生化期末習題及答案

1、生物化學復習題 一、 名詞解釋 變構效應: 酶分子的非催化部位與某些化合物可逆地非共價結(jié)合后會使酶分子構象發(fā)生改變，進而會改變酶的活性狀態(tài)，或是增加酶活力或是抑制酶活力，這種效應即稱為酶的別構效應。等電點：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢和程度相等，成為兼性離子，呈電中性，此時溶液的pH稱為該氨基酸的等電點。鹽析：若向蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽時反而會因自由水成為鹽離子的水化水而降低蛋白質(zhì)的溶解度合使其從溶液中析出，此現(xiàn)象稱為鹽析。亞基: 有些蛋白質(zhì)的分子量很大，由2條或2條以上具有獨立三級結(jié)構的多肽鏈通過非共價鍵相互結(jié)合而成，稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構。構成四級結(jié)構的每條多肽鏈

2、稱為亞基 (subunit)誘導楔合學說：指用來解釋酶的專一性的一種學說，該學說認為酶與底物的分子形狀并不是正好完全互補的，而是在結(jié)合過程中，由于酶分子或底物分子，有時是二者的構象同時發(fā)生了改變才正好互補，發(fā)生催化反應的，這種動態(tài)過程即稱為酶的誘導契合穩(wěn)態(tài):催化部位：酶活性中心:在酶分子中與酶活力直接相關的區(qū)域往往是由少數(shù)幾個特異性的氨基酸殘基集中的區(qū)域，這少數(shù)幾個氨基酸殘基參與底物結(jié)合和催化反應，因此這個區(qū)域稱為酶活性中心或活性部位，一般可分為結(jié)合部位和催化部位.Tm: 當核酸分子發(fā)生熱變性時，其 260nm 紫外吸收增加，雙螺旋解體成單鏈，當雙螺旋結(jié)構解體到一半時的溫度稱為核酸的熱變性溫度

3、或熔解溫度，以Tm 表示。Tm 大小與核酸的均一性、G+C 含量等因素有關。增色效應: DNA 變性后紫外吸收增加的現(xiàn)象稱為增色效應減色效應：而當核酸熱變性后在緩慢冷卻條件下發(fā)生復性時，紫外吸收值會減少的現(xiàn)象稱為核酸的減色效應。 終止因子：終止子是轉(zhuǎn)錄的終止控制元件，是基因末端一段特殊的序列，它使 RNA 聚合酶在模板上的移動減慢，停止 RNA 的合成。啟動子: 啟動子是 RNA 聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段 DNA 序列。激酶：催化磷酸基從ATP轉(zhuǎn)移到相應底物上的酶叫做激酶。信號肽：常指新合成多肽鏈中用于指導蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)移（定位）的N-末端氨基酸序列。巴斯德效應：在厭氧條件下,向高速發(fā)

4、酵的培養(yǎng)基中通入氧氣,則葡萄糖消耗減少。這種抑制發(fā)酵產(chǎn)物積累的現(xiàn)象稱為巴斯德效應。P/O 比值：在氧化磷酸化中，每 1/2O2 被還原成 ADP 的摩爾數(shù)。電子從 NADH 傳遞給 O2 時，P/O3，而電子從 FADH2 傳遞給 O2 時，P/O2。三聯(lián)體密碼：由決定蛋白質(zhì)中氨基酸順序的核苷酸順序，由3個連續(xù)的核苷酸組成的密碼子構成。高能化合物：在標準條件下水解時，自由能大幅度減少的化合物。一般是指水解釋放的能量能驅(qū)動 ADP 磷酸化合成 ATP 的化合物糖異生：由簡單的非糖前體轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑倪^程。糖異生不是糖酵解的簡單逆轉(zhuǎn)。雖然由丙酮酸開始的糖異生利用了糖酵解中的七步進似平衡反應的逆反應，但還

5、必需利用另外四步酵解中不曾出現(xiàn)的酶促反應，繞過酵解過程中不可逆的三個反應。酮體：酮體是指脂肪酸在肝臟中氧化降解后產(chǎn)生的特有中間代謝產(chǎn)物，包括乙酰乙酸、D-羥丁酸和丙酮三種。復制子：DNA 中發(fā)生復制的獨立單位稱為復制子。翻譯后加工: 將新合成的多肽鏈轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿牡鞍踪|(zhì)分子所經(jīng)歷的一系列化學反應過程。包括肽鍵形成、裂解、二硫鍵生成等。二、 選擇題 1. 蛋白質(zhì)形成三級結(jié)構的主要驅(qū)動力是 （ ） A 范德華力 B 疏水作用 C 氫鍵 D 離子鍵 2. 側(cè)鏈含有咪唑基的氨基酸是 （ ） A 甲硫氨酸 B 半胱氨酸 C 精氨酸 D 組氨酸 3. 精氨酸的 Pk1=2.17、Pk2=9.04（a-NH

