生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用課件

1、生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用1生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物 的選擇和應(yīng)用的選擇和應(yīng)用 代代 解解 杰杰 （Tel：8181259；Email: ）生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用2前前 言言 任何科學(xué)研究、醫(yī)療實踐、生物制品的任何科學(xué)研究、醫(yī)療實踐、生物制品的生生產(chǎn)和檢定都離不開實驗動物，為了保證實驗結(jié)產(chǎn)和檢定都離不開實驗動物，為了保證實驗結(jié)果的科學(xué)性、重復(fù)性，必須選擇標(biāo)準(zhǔn)化及與實果的科學(xué)性、重復(fù)性，必須選擇標(biāo)準(zhǔn)化及與實驗?zāi)康南噙m應(yīng)的實驗動物。驗?zāi)康南噙m應(yīng)的實驗動物。 在某種意義上講，選擇適宜的實驗動物在某種意義上講，選擇適宜的實驗動物來來進行實驗，是科

2、學(xué)研究成功的關(guān)鍵。進行實驗，是科學(xué)研究成功的關(guān)鍵。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用3第一節(jié)第一節(jié) 選擇實驗動物的原則選擇實驗動物的原則 實驗動物種類繁多，實驗動物的選擇是一個內(nèi)容復(fù)實驗動物種類繁多，實驗動物的選擇是一個內(nèi)容復(fù)雜雜的問題，不同的實驗有不同的目的問題，不同的實驗有不同的目 的、要求，而各種動的、要求，而各種動物又有各自的生物學(xué)特性和解剖生理特征，因而不能物又有各自的生物學(xué)特性和解剖生理特征，因而不能隨便選一種動物來進行某項實驗研究。事實上，每項隨便選一種動物來進行某項實驗研究。事實上，每項科學(xué)實驗都有其最適合的實驗動物，如果選擇得當(dāng)，科學(xué)實驗都有其最適合的實驗動物，如果選擇

3、得當(dāng)，則可節(jié)約人力、動物和時間，以最小的代價最大限度則可節(jié)約人力、動物和時間，以最小的代價最大限度地獲得可靠的實驗結(jié)果。否則，不僅會造成不必要的地獲得可靠的實驗結(jié)果。否則，不僅會造成不必要的浪費，而且會影響實驗結(jié)果的判斷。因此，掌握正確浪費，而且會影響實驗結(jié)果的判斷。因此，掌握正確的實驗動物選擇方法非常重要。對于生物醫(yī)學(xué)研究而的實驗動物選擇方法非常重要。對于生物醫(yī)學(xué)研究而言，正確選擇實驗動物應(yīng)遵循以下基本原則。言，正確選擇實驗動物應(yīng)遵循以下基本原則。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用4 一、相似性原則一、相似性原則 在動物實驗中，動物的選擇通常依據(jù)對試驗品在動物實驗中，動物的選擇通常依據(jù)

4、對試驗品的敏感程度，或試驗品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化與人體的敏感程度，或試驗品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化與人體的相似性來確定。的相似性來確定。 利用實驗動物某些與人類相近似的特性，通利用實驗動物某些與人類相近似的特性，通過動物實驗對人類的疾病發(fā)生和發(fā)展的規(guī)律進行過動物實驗對人類的疾病發(fā)生和發(fā)展的規(guī)律進行推斷和探索。推斷和探索。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用51結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性 n一般來說，實驗動物進化層次愈高，其功能、一般來說，實驗動物進化層次愈高，其功能、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜，反應(yīng)也愈接近人類。猴、猩猩、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜，反應(yīng)也愈接近人類。猴、猩猩、狒狒、長臂猿等靈長類動物是最類似人的實狒狒、長臂猿等靈長類

5、動物是最類似人的實驗動物。它們是研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、驗動物。它們是研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動物，也痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動物，也是放射醫(yī)學(xué)、牙科學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營是放射醫(yī)學(xué)、牙科學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)的良好動物模型。獼猴生殖生理和人非養(yǎng)學(xué)的良好動物模型。獼猴生殖生理和人非常相似，是人類生殖課題研究的首選動物。常相似，是人類生殖課題研究的首選動物。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用62 2年齡的近似性年齡的近似性 n不同種屬實驗動物的壽命長短不一，但大多不同種屬實驗動物的壽命長短不一，但大多數(shù)比人的壽命短。選擇實數(shù)比人的壽命短。選擇實驗

