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1、(一)優(yōu)點(diǎn)(一)優(yōu)點(diǎn)1、組織分化程度低、組織分化程度低2、可選擇不同的日齡和接種途徑、可選擇不同的日齡和接種途徑3、病毒易于增殖、病毒易于增殖4、感染病毒的組織和液體中含大量病毒、感染病毒的組織和液體中含大量病毒5、容易采集和處理、容易采集和處理6、來(lái)源充足、來(lái)源充足7、設(shè)備和操作簡(jiǎn)便易行、設(shè)備和操作簡(jiǎn)便易行(二)缺點(diǎn)(二)缺點(diǎn)1、胚內(nèi)可能污染細(xì)菌和病毒、胚內(nèi)可能污染細(xì)菌和病毒 沙門氏菌、禽白血病病毒、新城疫、沙門氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽腦脊髓炎病毒禽腦脊髓炎病毒2、母源抗體、母源抗體3、許多病毒在雞胚中增殖缺乏特異性的、許多病毒在雞胚中增殖缺乏特異性的感染指針感染指針 1、絨毛尿囊膜接
2、種、絨毛尿囊膜接種 2、尿囊腔接種、尿囊腔接種3、卵黃囊接種、卵黃囊接種4、靜脈接種、靜脈接種 藍(lán)舌病毒藍(lán)舌病毒5、羊膜腔接種、羊膜腔接種 正粘病毒和副粘病毒正粘病毒和副粘病毒6、腦內(nèi)接種、腦內(nèi)接種 狂犬病毒狂犬病毒7、眼球接種、眼球接種1 1、用檢卵燈檢查雞胚活力。、用檢卵燈檢查雞胚活力。2 2、用鉛筆畫(huà)出氣室和胚胎的位置,并在、用鉛筆畫(huà)出氣室和胚胎的位置,并在將要接種的部位做好記號(hào)。將要接種的部位做好記號(hào)。3 3、對(duì)雞胚進(jìn)行消毒。、對(duì)雞胚進(jìn)行消毒。 主要用于蟲(chóng)媒披膜病毒以及主要用于蟲(chóng)媒披膜病毒以及鸚鵡熱衣原體和立克次氏體等鸚鵡熱衣原體和立克次氏體等的分離和增殖。的分離和增殖。方法一:方法一
3、:1 1)?。┤?-86-8日齡雞胚,用檢卵燈日齡雞胚,用檢卵燈照視畫(huà)出氣室和胚胎位置后,照視畫(huà)出氣室和胚胎位置后,垂直放置在卵座上垂直放置在卵座上( (大頭向上大頭向上) )2 2)用碘酊和酒精消毒氣室端)用碘酊和酒精消毒氣室端3 3)用鋼錐在氣室中央錐一小孔)用鋼錐在氣室中央錐一小孔 4 4)用注射器吸取病毒懸液,沿)用注射器吸取病毒懸液,沿氣室端所穿小孔垂直刺入氣室端所穿小孔垂直刺入3cm3cm,注入注入0.1-0.5ml0.1-0.5ml病毒液。病毒液。5 5)用熔化的石蠟封孔,置孵卵)用熔化的石蠟封孔,置孵卵箱內(nèi)繼續(xù)孵育,每天翻卵箱內(nèi)繼續(xù)孵育,每天翻卵1-21-2次,次,24h24h
4、內(nèi)死亡者廢棄。內(nèi)死亡者廢棄。方法二:方法二:1 1)2 2)同一)同一3 3)將卵橫放在卵座上,胚)將卵橫放在卵座上,胚胎位置向下。在卵長(zhǎng)徑的胎位置向下。在卵長(zhǎng)徑的1/21/2處用碘酊和酒精消毒。處用碘酊和酒精消毒。4 4)用鋼錐打一小孔,將針)用鋼錐打一小孔,將針頭刺入約頭刺入約1.5cm1.5cm,注入病毒,注入病毒液液0.1-0.5ml0.1-0.5ml。5 5)用熔化的石蠟封孔,置)用熔化的石蠟封孔,置孵卵箱內(nèi)繼續(xù)孵育,孵卵箱內(nèi)繼續(xù)孵育,24h24h內(nèi)內(nèi)死亡者廢棄。死亡者廢棄。主要用于痘主要用于痘V V和皰疹和皰疹V V的分的分離和增殖。離和增殖。方法一:方法一:1 1)?。┤?0-1
5、210-12日齡雞胚,日齡雞胚,畫(huà)出氣室部,消毒畫(huà)出氣室部,消毒2 2)在氣室端的卵殼上開(kāi))在氣室端的卵殼上開(kāi)一一1.51.51.5cm1.5cm的口的口3 3)用滅菌眼科鑷子撕去)用滅菌眼科鑷子撕去一小片內(nèi)殼膜。一小片內(nèi)殼膜。4 4)滴入接種物。)滴入接種物。5 5)用膠布或透明膠紙封)用膠布或透明膠紙封閉切口。閉切口。1、雞胚停止生長(zhǎng)。、雞胚停止生長(zhǎng)。2、全身出血(頭頸部,背部等)。、全身出血(頭頸部,背部等)。3、尿囊液增量。、尿囊液增量。4、病毒經(jīng)尿囊腔接種后、病毒經(jīng)尿囊腔接種后36h,最高滴度可,最高滴度可達(dá)達(dá)107個(gè)雞胚致死量。個(gè)雞胚致死量。5、雞胚死亡(病毒接種量大)。、雞胚死亡(病毒接種量大)。 收毒前將雞胚直立放置于收毒前將雞胚直立放置于4冰箱半小冰箱半小時(shí)以上,凍死胚胎,防止出血。時(shí)以上,凍死胚胎,防止出血。 根據(jù)接種途徑的不同,收獲相應(yīng)的材根據(jù)接種途徑的不同,收獲相應(yīng)的材料料1、絨毛尿囊膜接種、絨毛尿囊膜接種 收獲接種部位絨毛尿收獲接種部位絨毛尿囊膜囊膜2、尿囊腔接種、尿囊腔接種 收獲尿囊液(收獲尿囊液(58ml)3、卵黃囊接種、
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