紅景天多糖對老年小鼠免疫功能的影響

1、紅景天多糖對老年小鼠免疫功能的影響 作者：羅文哲 王建杰 阮陽 商宇【摘要】 目的 探討中藥紅景天多糖在免疫功能調(diào)節(jié)方面的作用機制。方法 應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)、放射免疫和ELISA方法檢測老年小鼠免疫功能T淋巴細(xì)胞亞群，外周血白介素2（IL2）含量及免疫球蛋白G（IgG）的含量。結(jié)果 紅景天多糖對老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群、外周血IL2含量及抗體形成均有增強作用（P<0.05）。結(jié)論 紅景天多糖能夠提高老年小鼠的免疫功能，是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑。 【關(guān)鍵詞】 紅景天多糖；TLC亞群；IL2；IgG紅景天含有多種生物活性成分，有良好的抗疲勞、抗衰老、抗缺氧、抗氧化作用1。大量研究證實紅景天

2、中所含的多糖成分具有特殊而明確的生理活性和藥理作用。本實驗通過檢測老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)目和比值，白介素2(IL2)的活性及IgG含量，探討紅景天多糖對老年小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。 1 材料與方法 1.1 主要試劑與藥品 抗小鼠CD3、CD4、CD8單克隆抗體：北京醫(yī)科大學(xué)免疫系；IL2試劑盒：解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所； IgG酶聯(lián)免疫試劑盒：北京邦定生物試劑公司；紅景天：佳木斯藥材公司。超聲波法提取紅景天多糖2。 1.2 實驗方法 昆明系小鼠30只、清潔級，雌雄各半，青年組2月齡10只,體重（20±2）g,老年組12月齡20只,體重(50±5）g，購于本校實驗動

3、物中心。分為3組，每組10只，青年對照組:生理鹽水0.5 ml灌胃；老年小鼠模型組：生理鹽水0.5ml灌胃；紅景天多糖組：紅景天多糖75 mg/kg灌胃（正常服藥組）。各組連續(xù)10 d。于第11天取樣檢測各項免疫指標(biāo)。 1.3 指標(biāo)檢測 1.3.1 T淋巴細(xì)胞亞群測定 處死小鼠.取脾研磨，制成脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1×106/ml。將細(xì)胞懸液分別加入2個試管內(nèi)，1 ml/管。第一管加入FITC標(biāo)記的抗小鼠CD+3McAb 40 l、第二管同時加入PE標(biāo)記的抗小鼠CD+4McAb和FITC標(biāo)記的抗小鼠CD+8McAb各20 l，作用30 min后，加入1 ml熒光洗液，2 200 r

4、/min離心5 min，去上清。加入1 ml熒光保存液，流式細(xì)胞儀檢測各細(xì)胞亞群的比例。 1.3.2 血清IL2的檢測 采用放射免疫法測定法，按試劑盒說明書操作。 1.3.3 IgG檢測 ELISA法，按試劑盒說明書操作。 1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 各項指標(biāo)以x±s表示，通過SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，組間進(jìn)行方差分析、q檢驗。 2 結(jié) 果 2.1 紅景天多糖對小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響 見表1。老年模型組與青年對照組比較，CD+4亞群的比例及CD+4/CD+8的比值降低（P0.05）；紅景天多糖能提高老年模型組小鼠的CD+4亞群的比例，提高CD4+4/CD+8的比值（P0.05），

5、與青年組水平無明顯差異（P0.05）。 2.2 紅景天多糖對小鼠血清IL2和血清IgG的影響 見表2。老年模型組與青年對照組比較，IL2、IgG水平明顯降低（均P0.05）；紅景天多糖能提高老年模型組小鼠的IL2及IgG水平（均P0.05），與青年對照組水平無明顯差異（P0.05）。表1 對小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響與老年模型組比較：1）P<0.05；下表同表2 對小鼠血清IL2和血液IgG的影響 3 討 論 T細(xì)胞在機體的免疫防御、免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視及免疫修復(fù)中有極為重要的作用，對于機體的自身穩(wěn)定和免疫平衡至關(guān)重要。T細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫，并對體液免疫起到輔助和調(diào)節(jié)作用。T細(xì)胞具有高

6、度的異質(zhì)性，細(xì)胞表面存在著許多特異性分子,如CD+3、CD+4、CD+8等,在識別抗原過程中發(fā)揮著重要的作用。其中Th細(xì)胞(CD+4)和Ts細(xì)胞(CD+8)的相互協(xié)調(diào)是調(diào)控的重要環(huán)節(jié)之一。CD+4/CD+8的比值是反映機體免疫內(nèi)環(huán)境是否穩(wěn)定的一個重要指標(biāo),兩者平衡決定了免疫反應(yīng)的總效應(yīng),若比值偏離正常值,說明機體免疫功能失調(diào)。本實驗表明：老年模型小鼠Th(CD+4)細(xì)胞明顯降低，CD+4/CD+8比值偏離青年對照組水平，提示老年模型小鼠T細(xì)胞亞群的分布發(fā)生了變化,導(dǎo)致小鼠T淋巴細(xì)胞免疫功能異常及免疫調(diào)節(jié)功能紊亂，造成小鼠細(xì)胞免疫功能低下。本實驗證明紅景天多糖可改善老年小鼠CD+4亞群比例及CD

7、+4/CD+8比值，說明它對老年細(xì)胞免疫功能低下有較好的改善作用3。 IL2在免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤免疫中具有重要作用。輔助性T細(xì)胞(CD+4)是IL2的主要來源，主要促進(jìn)CTL和NK細(xì)胞增殖;促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖。B淋巴細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞增殖、抗原選擇、免疫球蛋白類型轉(zhuǎn)換和細(xì)胞表面某些標(biāo)志的改變以及體細(xì)胞突變，最終分化為漿細(xì)胞，即抗體形成細(xì)胞，它產(chǎn)生高親和力抗體，主要介導(dǎo)體液免疫，中和細(xì)菌的毒素與游離的病毒、免疫調(diào)理及細(xì)胞溶解。因此，抗體檢測是衡量個體體液免疫的重要指標(biāo)。本實驗表明：老年模型小鼠，其血清IL2水平較青年對照組顯著減少，IgG較青年對照組顯著減少，說明老年個體存在著細(xì)胞免疫功能與

8、體液免疫功能的同時低下，這可能與產(chǎn)生IL2的Th(CD+4)淋巴細(xì)胞減少有關(guān)，引起小鼠淋巴細(xì)胞再分布,選擇性的降低了Th(CD+4)細(xì)胞的數(shù)量,其功能也受到抑制,這必然導(dǎo)致IL2的產(chǎn)生減少或活性降低，則刺激B淋巴細(xì)胞活化以及分泌抗體能力減弱。紅景天多糖可提高老年小鼠血清IL2水平和IgG的含量，使其恢復(fù)至正常水平，則證明紅景天多糖通過增強細(xì)胞免疫和體液免疫，從而調(diào)節(jié)老年小鼠免疫功能，是良好的免疫調(diào)節(jié)劑。 所以，紅景天多糖作為重要的免疫調(diào)節(jié)劑，為老年免疫功能低下和預(yù)防免疫功能低下疾病以及日常保健品的開發(fā)研制提供了重要的實驗依據(jù)，但也有資料報道，紅景天多糖具有抑制功能，因此，紅景天多糖不同劑量的作用還有待進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 李西林,南藝?yán)?紅景天多糖的化學(xué)藥理研究進(jìn)展J.中國中醫(yī)藥信息雜志，2006；3（13）：10910.2 龔