低于裝載物的區(qū)域）到裝載 物區(qū)域上方的噴霧器噴口的不斷循環(huán)。 循環(huán)水的加熱和冷卻可以直接通過蒸汽的噴射和冷水，也可以間接通過熱交換器來實(shí)現(xiàn)。 使用間接加熱和冷卻法（通過一個(gè)干凈的熱交換器）時(shí)，幾乎任何形式的蒸汽或水都可以 在熱交換器非潔凈的部位使用。間接冷卻是首選辦法，因?yàn)橹苯咏佑|密封容器的冷卻水可 以和產(chǎn)品儀器被滅菌。 另外一種循環(huán)過熱水方法是將產(chǎn)品完全

34、浸入水中。 對(duì)于幾乎所有的溶劑型產(chǎn)品，產(chǎn)品的頂部空間存在氣體（空氣、氮?dú)饣蚱渌麣怏w） 。液體被 加熱時(shí)，頂部空間中的氣體膨脹，容器中的壓力增大。 對(duì)于大多數(shù)液體裝載物，如預(yù)充式過濾器、一些玻璃瓶、塑料袋和半剛性容器，需要增大 滅菌器腔室的壓力從而維持容器的形狀和完整性，容器內(nèi)部壓力和滅菌器腔室壓力之間的 差異 減少到最低程度。為了補(bǔ)償內(nèi)部容器壓力所需的空氣超壓，不同的產(chǎn)品類型（如玻璃瓶和 塑料袋）壓力明顯不同?？諝獬瑝哼^程中常用無油壓縮空氣，空氣質(zhì)量很重要，比如微生 物等。 所有這些循環(huán)過熱水方法都使用在滅菌過程中可以控制的空氣超壓。循環(huán)水方法與其他的 蒸汽滅菌法相比，最大的優(yōu)點(diǎn)之一是加熱和冷

35、卻的速率容易控制，而且如果參數(shù)合適，不 會(huì)被產(chǎn)品和其他設(shè)施的參數(shù)變化所影響。 對(duì)于溶劑型產(chǎn)品的滅菌，需要確定以下操作參數(shù)（但不僅限于此）： 滅菌程序/階段控制參數(shù)對(duì)參數(shù)的說明 外殼溫度/壓力在過熱水滅菌程序中，外殼溫度/壓力的控 制不是決定性的因素。如果需要控制，則 外殼的溫度不應(yīng)高于滅菌器腔室的溫度 蒸汽空氣混合物程序 （sam）中風(fēng)扇的轉(zhuǎn) 速 風(fēng)扇最好包含故障報(bào)警裝置 攪拌/旋轉(zhuǎn)速率最好包含低速限度故障報(bào)警裝置 過熱水再循環(huán)流動(dòng)速率泵應(yīng)包含低限啟動(dòng)故障報(bào)警裝置 滅菌程序全部 監(jiān)控探頭/記錄探頭必須獨(dú)立，并帶有合適尺寸的記錄紙以便 記錄滅菌程序全部的溫度/壓力變化值 腔室的水位（過熱水法）應(yīng)

36、包含最小水位的報(bào)警裝置 加熱時(shí)間對(duì)于飽和蒸汽的滅菌方法，可以根據(jù)溫度 和壓力的變化設(shè)置報(bào)警點(diǎn)； 對(duì)于 sam，可以監(jiān)控蒸汽空氣的比例； 對(duì)于過熱水法，可以監(jiān)控加熱時(shí)間的波動(dòng) 腔室加熱速率（/分）sam 和過熱水法均為關(guān)鍵參數(shù) 加熱階段 壓力增加速率sam 和過熱水法均為關(guān)鍵參數(shù) 滅菌階段滅菌時(shí)間對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段的溫度對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段的 腔室溫度波動(dòng) 對(duì)每個(gè)滅菌程序都是重要的控制參數(shù) 滅菌階段的 腔室壓力波動(dòng) 對(duì)于飽和蒸汽滅菌法是重要的控制參數(shù)； 對(duì)于空氣超壓的循環(huán)也是重要的控制參數(shù) 滅菌階段間接加熱介質(zhì) 的溫度 若使用間接加熱，則為重要的控制

