生物化學(xué) (2)

1、第三章 蛋白質(zhì)一、填空題1.氨基酸的等電點(diǎn)(pI)是指_。2.氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)，主要以_離子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以_離子形式存在，在pH<pI的溶液中，大部分以_離子形式存在。3.在生理?xiàng)l件下(pH7.0左右)，蛋白質(zhì)分子中的_側(cè)鏈和_側(cè)鏈幾乎完全帶正電荷，但是_側(cè)鏈則帶部分正電荷。4.近年來(lái)的研究指出，肽也有構(gòu)象。如腦啡肽是一個(gè)五肽，它有_構(gòu)象。但肽的構(gòu)象易變，穩(wěn)定性遠(yuǎn)不如蛋白質(zhì)。5.在糖蛋白中，糖可與蛋白質(zhì)的_、_、_或_殘基以O(shè)糖苷鍵相連，或與_殘基以N-糖苷鍵相連。6.蛋白質(zhì)的最低自由能構(gòu)象，常常通過(guò)_殘基之間形成的共價(jià)鍵而穩(wěn)定。7.一般來(lái)說(shuō)，球狀蛋白質(zhì)的

2、_性氨基酸側(cè)鏈位于分子內(nèi)部，_性氨基酸側(cè)鏈位于分子表面。8.DEAE-纖維素是一種_交換劑，CM-纖維素是一種_交換劑。9.多聚L-谷氨酸的比旋光度隨pH改變是因?yàn)開，而L-谷氨酸的比旋光度隨pH改變則是由于_。10.影響血紅蛋白與氧結(jié)合的因素有_、_、_和_等。11.許多鈣結(jié)合蛋白都存在有_圖象，即它們的鈣結(jié)合位點(diǎn)都由一個(gè)_的結(jié)構(gòu)單位構(gòu)成。12.胰島素是胰島-細(xì)胞分泌的，它是由前胰島素原經(jīng)專一性蛋白水解，失去N端的_成為_。再經(jīng)類胰蛋白酶和類羧肽酶的作用失去_肽，形成具有生物活性的胰島素。二、是非題1. 蛋白質(zhì)分子中所有的氨基酸(除甘氨酸外)都是左旋的。2. 自然界的蛋白質(zhì)和多肽類物質(zhì)均由L

3、-型氨基酸組成。3. 當(dāng)溶液的pH大于某一可解離基團(tuán)的pKa值時(shí)，該基團(tuán)有一半以上被解離。4. CNBr能裂解Gly-Met-Pro三肽。5. 雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)特有的反應(yīng)，所以二肽也有雙縮脲反應(yīng)。6. 熱力學(xué)上最穩(wěn)定的蛋白質(zhì)構(gòu)象自由能最低。7. 可用8mol/L尿素拆開蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵。8. 蛋白質(zhì)的氨基酸順序(一級(jí)結(jié)構(gòu))在很大程度上決定它的構(gòu)象(三維結(jié)構(gòu))。9. 變性蛋白質(zhì)溶解度降低是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子的電荷被中和以及除去了蛋白質(zhì)外面的水化層所引。10. 血紅蛋白的-鏈、-鏈和肌紅蛋白的肽鏈在三級(jí)結(jié)構(gòu)上很相似，所以它們都有結(jié)合氧的能力。血紅蛋白與氧的親和力較肌紅蛋白更強(qiáng)。11. 在生理

4、條件下，氧和二氧化碳均與血紅蛋白血紅素中的二價(jià)鐵結(jié)合。12. 在水溶液中，蛋白質(zhì)溶解度最小時(shí)的pH值通常就是它的等電點(diǎn)。三、選擇題1. 下列有關(guān)氨基酸的敘述，哪個(gè)是錯(cuò)誤的? A.酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯環(huán) B.酪氨酸和絲氨酸都含羥基 C.亮氨酸和纈氨酸都是分支氨基酸 D.脯氨酸和酪氨酸都是非極性氨基酸 E.組氨酸、色氨酸和脯氨酸都是雜環(huán)氨基酸2. 下列哪一類氨基酸完全是非必需氨基酸? A.堿性氨基酸 B.含硫氨基酸 C.分支氨基酸 D.芳香族氨基酸 E.以上四種答案都不對(duì)3. 一個(gè)谷氨酸溶液，用5m1 1mo1/LNa0H來(lái)滴定，溶液的pH從1.0上升到7.0，下列數(shù)值中哪一個(gè)接近于該溶液中所

