2017年執(zhí)業(yè)藥師考試中藥化學(xué)講義

1、18 / 73溶劑法 水蒸氣蒸ts法握取方法T升華法前煮法 浸湧法 港漉法 回流法 連續(xù)回流法溶劑提取法超聲法超臨界流體萃取法注意：一般如無(wú)特殊規(guī)定，藥材須經(jīng)干燥并 適當(dāng)粉碎，以利于增大與溶劑的接觸表面，提高 提取效率。補(bǔ)充：溶劑提取法的原理：“極性相似相溶”原理，依據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對(duì)所提成分溶解度大、對(duì)雜質(zhì)溶解度小的溶劑，依據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來(lái)的方法。作用原理：溶劑穿透入藥材原料的細(xì)胞膜，溶解可溶性物質(zhì)，形成細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，將其滲出細(xì) 胞膜，達(dá)到提取目的。一般提取規(guī)律： 萜類、甾體等脂環(huán)類及芳香類化合物因?yàn)闃O性較小，易溶于三氯甲烷、乙醚等親脂性溶劑； 糖

2、苷、氨基酸等類成分則極性較大，易溶于水及含水醇中； 酸性、堿性及兩性化合物，因?yàn)榇嬖跔顟B(tài)（分子或離子形式）隨溶液而異，故溶解度將隨pH而改變，可用不同pH的堿或酸提取。補(bǔ)充：溶劑的選擇。（溶劑分類：水、親水性溶劑、親水性溶劑）1）常見(jiàn)溶劑類型石油醚v四氯化碳v苯v二氯甲烷v氯仿v乙醚v乙酸乙酯v正丁醇v丙酮v甲醇（乙醇）v水。（正丁醇是分水嶺，左邊極性小，右邊極性大）2）溶劑選擇的原則（1）相似相溶，能最大限度地提取所需要的化學(xué)成分（2）不與有效成分反應(yīng)（3）不溶共存雜質(zhì)（4）節(jié)約成本：價(jià)廉、安全、易得、濃縮方便。常用親水性提取溶劑溶劑水乙醇甲醇優(yōu)點(diǎn)對(duì)細(xì)胞穿透力強(qiáng)，提取效率高安全、價(jià)廉、易得對(duì)

3、藥材組織穿透力強(qiáng)，效率高有選擇性，不同濃度極性不同可防腐、沸點(diǎn)低，易除去、較便宜可抑制酶活性、大部分可回收利用效率高于乙醇缺點(diǎn)水雜質(zhì)多、易變對(duì)含淀粉、粘液質(zhì)多的藥材不易過(guò)濾脂溶性雜質(zhì)較多有揮發(fā)性、易燃燒毒性大、較貴 提取方法表定義：中藥材加水浸泡后加熱煮沸 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便煎煮法 缺點(diǎn)：需加熱，含揮發(fā)性成分及加熱易破壞的成分不宜使用 多糖類成分含量較高的中藥，用水煎煮后藥 液黏度較大，過(guò)濾困難，不宜 使用。對(duì)親脂性成分提取不完全定義：在常溫或溫?zé)幔?080C ）條件下用適當(dāng)?shù)娜軇┙n藥材，以溶出其中的有 效成分的方法。優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，適用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹(shù)膠、果膠、黏液質(zhì)的中 藥。滲漉

4、法回流法 與連續(xù) 回流法水蒸氣蒸餾法升華法超聲提取法超臨界流體萃取法缺點(diǎn)：出膏率低；以水為溶劑時(shí)，提取液易發(fā)霉變質(zhì)定義：不斷向粉碎的中藥材中添加新鮮浸出溶劑 ，使其滲過(guò)藥材，從滲漉筒下端出 口流出滲漉液的方法?；具^(guò)程： 藥材浸潤(rùn)一裝筒一浸漬一滲漉。優(yōu)點(diǎn)：適用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹(shù)膠、果膠、黏液質(zhì)的中藥。（似浸漬法，但提取效率高于浸漬法）缺點(diǎn)：溶劑消耗量大；耗時(shí)長(zhǎng)，操作麻煩定義：使用易揮發(fā)的溶劑加熱回流或連續(xù)回流 提取中藥成分的方法優(yōu)點(diǎn)：效率較高。缺點(diǎn)：對(duì)熱不穩(wěn)定成分不宜使用； 溶劑消耗量大、操作麻煩； 耗時(shí)長(zhǎng)定義：提取具有揮發(fā)性的、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，且難溶或不溶于水的成