37、參數(shù) f0值的累積對(duì)于滅菌器自帶的測(cè)量探頭，最小 f0值的 記錄有利于滅菌程序的評(píng)價(jià) f0值的累積（最大值）對(duì)于不小于 3 個(gè)滅菌器自帶的測(cè)量探頭， 最大 f0值的記錄有利于滅菌程序的評(píng)價(jià) 溫度下降速率（/分）對(duì)于 sam 和過熱水方法是重要的控制參 數(shù) 壓力下降速率若需要，可以保護(hù)包裝的完整性 冷卻階段 裝載物的冷卻時(shí)間可以通過冷卻時(shí)間的控制獲得理想的產(chǎn)品 溫度 產(chǎn)品最終滅菌最重要的是建立滅菌工藝，以保證能夠?yàn)檠b載物中溫度最低的冷點(diǎn)產(chǎn)品提供 足夠的致死率，同時(shí)確認(rèn)裝載物中溫度最高的產(chǎn)品能夠保持其產(chǎn)品性質(zhì)，因此，必須做到 以下幾點(diǎn)： 在驗(yàn)證和常規(guī)滅菌過程中，裝載物要在同一位置； 裝載物的熱輸入

38、是統(tǒng)一的； 產(chǎn)品的生物負(fù)載符合滅菌能力； 足夠的空氣超壓使得產(chǎn)品的破損和變形減小到最低程度； 允許裝載物的有效冷卻，以保證產(chǎn)品的質(zhì)量； 產(chǎn)品具有熱穩(wěn)定性 滅菌器艙室內(nèi)的托盤和支架應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品和加熱介質(zhì)（飽和蒸汽、蒸汽空氣混合 物或過熱水）的類型來設(shè)計(jì)； 4，滅菌驗(yàn)證的方法滅菌驗(yàn)證的方法 滅菌過程的驗(yàn)證和常規(guī)控制的相關(guān)內(nèi)容包括滅菌設(shè)備的確認(rèn)、滅菌工藝的驗(yàn)證、包裝適用 性、裝載試驗(yàn)、空氣過濾器的檢查、蒸汽的質(zhì)量及管理、真空檢查和再驗(yàn)證周期等等內(nèi)容。 4.1 在蒸汽滅菌驗(yàn)證進(jìn)行之前，需要確認(rèn)以下內(nèi)容： 蒸汽滅菌器制造商的質(zhì)量保證、 蒸汽滅菌器的檢查、安裝和性能確認(rèn)、 安裝于蒸汽滅菌器的空氣過濾器的泄漏

39、試驗(yàn)、 空氣流速或流型試驗(yàn)（若必需） 、 壓力或真空度測(cè)試、 蒸汽質(zhì)量測(cè)試（若必需） 、 生物指示劑（化學(xué)指示劑）的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)、 不同裝載的驗(yàn)證、 升溫時(shí)間的控制（若必需） 、 保溫時(shí)間內(nèi)的溫度波動(dòng)范圍、 對(duì)滅菌器進(jìn)行熱分布/熱穿透測(cè)試儀器的校準(zhǔn)， iq/oq/pq 的方案 具備證實(shí)能夠進(jìn)行 iq、oq 和 pq 的所有內(nèi)容并能對(duì)偏差進(jìn)行處理及糾正的能力。 4.2 一般來說：驗(yàn)證（iq/oq/pq）必須包含： 4.2.1 被測(cè)滅菌設(shè)備和公用系統(tǒng)的測(cè)試必須包含： 1.1滅菌設(shè)備供應(yīng)商的評(píng)價(jià)； 1.2滅菌設(shè)備的容積、真空度、壓力以及泄漏率； 1.3用什么作為滅菌介質(zhì)（如蒸汽、高壓空氣、過熱水等）并

40、能證實(shí)有效； 1.4滅菌設(shè)備如有夾層、夾層與氣室之間的壓力與溫度保持在什么水平上是安全的； 1.5使用何種類型的過濾器？多長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行挑戰(zhàn)性試驗(yàn)？ 1.6使用何種類型的監(jiān)測(cè)和控制傳感器？如何校正？是否符合相關(guān)規(guī)定？ 1.7如滅菌設(shè)備中裝有蒸汽分流器，則必須消除系統(tǒng)運(yùn)行安全的風(fēng)險(xiǎn)； 1.8時(shí)間、溫度、壓力、壓力消減速率的控制（若必需） ； 1.9空氣質(zhì)量、水質(zhì)量的控制以及報(bào)警（若必需） ； 1.10 以上所有情況的變化是否評(píng)價(jià)再驗(yàn)證的必要； 4.2.2 對(duì)滅菌工藝的驗(yàn)證必須包含： 2.1 空載熱分布研究 2.2 熱穿透研究 每種裝載容器的每種裝載方式； 每種方式的運(yùn)行次數(shù)； 每種方式的冷點(diǎn)是否確定

