臨床檢驗(yàn)儀器總復(fù)習(xí)

1、第一章 概論1、臨床檢驗(yàn)儀器大體分為：分離分析檢驗(yàn)儀器（離心機(jī)、色譜儀、電泳儀等）、光譜分析檢驗(yàn)儀器（紫外-可見分光光度計(jì)、熒光光譜儀等）、目視檢驗(yàn)儀器（普通生物顯微鏡、熒光顯微鏡等）、細(xì)胞及分子生物學(xué)檢驗(yàn)儀器（培養(yǎng)箱、生物安全柜、流式細(xì)胞儀等）、臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器（血細(xì)胞分析儀、血流變、血凝儀、尿沉渣，生化分析儀等）2、臨床檢驗(yàn)儀器的性能指標(biāo)：靈敏度、誤差、噪聲、最小檢測(cè)量、精確度、可靠性、重復(fù)性、分辨率、測(cè)量范圍和示值范圍、線性范圍、響應(yīng)時(shí)間、頻率響應(yīng)范圍第二章 離心機(jī)1、離心現(xiàn)象：物體在離心力場(chǎng)中表現(xiàn)的沉降運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象。2、離心技術(shù)主要用于各種生物用品的分離、純化和制備。3、離心是利用旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)

2、的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或懸浮密度的差異進(jìn)行分離、濃縮、和提純生物樣品的一種方法。4、離心機(jī)工作原理：利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力，迫使液體中的微?？朔U(kuò)散，加快沉降速度，把樣品中具有不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開。5、離心機(jī)的分類：（1）按轉(zhuǎn)速分：低速離心機(jī)4000r/min、高速離心機(jī)20000r/min、超速離心機(jī)5000080000r/min;(2)按用途分：制備型、分析型、制備分析兩用型；（3）按結(jié)構(gòu)分：臺(tái)式、多管微量式、細(xì)胞涂片式、血液洗滌式、高速冷凍式、大容量低速冷凍式、臺(tái)式低速自動(dòng)平衡離心機(jī)。6、基本結(jié)構(gòu)：（1）低速離心機(jī)：電動(dòng)機(jī)、離心轉(zhuǎn)盤、調(diào)速器、定時(shí)器、離

3、心管套與底座等；（2）高速離心機(jī)：轉(zhuǎn)動(dòng)裝置、速度控制系統(tǒng)、真空系統(tǒng)。溫控系統(tǒng)、安全保護(hù)裝置；（3）超速離心機(jī)：橢圓形轉(zhuǎn)子、真空系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、速控系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)、驅(qū)動(dòng)等第三章 顯微鏡1、光學(xué)顯微鏡的工作原理：（1）光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微笑物體放大成像，供人們提取物質(zhì)微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。（2）光學(xué)顯微鏡由兩組會(huì)聚透鏡組成光學(xué)折射成像系統(tǒng)，把焦距較短、靠近觀察物，成實(shí)像的透鏡組成為物鏡，把焦距較長(zhǎng)、靠近眼睛、成虛像的透鏡組成為目鏡。2、基本結(jié)構(gòu)：包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械系統(tǒng)兩大部分。光學(xué)系統(tǒng)包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等，機(jī)械系統(tǒng)包括調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺(tái)和物鏡轉(zhuǎn)換器等運(yùn)動(dòng)加持部

4、件以及底座、鏡臂、鏡筒等支持部件。3、電子顯微鏡原理：根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電子頭頸代替光束和光學(xué)透鏡，使物質(zhì)的微細(xì)結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像。4、電子顯微鏡基本結(jié)構(gòu)：主要由電子光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、供電系統(tǒng)、機(jī)械系統(tǒng)和觀察顯示系統(tǒng)等組成。5、電子顯微鏡分類：透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、掃描隧道顯微鏡。第四章 紫外-可見分光光度計(jì)1、分光光度計(jì)是指能夠從含有各種波長(zhǎng)的混合光中將每一單色光分離出來(lái)并測(cè)量其強(qiáng)度的儀器。紫外-可見光分光光度計(jì)所用光波段為200800nm。2、工作原理：不同物質(zhì)會(huì)吸收不同波長(zhǎng)光，且有屬于物質(zhì)的吸收光譜。每一種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜，因此可根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜

5、來(lái)分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、含量和純度。3朗伯-比爾定律：當(dāng)一束單色光照射吸收溶液時(shí)，其吸光度與液層厚度及溶液濃度的乘積成正比。（1）A為吸光度、T為透光度也叫透射率、入射光強(qiáng)度為I0、透射光強(qiáng)度為I、b為液層厚度、c為溶液濃度、比例常數(shù)k為吸光系數(shù)。（2）適用條件：入射光為單色光；溶液濃度不能過(guò)大。4、基本結(jié)構(gòu)：光源單色器吸收池檢測(cè)器信號(hào)顯示系統(tǒng)5：分類：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)、雙光束分光光度計(jì)、雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。第五章 臨床血液血常規(guī)檢驗(yàn)儀器一、血細(xì)胞分析儀BCA（又叫血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀、血液自動(dòng)分析儀）1、血細(xì)胞分析儀是對(duì)一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量和異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的常規(guī)檢驗(yàn)儀器。功能：血細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞

6、分類、血紅蛋白測(cè)定、相關(guān)參數(shù)計(jì)算。2、分類：（1）按自動(dòng)化程度：半自動(dòng)和全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（2）按檢測(cè)原理：電阻抗型、激光型、電容型、光電型、聯(lián)合檢測(cè)型、干式離心分層型、無(wú)創(chuàng)型；（3）按白細(xì)胞分類水平：二分群、三分群、五分類、五分類+網(wǎng)織紅細(xì)胞BCA3、檢測(cè)原理：（1）血細(xì)胞儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理以電阻抗型和聯(lián)合檢測(cè)型為主（2）血細(xì)胞儀測(cè)定血紅蛋白原理：光電比色原理4、基本結(jié)構(gòu)：由機(jī)械系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng)、血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)以不同形式組合構(gòu)成。二、血液凝固分析儀 1、分類：按自動(dòng)化程度分為半自動(dòng)血凝儀、全自動(dòng)血凝儀和全自動(dòng)血凝檢測(cè)流水線。2、檢測(cè)原理：凝固法。底物顯色法、免疫

7、學(xué)法、干化學(xué)法。3、基本結(jié)構(gòu)：（1）半自動(dòng)血凝：主要由樣本和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測(cè)系統(tǒng)（光學(xué)、磁場(chǎng)）及微機(jī)組成。(2)全自動(dòng)血凝：包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)及附件等。第六章 血流變檢驗(yàn)儀器1定義：血流變分析儀是對(duì)全血 血漿 或血細(xì)胞流變特性進(jìn)行分析的檢驗(yàn)儀器。主要有 血液黏度計(jì)，紅細(xì)胞形變測(cè)定儀，血小板聚集儀，紅細(xì)胞電泳儀，血沉儀。2分類：血液黏度計(jì)可分為毛細(xì)管黏度計(jì) 和 旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)；前者按結(jié)構(gòu)分為奧氏和烏氏黏度計(jì)；后者分為筒筒式，錐板式，錐錐式以及棱球式黏度計(jì)。錐板式最為常見。原理：毛細(xì)管黏度計(jì)原理： 一定體積的液體在一定壓力驅(qū)動(dòng)下通

8、過(guò)一定管徑時(shí)，所需時(shí)間與黏度成正比。 結(jié)構(gòu)：毛細(xì)管 儲(chǔ)液池 控溫裝置 計(jì)時(shí)裝置旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)原理：牛頓黏滯定律結(jié)構(gòu)：樣本傳感器 轉(zhuǎn)速控制以及調(diào)節(jié)系統(tǒng) 力矩測(cè)量系統(tǒng) 恒溫系統(tǒng)。自動(dòng)血沉儀血沉是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度。工作原理：1光學(xué)阻擋原理2紅外線障礙法3激光光源掃描微量全血第七章 尿液檢驗(yàn)儀器尿液分析是臨床診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要措施之一，通過(guò)對(duì)尿液的物理學(xué)檢查和化學(xué)檢查，可觀察尿液物理性狀和化學(xué)成分的變化。 尿液分析儀分類：1 按工作方式：干式和濕式 2 按測(cè)量項(xiàng)目：8,9,10,11,12,13項(xiàng)尿液分析儀 ，主要檢測(cè)項(xiàng)目有：尿蛋白，尿葡萄糖，尿ph,尿酮體，尿膽紅質(zhì)，尿膽原，尿潛血，