6、動物時必須了解有驗動物時必須了解有關(guān)動物的壽命，并安排與人的某年齡時期相應(yīng)關(guān)動物的壽命，并安排與人的某年齡時期相應(yīng)的動物進行實驗研究。的動物進行實驗研究。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用7常用實驗動物的壽命常用實驗動物的壽命n動物種類 最長壽命(年) 平均壽命(年)n 猩猩 37 20n 狒狒 24 15n 猴 30 10n 犬 20 10n 貓 30 12n 家兔 15 8n 豚鼠 7 5n 大鼠 5 3n 小鼠 3 2n 豬 27 16n 山羊 18 9n 田鼠 3 2生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用8人和各種實驗動物的年齡對應(yīng)人和各種實驗動物的年齡對應(yīng) 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實

7、驗動物的選擇和應(yīng)用93. 疾病特點的相似性 許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局部或全部地反映出與人類相似的疾病過程臨床表現(xiàn)。其疾病特點，有些可經(jīng)遺傳育種方法逐漸固定于動物品系之中；有些則可用各種手段在動物身上誘發(fā)復(fù)制。可根據(jù)研究目的，選擇合適的疾病動物模型進行實驗研究。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用104. 操作實感的相似性 為臨床操作打基礎(chǔ)的動物實驗，應(yīng)選用與臨床操作較接近的動物。如模擬人類心臟移植，練習(xí)手術(shù)操作的動物實驗，可選擇豬器官作實驗材料，因為豬的心臟形態(tài)大小與人很接近。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用11 二、差異性原則二、差異性原則 利用各種實驗動物在基因型、組織型、代謝

8、型、易感性等特點上的差別，選用不同種系實驗動物的某些特殊反應(yīng)，更適合于不同研究目的的需求。 如：家兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)是分別存在、獨立行走的，而人、豬、犬、貓等減壓神經(jīng)并不單獨行走，如果要觀察減壓神經(jīng)對心臟的作用，選擇家兔更合適。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用12 家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進行條件反射實家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進行條件反射實驗；其汗腺不發(fā)達，不宜選作發(fā)汗實驗；胰腺小，適宜作胰腺驗；其汗腺不發(fā)達，不宜選作發(fā)汗實驗；胰腺小，適宜作胰腺摘除術(shù)；胃小，易作胃導(dǎo)管，便于進行胃腸道生理的研究。摘除術(shù)；胃小，易作胃導(dǎo)管，便于進行胃腸道生理的研

9、究。 大鼠無膽囊，不會嘔吐，不能做膽功能觀察或催吐實驗。大鼠無膽囊，不會嘔吐，不能做膽功能觀察或催吐實驗。 狗、貓、猴等動物嘔吐反應(yīng)敏感，則宜選用。狗、貓、猴等動物嘔吐反應(yīng)敏感，則宜選用。 家兔對體溫變化十分敏感，宜選做發(fā)熱、解熱和檢查熱原家兔對體溫變化十分敏感，宜選做發(fā)熱、解熱和檢查熱原的實驗研究，大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。的實驗研究，大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。 一般動物可自身合成維生素一般動物可自身合成維生素C C，豚鼠則不能合成，因而可用豚鼠則不能合成，因而可用來做來做VcVc缺乏試驗。缺乏試驗。二、差異性原則二、差異性原則生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用13

10、三、易化性原則 在動物實驗過程中，進化程度高、結(jié)構(gòu)功能復(fù)雜的實驗動物，有時會給實驗條件控制和實驗結(jié)果分析帶來難以預(yù)料的困難。因此，在確保研究目標(biāo)的前提下，可選擇結(jié)構(gòu)、功能較簡單的實驗動物。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用14四、相容或相匹配原則 在設(shè)計動物實驗時，所選用的動物質(zhì)量等級要與實驗設(shè)計、實驗條件、實驗者的技術(shù)、方法及試劑性能等相匹配。避免應(yīng)用高精儀器、先進的技術(shù)方法、高純度的試劑與低質(zhì)量、非標(biāo)準(zhǔn)化、反應(yīng)性能低的動物相匹配，或利用低性能的測試手段、非標(biāo)準(zhǔn)化的實驗設(shè)施與高質(zhì)量、高反應(yīng)性能的動物相匹配。如果將經(jīng)過微生物控制的SPF動物或無菌動物購回后，飼養(yǎng)在普通環(huán)境中進行實驗，無疑

