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文檔簡介

1、血培養(yǎng)采集的方法及注意事項(xiàng)1血培養(yǎng)的概念血培養(yǎng)的概念u血血培養(yǎng)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查,是采集患者血液標(biāo)本并接種到培培養(yǎng)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查,是采集患者血液標(biāo)本并接種到培養(yǎng)瓶,用以發(fā)現(xiàn)、識別導(dǎo)致患者感染的病原微生物養(yǎng)瓶,用以發(fā)現(xiàn)、識別導(dǎo)致患者感染的病原微生物u是診斷菌血癥和真菌血癥的基本而重要的方法是診斷菌血癥和真菌血癥的基本而重要的方法u對感染性疾病的診斷、治療和預(yù)后都有極為重要的臨床意義對感染性疾病的診斷、治療和預(yù)后都有極為重要的臨床意義23血培養(yǎng)的目的血培養(yǎng)的目的u 證實(shí)有感染性的病原體證實(shí)有感染性的病原體u 鑒定病原體,鑒定病原體,做藥敏試驗(yàn)做藥敏試驗(yàn)u 指導(dǎo)抗菌藥物的使用指導(dǎo)抗菌藥物的使用能夠更

2、好的幫助醫(yī)生合理用藥,減少患者的死亡率能夠更好的幫助醫(yī)生合理用藥,減少患者的死亡率4目前血培養(yǎng)存在的主要問題目前血培養(yǎng)存在的主要問題-醫(yī)生醫(yī)生血培養(yǎng)重視程度不夠,送檢率低血培養(yǎng)重視程度不夠,送檢率低u 血培養(yǎng)用處不大,治療費(fèi)用增加,有指征不送檢血培養(yǎng)用處不大,治療費(fèi)用增加,有指征不送檢u 血培養(yǎng)時(shí)間長,不能適應(yīng)臨床需求血培養(yǎng)時(shí)間長,不能適應(yīng)臨床需求u 只做需氧培養(yǎng),不同時(shí)做厭氧培養(yǎng),病原菌檢出率低只做需氧培養(yǎng),不同時(shí)做厭氧培養(yǎng),病原菌檢出率低5目前血培養(yǎng)存在的主要問題目前血培養(yǎng)存在的主要問題-檢驗(yàn)員檢驗(yàn)員u血培養(yǎng)檢測運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)及接收標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)范血培養(yǎng)檢測運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)及接收標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)范 應(yīng)室溫儲存的卻低溫

3、儲存應(yīng)室溫儲存的卻低溫儲存 標(biāo)本沒有及時(shí)檢驗(yàn),導(dǎo)致微生物檢測延遲標(biāo)本沒有及時(shí)檢驗(yàn),導(dǎo)致微生物檢測延遲 實(shí)驗(yàn)室人員沒有認(rèn)真核查接收標(biāo)本(采血量不夠、培養(yǎng)瓶有破損等)實(shí)驗(yàn)室人員沒有認(rèn)真核查接收標(biāo)本(采血量不夠、培養(yǎng)瓶有破損等)u血培養(yǎng)陽性結(jié)果的處理不夠及時(shí)血培養(yǎng)陽性結(jié)果的處理不夠及時(shí) 沒有及時(shí)將結(jié)果反饋給臨床沒有及時(shí)將結(jié)果反饋給臨床 “ “時(shí)間就是生命時(shí)間就是生命”6目前血培養(yǎng)存在的主要問題目前血培養(yǎng)存在的主要問題-護(hù)理人員護(hù)理人員u 采血消毒不夠嚴(yán)格,導(dǎo)致污染率偏高采血消毒不夠嚴(yán)格,導(dǎo)致污染率偏高 皮膚皮膚消毒不夠嚴(yán)格消毒不夠嚴(yán)格 培養(yǎng)瓶的消毒問題培養(yǎng)瓶的消毒問題u 不規(guī)范的血培養(yǎng)不規(guī)范的血培養(yǎng)