9、亞硝酸鹽，尿白細(xì)胞，尿比重，維生素c，尿顏色和濁度。 3按自動(dòng)化分為：半自動(dòng)化和全自動(dòng)化測(cè)量原理：（一）試劑帶多聯(lián)試劑帶是將多個(gè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)塊集成在一的試劑帶上，使用時(shí)，進(jìn)入一次尿液可檢測(cè)多項(xiàng)參數(shù)。試劑塊比測(cè)量項(xiàng)目多一個(gè)空白快，空白快是為了消除尿液自身顏色以及試劑塊狀態(tài)分布不均等產(chǎn)生的誤差。試劑帶結(jié)構(gòu)圖從下到上依次是底層，吸水層，試劑層，鹽酸層，尼龍膜。1ph的測(cè)定：常用甲基紅和溴麝香草芬蘭指示劑2 尿蛋白測(cè)定：利用ph 指示劑蛋白質(zhì)誤差的原理3 尿糖測(cè)定：一種是葡萄糖氧化酶法 另一種是銅還原法4尿酮體測(cè)定：采用亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)；（二）尿液分析儀檢測(cè)原理一般采用雙波長(zhǎng)法測(cè)定試劑快顏色變化，一種是

10、測(cè)定波長(zhǎng) 一種是參比波長(zhǎng)反射率是：R=Tm*Cs/TS*Cm尿液檢驗(yàn)儀器結(jié)構(gòu)與功能1機(jī)械系統(tǒng) 齒輪傳輸 機(jī)械臂傳輸 膠帶傳輸2光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng) 光源 單色鏡 光電轉(zhuǎn)換3電路系統(tǒng)尿有形成分分析儀分類：1 通過(guò)鳥有形成分直接鏡檢在進(jìn)行影像分析 2 流式細(xì)胞術(shù)工作原理：1 稀釋染色標(biāo)本通過(guò)鞘液池 2氬激光照射 3光電轉(zhuǎn)換儀器結(jié)構(gòu)：1光學(xué)檢驗(yàn)系統(tǒng)：氬激光 激光反射系統(tǒng)，流動(dòng)池，前項(xiàng)收集器和前項(xiàng)光檢測(cè)儀2液流系統(tǒng)：由樣品管 鞘液管 噴嘴組成的流動(dòng)室是也流系統(tǒng)核心3電路系統(tǒng)4自動(dòng)加樣裝置：主要有自動(dòng)進(jìn)樣傳輸裝置，樣本混勻器 定量吸樣裝置和樣品傳輸裝置第十章微生物檢測(cè)儀器分類：一是自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)，功能

11、是檢測(cè)血液中是否存在微生物，并用計(jì)算機(jī)自動(dòng)掃描檢測(cè)二是自動(dòng)微生物鑒定與藥敏分析系統(tǒng)，功能是將分離的微生物進(jìn)行鑒定，并做抗菌藥物敏感試驗(yàn)。第八章 自動(dòng)生化分析儀定義：自動(dòng)生化分析儀是將生物化學(xué)分析過(guò)程中的取樣，加試劑，去干擾，混合，保溫反應(yīng)，自動(dòng)檢測(cè)，結(jié)果計(jì)算，數(shù)據(jù)處理，打印報(bào)告以及試驗(yàn)后清洗等步驟自動(dòng)化的儀器。分類：1全自動(dòng)和半自動(dòng) 2 單通道和多通道 3 連續(xù)流動(dòng)式 離心式 分立式 干化學(xué)式原理：1連續(xù)流動(dòng)式：通過(guò)比例泵將樣品和試劑吸到連續(xù)的管道系統(tǒng)中，混合并偷襲去干擾，在一定條件下保溫，顯色，比色，信號(hào)放大并運(yùn)算處理。2分立式：是按手工操作方式編程，并以有序的機(jī)械操作代替手工操作，用加樣探

12、針加樣于反應(yīng)杯中，用試劑針定時(shí)定量加入試劑，充分混勻后應(yīng)當(dāng)條件下反應(yīng)并進(jìn)行比色測(cè)定。3離心式：將樣品與試劑放入特質(zhì)圓形反應(yīng)器中，裝在離心機(jī)中，在離心作用下充分混勻反應(yīng)。4 干化學(xué)式：將待測(cè)液直接加入已固化于特殊結(jié)構(gòu)的試劑載體上，一樣本中水將載體上的實(shí)際溶解，在與樣品中待測(cè)成分發(fā)生反應(yīng)，是集光學(xué)，化學(xué)，酶工程學(xué)，化學(xué)計(jì)量學(xué)以及計(jì)算機(jī)技術(shù)于一體的新型生化儀器。自動(dòng)生化分析儀結(jié)構(gòu)：（一）樣品處理系統(tǒng)1樣品裝載和傳輸裝置 2閉蓋穿刺，開蓋閉蓋裝置 3試劑倉(cāng) 4樣品和試劑取樣單元5攪拌系統(tǒng)（二）檢測(cè)系統(tǒng)1光源 2分光裝置 3比色杯 4恒溫裝置 5清洗裝置 6信號(hào)轉(zhuǎn)換與傳輸裝置（三）計(jì)算機(jī)系統(tǒng)1 cpu和

