
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
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文檔簡介
1、廣西中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科廣西中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科 黃黃 新新泌尿系統(tǒng)的解剖泌尿系統(tǒng)的解剖腎上腺腎上腺腎腎輸尿管輸尿管膀胱膀胱尿道尿道前列腺前列腺陰囊內(nèi)容物陰囊內(nèi)容物腎上腺(腎上腺(suprarenal gland)位于腹膜后隙,腎位于腹膜后隙,腎臟的臟的上方,左側(cè)為半月形,右側(cè)似三角形。腎上腺的動脈左側(cè)為半月形,右側(cè)似三角形。腎上腺的動脈有三支:有三支: 膈下動脈腎上腺上動脈膈下動脈腎上腺上動脈腹主動脈腎上腺中動脈腹主動脈腎上腺中動脈 腎動脈腎上腺下動脈腎動脈腎上腺下動脈一、腎上腺的解剖一、腎上腺的解剖左腎上腺靜脈左腎靜脈左腎上腺靜脈左腎靜脈右腎上腺靜脈下腔靜脈右腎上腺靜脈下腔
2、靜脈少數(shù)匯入右膈下靜脈右腎靜脈少數(shù)匯入右膈下靜脈右腎靜脈 腎上腺皮質(zhì)腎上腺皮質(zhì)由外向內(nèi)可分為層即球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。由外向內(nèi)可分為層即球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。球狀帶球狀帶主要分泌醛固酮,又稱為鹽皮質(zhì)激素,其主要功能是促主要分泌醛固酮,又稱為鹽皮質(zhì)激素,其主要功能是促進腎臟對鈉離子的主動重吸收和對鉀離子的排泄,維持體內(nèi)水進腎臟對鈉離子的主動重吸收和對鉀離子的排泄,維持體內(nèi)水的恒定,增加組織液和血量,這對生命至關(guān)重要。的恒定,增加組織液和血量,這對生命至關(guān)重要。束狀帶束狀帶及及網(wǎng)狀帶網(wǎng)狀帶分泌糖皮質(zhì)激素,主要為皮質(zhì)醇。皮質(zhì)醇主要分泌糖皮質(zhì)激素,主要為皮質(zhì)醇。皮質(zhì)醇主要作用是促進糖異生和升高血糖
3、。促使蛋白質(zhì)分解,使脂肪組織作用是促進糖異生和升高血糖。促使蛋白質(zhì)分解,使脂肪組織中脂肪分解并在體內(nèi)重新分布。皮質(zhì)醇在機體處于應(yīng)激狀態(tài)時中脂肪分解并在體內(nèi)重新分布。皮質(zhì)醇在機體處于應(yīng)激狀態(tài)時可提高其耐受能力。皮質(zhì)醇還具有抗炎抗過敏和抑制免疫功能可提高其耐受能力。皮質(zhì)醇還具有抗炎抗過敏和抑制免疫功能的作用。的作用。腎上腺髓質(zhì)腎上腺髓質(zhì)由嗜鉻細胞構(gòu)成,主要分泌腎上腺素,也可分泌少由嗜鉻細胞構(gòu)成,主要分泌腎上腺素,也可分泌少量去甲腎上腺素。腎上腺素和去甲腎上腺素對心血管、內(nèi)臟平量去甲腎上腺素。腎上腺素和去甲腎上腺素對心血管、內(nèi)臟平滑肌的活動有調(diào)節(jié)作用。腎上腺髓質(zhì)是人體極重要的內(nèi)分泌腺,滑肌的活動有調(diào)
4、節(jié)作用。腎上腺髓質(zhì)是人體極重要的內(nèi)分泌腺,髓質(zhì)分泌功能障礙將引起人體失去有效的應(yīng)急能力髓質(zhì)分泌功能障礙將引起人體失去有效的應(yīng)急能力一、腎臟的解剖:一、腎臟的解剖: 腎的位置腎的位置腎(腎(kidney)位于脊柱兩側(cè),貼附于腹后壁位于脊柱兩側(cè),貼附于腹后壁 腎蒂(腎蒂(renal pedicle)由出入腎門的腎由出入腎門的腎血管、腎盂、神經(jīng)和淋巴管組成。由血管、腎盂、神經(jīng)和淋巴管組成。由前向后為:靜、動、盂;前向后為:靜、動、盂;由上向下為:動、靜、盂。由上向下為:動、靜、盂。腎的被膜有三層:由外向內(nèi)依次為腎腎的被膜有三層:由外向內(nèi)依次為腎筋膜、脂肪囊和纖維囊。筋膜、脂肪囊和纖維囊。輸尿管輸尿管