41、； 2.3 升溫、降溫速度對(duì)生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品的影響； 2.4 噴淋冷卻速度對(duì)被滅菌產(chǎn)品的影響； 2.5 冷卻用水是否能有效地控制微生物； 2.6 溫度測(cè)量系統(tǒng)是否提供每一個(gè)測(cè)點(diǎn)的打印數(shù)據(jù)； 2.7 溫度測(cè)量系統(tǒng)是否每次運(yùn)行都進(jìn)行前后校正； 2.8 溫度測(cè)量系統(tǒng)的校正是否符合相關(guān)規(guī)定； 2.9 生物指示劑的使用： 類型； 來源； 密度和 d 值； 是否采用生物負(fù)載法？是否測(cè)試被滅菌產(chǎn)品的初始菌？ 如發(fā)生意外（陽性） ，如何處理； 2.10 若出現(xiàn)熱穿透偏差如何處理； 2.11 若必需，提供污染菌（微生物負(fù)載）的特性及鑒別；微生物負(fù)載的報(bào)警及采取措 施的限度；生物指示劑的鑒別、耐熱性及穩(wěn)定性；污染菌

42、與生物指示劑耐熱性的比較； 微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，用以證明在最短的滅菌周期內(nèi)在最差條件下（如產(chǎn)品處在生物指 示劑最難殺滅的位置或它屬于最難滅菌的產(chǎn)品或二者兼?zhèn)涞那闆r） ； 2.12 對(duì)過度殺滅的風(fēng)險(xiǎn)分析及管理； 2.13 滅菌后的干燥程序?qū)缇Ч挠绊懀?2.14 研究產(chǎn)品耐受性變更導(dǎo)致的滅菌工藝變化； 2.15 總體評(píng)價(jià)并指導(dǎo)最佳滅菌效果的裝載量； 2.16 驗(yàn)證及其相關(guān)項(xiàng)目的培訓(xùn) 4.2.3 對(duì)于滅菌工藝的驗(yàn)證，應(yīng)符合以下規(guī)定： 1，保溫時(shí)間內(nèi)溫度波動(dòng)應(yīng)在0.51.0之內(nèi)（環(huán)境溫度變化變化應(yīng)盡可能小） ； 2，保溫時(shí)間內(nèi)壓力波動(dòng)應(yīng)在5kpa 之內(nèi)（若必需） ； 3，滅菌工藝驗(yàn)證包含最小裝載、

43、飽和裝載和典型裝載三種；或者采用最大裝載，最小裝 載和混合裝載的兼容性研究； 4，極限最低溫度與最大值相差不大于 3k； 5，等效滅菌時(shí)間的偏差不大于 15s（對(duì)最大的滅菌設(shè)備不大于 30s） ； 6，空氣過濾器的流速應(yīng)不大于 0.13kpa/min（若必需） ； 7，空氣移除速度的檢查（若必需，適合多孔/堅(jiān)硬物質(zhì)） ； 8， 生物指示劑的布置； 9， 若必需，則需測(cè)被滅菌物品的初始菌（微生物負(fù)載） ； 10， 以冷點(diǎn)為控制溫度；即確認(rèn)所有測(cè)點(diǎn)均達(dá)到滅菌溫度后才計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。 5，滅菌驗(yàn)證形成的相關(guān)文件滅菌驗(yàn)證形成的相關(guān)文件 51相關(guān)文件要點(diǎn) 以下是對(duì)蒸汽滅菌器或蒸汽-濕熱滅菌工藝的相關(guān)驗(yàn)