11、也是對實驗動物資源的一種浪費。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用15五、可獲性原則 實驗大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用量多，用途最廣的實驗動物。而靈長類大型實驗動物，雖然在許多方面有著不可替代的優(yōu)越性，但由于繁殖周期長，繁殖率低，飼養(yǎng)管理困難，價格昂貴等因素而影響了其易獲性，不能得到普及使用。在不影響實驗質(zhì)量的前提下，選用最易獲得、最經(jīng)濟、最易飼養(yǎng)管理的動物是實驗研究時必須堅持的原則。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用16六、重復(fù)性和均一性原則 重復(fù)性和均一性是實驗結(jié)果可靠、穩(wěn)定的重要保證。生物醫(yī)學(xué)實驗應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物，才能排除因遺傳上的不均質(zhì)引起的個體反應(yīng)差異，排除動物所攜帶微生物

12、、寄生蟲和潛在疾病對實驗結(jié)果的影響，獲得可靠的實驗結(jié)果，并便于在國際上與同類研究進行比較和交流。在標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物中，近交系n代動物、突變系動物均有很好的遺傳均質(zhì)性，個體差異小，而SPF動物則是排除了一切疾病影響的健康動物。醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中應(yīng)杜絕使用隨意交配而來的雜種動物或未經(jīng)任何微生物控制的非標(biāo)準(zhǔn)動物。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用17第二節(jié)第二節(jié) 選擇實驗動物應(yīng)注意選擇實驗動物應(yīng)注意的問題的問題 動物對外界刺激的反應(yīng)存在著個體差異。為了減少實驗誤差，在動物的選擇上還應(yīng)注意動物年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況及動物品系、等級等因素。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用18一、年齡

13、與體重 年齡是一個重要的生物量，實驗動物的機體反應(yīng)性隨年齡而有明顯變化。幼年動物往往較成年動物敏感。不同年齡尤其是年齡差距較大的動物，對藥物的毒性反應(yīng)亦有差異。因此，急性毒性試驗規(guī)定小鼠體重在1822g，其目的在于減少由體重、年齡差距造成的影響。 同一實驗中，動物體重應(yīng)盡可能一致，若相差懸殊，則易增加動物反應(yīng)的個體差異，影響實驗結(jié)果的正確性。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用19 二、性別 實驗動物對藥物的毒性反應(yīng)有性別差異，并主要表現(xiàn)在成年動物。一般而言，雌性動物對藥物的敏感性高于雄性，但隨著受試物不同而異。 在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中，通常選擇實驗動物應(yīng)雌雄各半。若發(fā)現(xiàn)有明顯的性別差異時，則應(yīng)分

14、別測定不同性別實驗動物的LD50值。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用20三、生理及功能狀態(tài) 實驗動物在處于特殊的生理狀態(tài)如懷孕、哺乳時，其體重及某些生理生化指標(biāo)將有所不同。一般實驗研究不宜采用懷孕、哺乳的實驗動物。但為了某種特定的實驗?zāi)康?，如為了闡明藥物對妊娠及產(chǎn)前胎兒的影響時，就必須選用妊娠和哺乳期的實驗動物。 環(huán)境條件可影響實驗動物的生化指標(biāo)。如：在1517溫度下禁食12h的成年大鼠，腎上腺的維生素C含量為306mg100g，但在2022狀態(tài)下飼養(yǎng)10d，腎上腺的維生素C含量則升為456mg100g 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用21四、健康狀況 動物健康狀況對實驗結(jié)果正確與

15、否有直接的影響?；疾游飳λ幬锏哪褪苄暂^健康動物小，因而患病動物容易在實驗過程中中毒死亡。為確保實驗動物健康，要做好實驗前的動物健康檢查工作。對于實驗動物疾病，原則上只作預(yù)防，不作治療。但對于一些珍貴的動物，發(fā)現(xiàn)異常表現(xiàn)時，應(yīng)確診其疾病，并采取相應(yīng)的防治措施。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用22五、品系與等級 品系和等級能分別表示實驗動物按遺傳學(xué)控制和微生物控制的標(biāo)準(zhǔn)化條件。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用23第三節(jié) 動物實驗準(zhǔn)備與描述 動物實驗準(zhǔn)備是決定動物實驗成敗的一個重要環(huán)節(jié)，而動物實驗的描述則關(guān)系到研究論文質(zhì)量高低。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用24 一、動物