5、分 適用成分：揮發(fā)性（100C有一定蒸汽壓）；對(duì)水穩(wěn)定；不溶于水；耐熱。如：中藥中揮發(fā)油的提取常采用此法。定義：固體物質(zhì)在受熱時(shí)不經(jīng)過(guò)熔融而直接轉(zhuǎn)化為蒸氣，蒸氣遇冷又凝結(jié)成固體的 現(xiàn)象叫做升華。適用成分：游離羥基蒽醌類成分，一些小分子香豆素類，有機(jī)酸類成分等。如：樟木中的樟腦，茶葉中的咖啡因定義：采用超聲波輔助溶劑提取的方法。超聲波是一種強(qiáng)烈機(jī)械振動(dòng)波，它是指?jìng)鞑サ恼駝?dòng)頻率在彈性介質(zhì)中高達(dá)20kHz的一種機(jī)械波。提取原理：超聲波可產(chǎn)生高速、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用，能破壞藥材的細(xì)胞， 使提取溶劑滲透到藥材的細(xì)胞中，從而加速藥材中有效成分溶解于溶媒中，提高有 效成分的提取率。特點(diǎn)：不會(huì)改變有效成

6、分的化學(xué)結(jié)構(gòu)； 可縮短提取時(shí)間，提高提取效率。定義：采用超臨界流體為溶劑對(duì)中藥材進(jìn)行萃取的方法。超臨界流體（SF）:指處于臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上，介于氣體和液 體之間的、以流動(dòng)形式存在的單一相態(tài)物質(zhì)。密度與液體相近，而黏度與氣體相近，擴(kuò)散能力強(qiáng)。萃取選擇性的決定因素：溫度、壓力、夾帶劑的種類及含量。常用的提取物質(zhì)：c（2、Nh3、C2H6、C7H16、CCI2F2、N2O SFd 等，實(shí)際最常用的為 C02。（1）CC2超臨界流體萃取的特點(diǎn)： 簡(jiǎn)便、高效、無(wú)有機(jī)溶劑殘留； 安全，無(wú)污染； 因萃取溫度低，適用于對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提取； 萃取介質(zhì)的溶解特性容易改變，在一定溫度下只需改

7、變其壓力； 還可加入夾帶劑，改變萃取介質(zhì)的極性來(lái)提取極性物質(zhì)； 適于極性較大和分子量較大物質(zhì)的萃??； 萃取介質(zhì)可循環(huán)利用，成本低； 可與其他色譜技術(shù)聯(lián)用及IR、MS聯(lián)用，可高效快速地分析中藥及其制劑中 的有效成分。（2）局限性 對(duì)脂溶性成分溶解力強(qiáng)，對(duì)水溶性成分溶解能弱。適用于脂溶性成分的提取 設(shè)備造價(jià)高，成本高； 更換產(chǎn)品時(shí)設(shè)備清洗困難。（3）夾帶劑的作用：夾帶劑（entrainer ）作為亞臨界組分,揮發(fā)度介于超臨 界流體與被萃取溶質(zhì)之間，以液體形式和相對(duì)小的量加入超臨界流體中。作用：改善或維持選擇性；提高難揮發(fā)溶質(zhì)的溶解度。常用夾帶劑：甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等（對(duì)溶質(zhì)具有很好溶解性的溶劑

