CBL小鼠金紫菱PPT學(xué)習教案

1、會計學(xué)1CBL小鼠金紫菱小鼠金紫菱二、基本特性二、基本特性品系名稱：品系名稱： C57BL/6類別：類別： 近交系小鼠近交系小鼠 毛色毛色 ： 黑色黑色 成熟期（雄性）：成熟期（雄性）： 8-10周周 成熟期（雌性）：成熟期（雌性）： 8-10周周 交配比例交配比例 ： 1:2 發(fā)情周期發(fā)情周期 ： 4-5天天 妊娠期妊娠期 ： 19-21天天 平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第一胎）：平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第一胎）： 6只只 平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第二胎）：平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第二胎）：7只只 哺乳期哺乳期: 21天天 平均日飼料消耗量平均日飼料消耗量: 5g/8周齡周齡 平均日飲水消耗量平均日飲水消耗量: 6-7ml/8

2、周齡周齡 第1頁/共10頁三、飼養(yǎng)條件三、飼養(yǎng)條件1.溫度：溫度：2026。2.濕度：濕度：4070。3.光照：光照：12小時亮小時亮12小時暗。小時暗。4.飼育盒更換頻度：飼育盒更換頻度：配種鼠：每周配種鼠：每周1次。次。帶仔鼠：每周帶仔鼠：每周1-2次。次。離乳鼠：每周離乳鼠：每周1-2次。次。5.水瓶更換頻度：每周水瓶更換頻度：每周1-2次次 第2頁/共10頁四、主要特性四、主要特性、乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)、乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。、有眼部缺陷；雌仔鼠、有眼部缺陷；雌仔鼠. .，雄仔鼠為小眼或無眼。，雄仔鼠為小眼或無眼。用可的

3、松可誘發(fā)腭裂，其發(fā)生率達用可的松可誘發(fā)腭裂，其發(fā)生率達。、對放射物質(zhì)耐受力中等；補體活性、對放射物質(zhì)耐受力中等；補體活性高；較易誘發(fā)免疫耐受性。高；較易誘發(fā)免疫耐受性。、對結(jié)核桿菌敏感。對鼠痘病毒有一、對結(jié)核桿菌敏感。對鼠痘病毒有一定抵抗力。定抵抗力。、干擾素產(chǎn)量較高。、干擾素產(chǎn)量較高。、嗜酒精性高，腎上腺素類脂質(zhì)濃度、嗜酒精性高，腎上腺素類脂質(zhì)濃度低。對百日咳組織胺易感因子敏感。低。對百日咳組織胺易感因子敏感。第3頁/共10頁五、主要用途五、主要用途是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究中常用的品系。遺傳學(xué)研究中常用的品系。與其他品系相較，與其他品系相較，C57BL/

4、6C57BL/6最最適合動脈粥狀硬化傷害的研究適合動脈粥狀硬化傷害的研究。 第4頁/共10頁六、六、C57BLC57BL6 6小鼠小鼠CIACIA模型模型的建立的建立目的：建立穩(wěn)定的目的：建立穩(wěn)定的C57BLC57BL6 6小鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)小鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎炎(CIA)(CIA)模型，構(gòu)建進一步進行類風濕關(guān)節(jié)炎模型，構(gòu)建進一步進行類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)(RA)發(fā)病機制及治療研究的體系。發(fā)病機制及治療研究的體系。實驗動物：近交系實驗動物：近交系C57BLC57BL6(H-2 )6(H-2 )小鼠小鼠4040只，只，雄性，雄性，4 45 5周齡，體重周齡，體重151500+000+032g32g。三

5、級環(huán)境實驗觀察。三級環(huán)境實驗觀察。隨機配對分為隨機配對分為CIACIA模型組模型組2020只，對照組只，對照組2020只。只。第5頁/共10頁主要試劑與器材主要試劑與器材 ：雞：雞型膠原蛋白、弗氏完全佐劑型膠原蛋白、弗氏完全佐劑(complete Freund s adjuvant(complete Freund s adjuvant，CFA)CFA)購自美國購自美國ChondrexChondrex公司；公司；抗小鼠抗小鼠CD4-PECD4-PECY5CY5、IFN-IFN-FITC-FITC、IL-4IL-4一一PEPE及同及同型對照抗體均購自美國型對照抗體均購自美國BiolegendBio

