斐林試劑與雙縮脲試劑說課材料

1、斐林試劑、雙縮脲試劑和班氏試劑比較苗樹新斐林試劑和雙縮脲試劑的成分相同， 但二者的使用方法及原理不盡相同。 斐林試劑和班氏試劑都是檢驗(yàn)還原性糖的試劑， 二者的使用方法及原理、 成分也有區(qū)別，下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結(jié)。1. 斐林試劑和雙縮脲試劑斐林試劑和雙縮脲試劑都由溶液和溶液組成，但二者有如下三點(diǎn)不同：（ 1）溶液濃度不同斐林試劑中溶液稱為斐林試劑甲，其濃度為溶液稱為斐林試劑乙，其濃度為；雙縮脲試劑中溶液（雙縮脲試劑A）的濃度為，溶液（雙縮脲試劑B）的濃度為。（ 2）使用原理不同斐林試劑是新配制的溶液，它在加熱條件下與醛基反應(yīng)， 被還原成磚紅色的 沉淀，可

2、用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色棕色磚紅色（沉淀）。鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時，常用雙縮脲法， 使用的是雙縮脲試劑， 發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)實(shí)質(zhì)是在堿性環(huán)境下的與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲（）結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。（ 3）使用方法不同斐林試劑使用時，先反 溶液和 溶液混合（將 滴入 溶液中），而后立即使用：雙縮脲試劑使用時，先加入溶液滴溶液（ 2mL），振蕩搖勻，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，然后再加入34 滴溶液，振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象。2.

3、斐林試劑和班氏試劑關(guān)于斐林試劑和班氏試劑， 可用下面的例題引出其異同點(diǎn)： 例：你可用什么方法，檢驗(yàn)人的尿液中是否含有糖？答案：方法一：在試管中加入人的尿液 0.1mL，加入班氏糖定性試劑 1mL，混合均勻后，將試管放入盛有開水的燒杯中，加熱煮沸 1min2min，若試管中溶液在加熱后產(chǎn)生了磚紅色沉淀，說明尿液中含有糖。方法二：取少許尿液加水稀釋后，加入剛配制好的斐林試劑，沸水浴加熱后，若出現(xiàn)磚紅色沉淀，則說明尿液中含有糖。方法三：取少許尿液加水稀釋后，加入少許懸濁液（新制）加熱，若出現(xiàn)磚紅色沉淀，則說明尿液中含有糖。因斐林試劑實(shí)質(zhì)上是新配制的溶液，所以方法二與方法三的實(shí)質(zhì)是相同的，只是說法不同

4、而已。由以上例題可以看出， 斐林試劑和班氏試劑都能用于鑒定可溶性還原糖 （上題中檢驗(yàn)的是葡萄糖）的存在，二者有相同點(diǎn)，也有不同點(diǎn)。二者的不同點(diǎn)，可以歸納為以下幾點(diǎn)：（ 1）班氏試劑常用于尿糖的鑒定，其配方與斐林試劑不一樣，其配方為： 400mL水中加 85g 檸檬鈉和 50g 無水碳酸鈉； 50mL加熱的水中加入8.5g 無水硫酸銅。制成溶液；把溶液倒入檸檬酸鈉溶液中，邊加邊攪，如產(chǎn)生沉淀可濾去。（ 2）其反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時，斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成和可溶性還原糖反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產(chǎn)生卻是這樣的： 檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強(qiáng)堿弱酸鹽，在水中它們均可水解產(chǎn)生，與檸檬酸鈉溶液和溶液混合時，結(jié)合，生成與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀。（ 3）兩種試劑的保存方式不同。 斐林試劑甲和斐林試劑乙可強(qiáng)烈產(chǎn)生，很容易沉淀析出，因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配； 而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉 為一對緩沖物質(zhì)，產(chǎn)生的 數(shù)量有限，與后產(chǎn)生的濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存