6、3）Pk3=12.48（胍基）PI 是多少 （ ） A 1/2(2.17+9.04) B 1/2(2.17+12.48) C 1/2(9.04+12.48) D 1/3（2.17+9.04+12.48） 4. 蛋白質(zhì)變性過程中與下列哪項無關 （ ） A 理化因素致使氫鍵破壞 B 疏水作用破壞 C 蛋白質(zhì)空間結(jié)構破壞 D 蛋白質(zhì)一級結(jié)構破壞，分子量變小 5. 亞基的描述，哪一項不恰當？ （ ） A 每種亞基都有各自的三維結(jié)構 B 亞基內(nèi)除肽鍵外還可能會有其它共價鍵存在 C 亞基間次級鍵的結(jié)合比二、三級結(jié)構緊密 D 亞基單位獨立存在時具備原有生物活性 6. 決定 tRNA 攜帶氨基酸特異性的關鍵部

7、位是 （ ） A 3末端 B 反密碼子環(huán) C 二氫尿嘧啶環(huán) D 額外環(huán) 7. 稀有堿基較多的核酸是 （ ） A 核 DNA B 線粒體 DNA C tRNA D RNA 8. RNA 堿水解產(chǎn)物是 （ ） A 2核苷酸和 5核苷酸 B 2核苷酸和 3核苷酸 C 3核苷酸和 5核苷酸 D 2核苷酸和 4核苷酸 9. DNA 復性的重要標志是 （ ） A 溶解度降低 B 溶液粘度降低 C 紫外吸收增大 D 紫外吸收降低 10. DNA的純度可用OD260與OD280的比值來表示，下列說法正確的是 （ ） A 當 OD260/OD280 值>1.8 時，說明含鹽離子等雜質(zhì) B 當 OD260/

8、OD280 值>1.8 時，說明含 RNA 等雜質(zhì) C 當 OD260/OD280 值>1.8 時，說明含蛋白質(zhì)和苯酚等 D 當 OD260/OD280 值<1.8 時，說明含 RNA 等雜質(zhì) 11. 核細胞 mRNA 帽結(jié)構最多見的是 （ ） 12. A m7ApppNmP B m7GpppNmP C m7UpppNmP D 13. 下圖的結(jié)構式代表哪種糖？ （ ） A -D-吡喃型葡萄糖 B -D-吡喃型葡萄糖 C -D-呋喃型葡萄糖 D -D-呋喃型葡萄糖 14. 有關糖原結(jié)構的下列敘述哪些是正確的? （ ） (1).有 -1,4 糖苷鍵 (2).有 -1,6 糖苷鍵

9、(3).糖原由 -D-葡萄糖組成 (4).糖原是沒有分支的分子 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 15. 從組織中提取酶時，最理想的結(jié)果是 （ ） A 蛋白產(chǎn)量最高 B 轉(zhuǎn)換系數(shù)最高 C 酶活力單位數(shù)值很大 D 比活力最高 16. 酶的競爭性抑制劑具有下列哪種動力學效應： （ ） A Vmax 不變，Km 增大 B Vmax 不變，Km 減小 C Vmax 增大，Km 不變 D Vmax 減小，Km 不變 17. 關于米氏常數(shù) Km 的說法，哪個是正確的？ （ ） A 飽和底物濃度時的速度 B 在一定酶濃度下，最大速度的一半 C 飽和底物濃度的一半 D 速度達最大速度一半時的底物

10、濃度 18. 酶催化底物時將產(chǎn)生哪種效應 （ ） A 提高產(chǎn)物能量水平 B 降低反應的活化能 C 提高反應所需活化能 D 降低反應物的能量水平 19. 催化下列反應的酶屬于哪一大類： （ ） 1，6二磷酸果糖 3-磷酸甘油醛+磷酸二羥丙酮 A 水解酶 B 裂解酶 C 氧化還原酶 D 轉(zhuǎn)移酶 20. 一個簡單的米氏酶催化反應，當S<<Km 時： （ ） A 反應速度最大 B 底物濃度與反應速度成正比 C 增加酶濃度，反應速度顯著變大 D S濃度增加，Km 值也隨之變大 20. 胰蛋白酶原經(jīng)腸激酶作用后切下六肽，使其形成有活性的酶，這一步驟是 （ ） 21. A 誘導契合 B 酶原激活

11、 C 反饋調(diào)節(jié) D 同促效應 22. 卵磷脂分子中的磷酸膽堿部分是這種膜脂的哪個部分？ （ ） 23. A 親水尾部 B 疏水頭部 C 極性頭部 D 非極性尾部 24. 當生物膜中不飽和脂肪酸增加時，生物膜的相變溫度 （ ） 25. A 增加 B 降低 C 不變 D 范圍增大. 26. 目前公認的氧化磷酸化理論是 （ ） A 化學偶聯(lián)假說 B 構象偶聯(lián)假說 C 化學滲透假說 D 中間產(chǎn)物學說 27. 下面哪種酶在糖酵解和糖異生作用中都起作用 （ ） A 丙酮酸激酶 B 丙酮酸羧化酶 C 3磷酸甘油酸脫氫酶 D 己糖激酶 28. 關于磷酸戊糖途徑的敘述錯誤的是 （ ） A 6-磷酸葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槲?/p>

