顯微鏡基礎(chǔ)知識問答_第1頁
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文檔簡介

1、Q:什么是數(shù)值孔徑 NA ?A:數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其是對物鏡而言)性能高低的重要標(biāo) 志。數(shù)值孔徑越高,分邊率越高,焦深則越小。Q:是否可以在無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)上使用有限遠(yuǎn)筒長的物鏡?A:您可能能夠?qū)⑽镧R擰上物鏡轉(zhuǎn)盤,但由于無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)光路上的結(jié)像透鏡的關(guān)系,使用有限遠(yuǎn) 系統(tǒng)的物鏡不能得到最佳的圖像。Q:是否可以在有限遠(yuǎn)筒長的顯微鏡上使用無限遠(yuǎn)系統(tǒng)的物鏡?A:不能。因?yàn)橄裼邢捱h(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)不包含可使平行光路聚焦在目鏡光欄面的結(jié)透鏡。Q:相差物鏡是否可以用于其他觀察方法 ?A:是的,可以。 僅需移動相差聚光鏡到 “0位”置同時使用柯勒照明。 相差物鏡在其后焦平面上有相板

2、, 但是大部分光不受這個相板的影響。因此,對圖像質(zhì)量僅有輕微的影響,對明場圖像依然有用。 Ol ympus 制造的相差物鏡還可應(yīng)用于熒光觀察。Q:相差物鏡上標(biāo)記的 Ph1 、Ph2、 Ph3 是什么意思?A :相差物鏡要配合安裝在聚光鏡的環(huán)狀光闌來使用。光闌的直徑要與物鏡的NA 值相匹配。 Olympus UIS 的物鏡, Ph1 表示物鏡的 NA 值不超過 0.50 ;Ph2 表示 NA 值在 0.55 至 1.0 之間; Ph3 表示 N A 值大于 1.0 (油鏡)。長工作距離的物鏡使用專用的相差環(huán)。Q :是否可以為視頻顯微方法選擇高NA 值的物鏡觀察微小標(biāo)本的細(xì)節(jié)?A:是的,可以。當(dāng)您

3、通過目鏡觀察時眩光可能圖像的細(xì)節(jié)變暗,但必要的信息往往包含在其中,那 么視頻增強(qiáng)技術(shù)可以處理這些信息并且獲得極好的視頻圖像。Q:是否應(yīng)該購買我所能買得起的最好的物鏡?A:通常是這樣的,但不總是。如果你所觀察的標(biāo)本的厚度有幾個微米,平場消色差或平場半復(fù)消色 差物鏡就很好了,因?yàn)楸绕鹌綀鰪?fù)消色差物鏡有更好的焦深。如果用于彩色照相,平場半復(fù)消色差比 平場消色差物鏡得到的圖像要好。平場復(fù)消色差物鏡在微小細(xì)節(jié)上可以得到極好的觀察和照相的效 果,但往往要花費(fèi)比平場半復(fù)消色差物鏡高幾倍的價格。Q:如何避免在滴油時損傷 40 倍的干式物鏡?A :如果您經(jīng)常使用 100 倍的油鏡,您可能想用 50 倍的油鏡來替

4、換掉 40 倍的干鏡。 50 倍的平場消 色差油鏡( NA0.90 )比標(biāo)準(zhǔn)的 40 倍平場消色差或消色差干鏡( NA 0.65 )得到更加明亮的圖像 ,更好 的清晰度。Q:如何減少在 40 倍干鏡上沾上香柏油?A :當(dāng)您在轉(zhuǎn)換 40 倍干鏡和 100 倍油鏡時,盡量避免 40 倍的干鏡浸到油上。實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常將這兩款物 鏡裝在相對的方向上Q:為什么有時候 40 倍的物鏡成象效果比 20 倍差?A :當(dāng)標(biāo)本的厚度大于標(biāo)準(zhǔn)厚度 0.17MM ,或在蓋玻片上有其他物質(zhì)。為了改善成象效果,您可以用 帶校正環(huán)干式物鏡,或用 40 倍和 50 倍的油鏡來取代 40 倍的干式物鏡,因?yàn)橛徒镧R對蓋玻片厚度變化

