色譜峰拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因

1、a12021332145石家源石家源色譜峰拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因色譜峰拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因a2一、色譜峰拖尾a3原因及解決方法 1、溶解樣品的溶劑極性強(qiáng)于流動(dòng)相； 2、樣品量過(guò)載； 3、固定相中的硅醇基與胺類(lèi)相互作用； 4、酸性化合物在硅膠上吸附； 5、色譜柱床的空隙； 6、色譜柱污染； 7、色譜柱填料外表的惰性不夠好； 8、色譜柱本身填裝問(wèn)題,篩板堵塞或填料塌陷；a4 1、由于溶解樣品的溶劑極性強(qiáng)于流動(dòng)相而引起的拖尾。 有幾種線索可以幫助確定是由于此種原因引起的拖尾。第一種就是先流出的峰的拖尾較后流出的峰拖尾嚴(yán)重；另一種跡象就是進(jìn)樣量減少或者是樣品經(jīng)流動(dòng)相稀釋后進(jìn)樣峰拖尾減輕了。 解決很簡(jiǎn)單：

2、將樣品溶解在流動(dòng)相中，或者將樣品經(jīng)流動(dòng)相稀釋至進(jìn)樣后峰拖尾符合要求。a5 2、由樣品量過(guò)載引起的峰拖尾 當(dāng)進(jìn)樣量超過(guò)柱子的容量，樣品峰會(huì)呈現(xiàn)一個(gè)直角三角形。當(dāng)更多的樣品量注入時(shí)，峰的前端變得很尖而后端就拖尾更嚴(yán)重。 解決方法：減少進(jìn)樣量。a6 3、由固定相中的硅醇基與胺類(lèi)相互作用引起的拖尾 具有顯著的硅醇活性的固定相的色譜柱大局部都會(huì)發(fā)生此現(xiàn)象，而且中性pH68條件下比在酸性pH3更易發(fā)生。解決方法： 1確認(rèn)流動(dòng)相中有適宜的緩沖鹽，盡量在pH3的條件下操作在pH3的條件下操作，可使硅膠固定相上的硅醇基質(zhì)子化，減少了溶質(zhì)與硅醇反響的幾率，使用足夠的緩沖液控制pH并減少離子交換效應(yīng)。 2在流動(dòng)相中

3、參加競(jìng)爭(zhēng)性的胺類(lèi)三乙胺TEA，TEA可以與硅醇發(fā)生強(qiáng)的反響，并抑制樣品中的胺類(lèi)與硅醇反響。a7 4、酸性化合物在硅膠上吸附引起的拖尾 解決方法：應(yīng)提高流動(dòng)相中鹽的濃度來(lái)抑制二次反響，降低流動(dòng)相的pH使硅醇和溶質(zhì)質(zhì)子化，必要時(shí)可以向流動(dòng)相中參加競(jìng)爭(zhēng)性的酸。參加的酸優(yōu)先和硅膠固定相外表的酸性硅醇基反響，抑制了酸性化合物和硅醇基的反響，減低了拖尾。a8 5、由于柱床空隙引起的拖尾 如果通常色譜柱具有良好的柱效，突然發(fā)現(xiàn)所有的峰均拖尾時(shí)，可能是柱子有空隙。先洗脫出的峰較后洗脫的峰更易受柱空隙的影響。 雖然許多色譜分析者嘗試用相同的固定相材料修補(bǔ)柱子的空隙，但就經(jīng)驗(yàn)來(lái)講，此法很少能到達(dá)預(yù)期的效果。由柱子

4、空隙引起的拖尾最好的解決方法就是換掉它，這樣可以節(jié)省時(shí)間，金錢(qián)，減少麻煩。a9 6、色譜柱污染引起的拖尾 如果色譜柱開(kāi)始使用時(shí)峰形正常，使用一段時(shí)間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾，那么色譜柱被污染的可能性很大。 解決方法：需要對(duì)色譜柱加強(qiáng)沖洗，即使用比方法流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱。要做好樣品前處理，但如果前處理后依然比較臟，建議配置保護(hù)柱，一旦峰形變差，柱效下降，應(yīng)及時(shí)更換保護(hù)柱芯。a10 7、色譜柱填料外表的惰性不夠好引起的拖尾 鍵合硅膠型填料外表的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測(cè)化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾。 解決方法：選用高純硅膠合成填料的色譜柱以及進(jìn)行了有效硅羥基封端填料色譜柱。a11 8、色譜柱本身

5、填裝問(wèn)題,篩板堵塞或填料塌陷引起的拖尾 解決方法：如色譜柱塌陷，那么填充色譜柱；如篩板阻塞那么反向沖洗色譜柱或更換篩板。a12二、色譜峰出現(xiàn)雙峰 色譜雙峰指的是明明是同一種物質(zhì)，但在色譜圖中出現(xiàn)雙峰，而說(shuō)明含二種物質(zhì)。a13原因及解決方法 1、色譜柱阻塞； 2、溶劑極性及進(jìn)樣量； 3、樣品的特性及pH值； 4、 儀器參數(shù)； 5、保護(hù)柱或分析柱污染。a14 1、色譜柱阻塞 如果你分析樣品時(shí)發(fā)現(xiàn)每個(gè)色譜峰都是雙峰出現(xiàn)尤其采用單一純物質(zhì)時(shí)，可以肯定色譜柱出問(wèn)題。 色譜柱局部阻塞導(dǎo)致的峰裂分色譜圖 如果是色譜柱阻塞，解決方法是將色譜柱反過(guò)來(lái)接，用流動(dòng)相沖洗，將堵在色譜柱中的殘留物沖掉，再反過(guò)來(lái)，就可以

6、了。a15 2、溶劑極性及進(jìn)樣量 樣品一般用與流動(dòng)相相溶的溶劑溶解，最正確的溶解方法是用流動(dòng)相溶解，但是很多情況是不一致的。當(dāng)用溶劑極性強(qiáng)度大的試劑溶解樣品，而分析體系中以水為主，樣品進(jìn)樣量大，此條件下完全可以肯定，單一的純物質(zhì)出雙峰，第二峰比第一峰小且拖尾。將進(jìn)樣量減少一半以上，峰型將變?yōu)檎?。這是由于樣品的溶劑極性與流動(dòng)相極性相差太大，而流動(dòng)相來(lái)不及將其稀釋到達(dá)平衡造成的。 進(jìn)樣量不一定大，但絕對(duì)量很大，色譜圖上的雙峰緊靠在一起，根本上齊高，不拖尾。將樣品稀釋再進(jìn)樣就可以了，這是由于進(jìn)樣量過(guò)大，色譜柱過(guò)載造成的。a16 3、樣品的特性及pH值 有些樣品由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，存在互變異構(gòu)現(xiàn)象，這種互變異構(gòu)體無(wú)法分開(kāi)，而是以一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡存在。色譜分析時(shí)，在一個(gè)特定的條件下，一種物質(zhì)將出現(xiàn)雙峰，一般雙峰靠的很近，根本齊高，不拖尾。當(dāng)pH稍一變化，雙峰現(xiàn)象將消失。a17 4、儀器參數(shù) 如果記錄間隔時(shí)間太短，一個(gè)峰將變?yōu)槎€(gè)峰或更多，這時(shí)需要將間隔時(shí)間設(shè)置稍長(zhǎng)。 還有一種情況是，參比波長(zhǎng)設(shè)置過(guò)小，本來(lái)一個(gè)峰會(huì)變成對(duì)稱(chēng)的二個(gè)峰，這時(shí)要將參比波長(zhǎng)設(shè)置更大，或者取消。