12、糖 B 6-磷酸葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槲焯菚r每生成 1 分子 CO2，同時生成 1 分子 NADHH C 6-磷酸葡萄糖生成磷酸戊糖需要脫羧 D 此途徑生成 NADPHH+和磷酸戊糖 29. 脂肪酸合成時,將乙酰- CoA 從線粒體轉(zhuǎn)運至胞液的是 （ ） A 三羧酸循環(huán) B 乙醛酸循環(huán) C 檸檬酸穿梭 D 磷酸甘油穿梭作用 30. 下列氨基酸中，直接參與嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)合成的是 （ ） A 天冬氨酸 B 谷氨酰胺 C 甘氨酸 D 谷氨酸 31. 下列過程不能脫去氨基的是 （ ） A 聯(lián)合脫氨基作用 B 氧化脫氨基作用 C 嘌呤核甘酸循環(huán) D 轉(zhuǎn)氨基作用 32. 呼吸鏈的各細胞色素在電子傳遞中的排列順序是：

13、 （ ） A c1bcaa3O2 B cc1baa3O2 C c1cbaa3O2 D bc1caa3O2 33. 在鳥氨酸循環(huán)中，尿素由下列哪種物質(zhì)水解而得 （ ） A 鳥氨酸 B 胍氨酸 C 精氨酸 D 精氨琥珀酸 34. 操縱子是一組功能上相關的基因，以下基因不屬于操縱子的是 （ ） A 調(diào)節(jié)基因 B 啟動基因 C 操縱基因 D 結(jié)構基因 35. 一碳單位的載體是 （ ） A 葉酸 B 四氫葉酸 C 生物素 D 焦磷酸硫胺素 36. 嘌呤核苷酸的主要合成途徑中首先合成的是 （ ） A AMP B GMP C IMP D XMP 37. 1 分子丙酮酸完全氧化分解產(chǎn)生多少 CO2 和 ATP

14、？ （ ） A 3CO2 和 12.5ATP B 2CO2 和 12.5ATP C 3CO2 和 13.5ATP D 2CO2 和 13.5ATP 38. 下列呼吸鏈組分中氧化還原電位最高的是： （ ） A FMN B Cytb C Cytc D Cytc1 三、判斷題 1. 蛋白質(zhì)在小于等電點 pH 溶液中向正極移動。 （× ） 2. 肽鍵中相關的六個原子無論在二級或三級結(jié)構中，一般都處在一個剛性平面內(nèi)。 （ 對 ） 3. 蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的種類數(shù)目、排列次序決定它的二級、三級結(jié)構，即一級結(jié)構含有高級結(jié)構的結(jié)構信息。 （對 ） 4. 構成天然蛋白質(zhì)的氨基酸，其 D構型和 L型普

15、遍存在。 （ × ） 5. b-折疊是主肽鏈相當伸展的結(jié)構，因此它僅存在于某些纖維狀蛋白質(zhì)中。 （ × ） 6. DNA 的 Tm 值和 A-T 含量有關，A-T 含量高則 Tm 高。 （ × ） 7. BDNA 代表細內(nèi) DNA 的基本構象，在某些情況下，還會呈現(xiàn) A 型，Z 型和三股螺旋的局部構象。 （ 對） 8. 多核苷酸鏈內(nèi)共價鍵斷裂叫變性。 （ × ） 9. 真核細胞的 DNA 全部定位于細胞核。 （ × ） 10. 真核生物 mRNA 的 5'端有一個多聚 A 的結(jié)構。 （×） 11. 糖的變旋現(xiàn)象是指糖溶液放置后

16、,旋光方向從右旋變成左旋或從左旋變成右旋。 （ × ） 12. 酶有幾種底物時，其 Km 值也不相同。 （ 對） 13. 對于多酶體系，正調(diào)節(jié)物一般是別構酶的底物，負調(diào)節(jié)物一般是別構酶的直接產(chǎn)物或代謝序列的最終產(chǎn)物。 （對） 14. 在非竟爭性抑制劑存在下，加入足夠量的底物，酶促反應能夠達到正常的 Vmax。 （ × ） 15. 酶促反應的初速度與底物濃度無關。 （ ×） 16. 酶之所以有高的催化效率是因為它可提高反應活化能。 （ × ） 17. 最適溫度是酶特征的物理常數(shù)，它與作用時間長短有關。 （ ×） 18. 反競爭性抑制作用的特點是