5、含谷氨酸的毫摩爾數(shù)? A.1.5 B.3.0 C.6.0 D.12.0 E.18.04. 有一多肽經(jīng)酸水解后產(chǎn)生等摩爾的Lys，Gly和A1a.如用胰蛋白酶水解該肽，僅發(fā)現(xiàn)有游離的Gly和一種二肽。下列多肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)中，哪一個(gè)符合該肽的結(jié)構(gòu)? A.Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala B.Ala-Lys-Gly C.Lys-Gly-Ala D.Gly-Lys-Ala E.Ala-Gly-Lys 5. 測(cè)定小肽氨基酸順序的最好方法是 A.2，4-二硝基氟苯法(FDNB法) B.二甲氨基萘磺酰氯法(DNS-Cl法) C.氨肽酶法 D.苯異硫氰酸法(PITC法) E.羧肽酶法6.

6、 用下列方法測(cè)定蛋白質(zhì)含量，哪一種方法需要完整的肽鍵? A.雙縮脲反應(yīng) B.克氏定氮 C.紫外吸收 D.茚三酮反應(yīng) E.奈氏試劑7. 下列有關(guān)-螺旋的敘述哪個(gè)是錯(cuò)誤的? A.分子內(nèi)的氫鍵使-螺旋穩(wěn)定減弱R基團(tuán)間不利的相互作用使-螺旋穩(wěn)定 B.減弱R基團(tuán)間不利的相互作用使-螺旋穩(wěn)定 C.疏水作用使-螺旋穩(wěn)定 D.在某些蛋白質(zhì)中，-螺旋是二級(jí)結(jié)構(gòu)中的一種類型 E.脯氨酸和甘氨酸殘基使-螺旋中斷8. 下列哪種方法可得到蛋白質(zhì)的“指紋”圖譜? A.酸水解，然后凝膠過(guò)濾 B.徹底堿水解并用離子交換層析測(cè)定氨基酸的組成 C.用氨肽酶降解并測(cè)定被釋放的氨基酸的組成 D.用胰蛋白酶降解，然后進(jìn)行紙層析和紙電泳

7、 E.用2，4-二硝基氟苯處理蛋白質(zhì)9. 血紅蛋白別構(gòu)作用的本質(zhì)是其中的鐵離子 A.價(jià)態(tài)發(fā)生變化 B.自旋狀態(tài)發(fā)生變化 C.與卟啉環(huán)氮原子連接的鍵長(zhǎng)發(fā)生變化 D.以上說(shuō)法都對(duì) E.以上說(shuō)法都不對(duì)10. 若用電泳分離Gly-Lys、Asp-Val和Ala-His三種二肽，在下列哪個(gè)pH條件下電泳最為合適？ A.pH2以下 B.pH24 C.pH79 D.pH1012 E.pH12以上11. 進(jìn)行疏水吸附層析時(shí)，以下哪種條件比較合理 A.在有機(jī)溶劑存在時(shí)上柱，低鹽溶液洗脫 B.在有機(jī)溶劑存在時(shí)上柱，高鹽溶液洗脫 C.低鹽條件下上柱，高鹽溶液洗脫 D.高鹽溶液上柱，按低鹽，水和有機(jī)溶劑順序洗脫。 E