8、也往往是很好的挾帶）中藥有效成分的分離與精制原理方法特點(diǎn)及應(yīng)用根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離利用溫度不同引起溶解度的 改變進(jìn)行分離禾用兩種以上不同溶劑的極 性和溶解性差異進(jìn)行分離 利用酸堿性（不同）進(jìn)行分 離利用沉淀試劑進(jìn)行分離結(jié)晶 重結(jié)晶 水提醇沉法 醇提水沉法 酸提堿沉 堿提酸沉 沉淀法根據(jù)物質(zhì)分配比不同進(jìn)行分離萃取法液-液萃取法（LC）液-液分配色譜（LLC）物理吸附硅膠、氧化鋁：極性吸附劑V活性炭非極性吸附劑根據(jù)物質(zhì)吸附性差別進(jìn)行分離化學(xué)吸附半化學(xué)吸附活1 土炭. 非極1 土吸附劑 聚酰胺色譜：氫鍵吸附 大孔吸附樹(shù)脂：選擇性吸 附、分子篩原理根據(jù)物質(zhì)分子大小差別進(jìn)行分離凝膠過(guò)濾法 膜分離法

9、根據(jù)物質(zhì)解離程度不同進(jìn)行分離離子交換樹(shù)脂根據(jù)物質(zhì)沸點(diǎn)差別進(jìn)行分離分餾法（一）根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進(jìn)行分離1. 利用溫度不同引起溶解度的改變進(jìn)行分離：結(jié)晶與重結(jié)晶：。結(jié)晶：將不是結(jié)晶狀態(tài)的固體物質(zhì)處理成結(jié)晶狀態(tài)的操作。重結(jié)晶：從不純的結(jié)晶經(jīng)過(guò)進(jìn)一步精制處理得到較純結(jié)晶的過(guò)程。原理：要分離物質(zhì)在熱的溶劑中溶解達(dá)到飽和，冷卻時(shí)由于溶解度的降低，溶液因過(guò)飽和而析出晶 體。結(jié)晶與重結(jié)晶操作：提取或分離物I 溶于選擇的溶劑，加熱成4 飽和溶液，過(guò)濾溶液j 放置（冷藏）析晶，過(guò)濾 粗結(jié)晶J 重復(fù)上述操作（重結(jié)晶）纟吉晶結(jié)晶用溶劑的選擇： 不與被結(jié)晶物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)； 對(duì)被結(jié)晶成分熱時(shí)溶解度大、冷時(shí)溶解度小；

10、對(duì)雜質(zhì)或冷熱時(shí)都溶解（留在母液中），或冷熱時(shí)都不溶解（過(guò)濾除去）； 溶劑沸點(diǎn)較低，易揮發(fā)除去； 無(wú)毒或毒性較小，便于操作。常用的重結(jié)晶溶劑：水、冰醋酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、三氯甲烷、苯、四氯化碳、石油醚和 二硫化碳等。（單用或混用） 注意：用于重結(jié)晶溶劑用量需適當(dāng)，用量太大會(huì)增加溶解，析出晶體量少；用量太 小在熱過(guò)濾時(shí)會(huì)提早析出結(jié)晶 造成損失。一般可比需要量多加 20%左右。結(jié)晶純度的判定方法：（1）結(jié)晶形態(tài)和色澤：一個(gè)純的化合物一般都有 一定的晶形和均勻的色澤。（2） 熔點(diǎn)和熔距：?jiǎn)我换衔镆话愣加?一定的熔點(diǎn)和較小的熔距（12C）。（3） 色譜法：?jiǎn)我换衔镉脙煞N以上溶劑系統(tǒng)或色譜條件

11、進(jìn)行檢測(cè)，均顯示單一的斑點(diǎn)。常用的 有紙色譜、紙 上電泳和薄層色譜。（4）高效液相色譜法（HPLC :純的化合物顯示單一的譜峰。（5） 其他方法：質(zhì)譜、核磁共振等。單峰表示純化合物，雙峰表示不純的化合物 。2. 利用兩種以上不同溶劑的極性和溶解性差異進(jìn)行分離在溶液中加入另一種溶劑以改變混合物的極性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，從而實(shí)現(xiàn)分離。水提醇沉法：在藥材濃縮的水提液中加入數(shù)倍量的乙醇稀釋。（沉淀除去多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜 質(zhì)。醇提水沉法：在藥材濃縮的水提液中加入數(shù)倍量的乙醇稀釋。（沉淀除去樹(shù)脂、葉綠素等水不溶性雜質(zhì)。）另：醇/醚法、醇/丙酮法。（可使皂苷沉淀析出，而脂溶性的樹(shù)脂等雜質(zhì)留在母液中3