17、Km 值變小，Vmax 也變小。 （對 ） 19. 生物膜的不對稱性僅指膜蛋白的定向排列，膜脂可做側(cè)向擴散和翻轉(zhuǎn)擴散，在雙分子層中的分布是相同的。 （ × ） 20. 主動運轉(zhuǎn)有兩個顯著特點：一是逆濃度梯度進行，因而需要能量驅(qū)動，二是具有方向性。 （ 對 ） 21. 在丙酮酸經(jīng)糖異生作用代謝中，不會產(chǎn)生 NAD+。 （ × ） 22. 只有偶數(shù)碳原子脂肪酸氧化分解產(chǎn)生乙酰-CoA。 （×） 23. 原核細胞和真核細胞中許多 mRNA 都是多順反子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。 （× ） 24. 共價修飾調(diào)節(jié)酶被磷酸化后活性增大，去磷酸化后活性降低。 （× ） 25

18、. 生物化學中的高能鍵是指水解斷裂時釋放較多自由能的不穩(wěn)定鍵。 （對 ） 26. HMP 途徑的主要功能是提供能量。 （ ×） 27. 脂肪酸的從頭合成需要檸檬酸裂解提供乙酰-CoA。 （對 ） 28. 蛋白激酶和蛋白磷酸酶對蛋白質(zhì)進行磷酸化和去磷酸化的共價修飾是真核細胞代謝的重要方式。（對 ） 29. 有氧或無氧條件下均可發(fā)生底物水平磷酸化。 （對 ） 30. 操縱基因又稱操縱子，如同啟動基因又稱啟動子一樣。 （ × ） 31. RNA 合成時，RNA 聚合酶以 35方向沿 DNA 的反意義鏈移動，催化 RNA 鏈按 53方向增長。 （ 對 ） 32. L-谷氨酸脫氨酶不

19、僅可以使 L-谷氨酸脫氨基，同時也是聯(lián)合脫氨基作用不可缺少的重要酶。 （對 ） 33. 動植物組織中廣泛存在轉(zhuǎn)氨酶，需要a-酮戊二酸作為氨基受體，因此它們對與之相偶聯(lián)的兩個底物中的一個底物，即a-酮戊二酸是專一的，而對另一個底物則無嚴格的專一性。 （ 對 ） 34. 非必需氨基酸和必需氨基酸是針對人和哺乳動物而言的，它們意即人或動物不需或必需而言的。 （ × ） 35. 鳥氨酸循環(huán)（一般認為）第一步反應是從鳥氨酸參與的反應開始，首先生成瓜氨酸，而最后則以精氨酸水解產(chǎn)生尿素后，鳥氨酸重新生成而結(jié)束一個循環(huán)的。 （對 ） 36. 嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸都是先合成堿基環(huán)，然后再與 PRPP

20、 反應生成核苷酸。 （ × ） 37. 奇數(shù)碳脂肪酸的氧化分解與-氧化無關。 （ × ） 38. 在脂肪酸從頭合成過程中，增長的脂?；恢边B接在 ACP 上。 （ 對 ） 39. 劇烈運動后肌肉發(fā)酸是由于丙酮酸被還原為乳酸的結(jié)果。 （對） 40. 解偶聯(lián)劑可抑制呼吸鏈的電子傳遞。 （×） 四、填空題 1. 氨基酸按側(cè)鏈基團的性質(zhì)可分為非極性氨基酸、不帶電荷的極性氨基酸、帶電荷的氨基酸。結(jié)構中含咪唑環(huán)的氨基酸組氨酸，三字母表示方法是His 。結(jié)構中含吲哚環(huán)的氨基酸色氨酸，三字母表示方法是Trp。 2. 在生理 pH 條件下，蛋白質(zhì)分子中谷氨酸和天冬 氨酸殘基的側(cè)鏈幾

21、乎完全帶負電，而賴氨酸、精氨酸或組氨酸殘基側(cè)鏈完全荷正電。 3. 當氨基酸溶液的 pHpI 時，氨基酸（主要）以兩性離子形式存在；當 pHpI 時，氨基酸（主要）以陰離子形式存在；當 pHpI 時，氨基酸（主要）以陽離子形式存在。 4. 某種氨基酸-COOH pK2.4，-NH3 pK9.6，w-NH3 pK10.6，該種氨基酸的等電點（pI）是 10.1 。 5. 核酸變性時，260 nm 紫外吸收顯著升高，稱為變性，同時伴隨 A260 增大，吸光度增幅中點所對應的溫度叫做解鏈溫度，用符號Tm表示，其值的大小與 DNA 中C-G 堿基對含量呈正相關。 6. tRNA 的二級結(jié)構呈三葉草型，三

