土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)時(shí)PPT課件

1、第1頁(yè)/共20頁(yè)自主學(xué)習(xí)，發(fā)現(xiàn)問題自主學(xué)習(xí)，發(fā)現(xiàn)問題閱讀課本閱讀課本P23-P26，根據(jù)導(dǎo)學(xué)案，根據(jù)導(dǎo)學(xué)案的提示，完成以下問題。的提示，完成以下問題。1.1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括哪些內(nèi)容？實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括哪些內(nèi)容？2.2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的流程是什么？實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的流程是什么？3.3.每一步是如何操作的？注意事每一步是如何操作的？注意事 項(xiàng)是什么？項(xiàng)是什么？4.4.如何進(jìn)行結(jié)果分析與評(píng)價(jià)？如何進(jìn)行結(jié)果分析與評(píng)價(jià)？第2頁(yè)/共20頁(yè)小組討論，啟發(fā)思維小組討論，啟發(fā)思維小組互對(duì)答案，對(duì)有疑問小組互對(duì)答案，對(duì)有疑問的問題相互討論，并確定的問題相互討論，并確定發(fā)言人，按導(dǎo)學(xué)案上的要發(fā)言人，按導(dǎo)學(xué)案上的要求完成本組的問題展示。求

2、完成本組的問題展示。第3頁(yè)/共20頁(yè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括對(duì)、和，以及等的綜合考慮和安排。實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案所需儀器所需儀器材料材料用具用具藥品藥品具體的實(shí)施步驟具體的實(shí)施步驟時(shí)間安排時(shí)間安排學(xué)生展示，老師點(diǎn)撥，突破難點(diǎn)學(xué)生展示，老師點(diǎn)撥，突破難點(diǎn)第4頁(yè)/共20頁(yè)一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程土壤取樣制備培養(yǎng)基樣品稀釋取樣涂布微生物的培養(yǎng)與觀察細(xì)菌計(jì)數(shù)第5頁(yè)/共20頁(yè)注意事項(xiàng)：取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。二二.實(shí)驗(yàn)的具體操作及注意實(shí)項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的具體操作及注意實(shí)項(xiàng) 從從肥沃、濕潤(rùn)、酸堿度接近中性肥沃、濕潤(rùn)、酸堿度接近中性的土壤中取樣。先的土壤中取樣。先鏟去表層土鏟去表層土3cm3cm左右

3、，再在距離地表左右，再在距離地表3cm-8cm3cm-8cm處取樣，處取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。制備以尿素為唯一氮源的制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基和牛肉膏選擇培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨培養(yǎng)基。注意事項(xiàng)：倒平板時(shí)要冷卻到注意事項(xiàng)：倒平板時(shí)要冷卻到50 ，且，且要在要在酒精燈火焰旁酒精燈火焰旁進(jìn)行。進(jìn)行。第6頁(yè)/共20頁(yè)第7頁(yè)/共20頁(yè)測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104 ，105 ，106 測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用103 ，104 ，105 測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用102 ， 103 ， 104 為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？為什么

4、分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？第8頁(yè)/共20頁(yè)注意事項(xiàng)： 實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)培養(yǎng)皿作好標(biāo)記。注明培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、培養(yǎng)物等。注意事項(xiàng)： 涂布器和移液管要保持無(wú)菌。30300第9頁(yè)/共20頁(yè)在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。包括：形狀、大小、隆起程度和顏色。第10頁(yè)/共20頁(yè)第11頁(yè)/共20頁(yè)第12頁(yè)/共20頁(yè)第13頁(yè)/共20頁(yè)內(nèi)容內(nèi)容現(xiàn)象現(xiàn)象結(jié)論結(jié)論有無(wú)雜菌污有無(wú)雜菌污染的判斷染的判斷對(duì)照的培養(yǎng)皿中無(wú)菌對(duì)照的培養(yǎng)皿中無(wú)菌落生長(zhǎng)落生長(zhǎng)培養(yǎng)物中菌落數(shù)偏高培養(yǎng)物中菌落數(shù)偏高菌落形態(tài)多樣，菌落菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高數(shù)偏高選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基的篩選作用的篩選作用選擇培養(yǎng)基具

5、有篩選作用選擇培養(yǎng)基具有篩選作用樣品的稀釋樣品的稀釋操作操作操作成功操作成功重復(fù)組的結(jié)果重復(fù)組的結(jié)果若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)培養(yǎng)基未被雜菌污染培養(yǎng)基未被雜菌污染被雜菌污染被雜菌污染被雜菌污染或被雜菌污染或混入其他氮源混入其他氮源牛肉膏培養(yǎng)基上的牛肉膏培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目大于選擇菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目培養(yǎng)基上的數(shù)目得到三個(gè)或三個(gè)得到三個(gè)或三個(gè)以上菌落數(shù)目在以上菌落數(shù)目在30300的平板的平板接近接近第14頁(yè)/共20頁(yè)第15頁(yè)/共20頁(yè)3.3.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是( )( )A.A.篩選出能分解尿素的細(xì)菌B.B.對(duì)分離的菌種作進(jìn)一

6、步鑒定C.C.作細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)成分 D.D.如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素當(dāng)堂檢測(cè)當(dāng)堂檢測(cè)1.1.能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是( )( )A.A.稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 B.B.直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)法C.C.重量法重量法 D.D.比濁法比濁法2.2.下列操作步驟順序正確的是下列操作步驟順序正確的是( )( )土壤取樣稱取土壤取樣稱取10g10g土樣，加入盛有土樣，加入盛有90mL90mL無(wú)菌水的錐形瓶無(wú)菌水的錐形瓶中吸取中吸取0.1mL0.1mL土壤溶液進(jìn)行平板涂布依次稀釋至土壤溶液進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、 102 、 103 、104 、105 、10

7、6 、107稀釋度稀釋度A.A. B. B.C.C. D. D.ACB第16頁(yè)/共20頁(yè)4.(2016四川，10)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_為唯一氮源,鑒別培養(yǎng)基還需添加_作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成_色。(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為163、156、262、178和191。該過程采取的接種方法是_ ，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較_。尿素尿素酚紅酚

8、紅紅紅稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 1.91.9少少第17頁(yè)/共20頁(yè)5.(20155.(2015浙江自選模塊，1717節(jié)選) )某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑，對(duì)該酶菌株進(jìn)行篩選，其流程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題：(1)(1)土壤懸液首先經(jīng)8080處理1515分鐘，其目的是篩選出_。(2)(2)在無(wú)菌條件下，將經(jīng)過處理的土壤懸液進(jìn)行_，然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到_(3)(3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是_。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比，不含有的成分是_。土樣中的菌種篩選土樣中的菌種篩選菌株鑒定菌株鑒定優(yōu)良菌株擴(kuò)大培養(yǎng)優(yōu)良菌株擴(kuò)大培養(yǎng)植酸酶提純植酸酶提純植酸酶固定化植酸酶固定化植酸酶特性分析植酸酶特性分析耐高溫菌株耐高溫菌株稀釋稀釋單個(gè)菌落單個(gè)菌落供氧供氧瓊脂瓊脂第18頁(yè)/共20頁(yè)課后作業(yè)課后作業(yè)（一）空氣中微生物總數(shù)的檢測(cè)