黃顙魚生理學實驗項目申請書

1、. 編號： 地理與生命科學學院2011年度大學生科研基金項目申請書項目名稱： 養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標（紅細胞、白細胞及血紅蛋白含量）的影響 項目負責人： 張馳騁 年 級 ： 09級生物科學 聯(lián)系電話電子郵箱 1115739177 指導教師 肖玲遠 填表日期 2011年11月28日 地理與生命科學學院 制二一一年九月申請者的承諾：我承諾對本人填寫的各項內(nèi)容的真實性負責，保證沒有知識產(chǎn)權爭議。如獲準立項，我承諾以本表為有約束力的協(xié)議，遵守相關規(guī)定，按計劃認真開展研究工作，取得預期成果。地理與生命科學學院有權使用本表所有數(shù)據(jù)和資料。 申請人（簽章） 年 月 日填 寫 說

2、明一本表適用于學生向地理與生命科學學院申報大學生科研計劃項目。 二填表前，請先仔細閱讀生物科學專業(yè)大學生科研及創(chuàng)新訓練項目管理辦法。三項目申請表作為項目執(zhí)行過程中檢查、驗收等管理活動的重要依據(jù)文件，由項目負責人填寫。四、本表要按順序逐項填寫，內(nèi)容要實事求是，表達要明確、嚴謹。本申請表一式三份，要求一律用A4紙雙面打印，于左側裝訂成冊。 五、編號由學院統(tǒng)一填寫。 項目名稱養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標（紅細胞、白細胞及血紅蛋白含量）的影響項目類別A.重點項目 B.一般項目擬申請經(jīng)費1500元起止時間2012年 1 月至 2013年 1月預期成果形式以論文形式發(fā)表負責人姓名性別出生年月專業(yè)年級項目分工聯(lián)

3、系電話簽字張馳騁男1990.12生物科學09參與并負責項目各項流加成員熊帆楓男 1988.09生物科學09魚種的采集及飼劉鵬男 1991.02生物科學09實驗操作及設備管李能勛 男 1987.10生物科學09相關資料的搜集整指導教師情況姓 名肖玲遠職 稱 副教授學歷/學位大學/學士研究專長人體解剖生理學理論與實驗教學電 、項目簡介 黃顙魚是通過溶解在水中的氧氣而生存的一類水生動物，其血液中各項生理生化指標在正常情況下是保持相對恒定的。紅細胞是血細胞中數(shù)量最多的一種，

4、是脊椎動物體內(nèi)運輸氧和二氧化碳的重要載體；而白細胞雖然數(shù)量很少，但它是黃顙魚具有免疫活性的一類細胞，其吞噬異物并產(chǎn)生抗體的作用，可以抵御病原體對魚體入侵，且與機體傷病的損傷治愈密切相關。通過改變黃顙魚水體養(yǎng)殖密度，觀察研究黃顙魚血液中紅細胞、白細胞數(shù)量變化及對血紅蛋白含量影響。二、選題依據(jù)（包括項目的學術價值、應用價值、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析）黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)，鲇形目，鲿科，黃顙魚屬。又名黃臘丁、嘎牙子、黃鰭魚、黃刺骨等，是我國江河湖一種名貴的淡水經(jīng)濟魚類，廣布于中國東部各太平洋水系。黃顙魚肉質細嫩、少刺無鱗、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，具食療功效，深受廣大養(yǎng)殖者和

5、消費者青睞，而且在日本、韓國、東南亞等國家也有巨大的市場潛力，是出口創(chuàng)匯的優(yōu)良品種。溶氧量（D.O.）是黃顙魚養(yǎng)殖環(huán)境中的重要因子，它直接影響黃顙魚的呼吸、代謝等生理學功能。在養(yǎng)殖環(huán)境中溶解氧受諸多因素的影響，養(yǎng)殖密度是一個影響溶氧量極其重要的因素，所以可以通過改變養(yǎng)殖密度來改變其溶氧量。魚類的血液指標是魚體重要的生理指標之一。魚類的血液指標受環(huán)境條件和營養(yǎng)狀況等因素的影響，能反映魚體營養(yǎng)健康狀況，可以用作監(jiān)測水體環(huán)境變化的生物學指標。因此，研究養(yǎng)殖密度對黃顙魚的幾種血液指標（白細胞數(shù)目、紅細胞數(shù)目、血紅蛋白含量）的影響具有重要的學術、應用價值和研究意義。本項目擬通過對黃顙魚的免疫系統(tǒng)、呼吸代