22、級結(jié)構呈倒L型，其 3'末端有一共同堿基序列 CCA ，其功能是 結(jié)合氨基酸 。 7. 乳糖是由一分子_D-葡萄糖_和一分子_D-半乳糖_組成,它們之間通過_-1，4-糖苷鍵_相連。 8. 判斷一個糖的 D-型和 L-型是以_離羰基碳最遠的那個手性_碳原子上羥基的位置作依據(jù)。 9. 結(jié)合酶是由 酶蛋白 和 輔助因子 兩部分組成。 10. 構成生物膜的三類膜脂是 磷脂 、 膽固醇 和 糖脂 。 11. 真核細胞生物氧化的主要場所是 線粒體 ，呼吸鏈和氧化磷酸化偶聯(lián)因子都定位于 線粒體內(nèi)膜上 。 12. 三羧酸循環(huán)有 4次脫氫反應， 3次受氫體為 NAD+，1次受氫體為FADH2 。 13

23、. 在丙酮酸羧化酶 、 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、 果糖-1，6-二磷酸酶 和 葡萄糖-6-磷酸酶 4 種酶的參與情況下，糖酵解可以逆轉(zhuǎn)。 14. 丙酮酸形成乙酰 CoA 是由 丙酮酸脫氫酶復合物 催化的，該酶是一個包括丙酮酸脫氫酶 、二氫硫辛酰轉(zhuǎn)乙?；负?二氫硫辛酰脫氫酶 的復合體。 15. 丙酮酸氧化脫羧形成 丙酮酸CoA ，然后和 草酰乙酸 結(jié)合才能進入三羧酸循環(huán)，形成的第一個產(chǎn)物 檸檬酸 。 16. 脂肪酸-氧化是在 線粒體基質(zhì)中進行的，氧化時第一次脫氫的受氫體是 FAD ，第二次脫氫的受氫體 NAD+ 。 17. 硬脂酸（18C）完全氧化所生成的 ATP 分子數(shù)為_120。 18.

24、一分子 14 碳長鏈脂酰-CoA 可經(jīng) 6次-氧化生成 7個乙酰-CoA, 7 個 NADH+H+，7個 FADH2 。 19. 下列符號的中文名稱分別是：PRPP 核糖-5-磷酸 ；IMP 次黃嘌呤核苷酸 ；PEP 磷酸烯醇式丙酮酸 ； 20. 核糖核酸的合成途徑有 從頭合成途徑 和 補救途徑 。 21. 嘌呤環(huán)的 C4、C5 來自 甘氨酸，嘧啶環(huán)的 N1、C6 來自 天冬氨酸 。 22. 動植物中尿素生成是通 鳥氨酸 循環(huán)進行的，此循環(huán)每進行一周可產(chǎn)生一分子尿素，其尿素分子中的兩個氨基分別來自于 氧化脫氨基產(chǎn)生的氨 和 天冬氨酸的氨基 。每合成一分子尿素需消耗 3 分子 ATP。 23.

25、DNA 聚合酶 I 的催化功能有 5-3聚合、 3-5 外切、 5-3 外切 。 24. DNA 合成時,先由引物酶合成 RNA引物 ，再由 DNA聚合酶 在其 3端合成 DNA 鏈，然后由 DNA聚合酶 切除引物并填補空隙，最后由 DNA連接酶 連接成完整的鏈。 25. 真核生物細胞合成多肽的起始氨基酸為 甲硫氨酸，起始 tRNA 為 tRNA1 甲硫 。 26. 肽鏈延伸過程需要 進位 、 成肽 、 轉(zhuǎn)位 三步循環(huán)往復，每循環(huán)一次肽鏈延長 一個氨基酸殘基。 27. 原核生物核糖體為 70 S，其中大亞基為 50 S，小亞基為 30 S；而真核生物核糖體為 80 S，大亞基為 60S，小亞基

26、為 40 S。 28. 乳糖操縱子的誘導物是 別乳糖 ，色氨酸操縱子的輔阻遏物是 色氨酸 。 五、問答題 1. 簡述流動鑲嵌模型的結(jié)構特點。是膜結(jié)構的一種假說模型。脂類物質(zhì)分子的雙層，形成了膜的基本結(jié)構的基本支架，而膜的蛋白質(zhì)則和脂類層的內(nèi)外表面結(jié)合，或者嵌入脂類層，或者貫穿脂類層而部分地露在膜的內(nèi)外表面。磷脂和蛋白質(zhì)都有一定的流動性，使膜結(jié)構處于不斷變動狀態(tài)。這一模型有兩個結(jié)構特點：一是膜的流動性，膜蛋白和膜脂均可側(cè)向移動；二是膜蛋白分布的不對稱性，蛋白質(zhì)有的鑲嵌在膜的內(nèi)或外表面，有的嵌入或橫跨脂雙分子層。2. 簡述化學滲透假說。一種學說，主要論點是底物氧化期間建立的質(zhì)子濃度梯度提供了驅(qū)動