13、主機(jī) 2 顯示器自動(dòng)生化分析儀常用分析方法有哪些：終點(diǎn)分析法：通過(guò)測(cè)定反映開始至反映達(dá)到平衡時(shí)的產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來(lái)求待測(cè)物濃度或活性的方法；連續(xù)監(jiān)測(cè)法：通過(guò)連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的吸光度，根據(jù)吸光度隨時(shí)間的變化求出待測(cè)物濃度或活性的方法；比濁測(cè)定法：通過(guò)檢測(cè)物質(zhì)對(duì)光的散射或透射強(qiáng)度來(lái)測(cè)定物質(zhì)的方法。簡(jiǎn)述分立式自動(dòng)生化分析儀的基本結(jié)構(gòu)：分立式自動(dòng)生化分析儀主要由樣品處理系統(tǒng)，監(jiān)測(cè)系統(tǒng)及計(jì)算機(jī)系統(tǒng)構(gòu)成。第九章 電化學(xué)分析儀器定義：電化學(xué)分析儀器是利用電化學(xué)分析技術(shù)而設(shè)計(jì)的臨床分析儀器。電化學(xué)分析法是建立在溶液電化學(xué)性質(zhì)基礎(chǔ)上的分析方法。主要有電解質(zhì)分析儀 血?dú)夥治鰞x電解質(zhì)

14、測(cè)定方法有：化學(xué)法 火焰光度法 原子吸收法 離子選擇性吸收法（最重要）電解質(zhì)分析儀器主要檢測(cè)鉀，鈉，氯離子，部分檢測(cè)鋰，鈣，鎂離子。工作原理：ise即離子選擇電極分析法。電解質(zhì)分析儀器采用一個(gè)毛細(xì)管測(cè)試管路，讓待測(cè)樣品與測(cè)量電極（離子選擇電極）接觸。 反應(yīng)，與參比電極產(chǎn)生相關(guān)電位差E,經(jīng)放大處理后，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線與待測(cè)離子電位差值對(duì)照，即可求的各離子的濃度值，并顯示或打印出來(lái)。 公式：Eise=k±(2.303rt) / (nf) lnax= Eise=k±(2.303rt) / (nf) lncxfx N為電荷量 ±是指陽(yáng) 陰離子選擇電極 cx指被測(cè)離子濃度Fx是

15、被測(cè)離子活度系數(shù)。K為常數(shù)。對(duì)于ph的測(cè)定，測(cè)量電極為玻璃電極，ph敏感程度取決于電極的玻璃膜。電化學(xué)分析儀器基本結(jié)構(gòu)：離子選擇性電極，參比電極，分析箱，測(cè)量電路，控制電路，驅(qū)動(dòng)電機(jī)和顯示器。血?dú)夥治鰞x1定義：血?dú)夥治鰞x利用電極對(duì)人體血液中的酸堿度，二氧化碳氧分壓，和氧分壓進(jìn)行測(cè)定的儀器。2工作原理：測(cè)量過(guò)程中，被測(cè)血液樣本在管路系統(tǒng)的抽吸下，進(jìn)入樣品室內(nèi)的測(cè)量毛細(xì)管中。關(guān)閉上開有幾個(gè)小孔，孔內(nèi)插有ph,Pco2,PO2,等測(cè)量電極和一只參比電極。樣品中ph,Pco2,PO2同時(shí)被這些電極所感測(cè)。電極產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的參數(shù)電信號(hào)，最后經(jīng)過(guò)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換送到微處理器處理運(yùn)算，在傳至各顯示裝置。3其中用毛

