方法學(xué)評價課件

1、方法學(xué)評價PPT課件臨床生物化學(xué)實驗方法的臨床生物化學(xué)實驗方法的選擇選擇、建立與評價建立與評價 方法學(xué)評價PPT課件臨床生化定量分析中的實驗誤差臨床生化定量分析中的實驗誤差 臨床生化方法的選擇臨床生化方法的選擇 臨床生化方法的建立臨床生化方法的建立 臨床生化方法的評價臨床生化方法的評價 臨床生化方法學(xué)性能判斷臨床生化方法學(xué)性能判斷 方法學(xué)評價PPT課件第一節(jié)第一節(jié) 臨床生化定量分析中的實驗誤差臨床生化定量分析中的實驗誤差 實驗誤差的概念實驗誤差的概念實驗誤差的分類實驗誤差的分類實驗誤差與準確度和精密度的關(guān)系實驗誤差與準確度和精密度的關(guān)系方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件系統(tǒng)誤差系統(tǒng)誤差

2、隨機誤差隨機誤差過失誤差過失誤差方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 。 。 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 說明說明 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件說明說明 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件注注方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 說明說明方法學(xué)評價PPT課件實驗方法和標準品的分級實驗方法和標準品的分級實驗方法選擇的原則實驗方法選擇的原則方法選擇的步驟方法選擇的步

3、驟方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 三級方法的相互關(guān)系三級方法的相互關(guān)系方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件注注方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 標準品：純的或混合的標準品：純的或混合的液體液體、 固體固體或或氣體氣體。注注方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件二、材料和測定條件的選擇二、材料和測定條件的選擇（一）材料選擇（一）材料選擇1.1.純

4、度純度2.2.結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)3.3.材料供應(yīng)商的資質(zhì)和材材料供應(yīng)商的資質(zhì)和材 料的生產(chǎn)合格證料的生產(chǎn)合格證方法學(xué)評價PPT課件（二）測定條件的選擇（二）測定條件的選擇方法學(xué)評價PPT課件 注注方法學(xué)評價PPT課件線性范圍試驗?zāi)康模壕€性范圍試驗?zāi)康模和ㄟ^進行線性范圍的測定，選擇通過進行線性范圍的測定，選擇線性段作為該測定方法的分析范圍。線性段作為該測定方法的分析范圍。方法學(xué)評價PPT課件AC線性段方法學(xué)評價PPT課件 在不同在不同方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件（evaluation of methodologyevaluation of methodology） 方法學(xué)

5、評價PPT課件方法學(xué)評價實驗與實驗誤差類型的關(guān)系方法學(xué)評價實驗與實驗誤差類型的關(guān)系方法學(xué)評價PPT課件 重復(fù)性試驗是指在重復(fù)性試驗是指在相同條件下相同條件下，對，對同一標本同一標本進行進行多次重復(fù)測定多次重復(fù)測定（一般一般20次次），計算均值、），計算均值、SD和和CV，以評價方，以評價方法的隨機誤差（或精密度）。法的隨機誤差（或精密度）。 二、評價實驗二、評價實驗（一）重復(fù)性試驗（一）重復(fù)性試驗概念概念方法學(xué)評價PPT課件目的目的檢測候選方法的檢測候選方法的RE，即考察候選方法的即考察候選方法的精密度精密度。 依據(jù)時間間隔，重復(fù)性試驗依據(jù)時間間隔，重復(fù)性試驗 分為分為批內(nèi)批內(nèi)、天內(nèi)天內(nèi)、天間

6、天間三種形式。三種形式。 試驗形式與方法試驗形式與方法方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件 方法學(xué)評價PPT課件病人標本的平行雙份測定病人標本的平行雙份測定選擇選擇2020100100例病人標本例病人標本作作一一批或幾批分析批或幾批分析，每一標本都做，每一標本都做平平行雙份測定行雙份測定，用雙份分析結(jié)果的，用雙份分析結(jié)果的差值差值(d)(d)來計算來計算S S 。S方法學(xué)評價PPT課件病人血清病人血清標準液標準液控制物控制物方法學(xué)評價PPT課件分析物濃度的選擇分析物濃度的選擇被測物濃度宜選擇在醫(yī)學(xué)上被測物濃度宜選擇在醫(yī)學(xué)上具有決定具有決定性意義的濃度（性意義的濃度（

