VEGF在早期腎癌免疫治療中的作用

1、VEGF在早期腎癌免疫治療中的作用 摘要 目的 探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在早期腎癌免疫治療中的作用。方法 采用免疫組化方法檢測(cè)50例腎癌組織的表達(dá)情況。17例VEGF表達(dá)陽(yáng)性者術(shù)后行干擾素(INF)300萬(wàn)IU隔天皮下注射，12周為1個(gè)療程。對(duì)照組未進(jìn)行免疫治療。結(jié)果 50例腎癌組織中VEGF表達(dá)陽(yáng)性33例(66%)；免疫治療組與未治療組在5年腫瘤進(jìn)展方面差異有顯著性。結(jié)論 VEGF可以作為早期腎癌進(jìn)行免疫治療的判斷指標(biāo)。 關(guān)鍵詞 VEGF；腎癌；免疫治療 Effect of VEGF expression in early renal cell cancer before immun

2、otherapied Abstract Objective To evaluate the effect of VEGF expression in early renal cell cancer before immunotherapied.Methods VEGF immunostaining was successfully performed in 50 cases.17 cases with positive VEGF expression were subcutaneous injected INF 300IU Qod.A course of treatment was 12 we

3、eks.Cases with negative VEGF expression were not immunotherapied.Results The positive rates of VEGF expression in RCC was 66%(33/50).There was significant correlation in the 5 year tumor progression.Conclusion VEGF was an early immunotherapeutic factors in early RCC. Key words vascular endothelial g

4、rowth factor；renal cell cancer；immunotherapy 目前發(fā)現(xiàn)功能最強(qiáng)、特異性最高的促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖的生長(zhǎng)因子是內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）。我們應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)腎癌組織中VEGF的表達(dá)，并根據(jù)VEGF表達(dá)的情況制訂下一步的治療方案，探討它在早期腎癌免疫治療中的作用。 1 資料與方法 11 一般資料 取分院和總院1996年6月2005年6月手術(shù)治療的原發(fā)性腎細(xì)胞癌標(biāo)本（經(jīng)病理證實(shí)）50例，其中男37例，女13例；年齡2180歲，平均517歲；均為單側(cè)發(fā)病，左側(cè)27例，右側(cè)23例；術(shù)前結(jié)合B超、CT或MRI確診為早期腎癌（T1T2N0M0）；均行腎癌根

5、治術(shù)。將VEGF表達(dá)陽(yáng)性者隨機(jī)分為兩組，其中一組17例術(shù)后行干擾素（IFN）300萬(wàn)IU隔天皮下注射，12周為1個(gè)療程，休息24周重復(fù)同樣治療23個(gè)療程；每2周復(fù)查肝功能、腎功能和血常規(guī)。另一組16例VEGF表達(dá)陽(yáng)性者和VEGF表達(dá)陰性者分別作為對(duì)照組，未進(jìn)行免疫治療。隨訪12131個(gè)月，平均563個(gè)月。 12 免疫組織化學(xué)方法及結(jié)果判定 SP超敏試劑盒：購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。抗體：鼠抗人VEGF多克隆抗體（150），購(gòu)自Santa Cruz公司；兔抗人VWF單克隆抗體(1400)，購(gòu)自DAKO公司。 重新閱片，并找到相應(yīng)的石蠟包埋塊。然后將石蠟包埋塊連續(xù)切片3張，厚4 ，分別做HE染

6、色、免疫組化染色及空白對(duì)照。 VEGF陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：顯微鏡下觀察，參照Bot1等方法對(duì)結(jié)果判斷，以腫瘤細(xì)胞膜或胞漿著色淺黃色、棕黃色或棕褐色者為陽(yáng)性細(xì)胞。以每張切片中隨機(jī)4個(gè)高倍鏡(40×)視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%為陽(yáng)性切片。胞漿或胞膜著色10%或未著色者為陰性。 13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 100對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所得的計(jì)量資料和計(jì)數(shù)資料進(jìn)行分析。P005認(rèn)為差異有顯著性。 2 結(jié)果 21 VEGF在腎癌中的表達(dá) 按2002 UICC及AJCC標(biāo)準(zhǔn)劃分：組織類(lèi)型：透明細(xì)胞癌32例，乳頭狀細(xì)胞癌13例，嫌色細(xì)胞癌5例。50例腎癌組織中VEGF表達(dá)陽(yáng)性33例(66%)(見(jiàn)圖1)，VEGF表