4、 采血量、采血時(shí)間、采血套數(shù)不符合規(guī)范采血量、采血時(shí)間、采血套數(shù)不符合規(guī)范 不規(guī)范的血培養(yǎng)導(dǎo)致病原菌分離率低不規(guī)范的血培養(yǎng)導(dǎo)致病原菌分離率低 難以判斷病原菌是污染造成還是感染造成的難以判斷病原菌是污染造成還是感染造成的u標(biāo)本沒有及時(shí)送檢,導(dǎo)致檢測延遲標(biāo)本沒有及時(shí)送檢,導(dǎo)致檢測延遲7血培養(yǎng)標(biāo)本如何采集8血培養(yǎng)臨床實(shí)踐指南血培養(yǎng)臨床實(shí)踐指南nCLSI是美國【臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會】的英文縮寫,英文名為Clinical and Laboratory Standards Instituten美國CLSI的抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn),是國內(nèi)臨床細(xì)菌檢驗(yàn)遵循的標(biāo)準(zhǔn)。由于制訂該項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)需要投入大量

5、的人力、財(cái)力和物力,所以大多數(shù)國家包括中國都還沒有建立自己的標(biāo)準(zhǔn)而依賴CLSI的方法和標(biāo)準(zhǔn)nCLSI標(biāo)準(zhǔn)每年更新9關(guān)鍵要點(diǎn)關(guān)鍵要點(diǎn)u采血指征采血指征u采血時(shí)間采血時(shí)間u采血套數(shù)采血套數(shù)u采血次數(shù)采血次數(shù)u接種血量接種血量u消毒滅菌消毒滅菌10采血指征采血指征u不明原因的發(fā)熱(38)或體溫過低(36)u白細(xì)胞增多( 10109/L),粒細(xì)胞減少(1.0109/L)u休克,寒顫u嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、感染)u心率異常加快u低血壓或高血壓u呼吸頻率加快(20次/分或CO2分壓32mmHg)懷疑血流感染時(shí)要做血培養(yǎng)懷疑血流感染時(shí)要做血培養(yǎng)發(fā)熱發(fā)熱要做血培養(yǎng)!要做血培養(yǎng)!11

6、03060時(shí)間 (分鐘)體溫體溫細(xì)菌濃度細(xì)菌濃度采血時(shí)間采血時(shí)間12采集血培養(yǎng)時(shí)間的重要性采集血培養(yǎng)時(shí)間的重要性? ?9% +14% +9% +11% +發(fā)熱高峰前發(fā)熱高峰前12-2.5小時(shí)小時(shí)發(fā)熱高峰前發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時(shí)小時(shí)發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰后發(fā)熱高峰后1-12小時(shí)小時(shí)166 病人病人105 病人病人199 病人病人258 病人病人Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study13采血時(shí)間采血時(shí)間u在應(yīng)用抗菌藥物之前u如果患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物治療,應(yīng)該在下一次用藥之前采集血培養(yǎng)14采血套數(shù)采血套數(shù)基本概念基本概念u成人成人“一

7、套一套” ” 血培養(yǎng)包括:血培養(yǎng)包括:需氧瓶需氧瓶和和厭氧瓶厭氧瓶各一個(gè)各一個(gè) 注意:注意:一次穿刺采血,算一次穿刺采血,算“一套一套”,采集第二套應(yīng)從另一,采集第二套應(yīng)從另一穿刺點(diǎn)獲得穿刺點(diǎn)獲得u“雙瓶雙側(cè)雙瓶雙側(cè)”,是指從一個(gè)部位采血接種一套培養(yǎng)瓶,再從另一部位,是指從一個(gè)部位采血接種一套培養(yǎng)瓶,再從另一部位 采血接種另一套培養(yǎng)瓶,一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單采血接種另一套培養(yǎng)瓶,一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單 個(gè)血培養(yǎng)個(gè)血培養(yǎng)u兒童一般只做需氧培養(yǎng),特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)兒童一般只做需氧培養(yǎng),特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)15采血套數(shù)采血套數(shù)指南中強(qiáng)調(diào):指南中強(qiáng)調(diào):血培養(yǎng)至少送

8、血培養(yǎng)至少送2 2套套u(yù)除外新生兒外,成人:除外新生兒外,成人:任何時(shí)候,不能只送一瓶!任何時(shí)候,不能只送一瓶!162 23 3套血培養(yǎng),有助于污染的判斷套血培養(yǎng),有助于污染的判斷 采集采集1套無法判套無法判斷是病原菌還斷是病原菌還是污染菌是污染菌17 血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率()血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率()6580969918Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults:

9、How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548血培養(yǎng)套數(shù)與檢測靈敏度()血培養(yǎng)套數(shù)與檢測靈敏度()19u這些研究中,使用這些研究中,使用“配對需氧配對需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶厭氧血培養(yǎng)瓶”比用比用“兩個(gè)需氧兩個(gè)需氧血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶”能檢出更多的金葡、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌能檢出更多的金葡、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌u推薦常規(guī)血培養(yǎng)要包括配對的需氧推薦常規(guī)血培養(yǎng)要包括配對的需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶厭氧血