12、. 利用酸堿性（不同）進(jìn)行分離pH,改變分子的存在狀態(tài)，從而改對(duì)酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物來(lái)說(shuō)，加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液的變?nèi)芙舛葘?shí)現(xiàn)分離酸提堿沉：生物堿等堿性成分。堿提酸沉：黃酮、蒽醌類等酸性成分。內(nèi)酯或內(nèi)酰胺也可以用堿提酸沉法提?。阂?yàn)榭杀辉砘苡谒?，與其他難溶于水的成分分離4. 利用沉淀試劑進(jìn)行分離酸性或堿性化合物可通過(guò)加入某種沉淀試劑，使之生成水不溶性的鹽類 等沉淀析出。酸性化合物+鈣鹽、鋇鹽、鉛鹽沉淀 H2S氣體純品堿性化合物+苦味酸鹽、苦酮酸鹽等（有機(jī)酸鹽）先加入無(wú)機(jī)酸，再堿化純品磷鉬酸鹽、磷鎢酸鹽、雷氏銨鹽等（無(wú)機(jī)酸鹽）（二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比（分配系數(shù)）不同進(jìn)行分離 常見(jiàn)

13、的方法有簡(jiǎn)單的液-液萃取法和液-液分配色譜（LC或LLC）等。 液一液萃取法的原理：1. 分配系數(shù)K值溶質(zhì)在任意不相混溶的兩溶劑中的分配系數(shù)K: K=CU/CLK：分配系數(shù)；CU：溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；CL：溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度（K在一定的溫度及壓力下為一常數(shù)K值：（表示分離的傾向）K1:更傾向于溶解于上層溶液；K KB） 分離難易判定：3100，僅作一次簡(jiǎn)單萃取就可實(shí)現(xiàn)基本分離（如上例）；100P 10,通常需萃取1012次；BW 2,需萃取100次以上；1, 即KA/KB1，則無(wú)法分離3. 分配比與pH以酸性物質(zhì)(HA為例，其在水中的解離平衡及解離常數(shù) K可用下式表示： 酸性越強(qiáng)，Ka

14、越大，pKa值越小。堿性越強(qiáng)，Ka越小，pKa值越大。通常酚類化合物的pKa值一般為9.210.8，羧酸類化合物的pKa值約為5OH R-C00H(苯酚)(拔酸類化合物)若使該酸性物質(zhì)完全解離，則溶劑的pH也pKa+2若使該酸性物質(zhì)完全游離，則溶劑的pH也pKa-2(游離型極性小，易溶于小極性的有機(jī)溶劑；解離型極性大，易溶于水或親水性有機(jī)溶劑) 若pH 12 (堿性條件) 酸性物質(zhì)解離形式，極性大 堿性物質(zhì)游離狀態(tài)，極性小4. 液-液萃取與紙色譜5. 液-液分配柱色譜：將兩相中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上作為固定相，填充在色譜管中，然后 加入與固定相不相混溶的另一相溶劑作為流動(dòng)相來(lái)沖洗色譜柱。

15、常用載體：硅膠、硅藻土及纖維素粉等。常用反相硅膠填料有：RP-2 (-C2H5)、RP-8 (-C8H17)、RP-18 (-C18H37)(1) 正相色譜：固定性極性 流動(dòng)相極性 被分離物質(zhì)極性越大(親水性越強(qiáng))，越不易洗脫。 固定相：強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖溶液等。流動(dòng)相：弱極性有機(jī)溶劑，三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等。適用物質(zhì)：水溶性或極性較大的成分,如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物。(2) 反相色譜：固定性極性 脂肪胺芳香胺N- 芳雜環(huán)酰胺吡咯。（二）堿性強(qiáng)弱與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系堿性強(qiáng)弱影響因素：氮原子的雜化方式、電子云密度（電性效應(yīng)）、 空間效應(yīng)、分子內(nèi)氫鍵。1. 氮原子的雜化方式堿性隨雜