16、細(xì)管ph玻璃電極和甘汞電極測(cè)量ph，用氣敏電極測(cè)量氧分壓和二氧化碳分壓。4血?dú)夥治鰞x結(jié)構(gòu)（一）電極 即電化學(xué)傳感器（二）管路 ：氣路，流路，電路。簡(jiǎn)述電阻抗（庫(kù)爾特）血細(xì)胞檢測(cè)原理：血細(xì)胞與等滲電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)的不良導(dǎo)體，其電阻值大于稀釋溶液的阻值；當(dāng)血細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)器的孔徑感受區(qū)時(shí)，檢測(cè)器內(nèi)外電極之間的恒流源電路的電阻值瞬間增大，產(chǎn)生電壓脈沖信號(hào)；脈沖信號(hào)數(shù)等于通過(guò)的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號(hào)幅度大小與細(xì)胞大小成正比。第十一章 臨床免疫檢驗(yàn)儀器1、 酶免疫分析技術(shù)的分類根據(jù)測(cè)定過(guò)程中是否需要分離結(jié)合的和游離的酶標(biāo)記物分為均相和異相酶免疫檢測(cè)，異相又分為固相和液相酶免疫檢測(cè)（1）均相：以激素、藥物等小

17、分子抗原或半抗原為主，測(cè)定過(guò)程中無(wú)需分離結(jié)合的和游離的酶標(biāo)記物，實(shí)驗(yàn)在液相中進(jìn)行，可直接用自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。（2）異相：是在抗原抗體反應(yīng)達(dá)到平衡后，將游離的和與抗原或抗體結(jié)合的酶標(biāo)記物加以分離，在通過(guò)底物顯色加以測(cè)定。（3）區(qū)別：均相在測(cè)定時(shí)不需要分離標(biāo)記物，異相則是需要分離后再進(jìn)行測(cè)定。2、發(fā)光免疫分析儀優(yōu)點(diǎn)：發(fā)光免疫分析體系中，標(biāo)記的抗原越多，光強(qiáng)度增加越大，因而免除了抗原抗體復(fù)合物與游離抗原、抗體的分離步驟。（一）全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng) 1、測(cè)定原理：小分子抗原物質(zhì)使用競(jìng)爭(zhēng)法，大分子抗原物質(zhì)使用夾心法。 2、結(jié)構(gòu)：由主機(jī)和微機(jī)構(gòu)成。3、酶標(biāo)儀的工作原理： 原理是分光光度法，按照

18、比色原理分析抗原抗體含量（二）全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀1、測(cè)定原理：將待測(cè)標(biāo)本與包被抗體的順磁性微粒和發(fā)光標(biāo)記的抗體加在反應(yīng)杯中共同溫育，形成復(fù)合物。復(fù)合物被吸入流動(dòng)室，同時(shí)用TPA緩沖液沖洗。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)點(diǎn)擊表面時(shí)被安裝在電極下的磁鐵吸引住，而游離的發(fā)光劑標(biāo)記抗體被沖洗走。同時(shí)在電極上加壓，啟動(dòng)電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生點(diǎn)化學(xué)發(fā)光，光強(qiáng)與待測(cè)抗原的濃度成正比。2、組成：樣品盤、試劑盤、溫育反應(yīng)盤、電化學(xué)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)第十二章 POCT定義：即時(shí)檢驗(yàn)，指在病人旁邊進(jìn)行的臨床檢測(cè)，通常不一定是臨床檢驗(yàn)師來(lái)進(jìn)行。是在采樣現(xiàn)場(chǎng)即刻進(jìn)行分析，省去標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)時(shí)的復(fù)雜處理程序，快速得到檢驗(yàn)結(jié)

19、果的一類新方法第十三章 PCR核酸擴(kuò)增儀1、PCR技術(shù)原理步驟：（1）DNA的變性（2）模版DNA與引物的退火（3）引物的延伸2、循環(huán)過(guò)程：模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94左右一定時(shí) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至4060左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；引物的延伸：DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶的作用下，于72左右，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互

20、補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需24分鐘，23小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。3、控溫方式：（1）水浴鍋控溫（不方便、控溫不穩(wěn)定，不常用）（2）壓縮機(jī)控溫（比水浴鍋方便，故障率高，邊緣效應(yīng)嚴(yán)重）（3）半導(dǎo)體控溫（可以高精度控溫，仍有邊緣效應(yīng)）（4）離心式空氣加熱控溫（能滿足熒光定量PCR高標(biāo)準(zhǔn)）第十四章 全自動(dòng)DNA測(cè)序儀1、工作原理：主要利用sanger雙脫氧鏈末端終止法或maxmgilbert化學(xué)降法，原理雖然不同，都根據(jù)在某一個(gè)固定的點(diǎn)開始核苷酸的延伸，隨即在一個(gè)堿基終止，產(chǎn)生AT