6、謝等方面的研究，使人們對黃顙魚體內(nèi)許多復雜代謝得到更深入的認識，為人們以后在黃顙魚的養(yǎng)殖方面的改善，提供了一個理論性的依據(jù)，使人們獲得更高的生產(chǎn)，創(chuàng)造更多的物質財富。目前國內(nèi)外關于黃顙魚血液指標的研究只集中在饑餓處理及病菌侵害等對其血液指標的影響，但養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標(血細胞）的影響的研究，目前國內(nèi)外尚屬空白。三、研究方案（包括研究目標、研究內(nèi)容、研究方法、實驗方案、技術路線、可行性分析等）研究目標：黃顙魚在不同養(yǎng)殖密度下對其血液指標中的紅細胞、白細胞數(shù)目以及血紅蛋白含量的測定。通過血液生理學實驗得出其數(shù)據(jù)，并進行科學分析，最終得出結論。研究內(nèi)容：黃顙魚在水中生活的溶氧條件為：溶氧在3m

7、gL以上時生長正常，低于2mgL時出現(xiàn)浮頭，低于1mgL會窒息死亡。因此研究就在魚體能正常生活的情況下通過一定量的水中黃顙魚的條數(shù)設置不同的養(yǎng)殖密度梯度，再分別對其血液指標中紅細胞、白細胞數(shù)目及血紅蛋白含量的測定。并最終得出結論。研究方法：項目采用實驗室人工養(yǎng)殖黃顙魚作為試驗材料，并對其進行具體詳細的種類鑒定后，根據(jù)其生境（溫度、PH、溶氧量等）及其各項生理指標，進行編號，栓掛標簽后分組人工飼養(yǎng)（保持單一變量原則）然后根據(jù)黃顙魚在不同梯度的養(yǎng)殖密度條件下，相同溫度、PH中提取其血液標本。對其進行實驗紅細胞、白細胞數(shù)目和血紅蛋白含量的測定。將所得數(shù)據(jù)記錄于下表中：養(yǎng)殖密度 （條百升） 測量指標（

8、個cm³或gmL） 備注數(shù)據(jù)及 簡要分析紅細胞數(shù)目白細胞數(shù)目血紅蛋白含量5101520253035404550 研究技術路線：結合此實驗項目的研究目標、內(nèi)容和方法，確定出整個項目實施的大體流程，并根據(jù)它的可行性方案分析，現(xiàn)有條件的合理運用，以及時間方面的進度安排，最終確定其研究技術路線。研究技術路線首先從課題項目的提出開始，圍繞這個實驗的各個方面和多角度全面分析，有魚的養(yǎng)殖技術；養(yǎng)殖條件中養(yǎng)殖密度的變化（單一變量原則）；抽取魚體尾靜脈一定量血液樣本；將抽取出的血液樣本分組檢測；檢測項目包括紅細胞數(shù)目、白細胞數(shù)目和血紅蛋白含量三項指標；將檢測出的各個數(shù)據(jù)對應記錄至表格中；對數(shù)據(jù)進行處理

9、，繪出三條曲線圖；最后得出結論總結項目報告。 主要技術路線流程見下頁：養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標（紅細胞、白細胞及血紅蛋白含量）的影響捕捉或購買同種類別的黃顙魚人工飼養(yǎng)一段時期（保持魚體正常生活）改變相同量水中的養(yǎng)殖條數(shù)提取魚體內(nèi)的血液樣本并迅速其血液樣本進行技術分析將測定出的血液紅細胞、白細胞、血紅蛋白 含量記錄于上表中處理表格（繪出坐標圖）整理分析數(shù)據(jù)得出結論項項目可行性分析： （1）現(xiàn)有資源條件：項目組成員經(jīng)過對實驗室的資源考察和與實驗項目指導老師的反復思考討論，結合我們地理與生命科學院的實驗室先進設備、儀器。提出了此項研究課題，并且方案切實可行，又有理論依據(jù)，因此可行性充分。 （2）科學

10、儲備：自從2009年9月我們剛進校以來，項目組成員就認真學習包括植物學、動物學、生物化學、生物統(tǒng)計學、生理學等一系列專業(yè)理論知識，并認真參加了各科各個項目的實驗課程，積累了扎實的專業(yè)理論基礎和實踐經(jīng)驗。并且在此之前項目組成員在課外閱讀的與本項目相關的知識頗為廣泛，并對魚類養(yǎng)殖都有著相當?shù)呐d趣愛好。目可行性分析： （1）現(xiàn)有資源條件：項目組成員經(jīng)過對實驗室的資源考察和與實驗項目指導老師的反復思考討論，結合我們地理與生命科學院的實驗室先進設備、儀器。提出了此項研究課題，并且方案切實可行，又有理論依據(jù)，因此可行性充分。 （2）科學儲備：自從2009年9月我們剛進校以來，項目組成員就認真學習包括植物學