44、證文件的分類，可以根據(jù)實(shí)際情況作出 篩選，但必須評(píng)估相關(guān)內(nèi)容是否完整： 滅菌器制造商及其設(shè)備信息； 滅菌器的安裝報(bào)告； 首次滅菌的情況、所有操作及控制文件，包括儀表、閥門、報(bào)警裝置以及相關(guān)設(shè)施的校驗(yàn) 等； 產(chǎn)品的安全耐受性研究報(bào)告 真空度以及壓力保障措施的驗(yàn)證 泄漏率測(cè)試報(bào)告 蒸汽、水、壓縮空氣等輔助系統(tǒng)的質(zhì)量測(cè)試報(bào)告 包含冷點(diǎn)、裝載分布、熱分布、熱穿透等項(xiàng)目研究的 iq、oq、pq 方案及報(bào)告 對(duì)驗(yàn)證結(jié)果的總結(jié)和風(fēng)險(xiǎn)分析，提出裝載指導(dǎo)報(bào)告 完整的操作記錄（也可以是表格） 維護(hù)保養(yǎng)程序以及記錄，包含預(yù)防性維護(hù)、條件維護(hù)等內(nèi)容 任何變更、任何故障的處理報(bào)告 培訓(xùn)記錄以及效果評(píng)價(jià)報(bào)告 再驗(yàn)證周期的

45、規(guī)定 其他 52 驗(yàn)證文件要點(diǎn) 滅菌參數(shù)與被滅菌物品特性的確認(rèn) 真空度（泄漏率） 蒸汽滅菌的初始菌控制（滅菌前物品的生物負(fù)荷的數(shù)量） 蒸汽滅菌中對(duì)于水、空氣過濾器等的要求 產(chǎn)品的安全耐受值 對(duì)過度殺滅的限制 挑戰(zhàn)試驗(yàn) 再驗(yàn)證周期 新的滅菌工藝的開發(fā) 驗(yàn)證實(shí)施步驟 偏差處理、風(fēng)險(xiǎn)分析以及驗(yàn)證報(bào)告 其他 附錄一附錄一 幾種滅菌程序介紹幾種滅菌程序介紹 1 飽和蒸汽重力置換飽和蒸汽重力置換 本滅菌工藝適用于可耐受飽和蒸汽的各類產(chǎn)品。但對(duì)排除纖維及空隙中的空氣尚不能 肯定完全去除，因此主要推薦用于表面接觸式滅菌。本滅菌工藝主要分為三個(gè)階段： 加熱階段：打開排氣口，飽和蒸汽通入滅菌器腔室，直至達(dá)到規(guī)定的

46、溫度，隨后關(guān)閉 排氣口，飽和蒸汽繼續(xù)通入滅菌器腔室（或在腔室內(nèi)發(fā)生） ，直至達(dá)到規(guī)定的滅菌溫度以及 相應(yīng)的飽和蒸汽壓； 滅菌階段：通過飽和蒸汽在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)維持滅菌器腔室內(nèi)的溫度； 冷卻階段：本階段可根據(jù)產(chǎn)品的類型來選擇冷卻方式。為避免降溫造成的快速減壓， 需向滅菌器腔室內(nèi)通入空氣，然后恢復(fù)至正常大氣壓狀態(tài)。當(dāng)對(duì)密閉容器中的藥品進(jìn)行冷 卻時(shí)，通入滅菌器腔室的壓縮空氣需過濾，當(dāng)滅菌器腔室內(nèi)恢復(fù)常壓時(shí)，密閉容器達(dá)到安 全溫度時(shí)，冷卻結(jié)束。 下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時(shí)間的變化曲線： 2 飽和蒸汽預(yù)真空程序飽和蒸汽預(yù)真空程序 本滅菌工藝適用于多孔/堅(jiān)硬物品的滅菌。本本滅菌工藝主要分為五個(gè)階段： 空

47、氣去除階段：去除滅菌器腔室內(nèi)和待滅菌物品中的空氣，可采用一次高度真空或多 次脈動(dòng)真空，也可采用脈動(dòng)真空與蒸汽的組合； 充蒸汽階段：飽和蒸汽通入滅菌器腔室，直至達(dá)到滅菌所需要的溫度和壓力； 滅菌階段：通過飽和蒸汽在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)維持滅菌器腔室內(nèi)的溫度； 抽蒸汽階段：從滅菌器腔室內(nèi)抽出蒸汽，并使真空度降至預(yù)定水平； 干燥階段：對(duì)需干燥的物品，應(yīng)使夾套中的溫度和滅菌器腔室的真空維持一段預(yù)定的 時(shí)間； 真空解除階段：向滅菌器腔室內(nèi)通入過濾的空氣，直到恢復(fù)至正常大氣壓狀態(tài)。 下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時(shí)間的變化曲線： 3 蒸汽空氣混合物程序（蒸汽空氣混合物程序（sam） 本滅菌工藝分為三個(gè)階段： 加熱階