7、達(dá)在組織類(lèi)型中差異無(wú)顯著性（P0333，P005），其關(guān)系見(jiàn)表1。表1 VEGF表達(dá)與組織類(lèi)型的關(guān)系 （略） 22 治療和隨訪結(jié)果 VEGF表達(dá)陽(yáng)性免疫治療組與未治療組比較，見(jiàn)表2。VEGF表達(dá)陽(yáng)性免疫治療組：無(wú)一例因明顯并發(fā)癥而終止治療。1年隨訪：腫瘤進(jìn)展：復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或死亡1例；5年隨訪：復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或死亡1例。VEGF表達(dá)陽(yáng)性未治療組與VEGF表達(dá)陽(yáng)性組的比較，見(jiàn)表3。VEGF表達(dá)陽(yáng)性未治療組：1年隨訪：腫瘤進(jìn)展1例；5年隨訪：腫瘤進(jìn)展6例。VEGF表達(dá)陰性未治療組：1年隨訪：腫瘤進(jìn)展1例；5年隨訪：腫瘤進(jìn)展2例。 表2 VEGF表達(dá)陽(yáng)性免疫治療組與未治療組的比較 （略） 3 討論 由于VE

8、GF具有特異的促血管生長(zhǎng)潛力，臨床上廣泛研究了它在腎癌中表達(dá)的意義。Paradis等2應(yīng)用免疫組化法研究VEGF在RCC中的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)VEGF陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤分級(jí)和大小密切相關(guān)。研究還表明3，VEGF表達(dá)強(qiáng)的腫瘤，比VEGF表達(dá)弱的病人病情發(fā)展迅速、復(fù)發(fā)快、術(shù)后無(wú)復(fù)發(fā)、生存時(shí)間短。因此，認(rèn)為組織和血液中VEGFmRNA表達(dá)和(或)蛋白水平可作為評(píng)價(jià)腫瘤狀況和預(yù)后不良的指標(biāo)4。因此本組研究也是建立在以上的理論基礎(chǔ)之上的。 本組研究中，VEGF表達(dá)在細(xì)胞類(lèi)型之間差異無(wú)顯著性，說(shuō)明血管形成與組織來(lái)源無(wú)關(guān)，癌細(xì)胞類(lèi)型對(duì)血管形成無(wú)決定性作用。 對(duì)于晚期腎癌采用免疫治療已經(jīng)得到大家的認(rèn)可，但是否對(duì)早期的

9、腎癌患者應(yīng)該采用免疫治療大家仍有爭(zhēng)議。常用的免疫制劑有IFN、IL-2等，IFN的抗腫瘤機(jī)制5：（1）上調(diào)腫瘤細(xì)胞MHC-I類(lèi)抗原表達(dá)，增強(qiáng)NK細(xì)胞及巨噬細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的能力；（2）直接抑制腫瘤細(xì)胞增殖；（3）抗血管生長(zhǎng)作用。大量的VEGF促進(jìn)大量的腫瘤血管生成，提供更多的營(yíng)養(yǎng)支持腫瘤的生長(zhǎng)，IFN的抗血管生長(zhǎng)作用阻止腎癌的進(jìn)展。鑒于VEGF是腎癌預(yù)后的重要指標(biāo)，我們用它來(lái)確定是否進(jìn)行免疫治療。在本文研究中，VEGF表達(dá)陽(yáng)性采用免疫治療組在1年腫瘤進(jìn)展差異無(wú)顯著性（P00477），但在5年差異有顯著性（P0039）；而VEGF表達(dá)陽(yáng)性未采用免疫治療組與VEGF表達(dá)陰性未治療組在腫瘤進(jìn)展方面無(wú)

10、差異，這就說(shuō)明了VEGF表達(dá)陽(yáng)性的早期腎癌術(shù)后行免疫治療是有益于患者的。 綜上所述，我們認(rèn)為VEGF可以作為早期腎癌進(jìn)行免疫治療的判斷指標(biāo)。 參考文獻(xiàn) 1 Bot FJ，Godschalk JCJ，Keihuadth KK，et al.Prognostion factors in renal cell carcinoma immunohistochemical detection of P53 protein versus clinicopathaological parameters.Int J Cancer，1994，57(5):634-637. 2 Paradis V，Lagha NB，

11、Zeimoura L，et al.Expression of vascular endothelial growth factor in renal cell carcinoma.Virchows Arch，2000，436(4):351-356. 3 Folkman J.The influence of angiogenesis research on management of patients with breast cancer.Breast Cancer Res Treat，1995，36:109-112. 4 Nicol D，Hii SI，Walsh M，et al.Vascular endothelial growth factor expression is increased in renal cell carcinoma.J Urol，1997，157:1452-14