10、培養(yǎng)瓶CLSI 2007 M47-A20厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間快于需氧瓶厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間快于需氧瓶厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 大腸埃希菌大腸埃希菌, 12.4厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌, 16.8厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 腸球菌腸球菌, 17.3厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 葡萄球菌葡萄球菌, 30.88需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 大腸埃希菌大腸埃希菌, 13.5需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌, 17.7需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 腸球菌腸球菌, 20.5需氧瓶平均

11、報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間, 葡萄球菌葡萄球菌, 31.7905101520253035大腸埃希菌大腸埃希菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌腸球菌腸球菌葡萄球菌葡萄球菌厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間厭氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間需氧瓶平均報(bào)陽時(shí)間h21厭氧瓶檢出致病菌時(shí)間更短厭氧瓶檢出致病菌時(shí)間更短同樣檢出致病菌,BACTEC平均檢測時(shí)間比Bact/Alert少少4.36小時(shí)小時(shí)Zadroga R et al. Clin Infect Dis. 2013;56:790-79722厭氧瓶、需氧瓶互相補(bǔ)充:提高檢出率厭氧瓶、需氧瓶互相補(bǔ)充:提高檢出率J Microbiol Immunol Infect. 200

12、7;40:445-44923采血次數(shù)采血次數(shù)u對懷疑菌血癥、真菌血癥對懷疑菌血癥、真菌血癥的的患者,推薦患者,推薦同時(shí)同時(shí)或或短時(shí)間內(nèi)短時(shí)間內(nèi)(1010分鐘內(nèi))分鐘內(nèi))從不同部位(如從不同部位(如雙臂雙臂)采集)采集 2 23 3 套血培養(yǎng)標(biāo)本,套血培養(yǎng)標(biāo)本,做到做到“雙瓶雙側(cè)雙瓶雙側(cè)”,如有必要可同時(shí)如有必要可同時(shí)從下肢靜脈從下肢靜脈采血接種第三套培養(yǎng)瓶,采血接種第三套培養(yǎng)瓶,采血后的采血后的 2 2 5 5 天內(nèi)不需要重復(fù)采集血培養(yǎng)天內(nèi)不需要重復(fù)采集血培養(yǎng) u急性心內(nèi)膜炎:急性心內(nèi)膜炎:3030分鐘分鐘內(nèi)完成內(nèi)完成3 3套套血培養(yǎng)的采集,如果血培養(yǎng)的采集,如果2424小時(shí)內(nèi)報(bào)告小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰

13、性,則繼續(xù)采集陰性,則繼續(xù)采集2 2套血培養(yǎng)套血培養(yǎng)u亞急性心內(nèi)膜炎:每亞急性心內(nèi)膜炎:每間隔間隔3030分鐘至分鐘至1h1h采集采集1 1套,連續(xù)套,連續(xù)采集采集3 3套套標(biāo)本,如標(biāo)本,如果果2424小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性,則繼續(xù)采集小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性,則繼續(xù)采集2 2套血培養(yǎng)套血培養(yǎng)24接種血量接種血量采血量與檢出率的關(guān)系血量每增加1毫升,成年人菌血癥陽性檢出率增加3 但并非越多越好,超過一定數(shù)量的采血量會稀釋培養(yǎng)瓶內(nèi)的肉湯,使肉湯無法有效中但并非越多越好,超過一定數(shù)量的采血量會稀釋培養(yǎng)瓶內(nèi)的肉湯,使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)(補(bǔ)體、抗體、抗生素),所以血液與肉湯的最佳比例為和血中的抑制物質(zhì)(補(bǔ)體

14、、抗體、抗生素),所以血液與肉湯的最佳比例為1:41:1025接種血量接種血量u成人一套標(biāo)本(需氧厭氧成人一套標(biāo)本(需氧厭氧2 2個(gè)培養(yǎng)瓶),每瓶個(gè)培養(yǎng)瓶),每瓶8 810ml10ml,共,共20ml20ml,雙側(cè)雙瓶即,雙側(cè)雙瓶即40ml40mlu嬰幼兒推薦的采血量應(yīng)少于患兒總血容量的嬰幼兒推薦的采血量應(yīng)少于患兒總血容量的 1% 1%,每瓶不少于每瓶不少于2ml2mlu采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床9090以上以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染 利用瓶身刻度準(zhǔn)確采血26規(guī)范采集規(guī)范采集血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本無菌操作:無菌操