11、、動物學、生物化學、生物統(tǒng)計學、生理學等一系列專業(yè)理論知識，并認真參加了各科各個項目的實驗課程，積累了扎實的專業(yè)理論基礎和實踐經(jīng)驗。并且在此之前項目組成員在課外閱讀的與本項目相關的知識頗為廣泛，并對魚類養(yǎng)殖都有著相當?shù)呐d趣愛好。項目可行性分析：（1） 現(xiàn)有資源條件：項目組成員經(jīng)過對實驗室的資源考察和與實驗項目指導老師的反復思考討論，結合我們地理與生命科學院的實驗室先進設備、儀器。提出了此項研究課題，并且方案切實可行，又有理論依據(jù)，因此可行性充分。（2） 科學儲備：自從2009年9月我們剛進校以來，項目組成員就認真學習包括植物學、動物學、生物化學、生物統(tǒng)計學、生理學等一系列專業(yè)理論知識，并認真參

12、加了各科各個項目的實驗課程，積累了扎實的專業(yè)理論基礎和實踐經(jīng)驗。并且在此之前項目組成員在課外閱讀的與本項目相關的知識頗為廣泛，并對魚類養(yǎng)殖都有著相當?shù)呐d趣愛好。項目可行性分析： （1）現(xiàn)有資源條件：項目組成員經(jīng)過對實驗室的資源考察和與實驗項目指導老師的反復思考討論，結合我們地理與生命科學院的實驗室先進設備、儀器。提出了此項研究課題，并且方案切實可行，又有理論依據(jù)，因此有充分的可行性。 （2）科學儲備：自從2009年9月我們剛進校以來，項目組成員就認真學習包括植物學、動物學、生物化學、細胞生物學、生物統(tǒng)計學、生理學等一系列專業(yè)理論知識，并認真參加了各科各個項目的實驗課程，積累了扎實的專業(yè)理論基礎

13、和實踐經(jīng)驗。并且在此之前項目組成員在課外閱讀的與本項目相關的知識頗為廣泛，并對魚類養(yǎng)殖都有著濃厚的興趣愛好。四、項目的創(chuàng)新點、特色和解決的關鍵技術本項目研究養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標（紅細胞、白細胞數(shù)目及血紅蛋白含量）的影響，而在此以前，前人對黃顙魚生理研究的進展有如下幾個方面：1、瓦氏黃顙魚血清的鱗組分的測定。2、黃顙魚消化器官蛋白酶和淀粉酶活性測定分析。3、光鏡技術對瓦氏黃顙魚的消化道和消化腺初步研究。4、淡水白鯧、團頭魴、黃顙魚的主要消化酶活性對比研究。5、黃顙魚消化道黏膜的掃描電鏡觀察。6、中華倒刺鲃、黃顙魚和華鯪的消化酶活性的比較分析。7、 黃顙魚不同組織中同工酶的表達模式的研究等。8

14、、黃顙魚血清免疫球蛋白的純化及分子量的初步測定。 前人針對上述7個生理方面的研究，而未對養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標的影響，不同養(yǎng)殖密度對應著不同的溶氧量，間接的反映著不同的溶氧量對黃顙魚血液指標的影響前人還沒有徹底進入對黃顙魚血液指標這一方面的研究，因此該課題是一項較為新的生理方面的研究，前人的研究都基本不涉及到有關血液方面。本項目的創(chuàng)新點：養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標的影響，是建立在外界條件下對黃顙魚體內(nèi)血液指標的影響，因此該提法是較為新的方式的提法，該項目所要用到的實驗裝置也是較新的實驗裝置，該項目切中了魚類生理代謝和調控的三項重要指標，通過對該課題的研究，從而使人們進一步揭示了黃顙魚的生理奧秘