5、(ureters):全長全長2530cm。可可分三部:分三部:腹部(腰段),從腎盂與輸尿管交腹部(腰段),從腎盂與輸尿管交界處至跨越髂血管處;界處至跨越髂血管處; 盆部(盆段),從跨越髂血管處至盆部(盆段),從跨越髂血管處至膀胱壁;膀胱壁;壁內(nèi)部(膀胱壁段),斜行穿膀胱壁內(nèi)部(膀胱壁段),斜行穿膀胱壁。壁。膀胱膀胱(urinary bladder)位于盆腔前部,空位于盆腔前部,空虛時上界約與骨盆上口相當(dāng),膀胱體上面虛時上界約與骨盆上口相當(dāng),膀胱體上面有腹膜覆蓋,下外側(cè)面緊貼恥骨后隙的疏有腹膜覆蓋,下外側(cè)面緊貼恥骨后隙的疏松結(jié)締組織、肛提肌和閉孔內(nèi)肌。男性膀松結(jié)締組織、肛提肌和閉孔內(nèi)肌。男性膀胱
6、底上部借直腸膀胱陷凹與直腸相鄰,下胱底上部借直腸膀胱陷凹與直腸相鄰,下部與精囊和輸精管壺腹相鄰;膀胱頸與前部與精囊和輸精管壺腹相鄰;膀胱頸與前列腺相接。女性的膀胱底與子宮頸和陰道列腺相接。女性的膀胱底與子宮頸和陰道前壁相貼,膀胱頸與尿生殖膈相鄰。前壁相貼,膀胱頸與尿生殖膈相鄰。髂內(nèi)動脈前干髂內(nèi)動脈前干膀胱上動脈膀胱上動脈膀胱下動脈膀胱下動脈膀胱上中部膀胱上中部膀胱下部膀胱下部髂內(nèi)靜脈髂內(nèi)靜脈陰囊的層次陰囊的層次1. 選題背景選題背景 2.研究現(xiàn)狀研究現(xiàn)狀3.研究目標研究目標和研究內(nèi)容和研究內(nèi)容4. 技術(shù)路線技術(shù)路線5. 本課題特本課題特點點6. 部分預(yù)實部分預(yù)實驗結(jié)果驗結(jié)果7. 實驗進展實驗進
7、展安排安排 3 hif-1腫瘤中表達及與生物行為關(guān)系腫瘤中表達及與生物行為關(guān)系4 hif-1與化療耐藥的關(guān)系與化療耐藥的關(guān)系5 p53基因與基因與hif-1表達的關(guān)系表達的關(guān)系胃癌是常見的消化道惡性腫瘤,化療仍是治胃癌是常見的消化道惡性腫瘤,化療仍是治療中晚期胃癌的主要手段,但由于腫瘤的多療中晚期胃癌的主要手段,但由于腫瘤的多藥耐藥(藥耐藥(mdr),化療的效果并不理想。),化療的效果并不理想。目前認為目前認為mdr-1基因與基因與mdr有關(guān),其編碼有關(guān),其編碼p-糖蛋白糖蛋白(p-gp),能把結(jié)構(gòu)功能不同的藥物泵,能把結(jié)構(gòu)功能不同的藥物泵出細胞外而降低藥物濃度出細胞外而降低藥物濃度, 從而引
8、發(fā)腫瘤耐從而引發(fā)腫瘤耐藥但是對于癌癥中藥但是對于癌癥中p-gp過表達的調(diào)節(jié)機制過表達的調(diào)節(jié)機制目前尚不清楚。目前尚不清楚。耐藥分類: 原藥耐藥原藥耐藥pdr 多藥耐藥多藥耐藥mdr 腫瘤耐藥機制 藥理耐藥藥理耐藥 . 生化耐藥生化耐藥 凋亡耐藥凋亡耐藥 細胞動力學(xué)耐藥細胞動力學(xué)耐藥 惡性腫瘤生長迅速惡性腫瘤生長迅速 ,當(dāng)腫瘤細胞生長超當(dāng)腫瘤細胞生長超過血管生成的速度時過血管生成的速度時,極易發(fā)生缺氧極易發(fā)生缺氧.因此腫瘤缺氧是腫瘤惡性進展的重要特征因此腫瘤缺氧是腫瘤惡性進展的重要特征.腫腫瘤細胞可通過多種途徑對缺氧進行適應(yīng)性調(diào)瘤細胞可通過多種途徑對缺氧進行適應(yīng)性調(diào)節(jié)節(jié).缺氧誘導(dǎo)因子缺氧誘導(dǎo)因子
9、1(hypoxia inducible factor 1, hif-1)是調(diào)節(jié)細胞缺氧反應(yīng)的主要轉(zhuǎn)錄因)是調(diào)節(jié)細胞缺氧反應(yīng)的主要轉(zhuǎn)錄因子子 .till acker ,et al. a role for hypoxia and hypoxia-inducible transcription factors in tumor physiology。 j mol med , 2002, 80:562575. 缺氧缺氧 癌基因激活癌基因激活 her2 frap hras csrc 抑癌基因失活抑癌基因失活 vhl pten p53 生長因子或細胞因子生長因子或細胞因子 igr、insulin、egf、