48、段：蒸汽進(jìn)入滅菌器腔室，直至達(dá)到規(guī)定的滅菌溫度。產(chǎn)品在此階段需要超壓， 當(dāng)留存空氣分壓不足時(shí)，應(yīng)輸入壓縮空氣。正常情況下，需要利用循環(huán)方式保持均勻的滅 菌環(huán)境； 滅菌階段：通過飽和蒸汽在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)維持滅菌器腔室內(nèi)的溫度；若需超壓，應(yīng)仍 使用壓縮空氣； 冷卻階段：為完成產(chǎn)品冷卻，可使用冷卻的壓縮空氣或進(jìn)行噴水。為保持產(chǎn)品的形態(tài)， 應(yīng)仍使用壓縮空氣維持所需的滅菌壓力，以避免快速減壓對(duì)產(chǎn)品造成的損害。壓力維持到 產(chǎn)品充分冷卻，然后通風(fēng)恢復(fù)至常壓。 下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時(shí)間的變化曲線： 4 過熱水程序過熱水程序 本滅菌工藝分為四個(gè)階段： 注水階段：在滅菌器腔室內(nèi)輸入一定量的水（或由蒸汽產(chǎn)生的

49、冷凝水） ，使產(chǎn)品整個(gè)浸 沒在水中； 加熱階段：將水通過熱交換器加熱，并將壓縮空氣通入滅菌器腔室； 滅菌階段：?jiǎn)?dòng)循環(huán)系統(tǒng)，使水在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)維持滅菌器腔室內(nèi)的溫度； 冷卻階段：通過壓縮空氣維持滅菌器腔室內(nèi)的壓力，使循環(huán)水按預(yù)定速度降溫，使產(chǎn) 品冷卻，當(dāng)產(chǎn)品降至安全溫度時(shí)，滅菌器腔室減壓。 下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時(shí)間的變化曲線： 附錄二附錄二 水浴式滅菌器的驗(yàn)證方案示例水浴式滅菌器的驗(yàn)證方案示例 滅菌器是大容量注射劑生產(chǎn)中的關(guān)鍵設(shè)備。常用的滅菌器之一有脈動(dòng)真空滅菌器，通 常用于過濾器、膠塞、灌裝機(jī)可拆卸部件、灌裝區(qū)用的手套、口罩、潔凈工作服等物品的 滅菌，這種滅菌器一般采用飽和蒸汽作為滅

50、菌介質(zhì)，并有防止二次污染的滅菌冷卻系統(tǒng) （如空氣濾器等） ；另一類是用以滅菌產(chǎn)品的滅菌器如水浴噴淋式滅菌器或過熱水滅菌器， 這種滅菌器采用純化水或注射用水作為加熱、滅菌和冷卻介質(zhì)，可以有效防止產(chǎn)品滅菌后 的二次污染。它以過熱水在滅菌器腔室內(nèi)循環(huán)對(duì)產(chǎn)品不斷地進(jìn)行均勻的噴淋來達(dá)到滅菌目 的，同時(shí)，借助于潔凈壓縮空氣的作用保持腔室內(nèi)處于適當(dāng)?shù)貕毫顟B(tài)而防止水的汽化， 在保證被滅菌產(chǎn)品受熱均勻性的同時(shí)，又通過自動(dòng)控制系統(tǒng)確保產(chǎn)品受熱時(shí)內(nèi)外壓力的基 本平衡，減少產(chǎn)品在滅菌過程中破損。 常規(guī)的驗(yàn)證工作有以下幾個(gè)步驟； a：設(shè)立驗(yàn)證的組織機(jī)構(gòu)（驗(yàn)證小組等） ； b：制定驗(yàn)證計(jì)劃，確定所需的儀器設(shè)備、系統(tǒng)、過

