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1、前帶檢查基本原理圖1 抗原抗體反應(yīng)的劑量反應(yīng)曲線在抗原抗體的反應(yīng)中,生成的不溶性抗原抗體復(fù)合物與抗原抗體的比例密切相關(guān),在適當(dāng)比例時生成的不溶性抗原抗體復(fù)合物量最大,此時透過的光最少,相當(dāng)于吸光度最大;大于和小于這個比例時,生成的不溶性抗原抗體復(fù)合物量都會減少,透過的光增加,吸光度減小。在這種情況下,濃度相差很大的兩份樣本(抗原),生成的不溶性抗原抗體復(fù)合物量可以相等,如果不進(jìn)行前帶檢查,會得到相同的測定結(jié)果。如圖7所示。因此,對于抗原抗體反應(yīng),有必要進(jìn)行前帶檢查。前帶檢查僅適用于終點法,固定時間法和動力學(xué)法不進(jìn)行前帶檢查。前帶限指沒有出現(xiàn)抗原過剩時允許的最大或最小pc值。前帶檢查判斷方法:反
2、應(yīng)速度比法反應(yīng)速度比法是根據(jù)在一定的相同的時間內(nèi),抗體過剩反應(yīng)曲線能夠達(dá)到平衡,如圖2所示;而抗原過剩反應(yīng)曲線達(dá)不到平衡,如圖3所示。具體判斷方法: (prozone limit)前帶限【pcm】 【q1】【q2】【q3】【q4】 (prozone check distinction abs.lowlimit)前帶檢查吸光度下限值abs【abs.lowlimit】 樣本pc值: 若pc pcm正常情況,pc值比較小.,給出“前帶!”標(biāo)記。以下兩種情況,不再進(jìn)行前帶檢查。(1) 樣本終點吸光度aabs.lowlimit(下降反應(yīng))。(2) 樣本反應(yīng)度絕對值rrcmax(最大濃度標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)度絕對值
3、)。上述q1q4為測光點.且滿足 0q1q2q3q4rcmax(最大濃度標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)度)時,測試結(jié)果不再計算,即使計算,測試結(jié)果已經(jīng)很大,并會給出相應(yīng)報警,因此該種情況下也不必檢查。3. 由于除alycon160外,大部分生化儀(如日立、奧林巴斯、雅培、貝克曼、島津、sysmex等)均把抗原過剩檢查稱為前帶檢查,因此建議bs生化儀抗原過剩檢查項(采用反應(yīng)速度比法)改名為前帶檢查。參數(shù)確定方案1. 配置各種濃度水平的溶液(濃度水平覆蓋前帶.等價帶及后帶),找出如圖1所示的抗原抗體反應(yīng)的劑量反應(yīng)曲線.2. 取測光點q1q4, 要求0q1q2q3q4反應(yīng)時間終點,q1,q2取反應(yīng)曲線的前幾個點(反應(yīng)最快的部分,要求在反應(yīng)曲線拐點以前), q3,q4取反應(yīng)曲線的最后幾個點(一般反應(yīng)曲線達(dá)到了平衡) .如圖2中,q1可取1,q2可取5,q3可取29,q4可取34.3. 根據(jù)2中的測光點,計算出各濃度水平的pc值,從而找出前帶和后帶之間的閾值pcm4. 前帶檢查吸光度下限值ab
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