16、實驗的準(zhǔn)備與管理 1. 動物實驗室(實驗?zāi)康?、實驗?guī)模、動物實驗周期）2.實驗室面積（動物種類、數(shù)量和飼養(yǎng)時間，對室內(nèi)溫度、 濕度、氨濃度等環(huán)境條件的調(diào)控）3.標(biāo)準(zhǔn)動物實驗室（實驗前的徹底清洗與消毒）4.動物的器具、器材（飲水瓶籠盒及蓋至少準(zhǔn)備2套，準(zhǔn)備好籠卡、記錄本、墊料、飼料、臺秤、溫度計、濕度計等必需物品） 5. 實驗過程中應(yīng)按設(shè)計要求和飼養(yǎng)操作規(guī)程進行飼養(yǎng)管理 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用25二、動物的購入 從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實驗動物供應(yīng)單位訂購所需要的實驗動物。購人時，應(yīng)向供應(yīng)單位及時索取動物的遺傳背景、微生物背景、質(zhì)量合格證、動物年齡、體重、健康營養(yǎng)狀況等資料，必要時

17、要求對方提供方便運輸?shù)挠嘘P(guān)證明材料。 購入動物回本單位后，檢測動物運輸容器是否完好，驗收確認動物是否與訂購要求一致，發(fā)現(xiàn)并剔除異常動物。雌雄分開，隔離飼養(yǎng)一段時間，使購入動物適應(yīng)新的飼養(yǎng)環(huán)境。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用26三、動物實驗的描述 動物實驗研究報告或論文中關(guān)于實驗動物和動物實驗的描述主要有以下內(nèi)容。 1.實驗動物種名 論文題目應(yīng)標(biāo)明實驗動物種名2.實驗動物的品種(系) 3.實驗動物來源、遺傳背景、微生物背景4.實驗動物和動物實驗設(shè)施合格證 5.實驗動物體重、性別、年齡。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用27三、動物實驗的描述6.實驗室環(huán)境 溫度、濕度、照度、噪聲、

18、光照 周期、氨濃度、季節(jié)等應(yīng)描述清楚。如果使 用的是清潔級以上環(huán)境，還應(yīng)敘述換氣次數(shù)、 壓差、潔凈等級等內(nèi)容。7.動物飼養(yǎng)方式 （密度、墊料、飼料飲水、籠盒等）8.技術(shù)路線方式（給藥方式，腹腔注射，手術(shù)過程等）9.其他說明的內(nèi)容（麻醉和麻醉方法，取材方法，材料 固定液，動物處死方法等） 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用28三、動物實驗的描述 總之，動物實驗的描述應(yīng)全面、詳細、準(zhǔn)確、簡練。對實驗動物和動物實驗描述清楚的研究論文，不僅可避免學(xué)術(shù)交流中爭論，而且可提高論文質(zhì)量，對于從事系列研究和高、精、尖的研究尤為重要。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用29 第四節(jié) 生物醫(yī)學(xué)研究中實驗動物

19、應(yīng)用 一、免疫學(xué)研究中實驗動物的選擇 (一)大鼠: 大鼠對綿羊紅細胞和牛r球蛋白的免疫反應(yīng)有品系差異。大鼠有抗體IgE,蠕蟲感染常能誘發(fā)大量的IgE抗體，它們存在于血液循環(huán)中,常規(guī)的免疫法只能使大鼠產(chǎn)生少量的抗體，在體內(nèi)存在的時間較短。百日咳桿菌免疫大鼠主要產(chǎn)生IgE,如在此抗原中加入福氏完全佐劑，免疫大鼠則產(chǎn)生IgG。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用30 (二)小鼠： 小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgGI、IgG2a和IgG2b。 小鼠很少見到典型的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，也不象其它動物那樣有規(guī)律。能誘發(fā)速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，其全身性過敏反應(yīng)的特點是循環(huán)不暢，循環(huán)性虛脫，常在幾小時甚至

20、10到 20 分鐘死亡。BALB/c小鼠常用于制備單克隆抗體。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用31(三)豚鼠： 豚鼠中已確定的免疫球蛋白有：IgG(IgGI、IgG2)、IgA和IgE。IgGI 是變態(tài)反應(yīng)的媒介，IgG2在抗原抗體的反應(yīng)中起結(jié)合補體的作用。 豚鼠除作為補體的來源外，還被用于結(jié)核菌素的皮內(nèi)試驗和接觸過敏物質(zhì)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的研究。豚鼠和人的結(jié)核菌素反應(yīng)差別是有無細胞浸潤，另外豚鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)在24-48h達到高峰，人在48-96h達到高峰。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用32(四)兔： 新西蘭白兔常用于實驗室制備抗體，及被用來作過敏反應(yīng)的研究。由 IgG和Ig