16、化程度的升高而增強(qiáng)，即sp3 sp2 sp。如四氫異喹啉（pKa9.5）為sp3雜化；吡啶（pKa5.17）和異喹啉（pKa5.4）均為sp2雜化；氰基 呈中性，因其為sp雜化。季銨堿的堿性強(qiáng)（pKa11.5以上）則是因羥基以負(fù)離子形式存在，類似無(wú)機(jī)堿。罌粟堿(pKQ 13)2. 電性效應(yīng)電性效應(yīng)（包括誘導(dǎo)效應(yīng)和共軛效應(yīng)），能影響N原子上電子云排布，從而影響堿性的大小。（1） 誘導(dǎo)效應(yīng)：生物堿分子中的氮原子上的電子云密度可受氮原子附近供電基（如烷基）或/和吸 電基（如各類含氧基團(tuán)、芳環(huán)、雙鍵）誘導(dǎo)效應(yīng)的影響。供電誘導(dǎo)使氮原子上電子云密度增加，堿性增強(qiáng)； 吸電誘導(dǎo)使氮原子上電子云密度減小，堿性降

17、低。（2） 共軛效應(yīng)： 當(dāng)生物堿分子中氮原子的孤電子對(duì)與n電子基團(tuán)共軛時(shí)，一般使生物堿的堿性 減弱。常見(jiàn)的有苯胺和酰胺兩種類 型。并非所有的p- n共軛效應(yīng)都能使生物堿的堿性減弱。如含胍基的生物堿，胍基接受質(zhì)子形成季銨離 子，呈更強(qiáng)的p- n共軛，且具有高度共軛穩(wěn)定性，而顯強(qiáng)堿性。3. 空間效應(yīng)：氮原子由于附近取代基的空間立體障礙或分子構(gòu)象因素，而使質(zhì)子難于接近氮原子， 堿性減弱。如麻黃堿堿性小 于去甲麻黃堿，山莨菪堿堿性介于東莨菪堿與莨菪堿之間，以及利血平堿性 較弱等。4. 氫鍵效應(yīng)：當(dāng)生物堿成鹽后，氮原子附近如有羥基、羰基，并處于有利于形成穩(wěn)定分子內(nèi)氫鍵時(shí)， 氮上的質(zhì)子不易離去，其共軛酸穩(wěn)

18、定，則堿性強(qiáng)。居王導(dǎo)地位。影響因素雜化效應(yīng)電性效應(yīng)空間效應(yīng)氫鍵效應(yīng)一般來(lái)說(shuō)，空間效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，空間 效應(yīng)居主導(dǎo)地位；共軛效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，共軛效應(yīng)典型化合物 四氫異喹啉 異喹啉苯異丙胺麻黃堿去甲麻黃堿（誘導(dǎo)效應(yīng)） 胡椒堿、秋水仙堿、咖啡堿堿性弱（共軛效應(yīng)） 莨菪堿 山莨菪堿 東莨菪堿鉤藤堿 異鉤藤堿1、其共軛酸因分子內(nèi)氫鍵而穩(wěn)定的是（）A. 小檗堿B.麻黃堿C.鉤藤堿D.東莨菪堿E.山莨菪堿 答案C2、麻黃堿的堿性（pKa9.58）強(qiáng)于去甲麻黃堿（pKa9.O0）的原因是由于A.空間效應(yīng)B.誘導(dǎo)效應(yīng)C.共軛效應(yīng)D.氫鍵作用E.氮原子雜化方式不同答案B 五、沉淀反應(yīng)生物堿在酸性水或稀醇中

19、（苦味酸試劑可在中性條件下進(jìn)行），與某些試劑生成難溶于水的復(fù)鹽或 絡(luò)合物的反應(yīng)稱為生物堿沉淀反應(yīng)。（一）常用的生物堿沉淀試劑試劑名稱組成反應(yīng)特征碘化鉍鉀試劑KBiI 4黃色至橘紅色無(wú)定性沉淀碘化汞鉀試劑K?Hgi4類白色沉淀碘-碘化鉀試劑KI-I 2紅棕色無(wú)定性產(chǎn)點(diǎn)硅鎢酸試劑SiO2-12WQ nH2O淺黃色或灰白色飽和苦味酸試劑2,4,6-三硝基苯酚黃色沉淀或結(jié)晶雷氏銨鹽試劑NF4Cr（ NH3） 2（ SCN 4紅色沉淀或結(jié)晶（二）沉淀反應(yīng)的條件及陽(yáng)性結(jié)果的判定1. 反應(yīng)條件：除苦味酸試劑外，其他生物堿沉淀反應(yīng)一般都在酸性水溶液中進(jìn)行。原因：生物堿在酸性條件下成鹽，易溶于水與沉淀試劑反應(yīng)，