5、的敏感性較小。Q:如何在熒光觀察中使用平場校色差物鏡?A:平場校色差物鏡適用于藍(lán)和綠激發(fā)波長,平場校色差物鏡的玻璃張力可以激發(fā)到近紫外。因此, 平場校色差物鏡,它的數(shù)值孔徑比平場半復(fù)或平場復(fù)校色差物鏡低,所以它需要一個調(diào)光器。Q: “干式”物鏡(物鏡前透鏡與蓋玻片之間以空氣為介質(zhì))的數(shù)值孔徑最大能達(dá)到多少? A:干式物鏡的數(shù)值孔徑可達(dá)到 0.95 ,但觀察蓋玻片時需要校正環(huán)。Q:為什么 “干式 ”20倍、 40 倍和 60 倍物鏡有校正環(huán)? A:旋轉(zhuǎn)校正環(huán)可以使物鏡內(nèi)的透鏡組的距離,這樣校正由于蓋玻片過厚所帶來的球差。在正置顯微 鏡中,校正環(huán)的校正蓋玻片范圍是 0.11mm 到 0.22mm

6、。倒置顯微鏡中,校正范圍 0 到 2mm 。Q :為什么 20 倍的物鏡或更高倍率的物鏡有彈簧或裝配可伸縮的前端透鏡? A:物鏡一般的工作距離比較短,如果使用不小心物鏡的前端將會碰到載玻片或樣品。在透鏡前安裝 彈簧裝置可以防止在使用時碰到樣品。如果安裝不正確,向反方向進(jìn)行保護(hù)而且連續(xù)摩擦。Q: "PL" or "NH" 在相差物鏡上表示什么意思?A:"PL" 代表“正低”,是正相差,是指標(biāo)本比周圍環(huán)境暗,即明中之暗,適用于折射率比較弱的被檢物 體。 "NH" 代表 “負(fù)高”,是負(fù)相差,是指標(biāo)本比周圍環(huán)境亮,即暗中之

7、亮。適用于折射率比較弱的被檢 物體。Q:為什么需要 UV 物鏡?A :UV 物鏡的透鏡組采用了新鍍膜工藝設(shè)計, 這樣可以穿透近紫外波長的光, 而普通的物鏡是達(dá)不到 的,這種物鏡用于紫外熒光激發(fā)工作。新奧林巴斯無限遠(yuǎn)校正萬能平場復(fù)校色差物鏡和萬能平場半復(fù) 校色差物鏡在近紫外觀察的性能上有了很大改善。Q:物鏡上為什么帶有 "NIC" or "DIC." 標(biāo)記?A:這些物鏡上的標(biāo)記特別用在諾瑪斯基或微分干涉顯微鏡。Q:對于 "LWD" or "ULWD" 對物鏡表示什么意思? A:這些長工作距離和超長工作距離物鏡,他們的

8、工作距離指物鏡前端聚焦到樣品的距離比其他物鏡 的工作距離要長。當(dāng)需要用倒置顯微鏡觀察培養(yǎng)皿或 petri 皿,厚冶金金屬樣品,檢查 IC 電路板和一 些焊接接口時,長工作距離和超長工作距離物鏡有一定優(yōu)勢。Q:物鏡上標(biāo)記的顏色代表什么意思?A :物鏡上的顏色代表著放大倍率,這樣很容易識別物鏡的放大倍率。紅色標(biāo)記表示放大倍率為4 倍或 5 倍,黃色代表 10 倍,綠色代表 20 倍,蘭色代表 40 倍, 50 倍或 60 倍。白色代表 100 倍。奧林 巴斯識別相差物鏡用紅色標(biāo)記靠近物鏡的前透鏡,識別無限遠(yuǎn)相差物鏡用綠色表示。Q :為什么物鏡上有 “平場 ”標(biāo)記?A :平場物鏡可以使整個成象效果更

9、加平坦。 對于視場數(shù)為 22 的目鏡, 許多物鏡都能使成象效果達(dá)到 平坦。對于新的平場復(fù)校色差和平場半復(fù)校色差物鏡都能和視場數(shù)為 26.5 目鏡匹配達(dá)到清晰的成象 效果。Q:什么是無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)物鏡?A :對于無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)物鏡,光線以平行光束射向無限遠(yuǎn)。例如物鏡,可以提供許多優(yōu)點(diǎn),無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)包含可使平行光路聚焦在目鏡視場光闌。Q:物鏡上標(biāo)記的 “ 160是“什么意思?A :這個標(biāo)記表示物鏡是有限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)的, 160MM 的光學(xué)筒長指從物鏡轉(zhuǎn)盤(物鏡安裝處)到觀察 筒頂部(目鏡安裝處)的距離。如果您在物鏡轉(zhuǎn)盤以上的光路中通過添加附件來增加這個距離,除非 這些附件中含有校正透鏡,否則將會產(chǎn)