8、.低鹽緩沖液上柱，低鹽洗脫12. 人工合肽時(shí)，采用下列哪種方法可以活化氨基？ A.加入三乙胺 B.甲酰化 C.乙?；?D.烷基化 E.酸化13. 下列氨基酸中哪些具有分支的碳?xì)鋫?cè)鏈? (1).纈氨酸 (2).組氨酸 (3).異亮氨酸 (4).色氨酸 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,414. 下列關(guān)于蛋白質(zhì)中L-氨基酸之間形成的肽鍵的敘述，哪些是正確的? (1).具有部分雙鍵的性質(zhì) (2).比通常的C-N單鍵短 (3).通常有一個(gè)反式構(gòu)型 (4).能自由旋轉(zhuǎn) A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,415. 下列關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述哪些是正

9、確的? (1).二硫鍵對(duì)穩(wěn)定蛋白質(zhì)的構(gòu)象起重要作用 (2).當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)放入水中時(shí)，帶電荷的氨基酸側(cè)鏈趨向于排列在分子的外面 (3).蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定高級(jí)結(jié)構(gòu) (4).氨塞酸的疏水側(cè)鏈很少埋在蛋白質(zhì)分子的內(nèi)部 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,416. 下列有關(guān)血紅蛋白運(yùn)輸氧的敘述哪些是正確的？ (1).四個(gè)血紅素基各自獨(dú)立地與氧結(jié)合，彼此之間并無(wú)聯(lián)系 (2).以血紅蛋白結(jié)合氧的百分?jǐn)?shù)對(duì)氧分壓作圖，曲線呈S形 (3).氧與血紅蛋白的結(jié)合能力比一氧化碳強(qiáng) (4).氧與血紅蛋白的結(jié)合并不引起血紅素中鐵離子價(jià)數(shù)的變化 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.

10、1,2,3,4四、問(wèn)答與計(jì)算1.蛋白質(zhì)換算系數(shù)6.25是如何產(chǎn)生的？什么情況下可以不用6.25？2.組成蛋白質(zhì)的常見氨基酸有哪些？它們的分子結(jié)構(gòu)有哪些共同點(diǎn)？寫出各種常見氨基酸的名稱、結(jié)構(gòu)和三字母符號(hào)。3. 什么是氨基酸的等電點(diǎn)，如何進(jìn)行計(jì)算？寫出His的解離反應(yīng)式，并計(jì)算其等電點(diǎn)。4.向1L濃度為1mol/L的，處于等電點(diǎn)的Gly溶液中加入0.3mol的HCl（體積忽略不計(jì)），問(wèn)溶液PH為多少？并用計(jì)算結(jié)果說(shuō)明氨基酸的PH緩沖作用。5.再PH4的溶液中，Glu、Ile、Arg的帶電情況如何？它們?cè)谥绷麟妶?chǎng)中的泳動(dòng)方向如何？6.在PH3.0的檸檬酸緩沖溶液中有Asp、Gly、Thr、Leu和L

11、ys，將此溶液加到732陽(yáng)離子的交換柱上（此柱先用同樣緩沖液平衡）。然后用適當(dāng)?shù)腜H梯度（低高）緩沖液洗脫，并分部收集。試問(wèn)五種氨基酸洗脫下來(lái)的順序如何？7.在作氨基酸紙上層析時(shí)，用正丁醇：甲酸：水15：3：2的溶劑系統(tǒng)作展層析劑，樣品溶液中有Val、Ile、Arg、Ala，試分析它們?cè)趯游鰣D譜上的排列順序如何？為什么？8. 蛋白質(zhì)是由哪些元素組成的？其基本結(jié)構(gòu)單元是什么？寫出其結(jié)構(gòu)通式。蛋白質(zhì)如何分類？蛋白質(zhì)在生命活動(dòng)中有何重要意義？ 9.試述蛋白質(zhì)的一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)的涵義？三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)象有什么特點(diǎn)？三級(jí)結(jié)構(gòu)與生理功能關(guān)系如何？10. 為什么說(shuō)蛋白質(zhì)的水溶液是一種穩(wěn)定的親水膠體？試述蛋白