27、ADP 和 Pi 形成 ATP 的能量3. 簡述蛋白質(zhì)測序的一般步驟。其中 N 端測序的經(jīng)典方法是什么？蛋白質(zhì)的一級結(jié)構測定或稱序列分析常用的方法是Edman降解和重組DNA法。Edman降解是經(jīng)典的化學方法，比較復雜。首先要純化一定量的待測蛋白質(zhì)，分別作分子量測定、氨基酸組成分析、N-末端分析、C-末端分析；要應用不同的化學試劑或特異的蛋白內(nèi)切酶水解將蛋白質(zhì)裂解成大小不同的肽段，測出它們的序列，對照不同水解制成的兩套肽段，找出重疊片段，最后推斷蛋白質(zhì)的完整序列。重組DNA法是基于分子克隆的分子生物學方法，比較簡單而高效，不必先純化該種蛋白質(zhì)，而是先要得到編碼該種蛋白質(zhì)的基因（DNA片段），測

28、定DNA中核苷酸的序列，再按三個核苷酸編碼一個氨基酸的原則推測蛋白質(zhì)的完整序列。這兩種方法可以相互印證和補充。 4. 簡述維持蛋白質(zhì)高級結(jié)構穩(wěn)定的次級鍵。蛋白質(zhì)的一級結(jié)構是由共價鍵形成的，如肽鍵和二硫鍵。而維持空間構象穩(wěn)定的是非共價的次級鍵。如氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華引力等。5. 簡述肽基的結(jié)構特點。 6. 簡述 DNA 復制過程。DNA復制是指DNA雙鏈在細胞分裂以前的分裂間期進行的復制過程，復制的結(jié)果是一條雙鏈變成兩條一樣的雙鏈（如果復制過程正常的話），每條雙鏈都與原來的雙鏈一樣。這個過程通過邊解旋邊復制和半保留復制機制得以順利完成。DNA復制主要包括引發(fā)、延伸、終止三個階段。7. 簡述

29、 螺旋的結(jié)構特征。 -螺旋是肽鍵平面通過-碳原子的相對旋轉(zhuǎn)形成的一種緊密螺旋盤繞，是有周期的一種主鏈構象。其特點是： 螺旋每轉(zhuǎn)一圈上升3.6個氨基酸殘基，螺距約0.54nm（每個殘基上升0.15nm，旋轉(zhuǎn)100O）。 相鄰的螺圈之間形成鏈內(nèi)氫鍵，氫鍵的取向幾乎與中心軸平行。典型-螺旋一對氫鍵O與N之間共有13個原子（3.613），前后間隔3個殘基。螺旋的走向絕大部分是右手螺旋，殘基側(cè)鏈伸向外側(cè)。R基團的大小、荷電狀態(tài)及形狀均對-螺旋的形成及穩(wěn)定有影響。8. 描述 DNA 雙螺旋結(jié)構模型。 二條反向平衡的多核苷酸鏈共同圍繞中心軸盤旋而成的雙螺旋結(jié)構，兩鏈的堿基按堿基互補配對規(guī)律互補配對，并靠氫鍵

30、維系。糖、磷酸在螺旋外側(cè)、堿基在螺旋內(nèi)側(cè)。（1） 兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞，兩條鏈均為右手螺旋。 （2） 嘌呤與嘧啶位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸與核糖在外側(cè)，彼此通過 3,5-磷酸二酯鍵相連接，形成 DNA 分子的骨架，堿基平面與縱軸垂直，糖環(huán)平面則與縱軸平行。多核苷酸鏈的方向取決于核苷酸間磷酸二酯鍵的走向，習慣上以 C3-C5為正向。兩條鏈配對偏向一側(cè)，形成一條大溝和一條小溝。 （3） 雙螺旋的平均直徑為 2nm，兩個相鄰的堿基對之間的高度，即堿基堆積距離為 0.34nm，兩個核苷酸之間的夾角為 36°，沿中心軸每旋轉(zhuǎn)一周有 10 個核苷酸，每一轉(zhuǎn)的高度（即螺距）為

31、 3.4nm。 （4） 兩條核苷酸依靠彼此堿基之間形成的氫鍵相聯(lián)系而結(jié)合在一起。 （5） 堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。但根據(jù)堿基配對原則，當一條多核苷酸鏈的序列彼此確定后，即可決定另一互補的序列。 解釋生命活動：雙螺旋 DNA 是儲存遺傳信息的分子，通過半保留復制，儲存遺傳信息，通過轉(zhuǎn)錄和翻譯表達出生命活動所需信息（蛋白質(zhì)和酶）。 9. 簡述高等動植物脂肪酸的共性。 10. 簡述尿素合成的特點。 （1）部位：肝臟線粒體和胞液。（2）機理：1932年，德國學者Krebs和Hensleit根據(jù)實驗研究，提出了鳥氨酸循環(huán)（ornithine cycle）合成尿素的學說，這比三羧酸循環(huán)發(fā)現(xiàn)早