7、醫(yī)學(xué)決定水平，醫(yī)學(xué)決定水平，medical decision level ）進行試驗。）進行試驗。 方法學(xué)評價PPT課件醫(yī)學(xué)決定水平醫(yī)學(xué)決定水平 是對臨床病人的診斷和治療是對臨床病人的診斷和治療具有醫(yī)具有醫(yī)學(xué)判斷作用的學(xué)判斷作用的臨界分析物濃度臨界分析物濃度。檢查數(shù)據(jù)高于或低于某個醫(yī)學(xué)決檢查數(shù)據(jù)高于或低于某個醫(yī)學(xué)決定水平時，醫(yī)生應(yīng)采取對策。定水平時，醫(yī)生應(yīng)采取對策?；蚺R床按照不同病情給予不同處理或臨床按照不同病情給予不同處理的指標閾值。的指標閾值。方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件 回收回收: :分析方法對于樣品中分析方法對于樣品中分析分析物的適當增量物的適當增量能實際檢出的能力。能實際

8、檢出的能力。 或或分析方法正確測定加入常規(guī)分分析方法正確測定加入常規(guī)分析分析樣品中的析分析樣品中的純分析物的純分析物的能力。能力。概念概念方法學(xué)評價PPT課件檢測候選方法的檢測候選方法的PEPE。目的：目的：衡量其衡量其準確度準確度。方法學(xué)評價PPT課件方法：方法：樣品制備：樣品制備：基礎(chǔ)樣品基礎(chǔ)樣品：病人樣品病人樣品 + + 等量的無分析物的溶劑等量的無分析物的溶劑 計算計算：分析樣品：分析樣品：病人樣品病人樣品 + + 被分析物純品標準液被分析物純品標準液分析樣品和基礎(chǔ)樣品中待測物含量分析樣品和基礎(chǔ)樣品中待測物含量候選方法測定：候選方法測定：加入濃度、回收濃度；加入濃度、回收濃度；回收率。

9、回收率。方法學(xué)評價PPT課件GODGOD法測定血糖的回收試驗法測定血糖的回收試驗樣品制備：樣品制備：基礎(chǔ)樣品基礎(chǔ)樣品: :分析樣品分析樣品: 分析樣品分析樣品:血清血清0.9ml+15.0mmol/L0.9ml+15.0mmol/L葡萄糖標準液葡萄糖標準液0.1ml0.1ml血清血清0.9ml+30.0mmol/L0.9ml+30.0mmol/L葡萄糖標準液葡萄糖標準液0.1ml0.1ml用用GODGOD法測定上述樣品中葡萄糖的濃度。法測定上述樣品中葡萄糖的濃度。 按公式計算相應(yīng)指標按公式計算相應(yīng)指標血清血清0.9ml+0.9ml+蒸餾水蒸餾水0.1ml0.1ml方法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價

10、PPT課件 樣品樣品測定濃度測定濃度(mmol/L)(mmol/L)加入濃度加入濃度(mmol/L)(mmol/L)回收濃度回收濃度(mmol/L)(mmol/L)回收率回收率（）（）基礎(chǔ)基礎(chǔ)分析分析分析分析5.885.887.327.328.798.79 1.501.503.003.00 1.441.442.912.91 96.096.097.097.0平均平均96.596.5理想的回收率為理想的回收率為100%100%，實測值與理，實測值與理論值之差為比例系統(tǒng)誤差的估量值。論值之差為比例系統(tǒng)誤差的估量值。 方法學(xué)評價PPT課件注意事項注意事項準確吸量準確吸量。一般須作加入高中低不同濃度回收

11、試驗。一般須作加入高中低不同濃度回收試驗。樣品中加入標準液后樣品中加入標準液后, 總的濃度應(yīng)在方法總的濃度應(yīng)在方法 的分析范圍內(nèi)的分析范圍內(nèi)。加入標準液后加入標準液后, 最好使實驗樣品中被測物最好使實驗樣品中被測物 的濃度達到醫(yī)學(xué)決定水平。的濃度達到醫(yī)學(xué)決定水平。 加入標準液體積要小。加入標準液體積要小。 每個樣品最好重復(fù)測定幾次每個樣品最好重復(fù)測定幾次, 用均值計算。用均值計算。 方法學(xué)評價PPT課件1 1）基體）基體 (matrix)(matrix)：基體亦稱為：基體亦稱為“介質(zhì)介質(zhì)”或或“基基質(zhì)質(zhì)”。分析樣品中，除了分析物以外的所有其。分析樣品中，除了分析物以外的所有其他物質(zhì)和組分稱為該