20、所生成沉淀易于觀察。2. 陽(yáng)性結(jié)果的判斷：利用沉淀反應(yīng)鑒別生物堿時(shí)，應(yīng)注意假陰性和假陽(yáng)性反應(yīng)。判定注意事項(xiàng)： 對(duì)生物堿定性鑒別時(shí)，應(yīng)用三種以上試劑分別進(jìn)行反應(yīng)，均陽(yáng)性或陰性方有可信性。 仲胺一般不易與生物堿沉淀試劑反應(yīng)，如麻黃堿、嗎啡、咖啡堿等。 水溶液中如有蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、鞣質(zhì)等亦可與此類試劑產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)，故應(yīng)在被檢液中除 掉這些成分。（具體方法：利用酸提堿沉得方法使生物堿游離，萃取使其與雜質(zhì)分離）3. 沉淀反應(yīng)的應(yīng)用 用于檢查生物堿的有無(wú)。 可用于試管定性反應(yīng)和色譜的顯色劑。 在生物堿的提取分離中可指示提取、分離終點(diǎn)。 個(gè)別沉淀試劑可用于分離純化生物堿，如雷氏銨鹽可用于沉淀分離季銨堿

21、。 某些生物堿沉淀反應(yīng)可用于生物堿的定量，如硅鎢酸試劑反應(yīng)。某些生物堿能與 常用的生物堿顯色劑Mandelin 試劑1%釩酸銨的濃硫酸溶液Macquis 試劑含少量甲醛的濃硫酸Frohde溶劑1%鉬酸納或鉬酸銨的濃硫酸溶液六、顯色反應(yīng)些試劑反應(yīng)生成不同顏色的產(chǎn)物，這些試劑成為生物堿顯色劑莨菪堿及阿托晶顯紅色土的寧顯藍(lán)紫色，奎寧顯淺橙色嗎啡顯紫紅色可待因顯藍(lán)色嗎啡顯藍(lán)色漸轉(zhuǎn)棕色，小糪堿顯棕綠色利血平顯黃色漸轉(zhuǎn)藍(lán)色，烏頭堿顯黃棕色一些顯色劑，如溴麝香草酚藍(lán)、溴麝香草酚綠等，在一定pH條件下能與一些生物堿生成有色復(fù)合物，這種復(fù)合物能被三氯甲烷定量提取出來(lái)，可用于生物堿的含量測(cè)定。生物堿的提取與分離一

22、、總生物堿的提取揮發(fā)性生物堿如麻黃堿可用水蒸氣蒸餾法提取?？缮A的生物堿如咖啡堿可用升華法提取。提取方法溶劑方法純化0.1%1%勺硫酸、鹽酸（1）陽(yáng)離子樹(shù)脂交換法水或酸水提取法或醋酸、酒石酸溶液浸漬（2）萃取法滲漉酸水-堿化-萃取法處理醇類溶劑提取法甲醇、乙醇回流去除脂溶性雜質(zhì)三氯甲烷、苯、乙醚連續(xù)回流親脂性有機(jī)溶劑提取法同上以及二氯甲烷等附：陽(yáng)離子交換樹(shù)脂法將總堿的酸水提取液通過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，使酸水中生物堿陽(yáng)離子交換在樹(shù)脂上，而非生 物堿化合物則 流出柱外，用中性水或乙醇進(jìn)一步洗除柱中的雜質(zhì)。將交換后的樹(shù)脂晾干，用氨水堿化至 pH值為10左右，使生物堿從樹(shù)脂中游離出來(lái)，再用三氯甲烷