51、程和進(jìn)度時(shí)間表； c：制定驗(yàn)證方案，必須確定為達(dá)到預(yù)期目的的具有可操作性的驗(yàn)證方法；包括驗(yàn)證 目的、適用范圍、系統(tǒng)或設(shè)備、驗(yàn)證方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施步驟等 d：按照驗(yàn)證方案實(shí)施； e：收集驗(yàn)證數(shù)據(jù)出具驗(yàn)證報(bào)告，包括驗(yàn)證結(jié)果、偏差處理、驗(yàn)證評(píng)價(jià)和建議，再驗(yàn) 證周期等。 驗(yàn)證的組織機(jī)構(gòu)（驗(yàn)證小組）開始工作以后，首先要確定滅菌柜的方案起草、會(huì)簽人員， 然后方案批準(zhǔn)后實(shí)施。 滅菌器的驗(yàn)證包含預(yù)確認(rèn)、安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)（產(chǎn)品滅菌工藝的確認(rèn)）等 幾個(gè)階段。 預(yù)確認(rèn)方案具備以下內(nèi)容： 首先應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的工藝來考慮滅菌器的選型，主要是裝量的大小、滅菌溫度與時(shí)間的可 控制性、滅菌程序的可選擇性、滅菌時(shí)腔

52、室內(nèi)溫度的一致性、升溫與降溫速率的穩(wěn)定性、 控制及記錄系統(tǒng)的可靠性等。 安裝/運(yùn)行確認(rèn)具備以下內(nèi)容： 是否符合設(shè)備本身的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)、安全標(biāo)準(zhǔn)以及國(guó)家相關(guān)法規(guī)（包含壓力容器）的規(guī)定； 電源、真空、壓縮空氣，冷卻水等公用系統(tǒng)的驗(yàn)收和與滅菌器的配合性試驗(yàn)是否通過；各 種附件、備件、可清洗件是否完整以及記錄；輔助設(shè)備（如純蒸汽發(fā)生器、空氣過濾器等） 的性能檢查等；儀器儀表的校驗(yàn)；設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)手冊(cè)/培訓(xùn)手冊(cè)/操作手冊(cè)是否完備；監(jiān) 控探頭/記錄探頭/報(bào)警裝置的驗(yàn)收等。 性能確認(rèn)（產(chǎn)品滅菌工藝的確認(rèn)）具備以下內(nèi)容： 見本文 4.2.2。 驗(yàn)證方案包含以下內(nèi)容，但不僅限于此： 1, 引言：包含概述和驗(yàn)證目的、

53、驗(yàn)證依據(jù)、接受標(biāo)準(zhǔn)、驗(yàn)證小組人員及其職責(zé)等。 概述中對(duì)待驗(yàn)證滅菌器的選型。功能以及是否符合滅菌工藝參數(shù)進(jìn)行描述； 驗(yàn)證目的則陳述驗(yàn)證要達(dá)到的幾項(xiàng)指標(biāo)，也可以包括挑戰(zhàn)試驗(yàn)的內(nèi)容。例如： 檢查并確認(rèn)該設(shè)備所用材質(zhì)、設(shè)計(jì)、制造符合 gmp 要求 檢查改設(shè)備的文件資料齊全且符合 gmp 要求 檢查并確認(rèn)設(shè)備的安裝符合要求，公用工程系統(tǒng)配套齊全且符合設(shè)計(jì)要求 確認(rèn)該設(shè)備的各種儀器、一般經(jīng)過校正且合格 確認(rèn)該設(shè)備的各種控制功率符合設(shè)計(jì)儀器 確認(rèn)該設(shè)備在穩(wěn)定的操作范圍內(nèi)能穩(wěn)定的運(yùn)行且能達(dá)到設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn) 確認(rèn)該設(shè)備的滅菌能力達(dá)到工藝要求 為設(shè)備維修、改造和再驗(yàn)證提供數(shù)據(jù)資料 2, 安裝確認(rèn)： 2.1 文件的確認(rèn)

