微生物學課件：第16章 螺旋體

1、第十六章第十六章 螺旋體螺旋體 第一節(jié)第一節(jié) 分類與命名分類與命名 致病性螺旋體主要有下述致病性螺旋體主要有下述3 3個屬：個屬： 1 1鉤端螺旋體屬（鉤端螺旋體屬（leptospiraleptospira） 2 2疏螺旋體屬（疏螺旋體屬（BorreliaBorrelia） 3 3密螺旋體屬（密螺旋體屬（TreponemaTreponema） 第二節(jié)第二節(jié) 鉤端螺旋體屬鉤端螺旋體屬 問號狀鉤端螺旋體問號狀鉤端螺旋體 一、臨床意義一、臨床意義 問好狀鉤端螺旋體是鉤端螺旋體病的病原體。問好狀鉤端螺旋體是鉤端螺旋體病的病原體。 1. 1. 致病物質致病物質 內毒素樣物質（內毒素樣物質（ELSELS）

2、/ /脂多糖樣物質（脂多糖樣物質（LLS)LLS) 溶血素溶血素 細胞毒性因子（細胞毒性因子（GTFGTF） 致細胞病變作用致細胞病變作用( CPE)( CPE)物質物質 傳染源與儲存宿主傳染源與儲存宿主 2.2.所致疾病所致疾病 鉤端螺旋體病鉤端螺旋體病 傳播途徑：主要是傳播途徑：主要是接觸疫水接觸疫水傳播傳播 易感人群：人及動物易感人群：人及動物 臨床表現(xiàn)臨床表現(xiàn) 螺旋細密、規(guī)則，一端或兩端呈鉤狀；螺旋細密、規(guī)則，一端或兩端呈鉤狀； 有兩根周漿鞭毛，運動活潑；有兩根周漿鞭毛，運動活潑； G-，但不易著色，但不易著色，F(xiàn)ontana鍍銀染色成棕褐色。鍍銀染色成棕褐色。 二、二、微生物學檢驗微

3、生物學檢驗 （一）（一）基本特性基本特性 問好狀鉤端螺旋體問好狀鉤端螺旋體 鍍銀染色法鍍銀染色法1000 暗視野顯微鏡暗視野顯微鏡1500 抗原構造抗原構造 根據(jù)屬特異性抗原、群特異性抗原、型特異性抗根據(jù)屬特異性抗原、群特異性抗原、型特異性抗 原分類原分類 營養(yǎng)要求高，需氧或微需氧，常用營養(yǎng)要求高，需氧或微需氧，常用Korthof培養(yǎng)培養(yǎng) 基，生長緩慢；最適溫度基，生長緩慢；最適溫度2830。 n 在水及土壤中可存活數(shù)天至數(shù)月；對青霉素敏感在水及土壤中可存活數(shù)天至數(shù)月；對青霉素敏感 n 基因組：賴型鉤體基因組全長為基因組：賴型鉤體基因組全長為4.69mb，包含，包含 4.33mb的大染色體和的

4、大染色體和359kb的小染色體，的小染色體，G+C平平 均為均為36mol （二）檢驗程序（二）檢驗程序 1. 1. 標本采集標本采集 1010天內取血液；天內取血液；1 1周后取尿液。周后取尿液。 2. 2. 標本直接檢查標本直接檢查 直接鏡檢：暗視野觀察；直接鏡檢：暗視野觀察；Fontana鍍銀染色：鍍銀染色： 棕褐色棕褐色 核酸檢測：特異核酸檢測：特異DNA探針法、探針法、PCR 4. 4. 抗體檢測抗體檢測 （1 1）顯微鏡凝集試驗）顯微鏡凝集試驗 3. 3. 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)分離與鑒定分離與鑒定 血液尿液培養(yǎng)血液尿液培養(yǎng) 接種于接種于KorthofKorthof培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后培養(yǎng)基