15、作:污染率的指標(biāo)是3%u手衛(wèi)生手衛(wèi)生u皮膚消毒皮膚消毒u培養(yǎng)瓶的消毒培養(yǎng)瓶的消毒27u每次采集血液標(biāo)本前一定要洗手每次采集血液標(biāo)本前一定要洗手u使用使用3-5ml3-5ml抗菌皂液抗菌皂液u保證所有手部皮膚接觸皂液的時(shí)間保證所有手部皮膚接觸皂液的時(shí)間超過超過1515秒秒u注意指尖及指甲內(nèi)側(cè)注意指尖及指甲內(nèi)側(cè)u不要遺忘拇指不要遺忘拇指u紙巾干手并勿用手直接關(guān)閉水籠頭紙巾干手并勿用手直接關(guān)閉水籠頭你的手真得洗干凈了嗎?你的手真得洗干凈了嗎?嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生28皮膚凝固酶陰性葡萄球菌定植于輸液管皮膚凝固酶陰性葡萄球菌定植于輸液管嚴(yán)格執(zhí)行皮膚消毒程序嚴(yán)格執(zhí)行皮膚消毒程序定植細(xì)菌定植細(xì)菌“污

16、染污染”血培養(yǎng)血培養(yǎng)29u推薦使用碘推薦使用碘酊酊、碘伏碘伏或或洗必泰洗必泰作為皮膚消毒劑作為皮膚消毒劑u 碘碘酊酊作用時(shí)間:作用時(shí)間:1min1minu 碘伏作用時(shí)間:碘伏作用時(shí)間:1.5-2min1.5-2min u 洗必泰作用時(shí)間:洗必泰作用時(shí)間:1min1min (但不能用于少于(但不能用于少于2 2個(gè)月嬰兒皮膚消毒)個(gè)月嬰兒皮膚消毒)皮膚消毒皮膚消毒3070%70%乙醇乙醇擦拭靜脈穿刺部位,擦拭靜脈穿刺部位,待干待干30秒秒1-2% 1-2% 碘酊碘酊3030秒秒或或10%10%碘伏消毒碘伏消毒6060秒秒,從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒, ,直徑直徑1.5-2cm1.5-

17、2cm用用70%70%乙醇消毒乙醇消毒 6060秒秒(脫碘),待酒(脫碘),待酒精揮發(fā)精揮發(fā)干燥后采血干燥后采血細(xì)菌是細(xì)菌是死的死的,不是不是死的死的皮膚消毒程序(三步法)皮膚消毒程序(三步法)31培養(yǎng)瓶的消毒程序培養(yǎng)瓶的消毒程序1.去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋2.70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒3.自然待干4.將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)5. 顛倒混勻標(biāo)本與肉湯,以避免血液凝集 (兒童采血量少,更應(yīng)注意顛倒混勻)細(xì)菌是細(xì)菌是死的死的,不是不是32蝶翼針采血程序蝶翼針采血程序1皮膚消毒2 培養(yǎng)瓶消毒3 標(biāo)注采血量4 準(zhǔn)備采血針5 靜脈穿刺6 負(fù)壓采血33血培養(yǎng)采血注意事項(xiàng)血培養(yǎng)采血注意事項(xiàng)u血培養(yǎng)建議從外周靜脈采血,不建議采動(dòng)脈血血培養(yǎng)建議從外周靜脈采血,不建議采動(dòng)脈血u常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置取血常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置取血u注射器采血注射器采血,采好后注入血培養(yǎng)瓶之前采好后注入血培養(yǎng)瓶之前不不需要更換針頭需要更換針頭u標(biāo)本采集部位標(biāo)本采集部位:從兩側(cè)從兩側(cè)上肢上肢靜脈采血靜脈采血“雙瓶雙側(cè)雙瓶雙側(cè)”,必要時(shí)從,必要時(shí)從下肢下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)靜脈采血做第三套血培養(yǎng)u采采多多種血液標(biāo)本種血液標(biāo)本時(shí)一定時(shí)一定最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本34u 無需保留的:從獨(dú)立的外周靜脈采集2套血培養(yǎng),無菌狀態(tài)下取出導(dǎo)管 并剪下5cm導(dǎo)管尖端或近心端于無

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