23、 或乙醚等有機(jī)溶劑回流提取，回收溶劑即可得到總生物堿。也可用含氨水的乙醇洗脫液直接洗脫，中和洗脫液， 回收乙醇即得總生物堿。二、生物堿的分離（一）生物堿的初步分離將總生物堿按堿性強(qiáng)弱、酚性有無(wú)及是否水溶性初步分成5個(gè)部分，一般分離流程如下：生物堿 的初步分離流程圖總生物堿I以酸水溶解、濾過(guò)酸水諳液| 叫（或H捋（弱堿性生物堿）t申、勞臧性生物威） 1$幸取CHCLS（弱喊性生翔蔽）I12%NaQH 萃取CHCI ：|層CHClJs（非酚性翳械性生物械;誡水層 叫JI處理CHCI：翠眠CHCI：屈（曲性另堿性生物喊）取（水溥ft生巒臧It水屛NH.CI處理CHtJq萃取 chci,s（贈(zèng)性為冊(cè)性

24、生物噪36 / 73（二）生物堿單體的分離1. 利用生物堿的堿性差異進(jìn)行分離 方法：酸水-堿化-萃取法 強(qiáng)堿在弱酸性條件下能形成生物堿鹽，易溶于水；弱堿則需在較強(qiáng)酸性條件下形成生物堿鹽而溶 于水。 成鹽后，弱堿鹽在弱堿條件下即可轉(zhuǎn)變成游離生物堿，易溶于親脂性有機(jī)溶劑；強(qiáng)堿鹽則需在較 強(qiáng)堿性條件下 轉(zhuǎn)變成游離生物堿，溶于親脂性有機(jī)溶劑?？倝A中各生物堿的堿性不同，可用總生物堿溶于親脂性有機(jī)溶劑，pH梯度萃取法進(jìn)行分離。具體方法有兩種：pH由高至低依次萃取，生物堿可按堿性由強(qiáng)至弱先后成鹽依次被萃取出而分離總生物堿溶于酸水，逐步加堿使pH值由低至高分離。對(duì)于堿性有差別的兩種生物堿，可采用調(diào)pH后簡(jiǎn)單萃

25、取法分離。如從洋金花的乙醇浸出液中分離莨菪堿和東萇菪堿，利用二者堿性差別進(jìn)行分離。2. 利用溶解度差異進(jìn)行分離游離生物堿：如苦參中苦參堿和氧化苦參堿的分離。（氧化苦參堿的極性大于苦參堿，難溶于乙醚）漢防己中漢防己甲素和漢防己乙素的分離。（漢防己甲素的極性小于漢防己乙素，可溶于冷苯）生物堿鹽：如麻黃中分離麻黃堿、偽麻黃堿。（在草酸中溶解度不同，麻黃堿溶解度小于偽麻黃堿）3. 利用特殊官能團(tuán)進(jìn)行分離（兩性）：含羧基的生物堿能與碳酸氫鈉生成羧酸鹽而溶于水，可與其他堿分離；酚性生物堿的酚羥基具有弱酸性，可與氫氧化鈉溶液生成鹽溶于水，而與其他非酚性生物堿分離。如在阿片生物堿中，嗎啡具酚羥基而可待因無(wú)酚羥

26、基，可用 5%氫氧化鈉分離。 內(nèi)酯或內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的生物堿可在 堿性水液中加熱開(kāi)環(huán)生成溶于水的羧酸鹽而與其他生物堿分離，在酸性下又環(huán)合成原生物堿而沉淀，如喜樹(shù)堿。4. 利用色譜法進(jìn)行分離（1）吸附柱色譜 常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑，有時(shí)也用纖維素、聚酰胺等。以苯、氯仿、乙醚 等親脂性有機(jī)溶劑或以其為主的混合溶劑系統(tǒng)作洗脫劑。（2）分配柱色譜 對(duì)某些結(jié)構(gòu)特別相近的生物堿，可采用分配色譜法。如三尖杉中的抗癌生物堿三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿的分離，兩者結(jié)構(gòu)僅差一個(gè)亞甲基。具體方法 是以硅膠為支 持劑，以pH5.0緩沖液為固定相，pH5.0緩沖液飽和的三氯甲烷溶液洗脫，首先洗脫的是 高三尖杉酯堿，中間部分是 二者的混合物，最后部分是三尖杉酯堿。5. 高效液相色譜法（HPLC優(yōu)點(diǎn)：分離效能好、靈敏度高、分析速度快