5、中，培養(yǎng)后 作暗視野檢查。作暗視野檢查。 鉤端螺旋體凝集試驗（暗視野）鉤端螺旋體凝集試驗（暗視野） 陰性對照陰性對照 陽性反應（陽性反應（+ + ） 5.5.動物試驗動物試驗 （2 2）間接凝集試驗）間接凝集試驗：效價效價1：8可判為陽性，雙份可判為陽性，雙份 血清標本效價呈血清標本效價呈4倍以上增長則更有診斷價值。倍以上增長則更有診斷價值。 （3 3）TR/PatocTR/Patoc特異性屬抗原玻片凝集試驗特異性屬抗原玻片凝集試驗 （4 4）酶聯(lián)免疫吸附試驗）酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)(ELISA) 適用于有雜菌污染的標本。常用幼齡豚鼠或適用于有雜菌污染的標本。常用幼齡豚鼠或 金地鼠。金

6、地鼠。 lyme病病 回歸熱螺旋體回歸熱螺旋體 第三節(jié)第三節(jié) 疏螺旋體疏螺旋體 此屬螺旋體螺旋少而稀疏，且排列不規(guī)則。此屬螺旋體螺旋少而稀疏，且排列不規(guī)則。 在自然界有宿主與媒介。在自然界有宿主與媒介。 疏螺旋體疏螺旋體 伯氏螺旋體伯氏螺旋體 流行性回歸熱流行性回歸熱 地方性回歸熱地方性回歸熱 （一）（一）臨床意義臨床意義 1. 1. 致病物質致病物質 粘附素，外膜蛋白粘附素，外膜蛋白OspAOspA，LPSLPS 2. 2. 自然儲存宿主自然儲存宿主 嚙齒動物、鹿嚙齒動物、鹿 3. 3. 傳播媒介傳播媒介 硬蜱硬蜱 4. Lyme4. Lyme病臨床表現(xiàn)病臨床表現(xiàn) 一、伯氏螺旋體一、伯氏螺旋

7、體 游走性紅斑游走性紅斑 長長1137m，兩端稍尖；，兩端稍尖； 周漿鞭毛有周漿鞭毛有2100根以上，根以上， 與運動有關；與運動有關； 伯氏疏螺旋體（電鏡伯氏疏螺旋體（電鏡2 0002 000） Giemsa染色為淡紫色，鍍銀染色為棕褐色；染色為淡紫色，鍍銀染色為棕褐色； 營養(yǎng)要求高，微需氧，營養(yǎng)要求高，微需氧，5 % 10% CO2促進生長，促進生長， 常用常用BSK培養(yǎng)基，生長緩慢；培養(yǎng)基，生長緩慢； 萊姆病的病原體：伯氏、伽氏、埃氏。萊姆病的病原體：伯氏、伽氏、埃氏。 1. 基本特性基本特性 （二）微生物學檢查（二）微生物學檢查 2. 檢驗程序檢驗程序 （3 3）抗體檢測：免疫熒光法及

8、）抗體檢測：免疫熒光法及ELISAELISA法檢測患者法檢測患者 體內的抗體。體內的抗體。 （1 1）標本中病原體數(shù)量少，早期和晚期均難分離）標本中病原體數(shù)量少，早期和晚期均難分離 出螺旋體。故一般不做直接鏡檢和分離培養(yǎng)出螺旋體。故一般不做直接鏡檢和分離培養(yǎng) （2 2）分子生物學技術）分子生物學技術 二、回歸熱疏螺旋體二、回歸熱疏螺旋體 病原體：病原體：回歸熱疏螺旋體，我國多見回歸熱疏螺旋體，我國多見 流行性回歸熱（虱傳回歸熱）流行性回歸熱（虱傳回歸熱） 傳播途徑：傳播途徑：體虱體虱 臨床癥狀：臨床癥狀：高熱反復發(fā)作高熱反復發(fā)作3 39 9次。次。 地方性回歸熱（蜱傳回歸熱）地方性回歸熱（蜱傳