12、分析物的基體。他物質(zhì)和組分稱為該分析物的基體。 臨床檢驗中的基體效應(yīng)臨床檢驗中的基體效應(yīng)2 2）基體效應(yīng)）基體效應(yīng) (matrix effect)(matrix effect)：檢測系統(tǒng)檢測：檢測系統(tǒng)檢測標本中的分析物時，處于分析物周圍的所有非標本中的分析物時，處于分析物周圍的所有非分析物質(zhì)（基體）對分析物參與反應(yīng)的影響分析物質(zhì)（基體）對分析物參與反應(yīng)的影響. .1.1.基本概念基本概念方法學(xué)評價PPT課件 回收實驗可以對分析方法受回收實驗可以對分析方法受基體效應(yīng)的影響作出估計?；w效應(yīng)的影響作出估計。2.2.基體效應(yīng)和回收試驗基體效應(yīng)和回收試驗方法學(xué)評價PPT課件3.3.克服基體效應(yīng)的方法：

13、克服基體效應(yīng)的方法： 使測定使測定標準標準和和標本標本處于相同的基體處于相同的基體環(huán)境，以抵銷基體效應(yīng)的影響。環(huán)境，以抵銷基體效應(yīng)的影響。方法學(xué)評價PPT課件（三）干擾試驗（三）干擾試驗?zāi)康模耗康模簷z測候選方法的檢測候選方法的CECE，衡量方法的衡量方法的準確度準確度。方法學(xué)評價PPT課件方法方法： 原病人樣品加入等量的原病人樣品加入等量的無干擾物的無干擾物的溶劑作為基礎(chǔ)樣品；溶劑作為基礎(chǔ)樣品； 將疑有將疑有干擾或非特異性反應(yīng)干擾或非特異性反應(yīng)的物質(zhì)的物質(zhì)配成一定濃度的溶液，加入病人樣品配成一定濃度的溶液，加入病人樣品中，成為中，成為分析樣品；分析樣品； 用候選方法測定，兩者測定結(jié)果的用候選方

14、法測定，兩者測定結(jié)果的差值為差值為干擾值干擾值。方法學(xué)評價PPT課件尿酸對尿酸對GODGOD法測定血糖的干擾試驗法測定血糖的干擾試驗樣品制備：樣品制備：基礎(chǔ)樣品基礎(chǔ)樣品: :分析樣品分析樣品:分析樣品分析樣品:血清血清0.9ml+4.0mmol/L0.9ml+4.0mmol/L尿酸標準液尿酸標準液0.1ml0.1ml血清血清0.9ml+8.0mmol/L0.9ml+8.0mmol/L尿酸標準液尿酸標準液0.1ml0.1ml用用GOD法測定制備樣品中葡萄糖的濃度法測定制備樣品中葡萄糖的濃度。 按公式計算相應(yīng)指標按公式計算相應(yīng)指標血清血清0.9ml+0.9ml+蒸餾水蒸餾水0.1ml0.1ml 方

15、法學(xué)評價PPT課件方法學(xué)評價PPT課件干擾試驗結(jié)果干擾試驗結(jié)果 樣品樣品測定濃度測定濃度(mmol/L)(mmol/L)加入尿酸濃度加入尿酸濃度(mmol/L)(mmol/L)干擾值干擾值(mmol/L)(mmol/L)基礎(chǔ)基礎(chǔ)分析分析分析分析6.506.506.426.426.356.350.40.40.80.8-0.08-0.08-0.15-0.15（注：（注：EA =0.175 mmol/L）方法學(xué)評價PPT課件注意事項注意事項本試驗檢測的誤差包括方法特異性本試驗檢測的誤差包括方法特異性 不高和因干擾作用引起的誤差。不高和因干擾作用引起的誤差。可疑干擾物的濃度可疑干擾物的濃度被試驗的物質(zhì)

16、被試驗的物質(zhì)干擾物溶液的體積干擾物溶液的體積方法學(xué)評價PPT課件 干擾試驗中評價的一些非分析物的干擾試驗中評價的一些非分析物的作用方式或原因是很清楚的，而基體作用方式或原因是很清楚的，而基體效應(yīng)只是對現(xiàn)象的分析和歸納的一種效應(yīng)只是對現(xiàn)象的分析和歸納的一種概括，包括了總的干擾作用。概括，包括了總的干擾作用?；w效應(yīng)與干擾試驗基體效應(yīng)與干擾試驗方法學(xué)評價PPT課件（四）方法比較試驗（四）方法比較試驗?zāi)康模耗康模?對一組病人的標本用對一組病人的標本用候選方法候選方法和和對對比方法比方法同時進行分析測定同時進行分析測定, , 最后觀察最后觀察兩者之間的差異。兩者之間的差異。 方法方法： 檢測候選方法的