54、文件名稱存放地點(diǎn)持有人 操作手冊(cè) 安裝計(jì)劃 維修指南 備件清單 壓力容器檢驗(yàn) 操作 sop 培訓(xùn)記錄 安裝圖 輔助設(shè)施清單及性能報(bào)告 2.2 主要部件檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號(hào)等） 部件名稱設(shè)計(jì)指標(biāo)是否有校驗(yàn)證書及編號(hào)結(jié)論 腔體 水噴淋設(shè)施 熱交換器 循環(huán)泵 空氣過濾器 滅菌車 監(jiān)控探頭 記錄探頭 其他 2.3 安全系統(tǒng)檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號(hào)等） 部件名稱設(shè)計(jì)指標(biāo)是否有校驗(yàn)證書及編號(hào)結(jié)論 腔體安全閥 門封條 門封壓力控制系統(tǒng) 壓縮空氣連鎖 腔室壓力開關(guān) 報(bào)警系統(tǒng) 溫度開關(guān) 緊急制動(dòng)開關(guān) 水位控制開關(guān) 其他 2.4 儀表的檢查與校驗(yàn)（最好填寫詳細(xì)信息、型號(hào)等） 部件名稱生產(chǎn)廠家是否有校驗(yàn)

55、證書及編號(hào)結(jié)論 溫度記錄儀 監(jiān)控/記錄溫度或 壓力探頭 真空開關(guān) 壓力表 溫度表 其他 2.5 公用系統(tǒng)的連接檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號(hào)等） 名稱設(shè)計(jì)指標(biāo)安裝情況結(jié)論 電源電壓 壓縮空氣 水（接觸產(chǎn)品） 蒸汽 冷卻水（不接觸產(chǎn)品） 管道材料/連接 蒸汽過濾器 冷卻水過濾器 真空系統(tǒng) 其他 2.6 控制系統(tǒng)檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號(hào)等） 部件名稱型號(hào)或系列號(hào)設(shè)計(jì)指標(biāo)結(jié)論 模擬輸入 模擬輸出 數(shù)字輸入/輸出 plc 模塊 通信卡 打印機(jī) 軟件 記錄紙 其他 3, 運(yùn)行確認(rèn)（功能測(cè)試） 包含真空度測(cè)試、腔室泄漏測(cè)試以及對(duì)規(guī)定的滅菌程序進(jìn)行測(cè)試，確認(rèn)符合規(guī)定。 4, 性能確認(rèn)（產(chǎn)品滅菌工藝的確認(rèn)）

56、 包含驗(yàn)證依據(jù)、接受標(biāo)準(zhǔn)、驗(yàn)證小組人員及其職責(zé)等。 4.1 熱分布試驗(yàn) 空載：必須包含測(cè)點(diǎn)位置圖和接受標(biāo)準(zhǔn)、溫度記錄等，通過數(shù)據(jù)找到冷點(diǎn)。 裝載：與上相同，但包含最小裝載、典型裝載和最大裝載三種，每種重復(fù)三次。 計(jì)算 f0值，結(jié)果分析與評(píng)價(jià)。 4,2 熱穿透試驗(yàn)（與生物指示劑同時(shí)進(jìn)行） 裝載：必須包含測(cè)點(diǎn)位置圖和接受標(biāo)準(zhǔn)、溫度記錄等，通過數(shù)據(jù)找到冷點(diǎn)。但宜 包含最小裝載、典型裝載和最大裝載三種，每種重復(fù)三次。 計(jì)算 f0值，結(jié)果分析與評(píng)價(jià)。 4.3偏差分析 偏差報(bào)告表偏差報(bào)告表 測(cè)試中出現(xiàn)偏差的位置:偏差號(hào). 偏差描述: 發(fā)現(xiàn)偏差人/日期:審核人/日期: 調(diào)查結(jié)果, 整改措施和總結(jié): 填寫人/

57、日期:審核人/日期: 負(fù)責(zé)人:預(yù)計(jì)解決日期: 總結(jié): 編寫人: 日期: 批準(zhǔn)人/日期:批準(zhǔn)人/日期: 工程部質(zhì)量保證部 注: 如果需要本頁(yè)可以復(fù)制. 但應(yīng)注明頁(yè)碼及總頁(yè)數(shù) 4.4測(cè)試記錄表 測(cè)試項(xiàng)目清單完成人/日期檢查人/日期是否符合備注 空載熱分布 裝載熱分布（最小裝載） 裝載熱分布（典型裝載） 裝載熱分布（最大裝載） 熱穿透試驗(yàn)（最小裝載） 熱穿透試驗(yàn)（典型裝載） 熱穿透試驗(yàn)（最大裝載） 生物指示劑試驗(yàn) 挑戰(zhàn)試驗(yàn) 4.6 參加驗(yàn)證人員清單 姓名職務(wù)參加項(xiàng)目簽字備注 4.7 報(bào)告附件清單 文件名稱頁(yè)數(shù)備注 人員資質(zhì)證書 驗(yàn)證依據(jù) 原始記錄 儀器校驗(yàn)報(bào)告 附錄三附錄三 歐盟醫(yī)藥產(chǎn)品管理法規(guī)第四