10、生球差。Q:為什么蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為 0.17MM ?A :0.17MM 是蓋玻片的厚度, 在物鏡的制造上已經(jīng)將其厚度的象差計算在內(nèi)。當(dāng)物鏡數(shù)值孔徑大于 0.45 時,假定這個厚度過厚(或完全沒有覆蓋差)這樣最后的成象的效果達(dá)不到最佳鏡象效果。Q:為什么暗場顯微鏡需要特殊物鏡?A:事實(shí)表明,在入射光進(jìn)行觀察時,暗場聚光鏡不讓光束從上到下的通過被檢物體。然而,為了獲 得很高的放大倍率,就需要帶虹彩光闌的物鏡來配合暗場聚光鏡使用。對于反射光進(jìn)行暗場觀察時, 需要明場 / 暗場物鏡進(jìn)行在暗場下工作。這些物鏡(標(biāo)記 BD/BF/DF )功能是利用被檢物體表面反射或 衍射光而形成的明亮圖象。Q:為什么有

11、些物鏡帶虹彩光闌?A:在使用暗場顯微鏡時為了保持背景足夠黑暗,物鏡的數(shù)值孔徑不應(yīng)比暗場聚光鏡要高。虹彩光闌 可以降低物鏡的數(shù)值孔徑,允許高數(shù)值孔徑的物鏡應(yīng)用于暗場顯微鏡。虹彩光闌可以使高于數(shù)值孔徑1.2 的物鏡應(yīng)用于暗場顯微鏡。對于普通明場觀察,虹彩光闌可以處于打開狀態(tài)。Q:為什么有些物鏡是油鏡和水鏡?A:物鏡的分辨率很大程度上取決于物鏡的NA 值,NA 值又受透鏡與標(biāo)本之間介質(zhì)的折射率的影響。高折射率的介質(zhì)可以聚集更多的光使圖像更亮、更清晰。當(dāng)使用空氣作為透鏡和標(biāo)本之間的介質(zhì)時, 一般低 NA 值的物鏡就可滿足要求。但是,高 NA 值的物鏡需要高折射率的介質(zhì),那么油可以達(dá)到高 折射率。當(dāng) N

12、A 值超過 1.0 時,在聚光鏡的頂部透鏡載玻片的底部點(diǎn)油可以達(dá)到更好的效果。浸油物 鏡通常會標(biāo)記 “oil或”“oel?!币恍┪镧R會應(yīng)用于活體標(biāo)本的觀察,就需要水作為介質(zhì)。這些物鏡通常會 標(biāo)記 “WI”。Q:為什么物鏡有校正帽?A :校正帽:用于 C 系列的校色差和半復(fù)校色差物鏡,觀察玻璃或塑料培養(yǎng)皿時校正球差。物鏡通過 調(diào)節(jié)校正帽聚焦在皮氏培養(yǎng)皿或厚的載玻片而不影響成象效果。Q:消色差,半復(fù)消色差和復(fù)消色差的區(qū)別?A:消色差或平場消色差物鏡至少能校正軸上點(diǎn)的位置色差(紅、藍(lán)兩色)、球差(黃綠光)、正弦 差以及消除近軸點(diǎn)慧差。但在綠光和白光下顯微照相時能獲得好的鏡象效果(但不是最佳效果)。半 復(fù)消色差或平場半復(fù)消色差物鏡能校正紅、藍(lán)兩色光的球差和色差。在成象質(zhì)量上,遠(yuǎn)好于消色差物 鏡。在彩色顯微照相時選用半復(fù)消色差物鏡,從成象質(zhì)量和經(jīng)濟(jì)上都是最佳選擇。復(fù)消色差、平場復(fù) 消色差物鏡, 不僅能校正紅、 綠、藍(lán)三色光的色差, 而且在同一焦點(diǎn)平面上造象, 達(dá)到消除 “剩余色差 ” (又稱二級色譜) 的效果, 同時能校正紅、 藍(lán)兩色光的球差。 它擁有更大的數(shù)值孔徑, 這樣分辨率高, 象質(zhì)好,有更高的有效放大率。復(fù)校色差物鏡性能很高,適用于高級研究鏡檢和顯微照相。它的景深要比其他物鏡小,所以它比其它種類物鏡要昂貴。Q:什么是工作距離?A:工作距離又叫物聚,指物鏡

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