17、檢測候選方法的SESE，包括，包括PEPE和和CECE，衡量候選方法的衡量候選方法的準確度準確度。方法學(xué)評價PPT課件注意事項注意事項試驗樣品數(shù)試驗樣品數(shù) 時間間隔時間間隔 比較方法的選擇比較方法的選擇整個實驗期間，實驗方法和比較方法整個實驗期間，實驗方法和比較方法的測定均在良好的狀態(tài)下進行。的測定均在良好的狀態(tài)下進行。檢驗人員有足夠的時間熟悉方檢驗人員有足夠的時間熟悉方法、試劑及儀器，熟悉評價方案。法、試劑及儀器，熟悉評價方案。方法學(xué)評價PPT課件 每天對每天對2 2份病人標本分別用份病人標本分別用GODGOD法法和和HKHK法各測定一次，連續(xù)測定法各測定一次，連續(xù)測定2020天，得到天，得

18、到4040組數(shù)據(jù)。組數(shù)據(jù)。以以GODGOD和和HKHK法測定血糖為例法測定血糖為例方法學(xué)評價PPT課件GOD法法 5.7 6.8 4.2 12.1 8.7 9.65.8 HK法法 5.5 6.9 4.5 11.8 8.9 9.36.01 2 3 4 5 6. 40注：單位（注：單位（mmol/L）方法學(xué)評價PPT課件結(jié)果處理結(jié)果處理作散點圖作散點圖 0HK法（法（mmol/L）GOD法法(mmol/L) 黃疸黃疸溶血溶血4812162048121620方法學(xué)評價PPT課件直線回歸分析直線回歸分析 yabxX X：自變量自變量, ,一般為資料中能精確測定一般為資料中能精確測定和控制的量和控制的量

19、, ,代表比較方法測得結(jié)果。代表比較方法測得結(jié)果。 a a：回歸直線在縱軸上的截距，代表：回歸直線在縱軸上的截距，代表CECE。b b：回歸直線的斜率，代表：回歸直線的斜率，代表PEPE。Y Y：應(yīng)變量應(yīng)變量, , 按回歸方程求得的候選按回歸方程求得的候選方法的估計值。方法的估計值。 方法學(xué)評價PPT課件b = nxy - xynx2 (x)2a = ybxy0.150.98x方法學(xué)評價PPT課件作相關(guān)分析作相關(guān)分析 r = (x-x)2 ( y-y)2(x-x) (y-y)即即r r值隨病人標本測定范圍的增加而增大值隨病人標本測定范圍的增加而增大。 注：注：r r值與待測物的濃度范圍有關(guān)，值

20、與待測物的濃度范圍有關(guān)，r r值值0.975:0.975:相關(guān)性良好相關(guān)性良好方法學(xué)評價PPT課件配對資料配對資料t t檢驗檢驗方法學(xué)評價PPT課件 一種檢驗方法或檢測系一種檢驗方法或檢測系統(tǒng)準確度評價的常用方法：統(tǒng)準確度評價的常用方法：注注室間質(zhì)量評價驗證室間質(zhì)量評價驗證方法比較試驗驗證方法比較試驗驗證定值標準品驗證定值標準品驗證方法學(xué)評價PPT課件（五）檢測能力的測定（五）檢測能力的測定 檢測能力，亦稱檢出限、最低檢出限。檢測能力，亦稱檢出限、最低檢出限。方法學(xué)評價PPT課件檢出限的測定目的：檢出限的測定目的： 評價方法的靈敏度評價方法的靈敏度, 常規(guī)工作常規(guī)工作中避免誤用中避免誤用, 即