21、CG四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸鏈，在電泳中片段分離，檢測(cè)從而獲得序列（一）雙脫氧鏈末端終止法測(cè)序原理：利用PCR，但反應(yīng)體系中除了dNTP外，還有ddNTP。ddNTP可摻入到正在延伸的DNA鏈中，但不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵，從而使正在延伸的DNA鏈在此終止。由于存在ddNTP與dNTP的競(jìng)爭(zhēng)，生成的反應(yīng)產(chǎn)物是一系列長(zhǎng)度不同的多核苷酸片段。2、融合的技術(shù)：PCR技術(shù)（不準(zhǔn)確）第十五章 流式細(xì)胞儀1、原理：將待測(cè)細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測(cè)樣品壓入流動(dòng)室，待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)域。流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源，照射細(xì)胞懸液發(fā)出熒光，這些熒光信號(hào)的

22、強(qiáng)度代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，計(jì)算機(jī)把所測(cè)量到的各種信號(hào)進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理，就能分析待測(cè)細(xì)胞的各種數(shù)據(jù)。2、結(jié)構(gòu)：流動(dòng)室、液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)、激光光源及光束形成系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、信號(hào)檢測(cè)與分析系統(tǒng)、細(xì)胞分選系統(tǒng)生物安全柜分為 級(jí).級(jí)生物安全柜 是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜。由于不考慮處理樣品是否會(huì)被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染，所以對(duì)進(jìn)入安全柜的空氣潔凈度要求不高?？諝馔ㄟ^(guò)窗前操作口向內(nèi)吸入柜內(nèi)，流過(guò)工作臺(tái)表面后被過(guò)濾并經(jīng)排氣口排到大氣?？諝獾牧鲃?dòng)為單項(xiàng)、非循環(huán)式。前窗操作口向內(nèi)吸入的負(fù)壓氣流保護(hù)操作人員的安全，從安全柜內(nèi)排除的氣流經(jīng)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后排出，

23、保護(hù)環(huán)境不受污染。級(jí)生物安全柜 是指用于保護(hù)操作人員、環(huán)境以及樣品安全的通風(fēng)安全柜，也是臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最廣泛的一類安全柜級(jí)生物安全柜按排放氣流占系統(tǒng)總流量的比例及內(nèi)部設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，將其劃分為A1、A2、B1、B2四個(gè)類型。指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜；A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。A2型安全柜的負(fù)壓環(huán)繞污染區(qū)域的設(shè)計(jì)，阻

24、止了柜內(nèi)物質(zhì)的泄漏。二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓，以免危險(xiǎn)氣體泄漏如實(shí)驗(yàn)室。其前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s(100fpm)。B1型70%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器排除，30%的氣體通過(guò)供氣口HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)。B2型為100%全排型安全柜，無(wú)內(nèi)部循環(huán)氣流，可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制。級(jí)生物安全柜 是具有完全密閉、不透氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜。工作空間內(nèi)為經(jīng)高效空氣過(guò)濾凈化的無(wú)渦流的單向流空氣。安全柜正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操作出口，在安全柜密閉連接的橡皮手套完成的

25、。安全柜內(nèi)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的負(fù)壓應(yīng)不低于120Pa。電熱恒溫培養(yǎng)箱適合于普通的細(xì)菌培養(yǎng)，并常用于有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的器材和實(shí)際的預(yù)溫。電熱恒溫培養(yǎng)箱有隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱和器套式電熱恒溫培養(yǎng)箱兩種，兩者基本結(jié)構(gòu)相似，只是加熱方式不同，前者的溫度變化幅度比后者小，因而在使用上更具有優(yōu)勢(shì)。實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化系統(tǒng)，是為了實(shí)現(xiàn)臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一個(gè)或幾個(gè)監(jiān)測(cè)子系統(tǒng)，如臨床化學(xué)、血液學(xué)和免疫學(xué)等的結(jié)合，將同一廠家或不同廠家相互關(guān)聯(lián)的自動(dòng)化分析儀器以及分析前和分析后的實(shí)驗(yàn)室吃力裝置，通過(guò)自動(dòng)化輸出軌道和信息網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行連接，形成流水作業(yè)，構(gòu)成全自動(dòng)化流水電泳指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電場(chǎng)中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。電泳速率，單位時(shí)間內(nèi)，帶電粒子在毛細(xì)管中的定向移動(dòng)距離。凝膠電泳 由區(qū)帶電泳派生出的