12、質(zhì)的膠體性質(zhì)及其與實(shí)踐的關(guān)系？11.蛋白質(zhì)為何具有兩性解離性質(zhì)？同一PH條件下，等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)帶電狀況如何？12.何謂蛋白質(zhì)變性作用？簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)復(fù)性的機(jī)理，并概要說(shuō)明變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn),舉例說(shuō)明與實(shí)踐的關(guān)系。13.試述蛋白質(zhì)沉淀的類型、方法及其與實(shí)踐的關(guān)系？14.何謂雙縮脲反應(yīng)？有何用途？15.簡(jiǎn)述幾種蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定方法的原理？16.解釋下列名詞：蛋白質(zhì)、肽鍵、酰胺平面、肽鏈、末端、構(gòu)象、疏水相互作用、螺旋、折迭、-轉(zhuǎn)角、變構(gòu)蛋白、亞基、輔基、沉降系數(shù)S、GSH、蛋白質(zhì)系數(shù)、無(wú)規(guī)則卷曲、鹽析、分段鹽析、透析、超濾、稀有氨基酸、非蛋白質(zhì)氨基酸、Sanger反應(yīng)、Edman反應(yīng)、茚三酮反

13、應(yīng)。17.總結(jié)蛋白質(zhì)定量、定性分析的常用方法有那些？18.分別指出下列酶能否水解與其對(duì)應(yīng)排列的肽，如能，則指出其水解部位。肽 酶(1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶(2)Phe-Met-Leu 羧肽酶B(3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶(4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶19.假定有1mmol的五肽，酸水解生成2mmol谷氨酸，1mmol賴氨酸，沒(méi)有能夠定量回收其它氨基酸。將原來(lái)的五肽用胰蛋白酶水解成兩個(gè)肽段，在pH7.0進(jìn)行電泳，一個(gè)肽段移向陽(yáng)極，另一個(gè)則移向陰極。用FDNB處理胰蛋白酶水解的一個(gè)肽段，再用酸水解，生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶處理原來(lái)五肽生成兩個(gè)肽段及游離谷

14、氨酸。試從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果寫出該五肽的氨基酸順序。20.用下列哪種試劑最適合完成以下工作:溴化氰、尿素、-巰基乙醇、胰蛋白酶、過(guò)甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L鹽酸、茚三酮、苯異硫氰酸(異硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。(1)測(cè)定一段小肽的氨基酸排列順序(2)鑒定小于10-7克肽的N-端氨基酸(3)使沒(méi)有二硫鍵的蛋白質(zhì)可逆變性。如有二硫鍵，應(yīng)加何種試劑？(4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽鍵(5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽鍵(6)水解由堿性氨基酸羧基形成的肽鍵21.扼要解釋為什么大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在溶液中具有下列性質(zhì)。(1)在低pH時(shí)沉淀。(2)當(dāng)離子強(qiáng)度從零逐漸增加時(shí)，其溶解度開始增加，然

15、后下降，最后出現(xiàn)沉淀。(3)在一定的離子強(qiáng)度下，達(dá)到等電點(diǎn)pH值時(shí)，表現(xiàn)出最小的溶解度。(4)加熱時(shí)沉淀。(5)加入一種可和水混溶的非極性溶劑減小其介質(zhì)的介電常數(shù)，而導(dǎo)致溶解度的減小。(6)如果加入一種非極性強(qiáng)的溶劑，使介電常數(shù)大大地下降會(huì)導(dǎo)致變性。22.0.1mo1/L的谷氨酸溶液處于它的等電點(diǎn):(1)計(jì)算主要等電形式的的谷氨酸的近似濃度。(2)計(jì)算完全質(zhì)于化形式的谷氨酸的近似濃度。(3)在溶液中甚至濃度小到幾乎沒(méi)有的，共有多少種形式? 23.某一蛋白質(zhì)的多肽鏈在一些區(qū)段為-螺旋構(gòu)象，在另一些區(qū)段為-構(gòu)象。該蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量為240000，多肽鏈外形的長(zhǎng)度為 5.06×10-5cm。試計(jì)算-