58、卷歐盟醫(yī)藥產(chǎn)品管理法規(guī)第四卷 歐盟有關(guān)人用和獸用醫(yī)藥產(chǎn)品歐盟有關(guān)人用和獸用醫(yī)藥產(chǎn)品 gmp 指南指南 附錄附錄 1 無菌藥品生產(chǎn)無菌藥品生產(chǎn) 有關(guān)滅菌方面的條款摘錄 原則原則 為降低微生物、微粒和熱原污染的風(fēng)險(xiǎn)，無菌藥品的生產(chǎn)應(yīng)有各種特殊要求。這在 很大程度上取決于生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度。質(zhì)量保證極為重 要，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心制訂并經(jīng)驗(yàn)證的方法及規(guī)程進(jìn)行。產(chǎn)品的無 菌或其它質(zhì)量特性絕不能僅依賴于任何形式的最終操作或成品檢驗(yàn)。 無菌藥品生產(chǎn)所需的潔凈區(qū)一般可分為 4 個(gè)級(jí)別： a 級(jí) 高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，如：灌裝區(qū)，放置膠塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林 瓶的區(qū)域及無菌裝配/連

59、接操作的區(qū)域。通常用層流操作臺(tái)/罩來維護(hù)該區(qū)的 環(huán)境狀態(tài)。層流系統(tǒng)在其工作區(qū)域必須均勻送風(fēng)，風(fēng)速為 0.36- 0.54m/s（指導(dǎo)值） 。應(yīng)有數(shù)據(jù)證明層流的狀態(tài)并須驗(yàn)證。在密閉的隔離操 作器或手套箱內(nèi)，可使用單向流或較低的風(fēng)速。 b 級(jí) 指無菌配制和灌裝 a 級(jí)區(qū)所處的背景區(qū)域。 c 級(jí)和 d 級(jí) 指生產(chǎn)無菌產(chǎn)品過程中重要程度較次的清潔操作區(qū)。 最終滅菌產(chǎn)品最終滅菌產(chǎn)品 28原料和大多數(shù)產(chǎn)品的準(zhǔn)備/配制至少應(yīng)在 d 級(jí)區(qū)進(jìn)行，以降低粒子和微生物污染的 風(fēng)險(xiǎn)，并與過濾及滅菌操作的要求相適應(yīng)。微生物污染風(fēng)險(xiǎn)比較高時(shí)，如容易長(zhǎng)菌的產(chǎn)品、 配制后要等相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間方可滅菌的產(chǎn)品或因故主要不在密閉容器內(nèi)進(jìn)

60、行配制操作的產(chǎn)品， 配制必須在 c 級(jí)環(huán)境中進(jìn)行。 29最終滅菌產(chǎn)品的灌裝應(yīng)至少在 c 級(jí)區(qū)進(jìn)行。 30當(dāng)環(huán)境對(duì)產(chǎn)品污染的風(fēng)險(xiǎn)比較大時(shí)，例如灌裝速度慢或容器是廣口瓶、或是須暴 露數(shù)秒鐘后方可壓塞的產(chǎn)品，必須在 c 級(jí)區(qū)內(nèi)局部 a 級(jí)條件下灌封。軟膏、霜?jiǎng)?、懸濁?以及乳劑一般應(yīng)在 c 級(jí)區(qū)配制和灌封，然后作最終滅菌。 80應(yīng)監(jiān)控滅菌前產(chǎn)品的微生物污染水平并確立控制標(biāo)準(zhǔn)，此標(biāo)準(zhǔn)與所采用滅菌方法 的效果相關(guān)。必要時(shí)，還應(yīng)監(jiān)控?zé)嵩??？赡芮闆r下，應(yīng)在緊挨灌裝點(diǎn)的位置，用除菌過濾 器將所有藥液，尤其是大容量注射劑進(jìn)行除菌過濾。 81無菌操作所需的物料、容器、設(shè)備和任何其它物品都應(yīng)滅菌，并通過與墻密封的