9、回歸熱） 病原體：病原體：杜通疏螺旋體等杜通疏螺旋體等1515種種 傳播途徑：傳播途徑：軟蜱軟蜱 儲存宿主：儲存宿主：嚙齒動物嚙齒動物 臨床癥狀：臨床癥狀：與虱傳型相似與虱傳型相似 1.體內正常菌群，寄生在口腔、齒齦及咽部體內正常菌群，寄生在口腔、齒齦及咽部 2.協(xié)同引起奮森咽峽炎、牙齦炎、潰瘍性口協(xié)同引起奮森咽峽炎、牙齦炎、潰瘍性口 腔炎、口頰壞疽腔炎、口頰壞疽 3.對青霉素、四環(huán)素等敏感對青霉素、四環(huán)素等敏感 三、奮森螺旋體三、奮森螺旋體 第四節(jié)第四節(jié) 密螺旋體屬密螺旋體屬 分為致病與非致病兩大類。分為致病與非致病兩大類。 蒼白螺旋體：蒼白亞種蒼白螺旋體：蒼白亞種 梅毒梅毒 性病性病 地方

10、亞種地方亞種 地方性梅毒地方性梅毒 極細亞種極細亞種 雅司病雅司病 非性病非性病 品他螺旋體：品他螺旋體： 品他病品他病 ( (一一) ) 臨床意義臨床意義 1. 1. 致病物質致病物質 外膜蛋白：黏附作用外膜蛋白：黏附作用 表面粘多糖和唾液酸：形成莢膜樣物質。表面粘多糖和唾液酸：形成莢膜樣物質。 透明質酸酶透明質酸酶 免疫逃逸免疫逃逸 過敏反應過敏反應 一、梅毒螺旋體一、梅毒螺旋體 獲得性梅毒臨床分期：分為三期獲得性梅毒臨床分期：分為三期 （1）期（初期）梅毒：感染后期（初期）梅毒：感染后3周左右局部周左右局部 出現(xiàn)無痛性硬下疳。感染性極強出現(xiàn)無痛性硬下疳。感染性極強 先天性：母體通過胎盤傳

11、給胎兒先天性：母體通過胎盤傳給胎兒 獲得性：性傳播獲得性：性傳播 2. 2. 所致疾病所致疾病 梅毒梅毒 巨大下疳巨大下疳(一期梅毒）一期梅毒） 全身皮膚、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴結腫大。全身皮膚、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴結腫大。 （2）期梅毒期梅毒 發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后28周。周。 （3）期（晚期）梅毒期（晚期）梅毒 發(fā)生感染發(fā)生感染2年后，病變可波及全身組織和器官年后，病變可波及全身組織和器官 基本損害為慢性肉芽腫基本損害為慢性肉芽腫 病損內螺旋體少但破壞性大病損內螺旋體少但破壞性大 晚期梅毒的潰瘍、壞死晚期梅毒的潰瘍、壞死 先天性梅毒（胎傳梅毒）先天性梅毒（胎傳梅毒） 系

12、母體蒼白亞種系母體蒼白亞種 螺旋體通過胎盤進入螺旋體通過胎盤進入 胎兒所致，多發(fā)于妊胎兒所致，多發(fā)于妊 娠娠4個月之后。個月之后。 早期先天梅毒早期先天梅毒 （1）直徑）直徑 0.100.15m，有，有814個致密而規(guī)則的小螺個致密而規(guī)則的小螺 旋，兩端尖直。旋，兩端尖直。 （2）原生質圓柱體上緊繞）原生質圓柱體上緊繞 著著34根周漿鞭毛根周漿鞭毛，故故 運動活躍，運動方式運動活躍，運動方式 多樣。多樣。 （二）（二）微生物學檢驗微生物學檢驗 1. 1. 基本特性基本特性 梅毒螺旋體梅毒螺旋體 （3）G-，但不易著色。，但不易著色。Fontana鍍銀染色呈棕褐色。鍍銀染色呈棕褐色。 （4）基因組）基因組 環(huán)狀環(huán)狀DNA，約為，約為1 138 006bp，G+C 平均為平均為52.8mol。 （5）在無活細胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長慢。）在無活細胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長慢。 （6）抵抗力：極弱，對溫度和干燥特別敏感；對）抵抗力：極弱，對溫度和干燥特別敏感；對 青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗菌藥物敏感。青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗菌藥物敏感。 菌體柔軟，用于運動的類似鞭毛的軸絲位于細胞外鞘內菌體柔軟，用于運動的類似鞭毛的軸絲位于細胞外鞘內 梅毒密螺旋體梅毒密螺旋體 2. 檢驗程序檢驗程序 （1 1）標本）標本：、期梅毒取下疳