32、5年。實驗的根據(jù)是：將鼠肝切片置于胺鹽和重碳酸鹽介質(zhì)中，有氧條件下保溫數(shù)小時，發(fā)現(xiàn)胺鹽含量減少，而尿素增多。當加入少量鳥氨酸、瓜氨酸或精氨酸能大大加速尿素的合成。肝臟又含有精氨酸酶，可催化精氨酸水解生成鳥氨酸和尿素。于是一個循環(huán)機制就出現(xiàn)。（3）反應過程：有5步反應，前2步在肝細胞線粒體，其他3步在胞質(zhì)溶液中進行。尿素循環(huán)本身是四步酶促反應組成。氨甲酰磷酸合成酶（CPS-）激活氨結(jié)合CO2形成氨甲酰磷酸。鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶催化氨甲酰磷酸轉(zhuǎn)移到鳥氨酸上生成瓜氨酸。精氨琥珀酸合成酶催化瓜氨酸與天冬氨酸縮合生成精氨琥珀酸。這是尿素中第2個氮原子的來源。精氨琥珀酸酶催化精氨琥珀酸裂解為精氨酸和延胡索酸（

33、后者可進入三羧酸循環(huán)，并轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?，轉(zhuǎn)氨后又形成天冬氨酸）。精氨酸酶水解精氨酸生成尿素，并重新產(chǎn)生鳥氨酸，進入第二輪循環(huán)。總反應式：NH3 + HCO3- +天冬氨酸 +3ATP CO( N H 2)2 + 延胡索酸 + 2ADP+2Pi+AMP+PPi尿素的合成是一個耗能的過程，循環(huán)中使用了4個高能磷酸鍵（3分子ATP水解為2ADP及Pi、一個AMP和PPi，后者隨之水解為Pi）。尿素循環(huán)產(chǎn)生的延胡索酸可進入TCA，精氨酸與甘氨酸縮合形成瓜基乙酸，進而合成肌酸磷酸（肌肉中的一種高能倉庫）。（4）調(diào)節(jié)：氨甲酰磷酸合成酶是變構酶，乙酰谷氨酸（AGA）是該酶的激活劑，而精氨酸又是AGA合成酶的

34、激活劑，因此，精氨酸濃度增高時，尿素生成加速。精氨琥珀酸合成酶活性最低，是限速酶。11. 根據(jù)糖酵解的過程，回答如下問題：（反應物、產(chǎn)物寫中文名即可，不要求結(jié)構式） 1.己糖激酶（hexokinase）催化葡萄糖生成G-6-P，消耗一分子ATP。己糖激酶（HK）分布較廣，而葡萄糖激酶（GK）只存在于肝臟，這是第一個關鍵酶催化的耗能的限速反應。若從糖原開始，由磷酸化酶和脫支酶催化生成G-1-P，再經(jīng)變位酶轉(zhuǎn)成G-6-P。2.G-6-P異構酶催化G-6-P轉(zhuǎn)化為F-6-P。3.磷酸果糖激酶（PFK-）催化F-6-P磷酸化生成F-1，6-DP，消耗一分子ATP。這是第二個關鍵酶催化的最主要的耗能的限

35、速反應。4.醛縮酶裂解F-1，6-DP為磷酸二羥丙酮和甘油醛-3-磷酸。平衡有利于逆反應方向，但在生理條件下甘油醛-3-磷酸不斷轉(zhuǎn)化成丙酮酸，驅(qū)動反應向裂解方向進行。5.丙糖磷酸異構酶催化甘油醛-3-磷酸和磷酸二羥丙酮的相互轉(zhuǎn)換。6.甘油醛-3-磷酸脫氫酶催化甘油醛-3-磷酸氧化為1，3 -二磷酸甘油酸。這是酵解中唯一的一步氧化反應，是由一個酶催化的脫氫和磷酸化兩個相關反應。反應中一分子NAD+被還原成NADH，同時在 1，3-二磷酸甘油酸中形成一個高能酸酐鍵，為在下一步酵解反應中使ADP變成ATP。7.磷酸甘油酸激酶催化1，3-二磷酸甘油酸生成3-磷酸甘油酸。反應（6）和反應（7）聯(lián)合作用，

36、將一個醛氧化為一個羧酸的反應與ADP磷酸化生成ATP偶聯(lián)。這種通過一高能化合物將磷酰基轉(zhuǎn)移ADP形成ATP的過程稱為底物水平磷酸化。底物水平磷酸化不需氧，是酵解中形成ATP的機制。8.磷酸甘油酸變位酶催化 3-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化為2-磷酸甘油酸9.烯醇化酶催化2-磷酸甘油酸生成磷酸烯醇式丙酮酸（PFP）。PFP具有很高的磷酰基轉(zhuǎn)移潛能，其磷?；且砸环N不穩(wěn)定的烯醇式互變異構形式存在的。10.丙酮酸激酶催化PFP生成丙酮酸和ATP。這是第三個關鍵酶催化的限速反應。也是第二次底物水平磷酸化反應。丙酮酸是酵解中第一個不再被磷酸化的化合物。其去路：在大多數(shù)情況下，可通過氧化脫羧形成乙酰輔酶A進入檸檬酸循環(huán)

