第一章微生物的純培養(yǎng)與顯微技術(shù)201508

1、微 生 物 學(xué)微生物的定義微生物是指形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見、進(jìn)化地位低下的生物的總稱。小小與動物、植物細(xì)胞大小的差異；單細(xì)胞或簡單的多細(xì)胞。微生物的基本特點(diǎn)：借助顯微鏡觀察肉眼分辨能力：0.25mm微生物的主要特點(diǎn)11、體積小、結(jié)構(gòu)簡單m:細(xì)胞型nm: 非細(xì)胞型“我家里的幾位女眷想要看醋里的線蟲，可是看了以后，厭惡地發(fā)誓說再也不用醋了?！币俏腋嬖V她們在口腔里牙垢上生活的動物比全國的人口還多，她們將會怎樣反應(yīng)呢？ Leeuwenhoek微生物學(xué)發(fā)展與微生物學(xué)技術(shù)的關(guān)系： 列文虎克、巴斯德、科赫顯微技術(shù)純種分離與培養(yǎng)技術(shù)無菌技術(shù)染色技術(shù)做看顯微技術(shù)分辨率：最小可分辨距離反差：樣品區(qū)別于背

2、景的程度波長振幅電子顯微鏡 透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 光學(xué)顯微鏡 普通光學(xué)顯微鏡 暗視野顯微鏡 相差顯微鏡 熒光顯微鏡 0.5 l 分辨率= n sin n玻片與物鏡間介質(zhì)的折射率空氣 (n=1.0)；水 (n=1.33)；香柏油 (n=1.52)；玻璃 ( n=1.54) :物鏡鏡口角的一半n sin ：數(shù)值孔徑 （numerical aperture）其數(shù)值越大，顯微鏡分辨率越好。浸沒油與玻璃的折射率相近很多原來由于在透鏡及載片表面的反射和折射而損失的光線可以進(jìn)入物鏡，使照明亮度提高，改善觀察效果。物物鏡鏡 特特性性 搜 索 物 鏡 低 倍 鏡 高 倍 鏡 油 鏡 放放大大倍倍數(shù)數(shù)

3、4 10 40-45 90-100 數(shù)數(shù)值值孔孔徑徑值值 0.10 0.25 0.55-0.65 1.25-1.4 焦焦距距（f） 40 mm 16 mm 4 mm 1.8-2.0 mm 工工作作距距離離 17-20 mm 4-8 mm 0.5-0.7 mm 0.1 mm 450nm光光 源源 （ 藍(lán)藍(lán)光光 ） 時時 的的 分分 辨辨 率率 2.3 m 0.9 m 0.35 m 0.18 m 在對細(xì)菌、放線菌等進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察時，油鏡最常使用，也最為重要。光學(xué)顯微鏡能觀察到的最小生物是( ) 。2012年全國生物聯(lián)賽試題A酵母 B植物細(xì)胞 C細(xì)菌 D噬菌體絕大多數(shù)細(xì)菌的直徑為：( ) 2008年全國生物聯(lián)賽試題 A 110毫米 B 110微米 C ll0納米 D l0毫米以上 答案：C答案：B增大透鏡直徑，以增加鏡口角； 不實(shí)用增加折射率；采用短波長的電磁波光學(xué)顯微鏡 ( = 550 nm) 的分辨率為 220 nm。電子的波長比可見光小1000倍。微生物無色透明，與背景折光率相差無幾，染色可增強(qiáng)反差染色前需固定 顯微鏡下觀察到細(xì)菌的大小受固定方法影響使蛋白質(zhì)變性加熱化學(xué)試劑：乙醇、醋酸、甲醛、戊二醛 保持細(xì)胞原來的形態(tài)，防止變形從混雜的群體中分離特定的某一種微生物，是研究和利用微生物的第一步。無菌技術(shù)用于分離、培養(yǎng)微生物的器具事先不含任