21、E引出的過敏反應(yīng)臨床癥狀相似,機理都是抗原抗體結(jié)合和血小板白細胞凝集形成沉淀物，釋放藥理活性物質(zhì)(組織胺和5-羥色胺)進入肺循環(huán)，在右心的流出道中產(chǎn)生一種機械和藥理的聯(lián)合作用，導(dǎo)致循環(huán)性虛脫。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用33 (五)狗： 狗的免疫球蛋白有IgG、IgM、IgA、IgG1、IgG2。 在狗花粉病和各種蠕蟲感染中發(fā)現(xiàn)IgE。 Lewis等認為狗對顆粒性抗原能較好地產(chǎn)生抗體,但新生狗初次免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM類,成年狗產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM和IgG,這兩種球蛋白的數(shù)量與初生狗的IgM幾乎相等。新生狗在再次反應(yīng)中能合成IgG和IgM。 除人之外，狗是研究人的變態(tài)反應(yīng)

22、和氣喘的適宜的實驗?zāi)Ｐ?。狗由豚草花?Raweed pillens)致敏后，血液和皮膚中出現(xiàn)IgE抗體。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用34二、腫瘤學(xué)研究中實驗動物的選擇 (一)昆明小鼠 肉瘤180（S180)、肉瘤37(S37)、艾氏癌腹水型(EAC)、艾氏癌實體型(EC)、肝癌實體型(Heps)、Harding-Passey黑色素瘤等，可接種昆明小鼠制備實驗?zāi)[瘤模型。(二)615小鼠: 用于小鼠網(wǎng)織細胞白血病L615的實驗?zāi)Ｐ汀?三)DBA/2小鼠: 用于小鼠淋巴細胞白血病L1210的實驗?zāi)Ｐ汀?四)C57BL/6小鼠: 用于Lewis肺癌，黑色素瘤B16，小鼠乳腺癌 M5076的

23、實驗?zāi)Ｐ汀?五)Wistar大鼠: 用于瓦克癌肉瘤W256，軟骨肉瘤，吉田肉瘤 腹水型的實驗?zāi)Ｐ汀?生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用35 三、藥理學(xué)研究中實驗動物的選擇 藥理學(xué)研究中一般選用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等。 (一)急性毒性試驗 常用小鼠，體重1822g，雌雄均可。每次510只，尾靜脈注射或腹腔注射一定劑量藥液，觀察有無不良反應(yīng)(如驚厥、四肢癱瘓、步伐不穩(wěn)、豎毛、呼吸抑制等)或死亡現(xiàn)象。一般觀察2448小時。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用36(二)亞急性和慢性毒性試驗 可選小鼠，方法和急性毒性試驗基本相似，但劑量小，小鼠按體重計算每天用人用劑量的2050倍口服或腹腔注射，

24、連續(xù)觀察18周。慢性毒性試驗則需36個月。觀察體重、進食量、進水量的變化，以及有無其它不良反應(yīng)或死亡( 包括內(nèi)臟肉眼觀察或組織切片檢查)。必要時作血象、肝腎功能化驗檢查。該項實驗也常用大鼠。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用37(三)半數(shù)致死量的測定 簡稱LD50.表示藥物的毒性時比較靈敏準(zhǔn)確。一般以每Kg多少mg表示(藥物劑量/體重)。臨床應(yīng)用時一般取1/51/10 LD50開始試用，觀察毒性和療效。由小劑量，到大劑量逐步試用至不能耐受為止。 測定LD50時常選用小鼠，體重1822g,雌雄均可,每次實驗需30-60只，一般分56組，每組610只。給藥途徑與臨床應(yīng)用相同，有口服、腹腔注射

25、、靜脈注射。給藥容量以每鼠0.5ml左右為宜。根據(jù)藥物出現(xiàn)作用的快慢，一般觀察14d或2472小時。 以死亡為主要指標(biāo)。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用38(四)過敏試驗 取豚鼠6只，體重250350g，隔日腹腔注射藥液0.5ml，共注射 3次。然后分成2組，分別在第一次注射藥物的第14天及21天再從頸靜脈注射原藥液1ml。如有過敏反應(yīng),則在注射藥物后幾分鐘內(nèi)，豚鼠表現(xiàn)興奮不安，呼吸困難，迅速窒息死亡。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用39(五)熱原檢查 熱原是由細菌產(chǎn)生的一種毒素。注射劑中若含有熱原，會使人發(fā)燒。 檢查熱原使用的動物是家兔，一般選用3只，體重1.5kg以上，注射藥