37、；在某些環(huán)境條件（如肌肉劇烈收縮），乳酸脫氫酶可逆地將丙酮酸還原為乳酸；在酵母，厭氧條件下經(jīng)丙酮酸脫羧酶和乙醇脫氫酶催化，丙酮酸轉(zhuǎn)化成乙醇（酒精發(fā)酵）。1） 糖酵解包含幾步反應？分成那兩個階段？ 10.葡萄糖轉(zhuǎn)變成磷酸丙糖，甘油醛-3-磷酸轉(zhuǎn)變成丙酮酸2） 糖酵解中消耗 ATP、產(chǎn)生 ATP 的反應包括哪些？ 消耗1，3 產(chǎn)生7，103） 糖酵解中哪一步反應脫氫？ 64） 糖酵解的限速酶是什么？ （1）葡萄糖在已糖激酶作用下生成葡萄糖-6-磷酸；（2）果糖-6-磷酸在磷酸果糖激酶作用下生成果糖-1，6-二磷酸；（3）磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸。區(qū)別糖異生：（1）丙酮酸在丙酮酸

38、羧化酶作用下生成草酰乙酸；（2）草酰乙酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸；（3）果糖-1，6-二磷酸在果糖-1，6-二磷酸酶作用下水解成果糖-6-磷酸；（4）葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。12. 寫出 TCA 循環(huán)的總反應式，統(tǒng)計 TCA 循環(huán)中： 三羧酸循環(huán)是由四個碳原子的草酰乙酸與二個碳原子的乙酰輔酶 A 縮合成具有三個羧基的檸檬酸開始，經(jīng)過二次脫羧和四次氧化還原反應后又以草酰乙酸結(jié)束。由于循環(huán)中首先生成含有三個羧基的檸檬酸，故又稱三羧酸循環(huán)或檸檬酸循環(huán)，簡稱 TCA 循環(huán)，為紀念德國科學家 Hans Krebs 在闡明三羧酸循環(huán)中所做出的突出貢獻

39、，三羧酸循環(huán)又稱 Krebs 循環(huán)。TCA 的生理意義主要包括二個方面：（1）為機體提供大量能量。1 分子葡萄糖經(jīng)酵解、 TCA 和呼吸鏈氧化后，可產(chǎn)生 38 分子 ATP。（2）TCA 是糖代謝、蛋白質(zhì)代謝、脂肪代謝、核酸代謝以及次生物質(zhì)代謝聯(lián)絡的樞紐，它的中間產(chǎn)物可參與其它代謝途徑，其它代謝的產(chǎn)物最終可通過 TCA 循環(huán)氧化為 CO2 和 H2O，并釋放出能量。1.檸檬酸合成酶催化乙酰CoA與草酰乙酸縮合成檸檬酸和CoASH。是第一個關鍵酶催化的限速反應。2.順烏頭酸酶催化檸檬酸異構成異檸檬酸。3.異檸檬酸在異檸檬酸脫氫酶的催化下生成草酰琥珀酸，再脫羧生成-酮戊二酸。此步是第一次氧化脫羧，

40、異檸檬酸脫氫酶是第二個關鍵酶。4.- 酮戊二酸由- 酮戊二酸脫氫酶系催化氧化脫羧生成琥珀酰CoA。此酶系由3種酶和5種輔助因子組成，是第三個關鍵酶催化的第二次氧化脫羧。5.琥珀酰CoA在琥珀酰輔酶A合成酶催化下生成琥珀酸。這是循環(huán)中惟一的一次底物水平磷酸化，GDP磷酸化形成GTP。6.琥珀酸在琥珀酸脫氫酶催化下氧化為延胡索酸。這是第三步脫氫，生成FADH2。7.延胡索酸在延胡索酸酶作用下水化形成蘋果酸。8.蘋果酸在蘋果酸脫氫酶催化下氧化為草酰乙酸。這是第四步脫氫，生成NADH+H+1） 共發(fā)生幾次脫羧？生成的 CO2 中的 C 來源于哪種物質(zhì)？ 2，原初的草酰乙酸部分2） 共發(fā)生幾次脫氫，氫和電子受體分別是什么？ 43） 共發(fā)生幾次底物水平磷酸化，寫出反應式。（反應物、產(chǎn)物寫中文名即可，不要求結(jié)構式）1 ，琥珀酰CoA在琥珀酰輔酶A合成酶催化下生成琥珀