實(shí)驗(yàn)a淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)PPT課件

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.制備固定化a-淀粉酶2.進(jìn)行淀粉水解的測(cè)定第1頁(yè)/共23頁(yè)知識(shí)回顧：知識(shí)回顧：1 1、在果汁生產(chǎn)中利用、在果汁生產(chǎn)中利用_，可以提高果汁的，可以提高果汁的產(chǎn)量和質(zhì)量，其原理是產(chǎn)量和質(zhì)量，其原理是_。2 2、洗衣粉中添加、洗衣粉中添加_，可以更有效地清除，可以更有效地清除頑漬。常用的酶制劑有頑漬。常用的酶制劑有_四類。四類。第2頁(yè)/共23頁(yè)第3頁(yè)/共23頁(yè)第4頁(yè)/共23頁(yè)第5頁(yè)/共23頁(yè)在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑，說(shuō)明酶制劑使用有很多優(yōu)點(diǎn)，你能思考后舉出一些嗎？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制劑的使用有缺點(diǎn)嗎？第6頁(yè)/共23頁(yè)第7頁(yè)/共23頁(yè) 1 1、通常對(duì)強(qiáng)

2、酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等條件非常敏感，容易失活； 2 2、溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本； 3 3、反應(yīng)后會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。( (難分離）第8頁(yè)/共23頁(yè)1 1、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)（如固定在不溶于水的載體上）。2 2、固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：（1 1）使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；（2 2）固定在載體上的沒(méi)可以被反復(fù)利用。第9頁(yè)/共23頁(yè)第10頁(yè)/共23頁(yè)交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法第11頁(yè)/共23頁(yè) 酶酶物理吸附法物理吸附法交聯(lián)法交聯(lián)法包埋法包埋法酶的固定化方法酶的固定化方法共價(jià)偶聯(lián)法共價(jià)偶聯(lián)法第12頁(yè)/共23頁(yè)實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：本實(shí)驗(yàn)

3、是用吸附法將a-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過(guò)固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測(cè)試，流出物呈紅色表明水解產(chǎn)物糊精生成這里使用的是枯草桿菌的a-淀粉酶，其作用的最適溫度為5075；最適PH為5.57.5遇碘顯藍(lán)色遇碘顯紅色遇碘不顯色四、“-淀粉酶固定化”實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模?、制備固定化的第13頁(yè)/共23頁(yè)設(shè)備及用品：設(shè)備及用品：5ml塑料注射器 50ml燒杯 滴管 自行車(chē)用氣門(mén)心及夾子 注射器架 試管及微量離心管3支實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料: :1、a-淀粉酶的固定化：在燒杯中將5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸餾水中。由于酶不純，可能有些不溶物。再加入5g石英砂石英砂

4、，不時(shí)攪拌，30min后裝入1支下端接有氣門(mén)心并用夾子封住的注射器中(石英砂體積約4ml)。用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器，流速為1ml/min。2、可溶性淀粉溶液：取50ml可溶性淀粉溶于100ml熱水中，攪拌均勻。3、5mmol/L KI-I2溶液：稱取0.127g碘和0.83g碘化鉀。加蒸餾水100ml完全溶解后裝入滴瓶中。除去未吸附的游離淀粉酶第14頁(yè)/共23頁(yè)反應(yīng)柱固定化酶氣門(mén)心夾子5ml注射器第15頁(yè)/共23頁(yè)步驟:1.將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過(guò)柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液

5、,觀察顏色.用水稀釋1倍后再觀察顏色.反應(yīng)柱固定化酶氣門(mén)心夾子5ml注射器淀粉第16頁(yè)/共23頁(yè)2.實(shí)驗(yàn)后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4冰箱中,幾天后再重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),看是否有相同的結(jié)果.第17頁(yè)/共23頁(yè)課后練習(xí) 1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒(méi)有淀粉酶?2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液，保溫幾分鐘后用碘液檢驗(yàn)。如仍顯藍(lán)色，則流出液中沒(méi)有淀粉酶了?？梢栽诟邷叵率沟矸鬯饪欤颐覆粫?huì)因高溫上而失活，所以可在一些需要高溫加熱同時(shí)又要水解淀粉的反應(yīng)中使用。第18頁(yè)/共23頁(yè)1 1、研究認(rèn)為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前

6、途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來(lái)降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（ ）A A、溫度 B B、PHPHC C、水分 D D、營(yíng)養(yǎng)D第19頁(yè)/共23頁(yè)2 2、目前，日用化工廠大量生產(chǎn)的酶制劑，其中的酶大都來(lái)自A A、化學(xué)合成 B B、動(dòng)物體內(nèi) C C、植物體內(nèi) D D、微生物體內(nèi) D第20頁(yè)/共23頁(yè)3.3.酶的固定方法不包括( )( )。A. A. 將酶吸附在固體表面上 B B將酶相互連接起來(lái)C C將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里 D D將酶制成固體酶制劑，如加酶洗衣粉中的酶D第21頁(yè)/共23頁(yè)5. 5. 關(guān)于固定化酶的敘述不正確的是 ( )(