15、，這三種指標可能涉及到黃顙魚的一些呼吸代謝，循環(huán)，還有免疫等方面，使人們對黃顙魚體內(nèi)許多復雜代謝得到更深入的認識，通過這一方面的研究，分析、總結，并得出結論，為人們以后在黃顙魚的養(yǎng)殖方面的改善，提供了一個理論性的依據(jù)，使人們獲得更高的生產(chǎn)，創(chuàng)造更多的物質財富。本項目的特色：研究黃顙魚的生理是建立在外界條件養(yǎng)殖密度（相當于不同溶氧量）的影響，同時也是建立在細胞水平上的研究，眾所周知紅細胞，白細胞，血紅蛋白是黃顙魚血液中最重要的三種組分，通過外界環(huán)境對這三種血液組分的影響的分析，可以揭示黃顙魚一些重要的代謝機制、生理活性，同時該研究方法也為其他魚類的研究提供了方法借鑒本項目需要解決的關鍵技術如下：

16、1、怎樣養(yǎng)殖黃顙魚。2、怎樣才能保證黃顙魚在不同密度環(huán)境中存活，且不影響（除本項目測定生理指標外）其他生理指標。3、怎樣采集黃顙魚的血液。4、怎樣使用實驗室儀器或實驗方法來測定黃顙魚的血液指標（紅細胞、白細胞及血紅蛋白含量）。五、項目進度安排（查閱資料、選題、自主設計項目研究方案、開題報告、實驗研究、數(shù)據(jù)統(tǒng)計、處理與分析、研制開發(fā)、填寫結題表、撰寫研究論文和總結報告等） （1）2011年11月份 通過查閱大量相關資料，并由自身學習所掌握的理論知識，結合生理學指導老師對學?，F(xiàn)有條件的分析，對其可行性的了解，討論出最終的選題方向并決定研究黃顙魚具體項目的研究名稱。即為：養(yǎng)殖密度對黃顙魚血液指標（紅

17、細胞、白細胞數(shù)目及血紅蛋白含量）的影響。并列出初步的研究方案和技術路線。 （2）2011年12月1日2011年12月31日 再通過廣泛查閱一些有針對性和拓展性強的資料，對實驗設計的方案進行完善，細化項目研究的每一個步驟和流程。 （3）2012年1月1日2012年8月31日 通過在外地區(qū)捕捉或本地區(qū)購買黃顙魚的魚苗或成魚，保證試驗取材的充足。通過學習黃顙魚的養(yǎng)殖技術，在實驗室對黃顙魚進行人工飼養(yǎng)和馴化，做好實驗前的準備工作。保證其在實驗室環(huán)境下的正常生活。 （4）2012年9月1日2012年10月31日 通過在不同養(yǎng)殖密度條件下對魚體內(nèi)血液的抽取樣本，檢測各組血液中紅細胞、白細胞數(shù)目和血紅蛋白含

18、量，并記錄數(shù)據(jù)在方案表格中。 （5）2012年11月1日2012年11月31日 比較表格中的各組實驗數(shù)據(jù)，并對其進行科學的處理和分析，繪出一個反映黃顙魚三種血液指標在不同養(yǎng)殖密度條件下的坐標曲線圖。并得出最后結論。 （6）2012年12月1日2012年12月31日 填寫出實驗項目的結題表，并撰寫出各自的研究論文，提交總結報告，最后完成此次項目試驗。六、擬利用資源（科研教學設施、儀器設備、資料等）1.養(yǎng)殖條件（1）多功能循環(huán)養(yǎng)殖箱 （2）食物（餌料或小型魚類等）等2.取材工具注射器、試管等 3.處理儀器 移液管、 酒精燈等4.處理藥品（1）抗凝劑（防止血液凝固）(2) 染液等（將白細胞和紅細胞染

19、成不同的顏色，便于觀察、計數(shù)和統(tǒng)計）5.觀察儀器 血紅蛋白測定儀、血細胞計數(shù)板、暗視野顯微鏡等 七、經(jīng)費使用計劃序號支持項目金額（元）1調研及黃顙魚的采集購買10002實驗試劑及藥品3003黃顙魚餌料（黃粉蟲、小魚等）6004打印資料200合 計2100八、項目預期成果（研究論文、設計、研究報告、申請專利、開發(fā)軟件、研制產(chǎn)品、獲獎等）黃顙魚主要分布在我國河川、湖泊、溝渠、等水域中，營底棲生活，雜食性，喜群居，在弱光條件下攝食和活動，以動物餌料為主食，在自然條件下，孵化出膜35天的魚苗以自身的卵黃為營養(yǎng)，以后幼魚以輪蟲、枝、角類、水蚯蚓等為食，成魚階段主食各種小魚、蝦；人工養(yǎng)殖時，可攝食動物餌料，也可攝食人工配合飼料。 此項目所研究的是溶氧量對黃顙魚血液生理指