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文檔簡介

1、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)P36P36臨床檢驗(yàn)根底教研室程楊艷嗜酸粒細(xì)胞來源于骨髓多能造血干細(xì)胞,為髓系干細(xì)胞分化而來的嗜酸粒細(xì)胞祖細(xì)胞CFU-EO所產(chǎn)生。 功能:1微弱的吞噬作用,根本無殺菌力;2主要作用是限制過敏反響的作用: 抑制嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞; 吞噬其釋放顆粒; 分泌組胺酶破壞組胺;3參與蠕蟲的免疫反響。嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子其來源嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子其來源從嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞來源的組胺;從補(bǔ)體來的C3aC5a;從致敏淋巴細(xì)胞來的嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子;從寄生蟲來的嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子;某些細(xì)菌來的嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子; 從腫瘤來的嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子。 趨化因

2、子E嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)數(shù)=WBCE% 其中E%嗜酸性粒細(xì)胞分類的比值不準(zhǔn),進(jìn)推算的絕對(duì)值誤差較大;故為到達(dá)準(zhǔn)確計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞的目的,須做嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)。 原理原理 用嗜酸粒細(xì)胞稀釋液將血液用嗜酸粒細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),同時(shí)使紅細(xì)胞和稀釋一定倍數(shù),同時(shí)使紅細(xì)胞和大部分其他白細(xì)胞被破壞,并將大部分其他白細(xì)胞被破壞,并將嗜酸粒細(xì)胞著色,充入計(jì)數(shù)板,嗜酸粒細(xì)胞著色,充入計(jì)數(shù)板,低倍鏡下計(jì)數(shù)低倍鏡下計(jì)數(shù)2 2個(gè)計(jì)數(shù)池共個(gè)計(jì)數(shù)池共1010個(gè)個(gè)大方格內(nèi)的嗜酸粒細(xì)胞數(shù),經(jīng)換大方格內(nèi)的嗜酸粒細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中的嗜酸粒細(xì)胞算求得每升血液中的嗜酸粒細(xì)胞數(shù)。數(shù)。 器材器材 采血針、干棉球、采血

3、針、干棉球、75%75%酒精酒精棉球棉球 試管、吸量管試管、吸量管 計(jì)數(shù)板、顯微鏡計(jì)數(shù)板、顯微鏡 試劑試劑 特點(diǎn):特點(diǎn):為低滲溶液,可使紅、白細(xì)為低滲溶液,可使紅、白細(xì)胞溶解破裂;胞溶解破裂;含對(duì)含對(duì)E E的維護(hù)劑,如乙醇、乙的維護(hù)劑,如乙醇、乙二醇、丙酮;二醇、丙酮;并使并使E E顆粒染色而被識(shí)別。顆粒染色而被識(shí)別。以下試劑任選一種: 1.伊紅-丙酮稀釋液 2.溴甲酚紫稀釋液 3.Hinkelman稀釋液 4.乙醇-伊紅稀釋液 5.皂素-甘油稀釋液 6.固綠稀釋液 操作操作 0.38ml 0.38ml稀釋液稀釋液20l20l血血混勻混勻RBCRBC溶解后溶解后混勻混勻充池充池2 2個(gè)個(gè)靜置靜

4、置2-5min2-5min鏡下計(jì)數(shù)鏡下計(jì)數(shù)1010個(gè)大方格個(gè)大方格E E的數(shù)的數(shù)目。目。 計(jì)算計(jì)算 E/L=10 E/L=10大方格大方格E E的數(shù)的數(shù)2020106106 =0.02N =0.02N109/L109/L 參考值參考值 0.05-0.5 0.05-0.5109/L109/L 本卷須知本卷須知 1.本實(shí)驗(yàn)必需在1h內(nèi)完成,否那么細(xì)胞被破壞,結(jié)果偏低;2.及時(shí)混勻,不能過分振蕩,以免細(xì)胞破壞;3.一致采血時(shí)間,以免受生理變化;4.留意與N區(qū)別,以免結(jié)果偏高;N著色淺,顆粒小5.含乙醇、丙酮等維護(hù)劑會(huì)揮發(fā),應(yīng)留意其變化;6.溴甲酚紫在酸性或中性時(shí)為橙黃色,在堿性顯藍(lán),故器具要防酸。

5、方法學(xué)評(píng)價(jià)方法學(xué)評(píng)價(jià) 1顯微鏡計(jì)數(shù)法 所需設(shè)備簡單,簡便易行; 求得的嗜酸粒細(xì)胞絕對(duì)值,比用白細(xì)胞總數(shù)和分類計(jì)數(shù)間接推算出的來的準(zhǔn)確。 但反復(fù)性差,準(zhǔn)確性不如血液分析儀法。 所采用的稀釋液多種,其優(yōu)缺陷見表2-472血液分析儀法 五分類血液分析儀是目前最有效的嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的篩檢方法, 分析速度快,準(zhǔn)確性較高。 但儀器昂貴;當(dāng)儀器提示嗜酸粒細(xì)胞增多伴直方圖或散點(diǎn)圖異常時(shí),應(yīng)采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法復(fù)檢。 臨床意義臨床意義 生理變化 腎上腺皮質(zhì)激素的作用: 阻止骨髓釋放E; 使血中E到組織中去。1勞動(dòng)、冰冷、饑餓、各精神刺激等 交感神經(jīng)興奮ACTH腎上腺皮質(zhì)激素 E。 2年齡: 5歲以下 0-0.8

6、109/L 5-15歲 0-0.5109/L3日間變化: 上午動(dòng)搖大,下午較恒定。 與糖皮質(zhì)激素脈沖式分泌有關(guān)。2.病理變化 1增高:輕度 0.5-1.5109/L 中度 1.5-5109/L 重度 5109/L 見于: 寄生蟲?。嚎蛇_(dá)10%或更多。變態(tài)反響性疾?。褐夤芟?、藥物過敏反響、蕁麻疹。某些皮膚病:如濕疹、銀屑病等。血液?。喝缏粤<?xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術(shù)后等;嗜酸性粒細(xì)胞白血??;霍奇金病。某些惡性腫瘤:如肺癌伴嗜酸性粒細(xì)胞增高。某些傳染?。焊腥酒谑人嵝粤<?xì)胞常減低,猩紅熱急性期嗜酸性粒細(xì)胞增高。恢復(fù)期暫時(shí)性增高。2減少: 長期運(yùn)用腎上腺皮質(zhì)激素; 急性傳染病早期:如傷寒、副傷寒; 大手術(shù)、燒傷。3其他臨床運(yùn)用 1察看急性傳染病的預(yù)后 2察看手術(shù)和燒傷患者的預(yù)后 3測定腎上腺皮質(zhì)功能和垂體前葉功能:促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH使腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)激素,構(gòu)成嗜酸性粒細(xì)胞減低。直接刺激腎上腺皮質(zhì):嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后,隨即肌注或靜脈滴注ACTH 25mg。 間接刺激腎上腺皮質(zhì):注射0.1%腎上腺素0.5ml,刺激垂體前葉分泌ACTH 。結(jié)果判別:正常情況:比注射前應(yīng)減低50%以上。腎上腺皮質(zhì)功能正常,而垂體前葉功能不良者:那么直接刺激

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