26、物前測量肛門體溫3次,取平均值(家兔的正常體溫38.539.6)。然后耳靜脈注射藥液(12ml/Kg),注射藥物后1小時、2小時、3小時各測體溫1次。如3兔體溫升高均不超過0.6,即合格,說明無熱原。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用40四、其它醫(yī)學(xué)研究中實驗動物的選擇 (一)計劃生育中實驗動物的選擇 常選用成年大白鼠，靈長類動物等，如觀察藥物對實驗動物的生殖率、精子數(shù)、精子活動力以及對雄性激素的影響，和雌性的生殖與避孕以及雌性激素的影響。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用41(二) 病毒學(xué)研究中實驗動物的選擇 病毒學(xué)研究中常選用的實驗動物有金黃地鼠、小白鼠、豚鼠、家兔、綿羊、禽類、

27、猴等。分離病毒廣泛使用的是乳鼠，它對柯薩琪病毒、呼吸道病毒和蟲媒病毒感染有很高的易感性。 選用實驗動物不僅考慮它的易感性，還考慮接種途徑，例單純皰疹病毒的易感動物為家兔、豚鼠，接種途徑分別是角膜、腦內(nèi)和肉趾。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用42 實驗動物在人類病毒學(xué)發(fā)展史上起重要作用,主要用作分離病毒、抑制病毒的藥物篩選、疫苗效果及安全性鑒定、制備病毒診斷試劑等。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用431. 黃熱病毒 靈長類動物都易感，最為敏感的動物是恒河猴。 小鼠對黃熱病毒也敏感，純血清接種的小白鼠尚能存活，而以稀釋血清接種的小白鼠卻于較短時間死亡。這一奇特現(xiàn)象的理由，可能是由于病

28、人體內(nèi)血清抗體早期出現(xiàn)之故。應(yīng)用純血清時，這些抗體中和了病毒的作用，而當(dāng)應(yīng)用稀釋血清時，抗體濃度不足，但病毒在稀釋后仍然具有活力。 生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用44 2. 乙腦病毒 乙腦病毒屬于披蓋病毒的B組蟲蝶病毒。實驗室內(nèi)，乳鼠和成年小白鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，腹腔內(nèi)接種后乳鼠發(fā)生致死性腦炎。恒河猴、食蟹猴和成年倉鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，但周圍途徑接種時只發(fā)生無癥狀的病毒血癥。豚鼠和兔腦內(nèi)或周圍接種，蝙蝠、小雞、和蒼鷺周圍接種后都只發(fā)生無癥狀的病毒血癥。蝙蝠可保持感染，經(jīng)過冬眠后重新發(fā)生病毒血癥。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用45 3. 脊髓灰質(zhì)炎病毒 恒河猴、長

29、尾猴類以及狒狒類對脊髓灰質(zhì)炎病毒較敏感。模型動物的接種方法可用腹腔注射、坐骨神經(jīng)附近的深部肌肉注射、鼻腔滴注。實際操作中最好以不同方法混合接種。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用464.流感病毒 屬于正粘液病毒屬。動物模型最好選用雪貂，也可用小白鼠、 金黃地鼠、豚鼠、猴及豬。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用475.麻疹病毒 除靈長類外，一般動物均不易感。1911年首次成功的傳給獼猴。 以后證明，除了接種和吸入外，其它種類的猴，如：猿類、恒河猴、崇猴、爪哇猴、矮猴等，對各種不同接種途徑也易感染。其癥狀類似人類麻疹。潛伏期為3-22天，病毒血癥期為4-15天，約一半動物有皮疹、結(jié)膜炎、卡它和發(fā)熱。生物醫(yī)學(xué)研究課題中實驗動物的選擇和應(yīng)用486. 甲型和乙型肝炎病毒 狨猴、黑猩猩、紅面猴對HAV均易感，經(jīng)口或靜脈注射接種病毒后，可產(chǎn)生肝炎。 黑猩猩是HBV的易感動物,狨猴雖可感染但不如前者敏感。因此用黑猩猩研究HBV的發(fā)病機理、檢測自動免疫、被動免疫的效果以及HB