6、legend公司；佛波酯公司；佛波酯(PMA)(PMA)、離子菌素、離子菌素(Ionomycin)(Ionomycin)、莫能菌素、莫能菌素(Monensin)(Monensin)購自美國購自美國SigmaSigma公司。公司。勻漿器為德國勻漿器為德國IKAIKA公司產(chǎn)品；公司產(chǎn)品；流式細胞儀為美國流式細胞儀為美國BDBD公司產(chǎn)品。公司產(chǎn)品。第6頁/共10頁模型建立方法模型建立方法 ：雞雞型膠原蛋白型膠原蛋白溶解于溶解于0 005mol05molL L冰醋酸冰醋酸中，濃度為中，濃度為2mg2mgmlml，將溶解的膠原與，將溶解的膠原與CIACIA等體積混合，等體積混合，冰浴中使用勻漿器充分乳化

7、。冰浴中使用勻漿器充分乳化。免疫動物時，在小鼠尾根部多點皮內(nèi)注射免疫動物時，在小鼠尾根部多點皮內(nèi)注射0 01ml1ml乳劑乳劑( (含含100mg100mg雞雞型膠原蛋白型膠原蛋白和和200mg200mg結(jié)核分支桿菌結(jié)核分支桿菌) )。基礎(chǔ)免疫后第?；A(chǔ)免疫后第2121天以同樣方法重復(fù)，避開初次免疫部位，進行加強免疫。天以同樣方法重復(fù)，避開初次免疫部位，進行加強免疫。同時，對照組用同時，對照組用CFACFA與與0 005mol05molL L冰醋酸等體積充分乳化后冰醋酸等體積充分乳化后按上述方法進行免疫及按上述方法進行免疫及2121天加強免疫。天加強免疫。關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)外病變觀察及關(guān)節(jié)炎評分關(guān)節(jié)和

8、關(guān)節(jié)外病變觀察及關(guān)節(jié)炎評分: :各關(guān)節(jié)病變程度按各關(guān)節(jié)病變程度按5 5級評分法級評分法 “ “0”0”：無紅腫；：無紅腫；“1”1”：關(guān)節(jié)：關(guān)節(jié)紅不腫；紅不腫；“2”2”：關(guān)節(jié)輕度紅腫；：關(guān)節(jié)輕度紅腫；“3”3”：關(guān)節(jié)中度紅腫；：關(guān)節(jié)中度紅腫；“4”4”：關(guān)節(jié)重度紅腫伴功能障礙。：關(guān)節(jié)重度紅腫伴功能障礙。關(guān)節(jié)炎分數(shù)關(guān)節(jié)炎分數(shù)(arthritis score(arthritis score，AS)AS)為每只小鼠所有病變關(guān)為每只小鼠所有病變關(guān)節(jié)分數(shù)的總和，最高分為節(jié)分數(shù)的總和，最高分為1616分。各劑量組所有小鼠關(guān)節(jié)炎分分。各劑量組所有小鼠關(guān)節(jié)炎分數(shù)之總和除以該組小鼠的只數(shù)，即為該組平均關(guān)節(jié)炎指

9、數(shù)數(shù)之總和除以該組小鼠的只數(shù)，即為該組平均關(guān)節(jié)炎指數(shù)(mean arthritic index(mean arthritic index，MAI)MAI)第7頁/共10頁結(jié)果：對照組小鼠均未發(fā)病。結(jié)果：對照組小鼠均未發(fā)病。 模型組小鼠在模型組小鼠在5O5O天的發(fā)病率達天的發(fā)病率達7O%7O%，關(guān)節(jié)炎評，關(guān)節(jié)炎評分在分在3 38 8分，持續(xù)時間大約分，持續(xù)時間大約100100天；天；病理切片顯示典型的炎性細胞浸潤，滑膜增生，軟骨病理切片顯示典型的炎性細胞浸潤，滑膜增生，軟骨及軟骨下骨破壞；外周血及軟骨下骨破壞；外周血Th1Th1Th2Th2比值升高。比值升高。結(jié)論：結(jié)論： 應(yīng)用應(yīng)用型膠原能在型膠

10、原能在C57BLC57BL6 6小鼠上成功建立小鼠上成功建立CIACIA模型，該模型是進行模型，該模型是進行RARA研究的良好動物模型。研究的良好動物模型。膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(collagen induced arthritis(collagen induced arthritis，CIA)CIA)模型是一種免疫炎癥模型，模型是一種免疫炎癥模型，CIACIA的特征是多發(fā)性的特征是多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，發(fā)病機制和病理特征與人類風濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎，發(fā)病機制和病理特征與人類風濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis(rheumatoid arthritis，RA)RA)類似。類似。第8頁/共10頁意義意義：CIACIA的建立極大地推進了的建立極大地推進了RARA發(fā)病機發(fā)病機制、治療等方面的研究。目前對制、治療等方面的研究。目前對RARA發(fā)