10、il-1 hif-1的表達調(diào)節(jié)因素的表達調(diào)節(jié)因素二二. 研研 究究 現(xiàn)現(xiàn) 狀狀1. hif-1在腫瘤細胞中表達位于細胞核在腫瘤細胞中表達位于細胞核內(nèi)內(nèi). 2.hif-1在多種腫瘤中的表達在多種腫瘤中的表達 ,在腫瘤在腫瘤 附近正常組織中不能測及附近正常組織中不能測及 . 3.在結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的在結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn),研究中發(fā)現(xiàn),hif-1蛋白表達隨乳腺癌蛋白表達隨乳腺癌惡性度升高而增加,且與浸潤、淋巴結(jié)惡性度升高而增加,且與浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)轉(zhuǎn)移有關(guān) 4. 發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)hif-1-/-組劑量反應(yīng)曲線較組劑量反應(yīng)曲線較hif-1+/+組明顯左移組明顯左移,ic
11、50也顯著減少也顯著減少. 5.對腫瘤細胞的研究發(fā)現(xiàn)對腫瘤細胞的研究發(fā)現(xiàn)hif-1-/-腫瘤細腫瘤細胞對放療和化療藥物的敏感度都有所增加。胞對放療和化療藥物的敏感度都有所增加。 6.多藥耐藥基因多藥耐藥基因mdr1是是 hif-1的靶基的靶基因。因。 7.利用乏氧誘導(dǎo)肺腺癌細胞利用乏氧誘導(dǎo)肺腺癌細胞459表達表達hif-1,發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)p-gp和和mrp隨著隨著hif-1表達而增加,并且對表阿表達而增加,并且對表阿霉素和順鉑的耐藥性增強。霉素和順鉑的耐藥性增強。 8.國外的研究也發(fā)現(xiàn),缺氧能導(dǎo)致國外的研究也發(fā)現(xiàn),缺氧能導(dǎo)致p-gp和和hif-1過過表達,從而產(chǎn)生對表達,從而產(chǎn)生對vp-16、博萊
12、霉素和蒽環(huán)類耐藥。、博萊霉素和蒽環(huán)類耐藥。 9.國外對卵巢癌的研究已表明突變型國外對卵巢癌的研究已表明突變型p53過表達會過表達會引起引起hif-1表達升高表達升高. 待解決問題待解決問題目前關(guān)于目前關(guān)于hif-1與胃癌生物行為及多藥耐與胃癌生物行為及多藥耐藥機制關(guān)系的研究報道甚少。藥機制關(guān)系的研究報道甚少。 目前對于目前對于hif-1與的研究多用基與的研究多用基因轉(zhuǎn)染方法,應(yīng)用原代胃癌體外細胞藥因轉(zhuǎn)染方法,應(yīng)用原代胃癌體外細胞藥物敏感性進行研究的報道甚少物敏感性進行研究的報道甚少 三三. .研究目標和研究內(nèi)容研究目標和研究內(nèi)容1. 研究目標研究目標研究研究hif-1蛋白表達與蛋白表達與p-g
13、p表達的相關(guān)表達的相關(guān)性,探討其與胃癌細胞多藥耐藥的關(guān)系。性,探討其與胃癌細胞多藥耐藥的關(guān)系。探討探討hif-1表達與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)表達與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系系 .探討探討hif-1蛋白表達與突變蛋白表達與突變p53過表達的過表達的相關(guān)性相關(guān)性 . 2. 研究內(nèi)容研究內(nèi)容 對例新鮮胃癌標本進行細胞純化,對例新鮮胃癌標本進行細胞純化,短期原代培養(yǎng),應(yīng)用流式細胞技術(shù)和短期原代培養(yǎng),應(yīng)用流式細胞技術(shù)和mtt法檢測其對常用化療藥物的敏感性法檢測其對常用化療藥物的敏感性應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測60例胃癌石蠟標例胃癌石蠟標本本p53、p-gp、hif-1蛋白表達,并收集蛋白表達,并收集
14、臨床病理資料。臨床病理資料。應(yīng)用應(yīng)用rt-pcr方法檢測相同方法檢測相同60例新鮮胃例新鮮胃癌細胞癌細胞hif-1mrna的表達水平。的表達水平。 應(yīng)用應(yīng)用tunel、熒光顯微鏡等方法檢測、熒光顯微鏡等方法檢測化療藥誘導(dǎo)胃癌細胞凋亡后的形態(tài)學(xué)改變?;熕幷T導(dǎo)胃癌細胞凋亡后的形態(tài)學(xué)改變。四. 技術(shù)路線hif-1rt-pcr 免疫組化免疫組化胃癌手術(shù)標本胃癌手術(shù)標本細胞分離、短期培養(yǎng)細胞分離、短期培養(yǎng)及流及流式技術(shù)檢測式技術(shù)檢測化療藥物體化療藥物體外敏感性外敏感性hif-1、p-gp 、p53 免疫組化免疫組化化療藥誘化療藥誘導(dǎo)胃癌細導(dǎo)胃癌細胞凋亡后胞凋亡后形態(tài)學(xué)改形態(tài)學(xué)改變變對結(jié)果進行統(tǒng)計對結(jié)果