21、標本中待測物含量即標本中待測物含量不應(yīng)接近或低于檢出限。不應(yīng)接近或低于檢出限。 方法學(xué)評價PPT課件檢出限的測定方法：檢出限的測定方法： 選擇合適的選擇合適的空白樣品空白樣品, ,按操作方法多按操作方法多次測定其吸光度值次測定其吸光度值, ,求其平均吸光度值和求其平均吸光度值和標準差標準差, ,用用“空白樣品讀數(shù)的空白樣品讀數(shù)的均值均值+3S+3S”代代表檢出限的吸光度值表檢出限的吸光度值, ,再轉(zhuǎn)換成濃度單位。再轉(zhuǎn)換成濃度單位。方法學(xué)評價PPT課件說明說明 方法的靈敏度越高，檢測方法的靈敏度越高，檢測限就越低，檢測能力越強。限就越低，檢測能力越強。檢測限與靈敏度的關(guān)系檢測限與靈敏度的關(guān)系檢測

22、限與測定噪聲密切相關(guān)檢測限與測定噪聲密切相關(guān) 測定噪聲：沒有被測物時所測定噪聲：沒有被測物時所產(chǎn)生的響應(yīng)信號的波動或變化值。產(chǎn)生的響應(yīng)信號的波動或變化值。檢測系統(tǒng)或方法對小于或等于檢測低限檢測系統(tǒng)或方法對小于或等于檢測低限的分析物量只能報告的分析物量只能報告“無分析物檢出無分析物檢出”。方法學(xué)評價PPT課件第五節(jié)第五節(jié) 臨床生化方法學(xué)性能判斷臨床生化方法學(xué)性能判斷一、方法學(xué)性能標準一、方法學(xué)性能標準性能標準性能標準(performance standards,PS)由允許分析誤差由允許分析誤差(allowable analytical error,EA) 和醫(yī)學(xué)決定水平和醫(yī)學(xué)決定水平(medi

23、cal decision level) 決定決定。 方法學(xué)評價PPT課件允許分析誤差允許分析誤差（EA）被規(guī)定為被規(guī)定為9595樣品的允許誤差限度樣品的允許誤差限度， 即即9595的病人樣品其誤差應(yīng)小于這個限度的病人樣品其誤差應(yīng)小于這個限度。方法學(xué)評價PPT課件醫(yī)學(xué)決定水平醫(yī)學(xué)決定水平（XcXc） 是對臨床病人的診斷和治療具有醫(yī)是對臨床病人的診斷和治療具有醫(yī)學(xué)判斷作用的臨界分析物濃度學(xué)判斷作用的臨界分析物濃度， 或臨床按照不同病情給予不同處或臨床按照不同病情給予不同處理的指標閾值。理的指標閾值。 方法學(xué)評價PPT課件二、使用單值判斷指標判斷二、使用單值判斷指標判斷 計算公式計算公式 誤差類型誤

24、差類型 判斷指標判斷指標 備注備注 REPECESETE(RESE)1.96STMEAR100XC100EA干擾值干擾值EA(abXc)XcEA1.96STM(abXc)XcEASTM:重復(fù)試驗的標準差重復(fù)試驗的標準差R平均回收率平均回收率干擾值由干擾試驗測出干擾值由干擾試驗測出對比試驗回歸方程對比試驗回歸方程包括偶然及系統(tǒng)誤差包括偶然及系統(tǒng)誤差 方法學(xué)評價PPT課件結(jié)果判斷結(jié)果判斷 判斷舉例判斷舉例 某法測定血肌酐的方法學(xué)評價實驗結(jié)果：某法測定血肌酐的方法學(xué)評價實驗結(jié)果： 重復(fù)性試驗重復(fù)性試驗： 方法比較試驗方法比較試驗：回歸方程回歸方程：n50，Y0.980.925X。設(shè)設(shè)Xc176.8m

25、ol/L時，時，EA35.4mol/L。N=20=176.8mol/L，STM=3.536mol/L。 X方法學(xué)評價PPT課件判斷：判斷： RE1.96STM1.963.563mol/L 6.98mol/LEA，RE可以接受?？梢越邮?。 SE(abXc)Xc14.24mol/LEA，SE可以接受?？梢越邮?。 (-0.980.925176.8)176.8TE = RESE6.9814.24故該方法初步判斷為可接受。故該方法初步判斷為可接受。 21.22mol/LEA，TE可以接受可以接受方法學(xué)評價PPT課件三、使用可信區(qū)間判斷指標判斷三、使用可信區(qū)間判斷指標判斷方法學(xué)評價PPT課件最后進入方法應(yīng)用階段。最后進入方法應(yīng)用階段。 候選方法得出可接受性的結(jié)論，候選方法得出可接受性的結(jié)論，即可進行臨床相關(guān)研究，即可進行臨床相關(guān)研究，包括參考值的制定；質(zhì)控