15、進行統(tǒng)計分析分析五. 本課題的特點 從細胞缺氧角度探討從細胞缺氧角度探討hif-1蛋白表達與蛋白表達與p-gp表達的相關(guān)性,探討其與胃癌細胞表達的相關(guān)性,探討其與胃癌細胞多藥耐藥的關(guān)系。國外有類似研究,國多藥耐藥的關(guān)系。國外有類似研究,國內(nèi)未見報道內(nèi)未見報道 關(guān)于關(guān)于hif-1表達與胃癌生物學(xué)行為的表達與胃癌生物學(xué)行為的研究國內(nèi)未見報道。研究國內(nèi)未見報道。 新穎性新穎性關(guān)于胃癌中關(guān)于胃癌中hif-1蛋白表達與蛋白表達與p53過表達過表達關(guān)系在國內(nèi)未見報道關(guān)系在國內(nèi)未見報道 實用性實用性探討探討hif-1蛋白表達與蛋白表達與p-gp表達的相關(guān)性,表達的相關(guān)性,可望從一新角度闡述耐藥發(fā)生機制??赏?/p>
16、從一新角度闡述耐藥發(fā)生機制。 研究研究hif-1表達與胃癌生物學(xué)行為的表達與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系,探討其作為一種新的獨立關(guān)系,探討其作為一種新的獨立預(yù)后參數(shù)的可能性預(yù)后參數(shù)的可能性。 探討探討hif-1蛋白表達與蛋白表達與p53過表達關(guān)系過表達關(guān)系有助于更好理解胃癌病理生物學(xué)特征。有助于更好理解胃癌病理生物學(xué)特征。 國外已有類似的文獻報道國外已有類似的文獻報道??尚行钥尚行允中g(shù)標本充足手術(shù)標本充足 ,設(shè)備齊全,預(yù)實驗結(jié)果,設(shè)備齊全,預(yù)實驗結(jié)果 科學(xué)性科學(xué)性免疫組化判斷標準:免疫組化判斷標準:p53:無陽性細胞或陽性細胞 5 %為陰性, ( + ) , ( ) , 強陽性( ) ,為()。p-g
17、p 為胞質(zhì)和(或) 胞膜陽性,陽性細胞 5 %為陰性,5 %15 %為+ , 16 %為 。hif-1判斷標準:為陰性,為判斷標準:為陰性,為(),為(),為(),為(),為()()藥物敏感性判斷:藥物敏感性判斷:高度敏感高度敏感:抑制率抑制率 50 %;中度敏感中度敏感:抑制率抑制率30 %50 %;不敏感不敏感:抑制率抑制率 30 %。 hif-1陽性陽性 hif-1陰性陰性p-gp 陽性陽性p-gp 陰性陰性hif-1陽性陽性 hif-1陰性陰性藥物敏感性與藥物敏感性與hif-1的關(guān)系的關(guān)系hif-1表達與胃癌生物學(xué)行為的研究表達與胃癌生物學(xué)行為的研究 按臨床病理分期、組織類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)按臨床病理分期、組織類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否分組移與否分組hif-1陽性陽性 hif-1陰性陰性p53 陽性陽性p53陰性陰性 部分預(yù)實驗結(jié)果部分預(yù)實驗結(jié)果胃癌中突變胃癌中突變p53蛋白的表達蛋白的表達 (10*20倍)倍) 細胞核內(nèi)表達細胞核內(nèi)表達 胃癌中胃癌中p-gp的表達的表達 (10*20倍)倍) 細胞膜細胞膜/漿表達漿表達預(yù)實驗結(jié)果小結(jié)預(yù)實驗結(jié)果小結(jié)基本掌握胃癌細胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法基本掌握胃癌細胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法原代胃癌細胞法體外藥物敏感實驗原代胃癌細胞法體外藥物敏感實驗基本掌握免疫組織化學(xué)的實驗流程基本掌握免疫組織化學(xué)的實驗流程凋亡細胞凋亡細胞dna片斷電
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